本发明属于农药领域，具体涉及一种防治细菌性病害的绿色杀菌剂组合物及其应用。
背景技术：
目前对于作物的细菌、真菌和病毒等病害的防治，主要采用化学合成杀菌剂，目前的化学杀菌剂对作物病害已产生不同程度的抗药性，使得对作物病害的防治效果差、药剂成本高。而化学合成杀菌剂毒性、残留、环境等问题日趋严重。
植物源、矿物源杀菌剂具有低毒、无残留的特点，合适的使用剂量对人、动物和植物无害，也不会对环境造成污染，具有广阔的发展前景。
技术实现要素：
为了解决现有农药使用存在的问题，本发明的目的是提供一种防治细菌性病害的绿色杀菌剂组合物及其应用。为作物病害的防治尤其是细菌性病害的防治提供一种有效的解决途径。
为了实现本发明目的，本发明的技术方案如下：
一种防治细菌性病害的杀菌剂组合物，其活性成分包括小檗碱或硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐，以及大蒜素和硫酸铵。
进一步地，所述防治细菌性病害的杀菌剂组合物，以重量份计其活性成分包括：0.1-20份小檗碱或硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐，0.1-25份大蒜素，0.1-75份硫酸铵。
进一步地，所述防治细菌性病害的杀菌剂组合物，以重量份计其活性成分包括：1-15份小檗碱或硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐，1-20份大蒜素，10-50份硫酸铵。
进一步地，所述防治细菌性病害的杀菌剂组合物，以重量份计其活性成分包括：2-10份小檗碱或硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐，3-20份大蒜素，20-40份硫酸铵。
进一步地，所述防治细菌性病害的杀菌剂组合物，以重量份计其活性成分包括：2-8份小檗碱或硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐，5-20份大蒜素，20-40份硫酸铵。
更进一步地，所述防治细菌性病害的杀菌剂组合物，以重量份计其活性成分包括：2-4份小檗碱或硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐，3-6份大蒜素，10-30份硫酸铵。
按配比将各组分混匀，即可制得所述防治细菌性病害的杀菌剂组合物。
本发明还提供一种农药制剂，其含有上述防治细菌性病害的杀菌剂组合物，还含有农药领域常用的助剂和/或载体。
进一步地，所述农药制剂中上述防治细菌性病害的杀菌剂组合物的重量百分含量为5％-80％，优选为30％-70％。
本发明所述农药制剂可通过本领域技术人员常规的制备方法制备成任意一种制剂，包括但不限于悬浮剂、水分散粒剂、微乳剂、干悬浮剂、可分散油悬浮剂、可湿性粉剂、悬浮种衣剂等中任意一种。
具体地，所述农药制剂为可湿性粉剂，包括5-15份小檗碱或硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐，15-25份大蒜素，30-50份硫酸铵，润湿剂1-5份，分散剂3-8份，填料补足至100份。
在本发明一种具体实施方式中，所述农药制剂为可湿性粉剂，包括小檗碱或硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐10份，硫酸铵40份，大蒜素20份，木质素磺酸钙5份，木质素胺磺酸钠5份，高岭土补足至100份。
所述可湿性粉剂可按本领域常规方法制备，例如按配比将农药活性成分、润湿剂、分散剂和填料等混匀，经气流粉碎机粉碎后即可制得本发明所述的可湿性粉剂。
具体地，所述农药制剂为悬浮剂，包括1-5份小檗碱或硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐，2-8份大蒜素，10-30份硫酸铵，悬浮助剂2-6份，润湿剂1-5份，增稠剂0.1-0.5份，防腐剂0.5-2份，防冻剂3-8份，消泡剂0.5-3份，水补足至100份。
在本发明一种具体实施方式中，所述农药制剂为悬浮剂，包括小檗碱或硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐3份，硫酸铵25份，大蒜素5份，聚氧乙烯醚磷酸酯3份，聚醚改性聚有机硅氧烷2份，黄原胶0.2份，山梨酸钾1份，乙二醇5份，有机硅酮1份，水补足至100份。
