本发明涉及一种超敏蛋白复合酶制剂及其制备方法与应用，属于酶制剂技术领域。
背景技术：
目前常用的菌剂发酵床多以锯末、木屑和稻壳为主材，其垫料厚度为0.7-1.0米，而锯末、木屑的价格一直居高不下，广大养殖户制作发酵床的成本较高，且因为菌剂死亡发生“死床”而不断更换，同时日常护理工作劳动强度大。菌剂发酵床并没有得到广泛推广，由于降解效果不好，不能够有效降解粪便，净化效果不好，并且菌剂发酵床通常在发酵过程中温度升高使得不适宜猪的生长，菌剂发酵床大多没有经受住市场的考验，多以失败告终。
农业害虫日益增多，所使用的农药也越来越多，给农产品、环境以及人类健康都带来一定的危害，过量使用农药及化肥致带来农产品农药残留严重超标，因此，如何减少农药残留具有重要的意义。
柑橘在种植过程中极易出现黄龙病，对农户带来损失，因此柑橘黄龙病的防治对于柑橘种植具有重要意义。
技术实现要素：
为解决现有菌剂发酵床对于粪便的降解速度低、需要垫料厚度大，寒地水稻产量低且有农药残留，以及柑橘易出现黄龙病的问题，本发明提供了一种超敏蛋白复合酶制剂及其制备方法，采用的技术方案如下：
本发明的目的在于提供一种蛋白复合酶制剂，该蛋白复合酶制剂由复合酶，沸石粉，葡萄糖和水发酵制备而成；所述复合酶由超氧化物歧化酶，菠萝蛋白酶，纤维素酶，脂肪酶，淀粉酶，低聚糖酶和木瓜蛋白酶组成。
优选地，所述复合酶，沸石粉，葡萄糖和水按照如下重量份数配比：5.72重量份～8.82重量份复合酶；3.8重量份～5.7重量份沸石粉；0.39重量份～1.14重量份葡萄糖；7.6重量份～11.4重量份水；其中：所述5.72重量份～8.82重量份复合酶由0.1重量份～0.15重量份超氧化物歧化酶，1.5重量份～2.5重量份菠萝蛋白酶，2重量份～3重量份纤维素酶，1重量份～1.5重量份脂肪酶，1重量份～1.5重量份淀粉酶，0.05重量份～0.07重量份低聚糖酶和0.07重量份～0.1重量份木瓜蛋白酶组成。
优选地，所述复合酶，沸石粉，葡萄糖和水按照如下重量份数配比：复合酶7.26重量份；沸石粉4.2重量份；葡萄糖0.78重量份；水9.4重量份；其中：所述7.26重量份复合酶由0.12重量份超氧化物歧化酶，2重量份菠萝蛋白酶，2.5重量份纤维素酶，1.3重量份脂肪酶，1.2重量份淀粉酶，0.06重量份低聚糖酶和0.08重量份木瓜蛋白酶组成。
本发明还提供了一种上述任一蛋白复合酶制剂的制备方法，该制备方法是将复合酶，沸石粉和水混合后加氧搅拌均匀，在35℃-37℃、ph为5.7的条件下有氧发酵10-12天，然后调整ph至6.5-6.8，加入葡萄糖继续有氧发酵进行后成熟期培育至第45-50天，待培育完成后静置，过滤得蛋白复合酶制剂。
优选地，所述有氧发酵的天数为10天。
优选地，所述后成熟期培育在发酵期间每隔15h搅拌一次，每次搅拌30min。
优选地，所述静置的时间为45天。
本发明还提供了以上任一所述蛋白复合酶制剂在制备养殖用垫料或垫料床中的应用。尤其是在制备畜禽生猪养殖用垫料或垫料床中的应用。
本发明还提供了以上任一所述制备方法制得的蛋白复合酶制剂在制备养殖用垫料或垫料床中的应用。尤其是在制备生猪养殖用垫料或垫料床中的应用。
本发明还提供了以上任一所述蛋白复合酶制剂在寒地水稻种植中的应用。尤其是在提高寒地水稻产量、促进寒地水稻早熟、降解农药中的应用。
本发明还提供了以上任一所述制备方法制得的蛋白复合酶制剂在寒地水稻种植中的应用。尤其是在提高寒地水稻产量、促进寒地水稻早熟、降解农药中的应用。
本发明还提供了以上任一所述蛋白复合酶制剂在防治黄龙病中的应用。尤其是在防治柑橘黄龙病中的应用。
本发明还提供了以上任一所述制备方法制得的蛋白复合酶制剂在防治黄龙病中的应用。尤其是在防治柑橘黄龙病中的应用。
现有菌剂发酵床厚度较厚的原因是：一是因为菌剂发酵床需要人为加入外来菌种，是属于外来菌种入侵，加入后会与当地菌种有个争性作用损失一部分，所以需要较厚的垫料来为菌种提供更多的生存空间和能量来进行后续的降解粪便工作，二是因为菌剂需要产生大量热量进行粪便水分蒸发和粪便降解活动，薄床储存不了热量不适用，必须是厚床。而本发明的超敏蛋白复合酶制剂是一种超敏蛋白复合酶产品，以蛋白形式存在，不是菌剂，该蛋白复合酶制剂具有强大的生物催化分解作用，通过催化生物体里有益微生物的正反应，催化抑制生物体里有害微生物的负反应，实现"微生态”处于平衡，能激发细胞活性，排斥异种蛋白，大幅增强生物体的免疫能，该蛋白复合酶制剂稳定性很强、抗外来细菌干扰能力强，不受外来物种的侵害，具有生物多样性，催化反应速度快的特点，将本发明的蛋白复合酶制剂加入到垫料中制备的实际上不属于发酵垫料，更准确的说应当属于一种降解垫料，该降解垫料铺成垫料床在使用过程中不产热，直接依赖酶强大的催化能力，扶植本土有益菌进行粪便降解，不涉及物种入侵，是一种生态养殖模式。
