一种以硫化氢供体硫氢化钠提高作物抗逆能力的方法与流程

文档序号:15200553发布日期:2018-08-19 11:19阅读:775来源:国知局

本发明涉及作物种植领域,具体的说是一种以硫化氢提高作物抗逆能力的方法。



背景技术:

干旱、盐、重金属等非生物胁迫是目前导致全世界农作物产量减少的主要原因,作物在极端胁迫环境中,其自身的抗逆境能力表现的极为不足,自身抗逆调节能力无法满足环境变化的要求,表现为因逆境造成的植物体内抗氧化物质含量发生较大的变化如:内源脯氨酸含量剧烈变化、生命活动过程中所需酶活性及植物光合过程中所需的光合物质含量降低等,直接表现为生长受到明显的抑制,植株矮小、叶片变黄、甚至导致作物的非正常性死亡,造成果实产率降低,给全球粮食作物经济发展带来灾难。我国是一个淡水资源严重匮乏的国家,随着经济的发展,各种工业活动的频繁问世,全球气候变暖的趋势日益严重,同时人口数量的增加,淡水资源的匮乏程度也随之急剧增加,除此之外,重工业活动过程中,污水的不达标排放也造成了我国土壤的盐泽化及重金属污染程度加剧,因此研究作物在胁迫条件下的生理特性和抗逆机制,对提升作物抗胁迫能力具有很好应用价值,对各受胁迫地区的农业发展具有重要的意义。

h2s是一种无色有臭鸡蛋气味的气体,在过去很长时间里,硫化氢始终作为一种有毒气体而被人们熟知,但在1989年科学家从大鼠脑中检测到存在内源硫化氢且含量达到1.6μg/g,人脑中h2s含量达0.7μg/g时,科学家推断硫化氢除了作为一种有毒物质之外,也可能对动物的生长发育有一定的生理作用,因此硫化氢成为了近几年医学领域热点之一。经研究表明,h2s在调控神经系统和心血管系统方面具有重要的生理功能,被认定是在co和no等气体信号分子被发现后出现的一种新的内源气体信号分子,并很快在植物方面进行的研究,表明硫化氢对植物的生长发育及应对逆境环境同样具有重要作用。硫化氢参与植物的各种生理功能,如:种子的萌发、根的生成、提高植物在盐、旱、高温及重金属等非生物胁迫下的逆境生存能力。据研究表明,硫化氢已被广泛应用到各种植物的抗逆过程中,如:在小麦中,硫化氢可通过提高小麦幼苗在正常培养条件和高温胁迫下的内源脯氨酸和可溶性糖含量,缓解因高温造成的膜脂过氧化,提高小麦的抗高温和抗干旱能力(吴单华等2013)。cn101385466a硫化氢促进重金属胁迫下的小麦种子萌发。cn101385465a硫化氢促进植物的根形态建成。同时,据科学家研究,硫化氢不仅参与调节植物体内各种物质的变化,还可以参与气孔的调节。

气孔即植物叶表皮内存在的能让植物与外界环境进行气体交换的一种可变性气体通道,其自身由一对保卫细胞构成,对外界环境的各种变化具有强烈的敏感性,可通过自身的开和关调节植物内部各生理功能保持稳定。但在极端恶劣环境中时,环境的变化超出气孔可调节范围之内,导致气孔无法正常开关,气体交换受影响,水分调节失衡,导致植物体内稳态环境紊乱,造成植物的非正常性死亡。有研究表明,硫化氢参与调节气孔运动的过程,主要表现方式为调节气孔的开和关。

目前在研究逆境条件下作物的抗逆能力方面已有很大的进步,因此也产生了多种不同的研究方法,如:通过定性的基因敲除、突变等技术获得抗逆的转基因作物。但是随着转基因作物的问世,不少人也对转基因食品的安全性始终持怀疑态度,也正因为这种观点的不断深化,转基因作物的实际应用领域受到大幅度的限制,国家也曾因此对转基因食品做出法律规范,因此转基因作物参与调节抗逆环境的应用能力仍然不足。除此之外,各种生长调节剂的研发也在不断的深化,从单一的生长调节剂到各种调节剂的混合使用,在抗逆境的研究过程中也得到了一定的认可,但是在实际应用中,生长调节剂的混合使用,操作繁琐,过程复杂,且有可能造成一定程度上的环境污染。

因此本发明采用硫化氢作为植物抗逆环境的调节剂,用浇灌、喷洒等不同方式对作物的种子期、幼苗期及成苗期的抗逆境能力做出初步的评估。通过施用不同浓度的硫化氢调节作物抗逆境过程中的各生理指标的变化,改变因极端环境所造成的作物非正常性生长发育,缓解因恶劣环境造成作物的生存能力降低,提高作物的抗逆境能力。



技术实现要素:

本发明目的是为了克服现有植物抗逆能力技术不足而出现的一种以硫化氢供体硫氢化钠提高作物抗逆能力的方法,该方法可用于作物不同生长阶段及不同胁迫时期。通过施加不同浓度硫氢化钠水溶液,达到调节植物内源物质的变化,改变植物内部光合物质含量,提高作物抗逆能力的目的。

为了达到以上目的,本发明采用以下技术方案:

