本发明涉及海洋生物技术中贝类遗传育种技术领域，特别是涉及一种双紫黑壳长牡蛎品系的制种方法。
背景技术：
贝类具有丰富的壳色多态性，大量的研究表明，贝类壳色是受遗传控制的，同时，也发现贝类壳色与其生长、存活等性状相差，丰富的壳色为贝类的遗传育种提供了宝贵的材料。长牡蛎的壳色多态性主要表现为着色程度的差异及颜色类型变异，比较不同壳色的长牡蛎品系生长发育情况，结果显示长牡蛎壳色与其生长和存活性显著相关。但现有品种中，通常所述的紫壳牡蛎经常是指左壳为淡紫的长牡蛎，品种不纯，不能为牡蛎多样性及壳色与生长相关性提供更为有力的研究资料。
因此本领域技术人员致力于开发一种双紫黑壳长牡蛎品系的制种方法，利用该制种方法不但可以培育出外观漂亮、壳色整齐的紫黑品系，而且也为其新品种培育提供了契机。
技术实现要素：
有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种双紫黑壳长牡蛎品系的制种方法。
为实现上述目的，本发明提供了一种双紫黑壳长牡蛎品系的制种方法，包括以下步骤：
1)核心基础群构建：以野生长牡蛎作为亲本，采用群体自繁育方式繁育子代进行核心基础群构建；
2)双紫黑壳群体筛选：当步骤1)中的子代长牡蛎生长至6月龄时，筛选双壳均为紫黑色的个体，采用常规单体养殖模式养成，当性腺成熟时，通过测定牡蛎外套膜中胡萝卜素和卟啉含量，筛选出含量最高的10％个体作为亲本群体，繁育双紫黑壳子一代，之后按照常规单体养殖模式养成；
3)双紫黑壳品系纯化：以步骤2)中的又紫黑壳子一代个体为材料，通过在壳高20～30cm稚贝阶段二次筛选双紫黑壳个体单独养成，当性腺成熟时，再次测定成体外套膜中胡萝卜素和卟啉含量，筛选出含量最高的10％个体作为繁殖群体，进行子二代自繁，按照牡蛎单体常规养殖模式养成，即获得了稳定遗传，双壳均为紫黑色的双紫黑壳长牡蛎品系。
较佳的，所述步骤1)中核心基础群构建中，选取的野生长牡蛎数量在5000个以上。
较佳的，所述步骤2)和步骤3)中所筛选双紫黑壳长牡蛎个体时，选取黑色素含量较大的。
本发明的有益效果是：本发明根据长牡蛎壳色遗传机制，结合外套膜中胡萝卜素和卟啉含量与紫壳色正相关原则，结合黑色素的关联影响，通过核心群体构建，双紫黑壳群体筛选、纯化等技术手段，获得稳定遗传的双紫黑壳长牡蛎新品系，为牡蛎养殖业提供了新的良种。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明：
一种双紫黑壳长牡蛎品系的制种方法，包括以下步骤：
1)核心基础群构建：在广东湛江某养殖场，以野生长牡蛎7000个体作为基础群，通过阴干流水刺激采用群体自繁方式进行核心基础群构建，共计生产d形幼虫1.6亿以上，分别放置在4个25m2水泥池中，按以下方式培养：培育期间水温保持在23～25℃，持续充气，每天换水一次，每次换水1/3，饵料以等鞭金藻为主，后期辅以扁藻和小球藻，投饵量根据幼虫摄食和水中残饵情况确定。幼虫培育22天后陆续出现眼点，开始投放附着基，当每片附着基附着约20个稚贝时结束采苗。将附着稚贝装入扇贝笼，放入室外沉淀池中暂养2个月，以避免自然海区野生牡蛎的污染，经培育，即可获得健康长牡蛎苗种。
2)双紫黑壳群体筛选：当步骤1)中的子代长牡蛎生长至6月龄时，经过仔细挑选，在壳高在25mm以上的双紫黑壳牡蛎个体15000个，再用扇贝笼饲养3个月，选出壳高45mm以上的双紫黑壳体1500个。利用镊子取出3至5mg外套膜，利用elisa试剂盒测定牡蛎外套膜中胡萝卜素和黑色素，用荧光法测定外套膜中卟啉量，综合评定，在可获得样品的牡蛎中选前10％的150个作为亲本群体，其中雌性为126个，雄性为24个，采用混合精卵的办法获得d形幼虫近1300万个，按照常规单体养殖模式进行单体培育。
3)双紫黑壳品系纯化：经过50天培育，获得壳高7至10cm的单体苗种近80万个，均为双紫黑壳个体，但为了进一步纯化，随机抽取双紫黑壳稚贝10000个，再利用扇贝笼吊养，整个养殖过程中定期清理污泥，经过一周年养殖，获得双紫黑个体8950个，利用镊子取出3至5mg外套膜，利用elisa试剂盒测定牡蛎外套膜中胡萝卜素和黑色素，用荧光法测定外套膜中卟啉量，综合评定，在可获得样品的牡蛎中选前10％的895个作为亲本群体，采用混合精卵的办法获得d形幼虫近，按照牡蛎单体常规养殖模式养成，即获得了稳定遗传，双壳均为紫黑色的双紫黑壳长牡蛎品系。一周年后，随机选取100个双紫黑壳牡蛎个体，测定其胡萝卜素，含量较普通长牡蛎提高了2至3倍。
以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术人员无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。