一种铁皮石斛快速成苗的方法与流程

文档序号:16628556发布日期:2019-01-16 06:20阅读:532来源:国知局
本发明属于石斛培养领域,具体涉及一种铁皮石斛快速成苗的方法。
背景技术
:铁皮石斛(dendrobiumcandidum),俗称铁皮枫斗,是兰科石斛属多年生草本植物,为名贵的传统中药,具重要的药用价值,有滋阴清热、生津益胃、止咳润肺之功效,颇具市场开发价值。近年来,由于人们对其过度采挖,导致其野生资源急剧减少,日趋濒危,现已被列为国家重点保护植物。由于铁皮石斛对生态环境要求高,自然条件下铁皮石斛繁殖率低生长速度缓慢,采用传统方法繁育铁皮石斛效率很低。因此铁皮石斛的组织培养研究得到了重视并获得了较大的进展。。传统的无性繁殖方式繁殖系数低,原球茎的培养经过原球茎诱导、增殖、分化,生根,壮苗,炼苗步骤,繁殖周期长、成苗率低。技术实现要素:发明目的:为了克服现有技术中存在的不足,本发明提供了一种铁皮石斛快速成苗的方法。技术方案:为解决上述技术问题,本发明提供的一种铁皮石斛快速成苗的方法,所述培养步骤包括如下:1)取材与消毒从铁皮石斛植株上切下长2~5cm的幼嫩茎段,在流水下冲洗,用刷子蘸少许洗衣粉水溶液轻轻刷洗,并经自来水充分洗净,在超净工作台上将茎段放置在75%的酒精中消毒30s后,再用0.1%的hgcl2水溶液浸泡8~10min,无菌水冲洗5~6次;2)诱导培养诱导培养:用解剖刀将铁皮石斛的幼嫩茎段切下,接种在诱导培养基中进行培养;15~20天后,外植体开始萌动,茎段膨大,切面及顶部组织形成疏松组织;继续培养20天后,转入微放置室中,切面及顶部膨大组织的表面形成凹凸不平的颗粒物,随着培养时间的延长,颗粒物长大形成直径1~2mm的类原球茎颗粒物;培养条件为25℃,光照为1900~2200lx,光照时间为14h/d;3)增殖分化培养将诱导形成的原球茎转入到增殖分化培养基中,同时部分原球茎开始分化出芽点并长出1~2片小叶,原球茎的增殖与芽分化同时进行;:温度26℃,光照度2200~2500lx,光照时间为13h/d;4)生根培养待增殖芽数量较多时,将高1~2cm、带有2~3片叶的小芽切下转入生根培养基上进行生根培养,培养30天左右,基部开始出现2~3条约1cm长的白色根;,培养条件:温度25-26℃,光照度1700-2100lx,光照时间为13-14h/d;5)出瓶苗的过渡管理当苗高3cm以上、具3~4片叶时,便可出瓶移栽,移栽前,将生根瓶苗打开瓶盖,然后将瓶苗取出,洗去附着在根部的培养基,用0.01%的高锰酸钾溶液浸泡8~10min,栽种于已灭菌的碎树皮基质中(移栽前浇透水),放置在遮光度50%~60%、湿度达80%以上的温室中。进一步地,所述步骤2)中的诱导培养基由以下组分组成:ms基本培养基,6-苄氨基腺嘌呤1.6~2.5mg/l,萘乙酸0.6~0.8mg/l,pqq0.5~1.5umol/l,植物提取混合物16~28mg/l,蔗糖80~120mg/l,培养基功能液5~8mg/l;进一步地,所述步骤3)中所述增殖分化培养基由以下组分组成:1/2ms基本培养基,6-苄氨基腺嘌呤1.6~2.5mg/l,萘乙酸0.6~0.8mg/l,pqq0.5~1.5umol/l,植物提取混合物16~28mg/l,蔗糖40~60mg/l,维生素b20.2~0.3mg/l;培养基功能液5~8mg/l;进一步地,所述ms基本培养基由以下组分组成:硝酸铵nh4no3600mg/l硝酸钙ca(no3)2·4h2o656mg/l氯化钙cacl2·2h2o196mg/l硫酸镁mgso4·7h2o370mg/l磷酸二氢钾kh2po4170mg/l硫酸钾k2so4990mg/l乙二胺四乙酸二钠na2·edta37.3mg/l硫酸亚铁feso4·7h2o27.8mg/l硫酸锰mnso4·h2o22.3mg/l硫酸锌znso4·7h2o8.6mg/l硼酸h3bo38.2mg/l钼酸钠na2moo4·2h2o0.25mg/l硫酸铜cuso4·5h2o0.05mg/l氯化钴cocl2.6h2o20.05mg/l肌醇c6h12o6·2h2o500mg/l甘氨酸nh2·ch2·cooh5mg/l盐酸硫胺素c12h17clos·2hcl2mg/l盐酸吡哆醇c8h10no5p0.8mg/l烟酸nc5h4cooh0.8mg/l;进一步地,所述1/2ms基本培养基由以下组分组成:硝酸铵nh4no3300mg/l硝酸钙ca(no3)2·4h2o328mg/l氯化钙cacl2·2h2o98mg/l硫酸镁mgso4·7h2o185mg/l磷酸二氢钾kh2po485mg/l硫酸钾k2so4495mg/l乙二胺四乙酸二钠na2·edta37.3mg/l硫酸亚铁feso4·7h2o27.8mg/l硫酸锰mnso4·h2o22.3mg/l硫酸锌znso4·7h2o8.6mg/l硼酸h3bo38.2mg/l钼酸钠na2moo4·2h2o0.25mg/l硫酸铜cuso4·5h2o0.05mg/l氯化钴cocl2.6h2o20.05mg/l肌醇c6h12o6·2h2o500mg/l甘氨酸nh2·ch2·cooh5mg/l盐酸硫胺素c12h17clos·2hcl2mg/l盐酸吡哆醇c8h10no5p0.8mg/l烟酸nc5h4cooh0.8mg/l。