萌发期,是植物必不可少的一个生长过程,在此期间,有多种因素可导致种子出芽率低甚至不出芽,造成作物不能成苗,因此萌发期也成为了作物生长的一个关键期。正因如此,本发明以硫氢化钠作为硫化氢供体提高种子在干旱胁迫或盐胁迫条件下抗逆萌发,确切的是在播种前,将种子在25~30℃,浓度为0.01~1.6mmol/l的硫氢化钠溶液中浸泡6~24h,待种子充分吸收硫氢化钠溶液后,方可播种。其中,硫氢化钠溶液的浓度优选为0.05~0.4mmol/l。

幼苗期,是植物生长的一个过渡时期,在这段时间,由于幼苗的各种生理机制尚未达到成熟,对外界各种环境的适应能力极弱,极易受到外界环境因素的影响,如温度、水分及污染等因素,因此提高幼苗的抗逆境能力能有效的缓解因环境的剧烈变化导致的幼苗非正常性死亡,提高幼苗的存活率。本发明以硫氢化钠为硫化氢供体提高作物幼苗期抗逆境能力的方法,具体是在作物幼苗期,于25~30℃温度条件下,用0.01~1.6mmol/l浓度的硫氢化钠溶液中灌根处理.。其中,硫氢化钠溶液的浓度优选为0.05~0.4mmol/l。

作为优选,灌根处理的具体操作为每隔6~24h更换溶液,连续更换2~5次。每次每株苗所用硫氢化钠溶液为20~50ml。

成熟期,是植物生长发育的最后时期,此期间的植物要进行各种正常的生理活动,如开花、果实的孕育等,此过程对环境要求极为苛刻,恶劣的环境,可导致植物无法正常产生花粉,植物之间的传粉受到阻碍,导致果实无法正常孕育,直接造成农作物产量降低,因此本发明以硫氢化钠为硫化氢供体提高作物成熟期抗逆能力的方法,确切的是在作物成苗期时,用硫氢化钠浓度为0.01~1.6mmol/l的硫氢化钠混合液在不同胁迫时期对叶面喷施处理。其中,硫氢化钠混合液中的硫氢化钠浓度优选为0.05~0.1mmol/l。

作为优选,所述不同胁迫时期包括胁迫初期、中期和后期,每个时期叶面喷施硫氢化钠混合液的量保持一致,平均每株苗喷施30~100ml,每个时期喷施1~3次。

作为优选,所述硫氢化钠混合液是将浓度为100mmol/l的硫氢化钠水溶液与吐温-80和silwet408按体积比500~1000:1:1混匀后制得。

本发明的有益效果是:

1.本发明所述试剂硫氢化钠来源广泛,并结合作物生长特性,选用适宜的硫氢化钠溶液浓度,避免了对作物的伤害,提高作物的抗逆性能,操作简单。

2.本发明成本低,适用于大规模应用,具有良好的适用性和社会价值。

3.本发明能提高作物的耐逆性能,为恶劣环境地区作物抗逆作用提供一种新的途径。

4.本发明所选用的浓度低,对环境无污染。

附图说明

图1干旱胁迫下绿豆品种苏绿2号种子萌发图;

图2盐胁迫下绿豆品种苏绿2号种子萌发图;

图3干旱胁迫下绿豆品种苏抗3号种子萌发图;

图4盐胁迫下绿豆品种苏抗3号种子萌发图;

图5干旱胁迫下红豆品种苏红2号种子萌发图;

图6盐胁迫下红豆品种苏红2号种子萌发图;

图7干旱胁迫下红豆品种苏红3号种子萌发图;

图8盐胁迫下红豆品种苏红3号种子萌发图;

图9干旱胁迫下水稻品种c两优513种子萌图;

图10盐胁迫下水稻品种c两优513种子萌发图;

图11干旱胁迫下水稻品种武运粳种子萌发图;

图12盐胁迫下水稻品种武运粳种子萌发图;

图13干旱胁迫下露丰黄瓜种子萌发图;

图14盐胁迫下露丰黄瓜种子萌发图;

图15干旱胁迫下玉米品种郑单958种子萌发图;

图16盐胁迫下玉米品种郑单958种子萌发图;

图17干旱胁迫下绿豆品种苏绿2号抗旱生长图;

图18干旱胁迫下绿豆品种苏抗3号抗旱生长图;

图19干旱胁迫下红豆品种苏红2号抗旱生长图;

图20干旱胁迫下红豆品种苏红3号抗旱生长图;

图21干旱胁迫下露丰黄瓜抗旱生长图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步描述:

实施例1硫化氢提高干旱胁迫下苏绿2号种子萌发

一种以硫化氢供体硫氢化钠提高作物抗逆能力的方法,硫氢化钠作为硫化氢气体的供体在提高种子在逆境条件下抗逆萌发的应用,确切的是在播种前,种子在25~30℃温度条件下用浓度为0~1.6mmol/l的硫氢化钠溶液浸泡6~24h。

具体步骤如下:

