本发明属农药技术领域，具体涉及一种防治烟草花叶病毒的氯溴异氰尿酸混合制剂及其应用。
背景技术：
植物病毒性病害全世界广泛存在，对现代农业造成严重危害。烟草花叶病毒(tobaccomosaicvirus，tmv)是一种最普遍的植物病毒，可感染9个科，至少125个属的植物，其中包括烟草、番茄、辣椒、黄瓜和一些观赏类花卉。目前控制烟草花叶病毒最主要的方式是使用化学制剂防控和转基因手段。然而，非生物降解的化学药品的滥用造成严重的环境污染，危及人类健康；另外转基因技术目前仍不被大部分人所接受。因此，寻求一种新颖、有效和环境相容型的抗病毒方法仍是当今面临的重要问题。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种杀菌效果好、环境污染小和无残留的防治烟草花叶病毒病的精油制剂及其应用。
本发明的第一个方面是提供一种防治烟草花叶病毒的氯溴异氰尿酸组合物，按照重量份数计，所述氯溴异氰尿酸组合物的组分包括：柠檬草精油10-40份、飞机草醇提物20-50份、山茶油5-20份、以及氯溴异氰尿酸10-40份。
优选地，按照重量份数计，所述氯溴异氰尿酸组合物的组分包括：柠檬草精油20-30份、飞机草醇提物30-40份、山茶油10-15份、以及氯溴异氰尿酸20-30份。
进一步优选地，按照重量份数计，所述氯溴异氰尿酸组合物的组分包括：柠檬草精油24份、飞机草醇提物35份、山茶油12份、以及氯溴异氰尿酸28份。
其中，所述飞机草醇提物为飞机草的甲醇提取物、乙醇提取物、丙醇提取物中的一种或几种的混合物。对于提取方法采用普通的醇提工艺即可，本发明在此不作赘述。
本发明的第二个方面是提供一种防治烟草花叶病毒的氯溴异氰尿酸混合制剂，其有效成分为本发明的第一个方面所述的氯溴异氰尿酸组合物。
其中，所述氯溴异氰尿酸混合制剂可以为农药学上常见的各种制剂，本发明不对其剂型进行特别限定。相应地，所述氯溴异氰尿酸混合制剂还含有农药制剂中可接受的辅料，根据对应的剂型选择合适的辅料，例如乳化剂、扩散剂等。
本发明的第三个方面是提供一种烟草花叶病毒的防治方法，将本发明第二个方面所述的氯溴异氰尿酸混合制剂用水稀释100-5000倍后，喷施在烟草植物上。
本发明的第四个方面是提供如本发明第一个方面所述的氯溴异氰尿酸组合物、或本发明第二个方面所述的氯溴异氰尿酸混合制剂在防治烟草花叶病毒的应用。
本发明的有效成分由纯天然的柠檬草精油、飞机草醇提物和山茶油与对环境低毒性的氯溴异氰尿酸组成，具有毒性地、无污染、无残留的优点，是环境友好型的产品，能避免农业生产中环境污染及农药残留问题，对烟草花叶病毒具有显著的钝化、预防和治疗效果。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本发明作进一步的说明，以更好地理解本发明。
应予说明，飞机草的甲醇提取物、乙醇提取物、丙醇提取物在功效上基本相同，因此，在具体实施例中未对飞机草醇提物进行具体区分，统一为飞机草醇提物，该飞机草醇提物可以为飞机草的甲醇提取物、乙醇提取物、丙醇提取物中的一种或几种的混合物。
实施例1
取柠檬草精油24份、飞机草醇提物35份、山茶油12份、以及氯溴异氰尿酸28份，加入适当的辅料，按照农药学上常用的方法制成悬浮液。
实施例2
取柠檬草精油30份、飞机草醇提物30份、山茶油15份、以及氯溴异氰尿酸30份，加入适当的辅料，按照农药学上常用的方法制成悬浮液。
实施例3
取柠檬草精油20份、飞机草醇提物40份、山茶油10-15份、以及氯溴异氰尿酸20-30份，加入适当的辅料，按照农药学上常用的方法制成乳浊液。