进一步地,所述植物提取液由桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质组成;所述桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5:4:1。进一步地,所述培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成;所述芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。进一步地,生根培养基由以下组分组成:1/2ms基本培养基+吲哚丁酸iba0.5~2.0mg/l+pqq0.5~1.5umol/l+胺鲜酯0.02~0.1mg/l+香蕉肉汁5~15g/l+柠檬酸5~12g/l+维生素b20.2~0.3mg/l+植物提取混合物12~18mg/l+培养基功能液5~8mg/l;所述植物提取液由桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质组成;所述桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5:8:1;所述培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成;所述芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。有益效果:本发明相对于现有技术而言具备以下优点:1)本发明中通过各步骤的培育,在省去了炼苗环节,大大缩短了培育周期,节省成本的同时,而且保证了成苗的存活率。2)本发明提供的培养基中培养基功能液包括芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸且通过特定比例,使得培养基呈液体与固定之间,培养基呈悬浮状态,液体之间呈微流动状态,使得培养基中的组分之间均匀,不会因石斛茎芽发育而造成的组分分布不均;且最终成苗移栽时,比较容易拔出,不易伤根伤茎,从而提高成苗存活率。3)本发明提供的培养基中植物提取混合物包括桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质以及特定比例,能够适应增殖分化期间的光照强度,从而成苗率高,成苗移栽后,阳光适应能力强,完成适应三伏天的光照强度和长度,不会造成灼伤等现象。4)本发明提供的培养基中植物提取混合物包括桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质以及特定比例,能够使得根部抗逆性强,成苗移栽后,不会出现烂根或者根部发育不良现象。5)本发明改进的1/2ms基本培养基和ms基本培养基,与培养基其他组分相互配合,能够大大增高增殖系数,增殖倍数可达8~10倍,培养周期短。具体实施方式ms基本培养基和1/2ms基本培养基中:包括如下成份:常量元素的组分如下:硝酸铵(nh4no3)、硝酸钙(ca(no3)2·4h2o)、氯化钙(cacl2·2h2o)、硫酸镁(mgso4·7h2o)、磷酸二氢钾(kh2po4)、硫酸钾(k2so4);微量元素的组分和其对应的使用浓度如下:硫酸锰(mnso4·h2o)、硫酸锌(znso4·7h2o)、硼酸(h3bo3)、钼酸钠(na2moo4·2h2o)、硫酸铜(cuso4·5h2o)、氯化钴(cocl2.62);铁盐的组分如下:乙二胺四乙酸二钠(na2·edta)、硫酸亚铁(feso4·7h2o);有机成分的组分如下:肌醇、甘氨酸(gly)、盐酸硫胺素(vb1)、盐酸吡哆醇(vb6)、烟酸(vpp)。