1.称取硫氢化钠0.028g,将其溶于5ml去离子水中制成浓度为100mmol/l的母液a,待用。

2.取不同体积母液a按照一定比例加入不同体积的去离子水稀释成0~1.6mmol/l不同浓度的硫氢化钠溶液。

3.挑选饱满的种子,用5%的次氯酸钠水溶液消毒15~20min后,用自来水冲洗15~30min,完全去除次氯酸钠。

渗透胁迫,是一种变相的干旱胁迫,其作用原理是利用细胞内外环境渗透压的不同,细胞内部渗透压低,胞外渗透压高于胞内渗透压,导致胞内失水而引起的种子或苗期作物细胞死亡,造成植物失水死亡的现象,因此可以看作是干旱胁迫的一种。

本案例采用绿豆品种苏绿2号进行干旱胁迫下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)中浸种6~8h。之后转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置40~50粒种子,向其中加入10~20ml20%(w:v)的peg-6000作为干旱胁迫条件,每隔6~12h更换一次peg-6000。观察苏绿2号种子萌发情况,统计并记录干旱胁迫12h、24h的发芽率及测量36h的芽长,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子40~50粒。结果如图1及表1所示:

表1干旱胁迫下绿豆品种苏绿2号种子发芽率、芽长及发芽指数

由表1可见,分别统计了12h和24h苏绿2号种子的发芽率及36h时的芽长,发现干旱胁迫下硫氢化钠溶液预处理后的苏绿2号种子发芽率与干旱胁迫对照组相比均有一定程度的提高,且在24h时,浓度为0.1mmol/l进行预处理的苏绿2号种子发芽率效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了21.99%和5.5,36h时,芽长增加了9.27mm。

实施例2硫化氢提高盐胁迫下苏绿2号种子萌发

具体实施步骤同实施例1

盐胁迫环境中,高浓度的盐离子可以加快有害离子进入种子胚。土壤盐分过多,生物膜受到伤害,扰乱了细胞膜对离子的选择,此外,盐胁迫会使土壤环境的水势降低,阻止了种子对水分的吸收,而在种子萌发过程中需要不断的吸收水分,当种子在盐胁迫环境下时,种子内外环境水势不平衡,由于土壤溶液水势较低,造成种子细胞内外水势差降低,影响种子的吸水。盐浓度越大,种子吸水量就越小,甚至不能吸水。由于种子萌发过程中需要经历吸水、吸涨及萌发三个步骤,因此在盐胁迫下种子不能吸收萌发所需要的水量,导致种子死亡。

本案例采用绿豆品种苏绿2号进行盐胁迫条件下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)溶液中浸种6~8h。之后将种子转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置40~50粒种子,加入10~20mll50mmol/lnacl溶液,以此作为盐胁迫条件。每隔6~12h更换一次nacl溶液。观察苏绿2号的种子萌发情况,统计并记录盐胁迫12h、24h的发芽率及测量36h的芽长,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子40~50粒,结果如图2及表2所示:

表2盐胁迫下绿豆品种苏绿2号种子发芽率、芽长及发芽指数

由表2可见,分别统计了12h和24h苏绿2号种子的发芽率及36h时的芽长,发现盐胁迫下硫氢化钠溶液预处理后的苏绿2号种子发芽率与盐胁迫对照组相比均有一定程度的提高,且在24h时,浓度为0.1mmol/l进行预处理的苏绿2号种子发芽率效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了26.66%和6.66,36h时,芽长增加了1.37mm。

实施例3硫化氢提高干旱胁迫下苏抗3号种子萌发

具体实施步骤同实施例1

本案例采用绿豆品种苏抗3号进行干旱胁迫下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)中浸种6~8h。之后将种子转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置40~50粒种子,向其中加入10~20ml20%(w:v)的peg-6000作为干旱胁迫条件,每隔6~12h更换一次peg-6000。观察苏抗3号的种子萌发情况,统计并记录干旱胁迫12h、24h的发芽率及测量36h的芽长,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子40~50粒。结果如图3及表3所示:

表3干旱胁迫下绿豆品种苏抗3号种子发芽率、芽长及发芽指数

由表3可见,分别统计了12h和24h苏抗3号种子的发芽率及36h时的芽长,发现干旱胁迫下硫氢化钠溶液预处理后的苏抗3号种子的发芽率与干旱胁迫对照组相比均有一定程度的提高,且在24h时,浓度为0.05mmol/l进行预处理的苏抗3号种子发芽率效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了30.01%和7.5,36h时,芽长增加了12.93mm。

实施例4硫化氢提高盐胁迫下苏抗3号种子萌发

具体实施步骤同实施例1

本案例采用绿豆品种苏抗3号进行盐胁迫条件下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)中浸种6~8h。之后将种子转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置40~50粒种子,向其中加入10~20ml150mmol/lnacl溶液,以此作为盐胁迫条件。每隔6~12h更换一次nacl溶液。观察苏抗3号的种子萌发情况,统计并记录盐胁迫12h、24h的发芽率及测量36h的芽长,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子40~50粒,结果如图4及表4所示:

表4盐胁迫下绿豆品种苏抗3号种子发芽率、芽长及发芽指数

由表4可见,分别统计了12h和24h苏抗3号种子的发芽率及36h时的芽长,与盐胁迫对照组相比,发现在24h时,浓度为0.05mmol/l进行预处理的苏抗3号种子发芽率效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了17.33%和4.33,36h时,芽长增加了2.96mm。