实施例4
取柠檬草精油10份、飞机草醇提物50份、山茶油5份、以及氯溴异氰尿酸40份，加入适当的辅料，按照农药学上常用的方法制成乳浊液。
实施例5
取柠檬草精油40份、飞机草醇提物20份、山茶油20份、以及氯溴异氰尿酸10份，加入适当的辅料，按照农药学上常用的方法制成悬浮液。
防治实验
将实施例1-5制备得到的制剂用水稀释至1000倍，将其充分混合均匀用于烟草花叶病毒的钝化、治疗和预防实验。
烟草花叶病毒悬浮液的制备：取感染烟草花叶病毒病的烟草叶片(品种k326)100g，剪碎，置于研钵内，加少许石英砂和20ml磷酸缓冲液(0.2m，ph5.7-8.0)，充分研磨。使用量筒加入磷酸缓冲液定容至100ml，贮藏于4℃冰箱内用于接种实验。
感染了烟草花叶病毒病的烟草叶片的鉴定方法按《gb/t23222-2008(烟草病虫害分级及调查方法)》进行取样鉴定。本制备方法中烟草花叶病毒是利用该病毒致烟草花叶病毒病的致病共性，而不是利用病毒的特异性，因此具有致病力的各种烟草花叶病毒都能达到感染烟草叶片，按所述的鉴定即可获得感染烟草花叶病毒病的烟草叶片。
(1)钝化实验：试验采用枯斑法并稍加修改，具体操作是：在绿色防虫温室内进行。取上述防治烟草花叶病毒的精油制剂180μl与烟草花叶病毒悬浮液20μl混合，室温下放置处理60min，期间间歇性震荡。60min后使用移液器准确取20μl上述混合液，接种于位置、大小均一致的烟草花叶病毒枯斑寄主心叶烟的整片叶子上，随后使用药用棉签涂抹均匀。以蒸馏水处理为空白对照，宁南霉素溶液(500μg/mll)处理为对照药剂。将上述烟苗在温度26℃-28℃，湿度70-80％条件下培养3-4d后，记录形成枯斑的数量。每个样品6个重复。抑制率根据下面公式计算：
抑制率＝[(c-t)/c]×100％
c表示空白对照形成的枯斑数量；t表示处理后形成的枯斑数量。
(2)预防作用：试验采用枯斑法并稍加修改，具体操作是：在绿色防虫温室内进行。取上述精油制剂，使用药用脱脂棉蘸取后均匀涂抹于位置、大小均一致的枯斑寄主心叶烟整片叶子上，以药液不下滴为宜。处理3h后，取病毒悬浮液20μl接种于上述处理的叶片上，使用药用棉签涂抹均匀。以蒸馏水处理为空白对照，宁南霉素溶液(500μg/ml)处理为对照药剂。将上述烟苗在温度26℃-28℃，湿度70-80％条件下培养3-4d后，记录形成枯斑的数量。每个样品6个重复。抑制率根据下面公式计算：
抑制率＝[(c-t)/c]×100％
c表示空白对照形成的枯斑数量；t表示处理后形成的枯斑数量。
(3)治疗实验：试验采用枯斑法并稍加修改，具体操作是：在绿色防虫温室内进行。使用移液器取烟草花叶病毒悬浮液20μl，接种于位置、大小一致的烟草花叶病毒枯斑寄主心叶烟的整片叶子上，使用药用棉签涂抹均匀。接种3h后，使用药用脱脂棉蘸取上述精油制剂涂抹于预先接种的病毒的叶片上，以药液不下滴为宜。以蒸馏水处理为空白对照，宁南霉素溶液(500μg/ml)处理为对照药剂。将上述烟苗在温度26℃-28℃，湿度70-80％条件下培养3-4d后，记录形成枯斑的数量。每个样品6个重复。抑制率根据下面公式计算：
抑制率＝[(c-t)/c]×100％
c表示空白对照形成的枯斑数量；t表示处理后形成的枯斑数量。
对照药剂物为宁南霉素和氯溴异氰尿酸单剂,实验结果见表1。
表1本发明防止烟草花叶病毒的作用
实验结果表明：本发明已经在对烟草花叶病钝化、防治和治疗上取得了较好的效果。
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。