所述悬浮剂可按本领域常规方法制备，例如的制备方法包括：先将其它助剂混合均匀，经高速剪切混合均匀，加入小檗碱、硫酸铵、大蒜素，在砂磨机中砂磨2-3小时，使得制剂粒径均在5微米以下，即可制得本发明所述的悬浮剂。
具体地，所述农药制剂为水分散粒剂，包括1-5份小檗碱或硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐，1-5份大蒜素，20-50份硫酸铵，分散剂3-10份，润湿剂2-6份，崩解剂1-10份，填料补足至100份。
在本发明一种具体实施方式中，所述农药制剂为水分散粒剂，包括小檗碱或硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐2份，硫酸铵40份，大蒜素3份，十二烷基磺酸钠6份，木质素磺酸钙4份，淀粉5份，高岭土补足至100份。
所述水分散粒剂可按本领域常规方法制备，例如制备方法包括：将农药活性成分、分散剂、润湿剂、崩解剂以及填料混合均匀，用超微气流粉碎机粉碎，经捏合，然后加入流化床造粒干燥机中进行造粒、干燥、筛分，即可制得本发明所述的水分散粒剂。
具体地，所述农药制剂为水剂，包括2-5份小檗碱或硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐，3-10份大蒜素，10-25份硫酸铵，乳化剂3-8份，润湿剂2-5份，水补足至100份。
在本发明一种具体实施方式中，所述农药制剂为水剂，包括小檗碱或硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐4份，硫酸铵20份，大蒜素6份，脂肪醇聚氧乙烯醚6份，聚醚改性聚有机硅氧烷4份，水补足至100份。
所述水剂可采用本领域常规方法制备，例如制备方法包括：将小檗碱、硫酸铵、大蒜素溶解去离子水中，加入脂肪醇聚氧乙烯醚和烷基酚聚氧乙烯醚，搅拌均匀即可制得本发明组合物的水剂。
进一步的，所述助剂和/或载体为分散剂、润湿剂、乳化剂、防冻剂、消泡剂、增稠剂、崩解剂、稳定剂、成膜剂、着色剂、填料、溶剂中的至少一种，所述的溶剂为有机溶剂、植物油溶剂或水。
所述分散剂为木质素磺酸盐、nno、二丁基萘磺酸钠、油酸甲基氨基乙基磺酸钠、烷基酚聚氧乙烯醚中的一种或多种。
所述润湿剂为烷基酚甲醛树脂聚氧乙烯醚、十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、聚醚改性聚有机硅氧烷、拉开粉bx中的一种或多种。
所述乳化剂为十二烷基苯磺酸钙、脂肪酸聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯醚磺基琥珀酸酯、苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚、蓖麻油聚氧乙烯醚、脂肪酸聚氧乙烯醚、聚氧乙烯脂肪醇醚中的一种或多种。
所述防冻剂为乙二醇、丙二醇、丙三醇、聚乙二醇、山梨醇中的一种或多种。
所述防腐剂为山梨酸钾、苯甲酸钠、尼泊金酯中的一种。
所述消泡剂为有机硅酮类、硅油、c10-20饱和脂肪酸类化合物中的一种或多种。
所述增稠剂为黄原胶、羟甲基纤维素、明胶、海藻类、石膏、羟乙基纤维素、甲基纤维素、硅酸镁铝、聚乙烯醇中的一种或多种。
所述着色剂为碱性品红、酸性品红、碱性紫色、玫瑰精、酸性紫色中的至少一种。
所述稳定剂为柠檬酸钠、环氧大豆油中的一种或两种。
所述崩解剂为膨润土、尿素、硫酸铵、氯化铝中的一种或多种。
所述成膜剂为pva-1788、peg600、bf308、阿拉伯胶、黄原胶、羟丙基纤维素、羟甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮中一种或多种。
所述填料为凹凸棒土淀粉、轻质碳酸钙、白炭黑、高岭土中的一种或多种。
进一步地，所述农药制剂还可包含其它的农药活性成分，包括但不限于其它种类的杀菌剂剂、杀虫剂、除草剂、杀菌剂、除草剂、增效剂、生物刺激素、植物生长调节剂。
进一步地，所述杀菌剂组合物或农药制剂可以被施加到土壤或植物，例如在种植前施用到土壤，也可在种植后施用到土壤或通过喷雾喷洒到植物。
进一步地，所述杀菌剂组合物可以施用滴灌系统将杀菌剂组合物施加到土壤。
本发明还包括所述防治细菌性病害的杀菌剂组合物、所述农药制剂在防治细菌性病害上的应用。