实施例5硫化氢提高干旱胁迫下苏红2号种子萌发

具体实施步骤同实施例1

本案例采用红豆品种苏红2号进行干旱胁迫条件下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)中浸种12~24h。之后将种子转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置30~40粒种子,向其中加入15~25ml20%(w:v)的peg-6000作为干旱胁迫条件。所加peg-6000溶液的体积应高于种子高度的一半,确保红豆种子能浸在渗透溶液中,每隔12~24h更换一次peg-6000。观察苏抗3号的种子萌发情况,统计并记录干旱胁迫48h、72h的发芽率及测量96h的芽长,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子30~40粒,结果如图5及表5所示:

表5干旱胁迫下红豆品种苏红2号种子发芽率、芽长及发芽指数

由表5可见,分别统计了48h和72h苏红号种子的发芽率及96h时的芽长,与干旱胁迫对照组相比,发现在72h时,浓度为0.1mmol/l进行预处理的苏红2号种子发芽效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了20.83%和2.78,96h时,芽长增加了3.93mm。

实施例6硫化氢提高盐胁迫下苏红2号种子萌发

具体实施步骤同实施例1

本案例采用红豆品种苏红2号进行盐胁迫条件下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)中浸种12~24h。之后将种子转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置30~40粒种子,向其中加入15~25ml100mmol/lnacl溶液,以此模拟盐胁迫条件。所加盐溶液的体积应高于种子高度的一半,确保红豆种子能浸在盐溶液中,每隔12~24h更换一次nacl溶液。观察苏红2号的种子萌发情况,统计并记录盐胁迫48h、72h的发芽率及测量96h的芽长,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子30~40粒,结果如图6及表6所示:

表6盐胁迫下红豆品种苏红2号种子发芽率、芽长及发芽指数

由表6可见,分别统计了48h和72h苏红2号种子的发芽率及96h时的芽长,发现盐胁迫下硫氢化钠溶液预处理后的苏红2号种子的发芽率与盐胁迫对照组相比均有一定程度的提高,且在76h时,浓度为0.05mmol/l进行预处理的苏红2号种子发芽效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了23.33%和3.11,96h时,芽长增加了6.47mm。

实施例7硫化氢提高干旱胁迫下苏红3号种子萌发

具体实施步骤同实施例1

本案例采用红豆品种苏红3号进行干旱胁迫条件下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)中浸种12~24h。将种子转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置30~40粒种子,向其中加入15~25ml20%(w:v)的peg-6000作为干旱胁迫条件,所加peg-6000溶液的体积应高于种子高度的一半,确保红豆种子能浸在渗透溶液中,每隔12~24h更换一次peg-6000。观察苏红3号的种子萌发情况,统计并记录干旱胁迫48h、72h的发芽率及测量96h的芽长,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子30~40粒,结果如图7及表7所示:

表7干旱胁迫下红豆品种苏红3号种子发芽率、芽长及发芽指数

由表7可见,分别统计了48h和72h苏红3号种子的发芽率及96h时的芽长,发现干旱胁迫下硫氢化钠溶液预处理后的苏红3号种子的发芽率与干旱胁迫对照组相比均有一定程度的提高,且在72h时,浓度为0.05mmol/l进行预处理的苏红3号种子发芽效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了25%和3.33,96h时,芽长增加了7.31mm。

实施例8硫化氢提高盐胁迫下苏红3号种子萌发

具体实施步骤同实施例1

本案例采用红豆品种苏红3号进行盐胁迫条件下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)中浸种12~24h。将种子转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置30~40粒种子,加入15~25ml100mmol/lnacl溶液模拟盐胁迫条件。所加盐溶液的体积应高于种子高度的一半,确保红豆种子能浸在盐溶液中,每隔12~24h更换一次盐溶液。观察苏红2号的种子萌发情况,统计并记录盐胁迫48h、72h的发芽率及测量96h的芽长,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子30~40粒,结果如图8及表8所示:

表8盐胁迫下红豆品种苏红3号种子发芽率、芽长及发芽指数

由表8可见,分别统计了48h和72h苏红3号种子的发芽率及96h时的芽长,与盐胁迫对照组相比,发现在72h时,浓度为0.1mmol/l进行预处理的苏红3号种子发芽效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了17.50%和2.35,96h时,芽长增加了4.75mm。

实施例9硫化氢提高干旱胁迫下水稻品种c两优513种子萌发

具体实施步骤同实施例1

本案例采用水稻品种c两优513进行干旱胁迫下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)中浸种12~24h。之后将种子转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置100~130粒种子,加入10~15ml20%(w:v)的peg-6000作为干旱胁迫条件,每隔12~24h更换一次peg-6000。观察c两优的种子萌发情况,统计并记录干旱胁迫48h、72h的萌发率及测量96h的芽长,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子100~130粒,结果如图9及表9所示:

表9干旱胁迫下水稻品种c两优513种子发芽率、芽长及发芽指数

由表9可见,分别统计了48h和72hc两优513种子的发芽率及96h时的芽长,发现干旱胁迫下硫氢化钠溶液预处理后的c两优513种子的发芽率与干旱胁迫对照组相比均有一定程度的提高,且在72h时,浓度为0.4mmol/l进行预处理的c两优513种子发芽效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了15.33%和5.12,96h时,芽长增加了8.86mm。