ms基本培养基由以下组分组成:硝酸铵nh4no3600mg/l硝酸钙ca(no3)2·4h2o656mg/l氯化钙cacl2·2h2o196mg/l硫酸镁mgso4·7h2o370mg/l磷酸二氢钾kh2po4170mg/l硫酸钾k2so4990mg/l乙二胺四乙酸二钠na2·edta37.3mg/l硫酸亚铁feso4·7h2o27.8mg/l硫酸锰mnso4·h2o22.3mg/l硫酸锌znso4·7h2o8.6mg/l硼酸h3bo38.2mg/l钼酸钠na2moo4·2h2o0.25mg/l硫酸铜cuso4·5h2o0.05mg/l氯化钴cocl2.6h2o20.05mg/l肌醇c6h12o6·2h2o500mg/l甘氨酸nh2·ch2·cooh5mg/l盐酸硫胺素c12h17clos·2hcl2mg/l盐酸吡哆醇c8h10no5p0.8mg/l烟酸nc5h4cooh0.8mg/l;1/2ms基本培养基由以下组分组成:硝酸铵nh4no3300mg/l硝酸钙ca(no3)2·4h2o328mg/l氯化钙cacl2·2h2o98mg/l硫酸镁mgso4·7h2o185mg/l磷酸二氢钾kh2po485mg/l硫酸钾k2so4495mg/l乙二胺四乙酸二钠na2·edta37.3mg/l硫酸亚铁feso4·7h2o27.8mg/l硫酸锰mnso4·h2o22.3mg/l硫酸锌znso4·7h2o8.6mg/l硼酸h3bo38.2mg/l钼酸钠na2moo4·2h2o0.25mg/l硫酸铜cuso4·5h2o0.05mg/l氯化钴cocl2.6h2o20.05mg/l肌醇c6h12o6·2h2o500mg/l甘氨酸nh2·ch2·cooh5mg/l盐酸硫胺素c12h17clos·2hcl2mg/l盐酸吡哆醇c8h10no5p0.8mg/l烟酸nc5h4cooh0.8mg/l。实施例1:一种铁皮石斛快速成苗的方法,所述培养步骤包括如下:1)取材与消毒从铁皮石斛植株上切下长2~5cm的幼嫩茎段,在流水下冲洗,用刷子蘸少许洗衣粉水溶液轻轻刷洗,并经自来水充分洗净,在超净工作台上将茎段放置在75%的酒精中消毒30s后,再用0.1%的hgcl2水溶液浸泡8~10min,无菌水冲洗5~6次;2)诱导培养诱导培养:用解剖刀将铁皮石斛的幼嫩茎段切下,接种在诱导培养基中进行培养;15~20天后,外植体开始萌动,茎段膨大,切面及顶部组织形成疏松组织;继续培养20天后,转入微放置室中,切面及顶部膨大组织的表面形成凹凸不平的颗粒物,随着培养时间的延长,颗粒物长大形成直径1~2mm的类原球茎颗粒物;培养条件为25℃,光照为2200lx,光照时间为14h/d;诱导培养基由以下组分组成:ms基本培养基,6-苄氨基腺嘌呤2.5mg/l,萘乙酸0.6mg/l,pqq0.5umol/l,植物提取混合物16mg/l,蔗糖80mg/l,培养基功能液5mg/l;所述植物提取液由桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质组成;所述桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5:4:1;所述培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成;所述芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。3)增殖分化培养将诱导形成的原球茎转入到增殖分化培养基中,同时部分原球茎开始分化出芽点并长出1~2片小叶,原球茎的增殖与芽分化同时进行;:温度26℃,光照度2500lx,光照时间为13h/d;增殖分化培养基由以下组分组成:1/2ms基本培养基,6-苄氨基腺嘌呤2.5mg/l,萘乙酸0.6mg/l,pqq0.5umol/l,植物提取混合物16mg/l,蔗糖40mg/l,维生素b20.2mg/l;培养基功能液5mg/l;所述植物提取液由桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质组成;所述桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5:4:1;所述培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成;所述芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。