所述应用方法包括喷雾法、喷粉法、烟雾法、种子处理法、土壤处理法等农药上常用的使用方法。
以活性成分计，所述防治细菌性病害的杀菌剂组合物、所述农药制剂的使用量一般为3-8g/亩。
小檗碱：小檗碱又称黄连素，是一种常见的异喹啉生物碱，分子式c20h18no4。本发明所用原料优选以硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐的形式存在。溶于水后有效成分小檗碱(c20h18no4+)溶出发挥杀菌作用。它存在于小檗科等四个科十个属的许多植物中。1826年m.-e.夏瓦利埃和g.佩尔坦从xanthoxylonclava树皮中首次获得。植保专家对小檗碱进行了一系列的研究，发现其对植物病原真菌、细菌、病毒有一定的生物活性，可以用来制作植物源生物农药，可用于番茄灰霉、黄瓜白粉病、葡萄霜霉、辣椒疫病等多种病害的防治。本发明所述小檗碱可提取自小檗科、罂粟科、毛莨科、芸香科、防己科、鼠李科等六个科植物。
硫酸铵：无色结晶或白色颗粒。无气味。280℃以上分解。水中溶解度：0℃时70.6g，100℃时103.8g。不溶于乙醇和丙酮。0.1mol/l水溶液的ph为5.5。相对密度1.77。折光率1.521。硫酸铵主要用作肥料，适用于各种土壤和作物。也具有杀菌抑菌作用，可用于纺织、皮革、医药等方面。
大蒜素：大蒜素(allicin)又名大蒜新素，为二烯丙基二硫-氧[硫]化物，是从百合科葱属植物大蒜的鳞茎中提取的具有浓烈大蒜气味的化合物，被誉为天然广谱性抗生素，能抑制和杀灭多种细菌。其机理为：大蒜素中的二硫醚和三硫醚能够透过细菌的细胞膜进入细胞质中，将含巯基的酶氧化为双硫键，使细菌缺乏半胱氨酸不能进行生物氧化作用，从而破坏致病菌的正常新陈代谢，使细菌巯基失活而抑制细菌的生长繁殖。另外，大蒜素具有杀虫作用，能有效的减少病菌通过害虫接触传播和从伤口侵入植物体内的概率。
与现有技术相比，本发明的杀菌剂组合物的有益效果为：
1、本发明的杀菌剂组合物对危害农业生产的多种病害(特别是细菌性病害)具有增效作用，减少了农药用药量，减缓了抗药性的产生。
2、本发明的杀菌剂组合物降低了农药在作物上的残留量，减轻了环境污染，具有环保的特点。
3、使用本发明的杀菌剂组合物，对人畜安全，环境相容性好，且不易产生抗药性。
4、使用本发明的杀菌剂组合物，除常规杀菌作用外，还具有其它防害、利生长作用，充分发挥最大效用。大蒜素具有杀虫作用，能有效的减少病菌通过害虫接触传播和从伤口侵入植物体内的概率。硫酸铵可以作为作物的氮肥源。
本发明通过以上几种活性物质不同的作用方式，综合作用于靶标，达到预防、控制、灭杀植物病菌的目的。具有高效、低毒、低残留、杀菌谱广、抗性发展缓慢等特点。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加简洁明了，本发明用以下具体实施例进行说明，但本发明绝非仅限于这些例子。以下所述仅为本发明较好的实施例，仅仅用于描述本发明，不能理解为对发明的范围的限制。应当指出的是，凡在本发明的精神和原则之内所做的任何修改、等同替换和改进，均包含在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以所附权利要求为准。在这些实施例中，除另有说明外，所有百分比均为重量百分比。
若无特殊指明，以下小檗碱均指硫酸小檗碱(c20h18no4·hso4)盐。
实施例1
70％小檗碱·硫酸铵·大蒜素可湿性粉剂(10∶40∶20)，配方：
所述可湿性粉剂的制备方法包括：按配方将农药活性成分、润湿剂、分散剂和填料等一次按比例混合，经气流粉碎机粉碎后即可制得本发明所述的可湿性粉剂。
实施例2
33％小檗碱·硫酸铵·大蒜素悬浮剂(3∶25∶5)，配方：
所述悬浮剂的制备方法包括：先将其它助剂混合均匀，经高速剪切混合均匀，加入小檗碱、硫酸铵、大蒜素，在砂磨机中砂磨2-3小时，使得制剂粒径均在5微米以下，即可制得本发明所述的悬浮剂。
实施例3
45％小檗碱·硫酸铵·大蒜素水分散粒剂(2∶40∶3)，配方：
所述水分散粒剂的制备方法包括：将农药活性成分、分散剂、润湿剂、崩解剂以及填料混合均匀，用超微气流粉碎机粉碎，经捏合，然后加入流化床造粒干燥机中进行造粒、干燥、筛分后经取样分析，即可制得本发明所述的水分散粒剂。
实施例4
30％小檗碱·硫酸铵·大蒜素水剂(4∶20∶6)，配方：