实施例10硫化氢提高盐胁迫下水稻品种c两优513种子萌发

具体实施步骤同实施例1

本案例采用水稻品种c两优513进行盐胁迫下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)中浸种12~24h。之后将种子转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置100~130颗种子,加入10~15ml盐浓度为100mmol/l盐溶液模拟盐胁迫条件,每隔12~24h更换一次盐溶液,观察c两优的种子萌发情况,统计并记录盐胁迫48h、72h的发芽率及测量96h的芽长,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子100~130粒,结果如图10及表10所示:

表10盐胁迫下水稻品种c两优513种子发芽率、芽长及发芽指数

由表10可见,分别统计了48h和72hc两优513种子的发芽率及96h时的芽长,与盐胁迫对照组相比,发现在72h时,浓度为0.1mmol/l进行预处理的c两优513种子发芽效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了11.00%和3.67,96h时,芽长增加了4.79mm。

实施例11硫化氢提高干旱胁迫下水稻品种武运粳种子萌发

具体实施步骤同实施例1

本案例采用水稻品种武运粳进行干旱胁迫下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)中浸种12~24h。将种子转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置100~130颗种子,加入10~15ml20%(w:v)的peg-6000作为干旱胁迫条件,每隔12~24h更换一次peg-6000,观察武运粳的种子萌发情况,统计并记录干旱胁迫48h、72h的发芽率及测量96h的芽长,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子100~130粒,结果如图11及表11所示:

表11干旱胁迫下水稻品种武运粳种子发芽率、芽长及发芽指数

由表11可见,分别统计了48h和72h武运粳种子的发芽率及96h时的芽长,发现干旱胁迫下硫氢化钠溶液预处理后的武运粳种子的发芽率与干旱胁迫对照组相比均有一定程度的提高,且在72h时,浓度为0.4mmol/l进行预处理的武运粳种子发芽效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了14.03%和4.66,96h时,芽长增加了5.87mm。

实施例12硫化氢提高盐胁迫下水稻品种武运粳种子萌发

具体实施步骤同实施例1

本案例采用水稻品种武运粳进行盐胁迫下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)中浸种12~24h。将种子转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置100~130颗种子,加入10~15ml盐浓度为100mmol/l盐溶液模拟盐胁迫条件,每隔12~24h更换一次盐溶液,观察武运粳的种子萌发情况,统计并记录盐胁迫48h、72h的发芽率及测量96h的芽长,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子100~130粒,结果如图12及表12所示:

表12盐胁迫下水稻品种武运粳种子发芽率、芽长及发芽指数

由表12可见,分别统计了48h和72h武运粳种子的发芽率及96h时的芽长,发现盐胁迫下硫氢化钠溶液预处理后的武运粳种子的发芽率与盐胁迫对照组相比均有一定程度的提高,且在72h时,浓度为0.1mmol/l进行预处理的武运粳种子发芽效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了14.33%和4.77,96h时,芽长增加了2.55mm。

实施例13硫化氢提高干旱胁迫下露丰黄瓜种子萌发

具体实施步骤同实施例1

本案例采用露丰黄瓜进行干旱胁迫下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)中浸种12~24h。之后将种子转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置20~50颗种子,加入10~15ml20%(w:v)的peg-6000作为干旱胁迫条件,重复三次,每隔24h更换一次peg-6000,观察黄瓜的种子萌发情况,统计并记录干旱胁迫24h、48h的发芽率,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子20~50粒,结果如图13及表13所示:

表13干旱胁迫下露丰黄瓜种子发芽率及发芽指数

由表13可见,分别统计了24h和48h露丰黄瓜种子的发芽率及发芽指数,与干旱胁迫对照组相比,发现在48h时,浓度为0.1mmol/l进行预处理的露丰黄瓜种子发芽效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了26.67%和4.00。

实施例14硫化氢提高盐胁迫下露丰黄瓜种子萌发

具体实施步骤同实施例1

本案例采用露丰黄瓜进行进行盐胁迫下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)中浸种12~24h。之后将种子转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置20~50颗种子,加入10~20ml盐浓度为100mmol/l盐溶液模拟盐胁迫条件,每隔12~24h更换一次盐溶液,观察黄瓜种子萌发情况,统计并记录盐胁迫24h、48h的发芽率,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子20~50粒,结果如图14及表14所示:

表14盐胁迫下露丰黄瓜种子发芽率及发芽指数

由表14可见,分别统计了24h和48h露丰黄瓜种子的发芽率,发现盐胁迫下硫氢化钠溶液预处理后的露丰黄瓜种子的发芽率与盐胁迫对照组相比均有一定程度的提高,且在48h时,浓度为0.05mmol/l进行预处理的露丰黄瓜种子发芽效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了32.22%和3.66。

实施例15硫化氢提高干旱胁迫下玉米品种郑单958种子萌发

具体实施步骤同实施例1

本案例采用玉米品种郑单958进行干旱胁迫下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)中浸种12~24h。之后将浸泡后的种子转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置20~50颗种子,加入15~25ml20%(w:v)的peg-6000作为干旱胁迫条件,每隔12~24h更换一次peg-6000,观察玉米的种子萌发情况,统计并记录干旱胁迫24h、48h发芽率,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子20~50粒,结果如图15及表15所示:

表15干旱胁迫下玉米品种郑单958种子发芽率及发芽指数

由表15可见,分别统计了24h和48h玉米种子的发芽率,发现干旱胁迫下硫氢化钠溶液预处理后的玉米种子的发芽率与干旱胁迫对照组相比均有一定程度的提高,且在48h时,浓度为0.1mmol/l进行预处理的玉米种子发芽效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了40.47%和5.66。

实施例16硫化氢提高盐胁迫下玉米品种郑单958种子萌发

具体实施步骤同实施例1

本案例采用玉米品种郑单958进行盐胁迫下的萌发实验,将消毒后的种子放置于不同浓度的硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)中浸种12~24h。之后将浸泡后的种子转移到玻璃培养皿中,每个皿中放置20~50颗种子,加入15~25ml盐浓度为100mmol/l盐溶液模拟盐胁迫条件,每隔12~24h更换一次盐溶液,观察玉米的种子萌发情况,统计并记录盐胁迫24h、48h的发芽率,并算出发芽指数。实验重复三次,每次不同处理组种子20~50粒。结果如图16及表16所示:

表16盐胁迫下玉米品种郑单958种子发芽率及发芽指数

由表16可见,分别统计了24h和48h玉米种子的发芽率,发现盐胁迫下硫氢化钠溶液预处理后的玉米种子的发芽率与盐胁迫对照组相比均有一定程度的提高,且在48h时,浓度为0.4mmol/l进行预处理的玉米种子发芽效果最佳。发芽率及发芽指数分别同比增长了30.96%和4.33。

实施例17硫化氢提高干旱胁迫下苏绿2号叶片含水量

一种以硫化氢供体硫氢化钠提高作物苗期在干旱胁迫条件下抗逆生长的应用,具体是将作物幼苗期的幼苗用浓度为0~1.6mmol/l的硫氢化钠溶液在25~30℃温度条件下灌根处理。

具体步骤如下:

1.称取硫氢化钠0.112g,将其溶于200ml去离子水中制成浓度为10mmol/l的母液a,待用。

2.取不同体积母液a按照一定比例加入不同体积的去离子水稀释成0~1.6mmol/l不同浓度的硫氢化钠溶液。

3.挑选饱满的种子,用5%的次氯酸钠水溶液消毒15~20min后,用自来水冲洗15~30min,完全去除次氯酸钠后,将种子放置于25℃恒温暗培养箱中催芽12~24h,播种于直径10cm含50g营养基质的盆钵中,此营养基质为蛭石和营养土按照3:1比例混合而成,播种前用200ml营养液将土完全润湿,每盆播种6~7颗发芽一致的种子,将其放置于25℃的光照培养箱中培养10~12天,期间每隔12~48h换液一次。待苗生长至两叶一心时,用不同浓度的硫氢化钠溶液灌根处理,每盆浇入约50ml硫氢化钠溶液,每隔6~24h换液一次,共2~5次。

或者,播种于植物水培盒中,内含400~500mlhoagland营养液,ph5.8,每个水培孔中放置3~5颗催芽后的种子,播种后将其放置于25~30℃恒温光照培养箱中,每隔1~2天换一次营养液,待其生长第四至五天时,用不同浓度硫氢化钠溶液灌根处理12~24h。

本案例采用绿豆品种苏绿2号进行自然干旱胁迫条件下生长实验,待苗生长至两叶一心时,用不同浓度硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)灌根处理12~24h,将预处理后的幼苗开始自然干旱,10~12天后测定幼苗叶片相对含水量和自然饱和亏,观察并记录数据,实验重复三次。结果如图17和表17所示:

表17干旱胁迫下绿豆品种苏绿2号幼苗叶片含水量及自然饱和亏

由表17可见,在自然干旱条件下经硫氢化钠溶液浇灌后的苏绿2号幼苗,其叶片的含水量均有一定程度的提高,尤其是在浓度为0.1mmol/l的硫氢化钠溶液浇灌下的幼苗抗旱能力得到了较大的提高,表现在相对于干旱对照组比较,叶片含水量和水分亏缺程度分别提高和降低了21.08%和21.08%。

实施例18硫化氢提高干旱胁迫下苏抗3号鲜重及干重

具体实施步骤同实施例17

本案例采用绿豆品种苏抗3号进行自然干旱胁迫条件下生长实验,待苗生长至两叶一心时,用不同浓度硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)灌根处理12~24h,将预处理后的幼苗开始自然干旱,10~12天后测定幼苗鲜重及干重,观察并记录数据,实验重复三次。结果如图18和表18所示:

表18干旱胁迫下绿豆品种苏抗3号幼苗鲜重及干重

由表18可见,在自然干旱条件下经硫氢化钠溶液浇灌后的苏抗3号幼苗,其鲜重及干重均有一定程度的提高,尤其是在浓度为0.05mmol/l的硫氢化钠溶液浇灌下,幼苗抗旱能力得到了较大的增强,表现在相对于干旱对照组比较,鲜重及干重分别提高了0.474g和0.043g。实施例19硫化氢提高干旱胁迫下苏红2号抗旱能力