4)生根培养待增殖芽数量较多时,将高1~2cm、带有2~3片叶的小芽切下转入生根培养基上进行生根培养,培养30天左右,基部开始出现2~3条约1cm长的白色根;,培养条件:温度25-26℃,光照度1700lx,光照时间为13-14h/d;生根培养基由以下组分组成:1/2ms基本培养基+吲哚丁酸iba2.0mg/l+pqq0.5umol/l+胺鲜酯0.02mg/l+香蕉肉汁5g/l+柠檬酸5g/l+维生素b20.2mg/l+植物提取混合物12mg/l+培养基功能液5mg/l;所述植物提取液由桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质组成;所述桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5:8:1;所述培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成;所述芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。5)出瓶苗的过渡管理当苗高3cm以上、具3~4片叶时,便可出瓶移栽,移栽前,将生根瓶苗打开瓶盖,然后将瓶苗取出,洗去附着在根部的培养基,用0.01%的高锰酸钾溶液浸泡8~10min,栽种于已灭菌的碎树皮基质中(移栽前浇透水),放置在遮光度50%~60%、湿度达80%以上的温室中。实施例2:一种铁皮石斛快速成苗的方法,所述培养步骤包括如下:1)取材与消毒从铁皮石斛植株上切下长2~5cm的幼嫩茎段,在流水下冲洗,用刷子蘸少许洗衣粉水溶液轻轻刷洗,并经自来水充分洗净,在超净工作台上将茎段放置在75%的酒精中消毒30s后,再用0.1%的hgcl2水溶液浸泡8~10min,无菌水冲洗5~6次;2)诱导培养诱导培养:用解剖刀将铁皮石斛的幼嫩茎段切下,接种在诱导培养基中进行培养;15~20天后,外植体开始萌动,茎段膨大,切面及顶部组织形成疏松组织;继续培养20天后,转入微放置室中,切面及顶部膨大组织的表面形成凹凸不平的颗粒物,随着培养时间的延长,颗粒物长大形成直径1~2mm的类原球茎颗粒物;培养条件为25℃,光照为1900lx,光照时间为14h/d;诱导培养基由以下组分组成:ms基本培养基,6-苄氨基腺嘌呤1.6mg/l,萘乙酸0.8mg/l,pqq1.5umol/l,植物提取混合物28mg/l,蔗糖120mg/l,培养基功能液8mg/l;所述植物提取液由桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质组成;所述桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5:4:1;所述培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成;所述芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。3)增殖分化培养将诱导形成的原球茎转入到增殖分化培养基中,同时部分原球茎开始分化出芽点并长出1~2片小叶,原球茎的增殖与芽分化同时进行:温度26℃,光照度2200~2500lx,光照时间为13h/d;增殖分化培养基由以下组分组成:1/2ms基本培养基,6-苄氨基腺嘌呤1.6mg/l,萘乙酸0.8mg/l,pqq1.5umol/l,植物提取混合物28mg/l,蔗糖60mg/l,维生素b20.3mg/l;培养基功能液8mg/l;所述植物提取液由桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质组成;所述桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5:4:1;所述培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成;所述芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。4)生根培养待增殖芽数量较多时,将高1~2cm、带有2~3片叶的小芽切下转入生根培养基上进行生根培养,培养30天左右,基部开始出现2~3条约1cm长的白色根;,培养条件:温度25-26℃,光照度2100lx,光照时间为13h/d;生根培养基由以下组分组成:1/2ms基本培养基+吲哚丁酸iba0.5mg/l+pqq1.5umol/l+胺鲜酯0.1mg/l+香蕉肉汁15g/l+柠檬酸12g/l+维生素b20.3mg/l+植物提取混合物18mg/l+培养基功能液8mg/l;所述植物提取液由桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质组成;所述桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5:8:1;所述培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成;所述芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。