所述可溶性液剂的制备方法包括：将小檗碱、硫酸铵、大蒜素溶解去离子水中，加入脂肪醇聚氧乙烯醚和烷基酚聚氧乙烯醚，搅拌均匀即可制得本发明组合物的水剂。
实验例1小檗碱、硫酸铵、大蒜素三元混配制剂对黄瓜白粉病菌的联合毒力测定
供试药剂：98％小檗碱原药(a)、99％硫酸铵(b)、95％大蒜素原药(c)
供试菌种：黄瓜白粉病菌(erysiphecichoracearum，sphaerothecafuliginea)
实验操作：将98％小檗碱原药、99％硫酸铵、95％大蒜素原药用水溶解后分别制成1000μg/ml的母液。设各试剂的实验浓度分别为0、0.5、1、2.5、5、10、50、100μg/ml。在无菌条件下，将实验药剂分别按设定浓度，用无菌水进行系列稀释，与培养基按1∶9的比例混合，分别制成系列浓度的含药pda平板。在预培养菌株边缘打取直径为5mm菌饼，正面朝下接至含药平板中央，至于24℃下，恒温培养，待对照菌落扩展至培养皿的的80％左右时，采用十字交叉法测量各处理及对照的直径。利用dps软件计算ec50及相关系数。
抑制率的计算：
抑制率(％)＝[(对照菌落生长量-处理菌落生长量萌发率)/对照菌落生长量]×100％
参照wadley公式计算药剂混合后的协同作用系数：
sr＝ec50(th)/ec50(ob)
上式中a、b、c代表三种杀菌剂在混合物中所占比率；ec50(a)、ec50(b)、ec50(c)分别表示a、b、c的实际观测ec50值，ec50(th)表示a、b、c三种杀菌剂按a∶b：c混合后的理论ec50值，ec50(ob)为a、b、c三种杀菌剂按a∶b∶c混合后的实际观测ec50值。sr>1.5，增效；sr<0.5，拮抗；sr介于0.5和1.5之间表示相加作用。实验结果见表1。
表1小檗碱、硫酸铵、大蒜素复配对黄瓜白粉病菌的联合毒力
从表1可知，小檗碱、硫酸铵、大蒜素混用后对黄瓜白粉病菌的菌丝生长均表现出良好的抑制作用，各配比的增效系数均大于1.5，表现出显著的增效作用，其中当小檗碱、硫酸铵、大蒜素配比为4∶20∶6时增效作用最明显，增效系数为4.11。
实施例230％小檗碱·硫酸铵·大蒜素水剂(实施例4制备的)防治黄瓜细菌性角斑病田间药效试验
1、防治对象：黄瓜细菌性角斑病(pseudomonassyringaepv.lachrymans)。本试验选在湖北省孝感市孝南区祝站镇堰河村进行。试验地块土质为沙壤土，ph值7.0，有机质含量较高，浇灌便利。
2、实验方法：
2.1供试药剂
表2试验设计：药剂用量与处理编号
2.2小区设置
小区面积：各处理小区面积30m2，小区间及四周设保护行。
重复次数：试验设有5个处理，每处理重复4次，共计20个小区。
2.3施药方法
常规方法喷雾，按每亩用水量60升计算小区用水量，先喷清水对照，然后喷试验药剂。喷施试验药剂时按浓度由低到高的顺序进行，换药时要清洗干净喷雾器。第一次施药后间隔7天于4月20日第二次施药。第一次施药时黄瓜细菌性角斑病发病初期。
2.4调查方法
随机五点取样，每点调查4株，查代表性叶5片，每小区调查20株，共查100片叶。分别计算各处理病情指数与相对防效。病情分级标准：
0级：无病斑；
1级：病斑面积占整个叶面积的5％以下；
3级：病斑面积占整个叶面积的6％-10％；
5级：病斑面积占整个叶面积的11％-25％；
7级：病斑面积占整个叶面积的26％-50％；
9级：病斑面积占整个叶面积的51％以上。
2.5药效计算方法
3、结果与分析
表330％小檗碱·硫酸铵·大蒜素水剂防治黄瓜细菌性角斑病田间药效试验原始数据统计表
表430％小檗碱·硫酸铵·大蒜素水剂防治黄瓜细菌性角斑病田间药效试验药后10天试验结果分析
生物统计方法：应用邓肯新复极差法对试验数据进行统计分析。
4、药剂评价：田间试验结果表明，第二次施药后10天，本发明自制杀菌剂30％小檗碱·硫酸铵·大蒜素水剂防治黄瓜细菌性角斑病a、b、c处理3种不同使用剂量的防效分别为55.12％、60.42％、72.08％，对照药剂d处理的防效为63.60％。在5％显著水平上，对剂量间差异进行分析，结果显示，a处理与b、c处理间防效差异显著；b处理与c处理间防效差异不显著；与对照药剂d处理进行比较，a、c处理与d处理间防效差异显著，b处理与d处理间防效差异不显著。在试验剂量范围内，供试药剂对作物安全。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。