具体实施步骤同实施例17

本案例采用红豆品种苏红2号进行自然干旱胁迫条件下生长实验,待苗生长至两叶一心时,用不同浓度硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)灌根处理12~24h,将预处理后的幼苗开始自然干旱,10~12天后测定幼苗株鲜重及叶鲜重,观察并记录数据,实验重复三次。结果如图19和表19所示:

表19干旱胁迫下红豆品种苏红2号株鲜重及叶鲜重

由表19可见,在自然干旱条件下经硫氢化钠溶液浇灌后的苏红2号幼苗,其株鲜重及叶鲜重均有一定程度的提高,尤其是在浓度为0.1mmol/l的硫氢化钠溶液浇灌下,相对于干旱对照组比较,幼苗株鲜重及叶鲜重得到了较大的提高,分别提高了0.539g和1.362g。

实施例20硫化氢提高干旱胁迫下苏红3号鲜重

具体实施步骤同实施例17

本案例采用红豆品种苏红3号进行自然干旱胁迫条件下生长实验,待苗生长至两叶一心时,用不同浓度硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)灌根处理12~24h,将预处理后的幼苗开始自然干旱,10~12天后测定幼苗鲜重,观察并记录数据,实验重复三次。结果如图20和表20所示:

表20干旱胁迫下红豆品种苏红3号株鲜重

由表20可见,在自然干旱条件下经硫氢化钠溶液浇灌后的苏红3号幼苗,其鲜重均有一定程度的提高,尤其是在浓度为0.1mmol/l的硫氢化钠溶液浇灌下,相对于干旱对照组比较,幼苗抗旱能力得到了较大的增强,表现在鲜重提高了0.512g。

实施例21硫化氢提高干旱胁迫下露丰黄瓜鲜重

具体实施步骤同实施例17

本案例采用黄瓜进行自然干旱胁迫条件下生长实验,待苗生长至两叶一心时,用不同浓度硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)灌根处理12~24h,将预处理后的幼苗开始自然干旱,10~12天后测定幼苗株鲜重及叶鲜重,观察并记录数据,实验重复三次。结果如图21和表21所示:

表21干旱胁迫下露丰黄瓜幼苗株鲜重及叶鲜重

由表21可见,在自然干旱条件下经硫氢化钠溶液浇灌后的黄瓜幼苗,其株鲜重及叶片鲜重均有一定程度的提高,在浓度为0.4mmol/l的硫氢化钠溶液浇灌下,相对于干旱对照组比较,幼苗株鲜重及叶片鲜重有明显提高,两者分别提高了1.779g和2.358g。

实施例22硫化氢提高干旱胁迫下紫花苜蓿抗逆能力

具体实施步骤同实施例17

本案例采用紫花苜蓿进行干旱胁迫下生长实验,待其生长第四至五天时,用不同浓度硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)灌根处理12~24h,将硫氢化钠溶液预处理后的幼苗进行干旱胁迫,向预处理后的幼苗中加入20%peg-6000400~500ml灌根处理,2~3天后测定紫花苜蓿幼苗地上部鲜重、地下部鲜重及根长,实验重复三次。观察并记录数据,结果如表22所示:

表22干旱胁迫下紫花苜蓿幼苗地上部、地下部鲜重及根长

由表22可见,在干旱胁迫条件下经硫氢化钠溶液浇灌后的紫花苜蓿幼苗,其地上部鲜重、地下部鲜重及根长均有一定程度的增加,在浓度为0.05mmol/l的硫氢化钠溶液浇灌下,相对于干旱胁迫对照组比较,幼苗抗旱能力得到了较大的增强,表现在地上部鲜重、地下部鲜重及根长分别提高了0.176g、0.078g和1.12cm。

实施例23硫化氢提高干旱胁迫下中薯3号马铃薯抗逆能力

具体实施步骤同实施例17

本案例采用中薯3号马铃薯进行干旱胁迫下生长实验,剪取带有1个腋芽的马铃薯茎段,并将其接种在ms固体培养基表面,于20~25℃恒温培养箱中连续培养3~5天,根系萌发之前,分别移入ms培养液中,用不同浓度硫氢化钠溶液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)处理2~3天后,将ms培养液换成20%(w:v)的peg-6000溶液,连续培养1周左右,期间每隔24~48h换一次peg-6000溶液,胁迫结束后,测量其根鲜重、根长。实验重复三次,记录并统计数据,结果如表23所示:

表23干旱胁迫下中薯3号马铃薯幼苗根鲜重及根长

由表23可见,在干旱胁迫下经硫氢化钠溶液预处理后的马铃薯幼苗,其根鲜重、根长均有一定程度的提高,在浓度为0.1mmol/l的硫氢化钠溶液预处理下,相对于干旱胁迫对照组比较,根鲜重、根长提高的较为明显,分别提高了1.258g和2.52cm。

实施例24硫氢化钠混合液喷施提高大田苏绿2号抗旱能力实验

一种以硫化氢供体硫氢化钠提高作物生长后期在干旱逆境条件下抗旱的应用,具体是在豆类作物成苗期时用浓度为0~1.6mmol/l的硫化氢混合液于室温条件下在不同干旱时期对叶面喷施处理,喷施3~5次。