5)出瓶苗的过渡管理当苗高3cm以上、具3~4片叶时,便可出瓶移栽,移栽前,将生根瓶苗打开瓶盖,然后将瓶苗取出,洗去附着在根部的培养基,用0.01%的高锰酸钾溶液浸泡8~10min,栽种于已灭菌的碎树皮基质中(移栽前浇透水),放置在遮光度50%~60%、湿度达80%以上的温室中。实施例3:一种铁皮石斛快速成苗的方法,所述培养步骤包括如下:1)取材与消毒从铁皮石斛植株上切下长2~5cm的幼嫩茎段,在流水下冲洗,用刷子蘸少许洗衣粉水溶液轻轻刷洗,并经自来水充分洗净,在超净工作台上将茎段放置在75%的酒精中消毒30s后,再用0.1%的hgcl2水溶液浸泡8~10min,无菌水冲洗5~6次;2)诱导培养诱导培养:用解剖刀将铁皮石斛的幼嫩茎段切下,接种在诱导培养基中进行培养;15~20天后,外植体开始萌动,茎段膨大,切面及顶部组织形成疏松组织;继续培养20天后,转入微放置室中,切面及顶部膨大组织的表面形成凹凸不平的颗粒物,随着培养时间的延长,颗粒物长大形成直径1~2mm的类原球茎颗粒物;培养条件为25℃,光照为2000lx,光照时间为14h/d;诱导培养基由以下组分组成:ms基本培养基,6-苄氨基腺嘌呤1.9mg/l,萘乙酸0.7mg/l,pqq0.8umol/l,植物提取混合物23mg/l,蔗糖110mg/l,培养基功能液7mg/l;所述植物提取液由桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质组成;所述桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5:4:1;所述培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成;所述芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。3)增殖分化培养将诱导形成的原球茎转入到增殖分化培养基中,同时部分原球茎开始分化出芽点并长出1~2片小叶,原球茎的增殖与芽分化同时进行;:温度26℃,光照度2300lx,光照时间为13h/d;增殖分化培养基由以下组分组成:1/2ms基本培养基,6-苄氨基腺嘌呤1.8mg/l,萘乙酸0.7mg/l,pqq1.2umol/l,植物提取混合物22mg/l,蔗糖55mg/l,维生素b20.25mg/l;培养基功能液6mg/l;所述植物提取液由桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质组成;所述桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5:4:1;所述培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成;所述芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。4)生根培养待增殖芽数量较多时,将高1~2cm、带有2~3片叶的小芽切下转入生根培养基上进行生根培养,培养30天左右,基部开始出现2~3条约1cm长的白色根;,培养条件:温度26℃,光照度2000lx,光照时间为13h/d;生根培养基由以下组分组成:1/2ms基本培养基+吲哚丁酸iba0.9mg/l+pqq1.3umol/l+胺鲜酯0.06mg/l+香蕉肉汁8g/l+柠檬酸8g/l+维生素b20.25mg/l+植物提取混合物15mg/l+培养基功能液7mg/l;所述植物提取液由桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质组成;所述桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5:8:1;所述培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成;所述芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。5)出瓶苗的过渡管理当苗高3cm以上、具3~4片叶时,便可出瓶移栽,移栽前,将生根瓶苗打开瓶盖,然后将瓶苗取出,洗去附着在根部的培养基,用0.01%的高锰酸钾溶液浸泡8~10min,栽种于已灭菌的碎树皮基质中(移栽前浇透水),放置在遮光度50%~60%、湿度达80%以上的温室中。实施例4:一种铁皮石斛快速成苗的方法,所述培养步骤包括如下:1)取材与消毒从铁皮石斛植株上切下长2~5cm的幼嫩茎段,在流水下冲洗,用刷子蘸少许洗衣粉水溶液轻轻刷洗,并经自来水充分洗净,在超净工作台上将茎段放置在75%的酒精中消毒30s后,再用0.1%的hgcl2水溶液浸泡8~10min,无菌水冲洗5~6次;2)诱导培养诱导培养:用解剖刀将铁皮石斛的幼嫩茎段切下,接种在诱导培养基中进行培养;15~20天后,外植体开始萌动,茎段膨大,切面及顶部组织形成疏松组织;继续培养20天后,转入微放置室中,切面及顶部膨大组织的表面形成凹凸不平的颗粒物,随着培养时间的延长,颗粒物长大形成直径1~2mm的类原球茎颗粒物;培养条件为25℃,光照为2000lx,光照时间为14h/d;诱导培养基由以下组分组成:ms基本培养基,6-苄氨基腺嘌呤2.1mg/l,萘乙酸0.7mg/l,pqq0.9umol/l,植物提取混合物27mg/l,蔗糖115mg/l,培养基功能液7mg/l;所述植物提取液由桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质组成;所述桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5:4:1;所述培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成;所述芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。3)增殖分化培养将诱导形成的原球茎转入到增殖分化培养基中,同时部分原球茎开始分化出芽点并长出1~2片小叶,原球茎的增殖与芽分化同时进行;:温度26℃,光照度2300lx,光照时间为13h/d;增殖分化培养基由以下组分组成:1/2ms基本培养基,6-苄氨基腺嘌呤2.3mg/l,萘乙酸0.7mg/l,pqq1.2umol/l,植物提取混合物26mg/l,蔗糖55mg/l,维生素b20.25mg/l;培养基功能液7mg/l;所述植物提取液由桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质组成;所述桑叶提取物、黄芩提取物以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5:4:1;所述培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成;所述芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。4)生根培养待增殖芽数量较多时,将高1~2cm、带有2~3片叶的小芽切下转入生根培养基上进行生根培养,培养30天左右,基部开始出现2~3条约1cm长的白色根;培养条件:温度25-26℃,光照度1800lx,光照时间为14h/d;生根培养基由以下组分组成:1/2ms基本培养基+吲哚丁酸iba0.7mg/l+pqq1.1umol/l+胺鲜酯0.09mg/l+香蕉肉汁13g/l+柠檬酸6g/l+维生素b20.27mg/l+植物提取混合物17mg/l+培养基功能液7mg/l;所述植物提取液由桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质组成;所述桑叶提取物、菱角叶汁以及鞣质三者之间的重量份比依次分别为5:8:1;所述培养基功能液由芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸组成;所述芦荟凝胶、皂甙以及棕榈酸的重量份比例依次分别为6:4:1。5)出瓶苗的过渡管理当苗高3cm以上、具3~4片叶时,便可出瓶移栽,移栽前,将生根瓶苗打开瓶盖,然后将瓶苗取出,洗去附着在根部的培养基,用0.01%的高锰酸钾溶液浸泡8~10min,栽种于已灭菌的碎树皮基质中(移栽前浇透水),放置在遮光度50%~60%、湿度达80%以上的温室中。本实施例1~4经过近万株石斛培养试验:实施例平均生根率光抗逆性平均根粗移栽烂根率实施例199.2%无灼伤,良好0.220实施例299.5%无灼伤,良好0.230实施例399.9%无灼伤,良好0.240实施例499.7%无灼伤,良好0.230现有方法75%灼伤率15%左右0.1512.5%光抗逆性数据来自南京地区2017年7~9月光照强度试验;平均根粗;实施例中的平均周期相比现有技术培育周期缩短30天左右。以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出:对于本
技术领域
的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。当前第1页12
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