所述硫氢化钠混合液制备方法:

1.称取硫氢化钠1.12g,将其溶于200ml去离子水中制成浓度为100mmol/l的母液a,将母液a与吐温-80和silwet408按体积比500~1000:1:1混匀后制得母液b,待用。

2.取不同体积母液b按照一定比例加入不同体积的去离子水稀释成0~1.6mmol/l不同浓度的硫氢化钠混合液。

试验在温室大棚中进行,挑选饱满的豆类种子,选择晴朗的早晨将种子播种于试验田中,试验土质为常规土质,正常浇灌直至作物长出第四对真叶时开始干旱,分别在干旱0天、15天及30天用不同浓度硫氢化钠混合液进行喷施处理。

本案例采用绿豆品种苏绿2号进行自然干旱胁迫条件下生长实验,正常浇灌直至苏绿2号长出第四对真叶时开始干旱,分别在干旱0天、15天及30天用不同浓度硫氢化钠混合液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)进行喷施处理。干旱结束后测量其鲜重、干重及叶绿素相对含量。观察并记录数据,结果如表24和表25所示:

表24干旱胁迫下大田苏绿2号鲜重及干重

表25干旱胁迫下大田苏绿2号叶片相对叶绿素含量

由表24及表25可见,在自然干旱条件下经硫氢化钠混合液叶面喷施后的苏绿2号,其鲜重、干重及叶片相对叶绿素含量均有一定程度的提高,使其在干旱时期叶片的光吸收能力得到了很好的提升,尤其是在浓度为0.1mmol/l的硫氢化钠混合液叶面喷施下,抗旱能力得到了较大的增强,表现在,相对于干旱对照组比较,鲜重、干重及叶片相对叶绿素含量分别提高了29.475g、5.304g和9.60。

实施例25硫氢化钠混合液喷施提高大田苏抗3号抗旱能力实验

具体实施步骤同实施24

本案例采用绿豆品种苏抗3号进行自然干旱胁迫条件下生长实验,正常浇灌直至苏抗3号长出第四对真叶时开始干旱,分别在干旱0天、15天及30天用不同浓度硫氢化钠混合液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)进行喷施处理。干旱结束后测量其鲜重、干重及叶片含水量。观察并记录数据,结果如表26和表27所示:

表26干旱胁迫下大田苏抗3号鲜重及干重

表27干旱胁迫下大田苏抗3号叶片含水量及自然饱和亏

由表26及表27可见,在自然干旱条件下经硫氢化钠混合液叶面喷施后的苏抗3号,其鲜重、干重及叶片含水量均有一定程度的提高,在浓度为0.05mmol/l的硫氢化钠混合液喷施下,抗旱能力得到了较大的增强,表现在,相对于干旱对照组比较,鲜重、干重及叶片含水量分别提高了24.960g、7.045g和15.55%。水分亏缺程度降低了15.55%。

实施例26硫氢化钠混合液喷施提高大田苏红2号抗旱能力实验

具体实施步骤同实施例24

采用红豆品种苏红2号进行自然干旱胁迫条件下生长实验,正常浇灌直至苏红2号长出第四对真叶时开始干旱,分别在干旱0天、15天及30天用不同浓度硫氢化钠混合液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)进行喷施处理。干旱结束后测量其鲜重、干重、光合速率、气孔导度、胞间二氧化碳浓度及蒸腾速率。观察并记录数据,结果如表28和表29所示:

表28干旱胁迫下大田苏红2号鲜重及干重

表29干旱胁迫下大田苏红2号叶片光合速率、气孔导度、胞间二氧化碳浓度及蒸腾速率

由表28及表29可见,在自然干旱条件下经硫氢化钠混合液叶面喷施后的苏红2号,其鲜重、干重及光合数据均有一定程度的改善,尤其是在浓度为0.1mmol/l的硫氢化钠混合液叶面喷施下,抗旱能力得到了较大的增强,表现在,相对于干旱对照组比较,鲜重及干重分别提高了22.931g和5.587g,光合作用能力得到了明显的提高。

实施例27硫氢化钠混合液喷施提高大田苏红3号抗旱能力实验

具体实施步骤同实施例24

采用红豆品种苏红3号进行自然干旱胁迫条件下生长实验,正常浇灌直至苏红3号长出第四对真叶时开始干旱,分别在干旱0天、15天及30天用不同浓度硫氢化钠混合液(0、0.01、0.05、0.1、0.4、1.6mmol/l)进行喷施处理。干旱结束后测量其鲜重、干重及收获后测量种子的宽长。观察并记录数据,结果如表30和表31所示:

表30干旱胁迫下大田苏红3号鲜重及干重

表31干旱胁迫下大田苏红3号种子的宽和长

由表30及31可见,在自然干旱条件下经硫氢化钠混合液浇灌后的苏红3号幼苗,其鲜重、干重及种子宽长均有一定程度的改善,在浓度为0.1mmol/l的硫氢化钠混合液叶面喷施下,相对于干旱对照组比较,鲜重、干重及种子宽长分别提高了36.636g、6.466g、1.220cm和2.910cm。

本发明方案所公开的技术手段不仅限于上述实施方式所公开的技术手段,还包括由以上技术特征任意组合所组成的技术方案。应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。

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