本发明有益效果：
本发明提供了一种蛋白复合酶制剂，该蛋白复合酶制剂具有很强生物催化分解作用，添加到养殖用垫料中，能够有效降解粪便，只需要4-6h完全降解粪尿中的腐败菌和有害物质，还能够迅速净化环境中的各种异味，消除畜禽粪便的恶臭味和有毒气体，抑制各种病原菌的繁殖，控制疾病发生，无蚊蝇孳生，保证了猪粪尿分解、生猪生存环境舒适的效果；不同于添加菌剂垫料床需要较厚的垫料(至少70cm)来作为菌剂的载体且在发酵过程中产生高温影响猪生长而无法得到推广使用，本发明蛋白复合酶制剂用于垫料只需要10cm-20cm的厚度即可，并且不会产生高温，垫料的厚度得到显著降低，极大地减少猪发酵床的制作成本，进而降低了养殖成本，同时避免垫料温度过高对猪产生不利影响；此外本发明蛋白复合酶制剂用于垫料床由于蛋白复合酶制剂具有很强生物催化分解作用使得垫料床的使用寿命相比于菌剂垫料床得到显著延长，如正确按照使用规程操作，使用寿命可达6-8年，甚至10年，该蛋白复合酶制剂对于构建科学环保的生产管理模式，建立健康的养猪模式，生产营养、安全的猪肉具有重要意义。
本发明蛋白复合酶制剂还能够用于寒地水稻种植过程，具有促进水稻早熟、提高水稻产量，有效降解农药、降低农药残留的的效果。
本发明蛋白复合酶制剂还具有防治黄龙病的效果。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明，但本发明不受实施例的限制。
实施例1：
本实施例提供了一种蛋白复合酶制剂，该蛋白复合酶制剂由复合酶，沸石粉，葡萄糖和水发酵制备而成；所述复合酶由超氧化物歧化酶，菠萝蛋白酶，纤维素酶，脂肪酶，淀粉酶，低聚糖酶和木瓜蛋白酶组成；其中：
5.72重量份复合酶；3.8重量份沸石粉；0.39重量份葡萄糖；7.6重量份水；
5.72重量份复合酶由0.1重量份超氧化物歧化酶，1.5重量份菠萝蛋白酶，2重量份纤维素酶，1重量份脂肪酶，1重量份淀粉酶，0.05重量份低聚糖酶和0.07重量份木瓜蛋白酶组成。
本实施例还提供了一种上述蛋白复合酶制剂的制备方法，该制备方法是将超氧化物歧化酶，菠萝蛋白酶，纤维素酶，脂肪酶，淀粉酶，低聚糖酶，木瓜蛋白酶，沸石粉，葡萄糖和水混合后加氧搅拌均匀，在35℃-37℃、ph为5.7的条件下有氧发酵10天后加入葡萄糖继续有氧发酵至第45天，然后调整ph至6.5-6.8进行后成熟期培育，在发酵期间每隔15h搅拌一次，每次搅拌30min，待后成熟期培育完成后静置45天，过滤得蛋白复合酶制剂。
实施例2
本实施例提供了一种蛋白复合酶制剂，该蛋白复合酶制剂由复合酶，沸石粉，葡萄糖和水发酵制备而成；所述复合酶由超氧化物歧化酶，菠萝蛋白酶，纤维素酶，脂肪酶，淀粉酶，低聚糖酶和木瓜蛋白酶组成；其中：
8.82重量份复合酶；5.7重量份沸石粉；1.14重量份葡萄糖；11.4重量份水；
8.82重量份复合酶由0.15重量份超氧化物歧化酶，2.5重量份菠萝蛋白酶，3重量份纤维素酶，1.5重量份脂肪酶，1.5重量份淀粉酶，0.07重量份低聚糖酶和0.1重量份木瓜蛋白酶组成。
本实施例还提供了一种上述蛋白复合酶制剂的制备方法，该制备方法是将超氧化物歧化酶，菠萝蛋白酶，纤维素酶，脂肪酶，淀粉酶，低聚糖酶，木瓜蛋白酶，沸石粉，葡萄糖和水混合后加氧搅拌均匀，在35℃-37℃、ph为5.7的条件下有氧发酵10天后加入葡萄糖继续有氧发酵至第45天，然后调整ph至6.5-6.8进行后成熟期培育，在发酵期间每隔15h搅拌一次，每次搅拌30min，待后成熟期培育完成后静置45天，过滤得蛋白复合酶制剂。
实施例3
本实施例提供了一种蛋白复合酶制剂，该蛋白复合酶制剂由复合酶，沸石粉，葡萄糖和水发酵制备而成；所述复合酶由超氧化物歧化酶，菠萝蛋白酶，纤维素酶，脂肪酶，淀粉酶，低聚糖酶和木瓜蛋白酶组成；其中：
复合酶7.26重量份；沸石粉4.2重量份；葡萄糖0.78重量份；水9.4重量份；
7.26重量份复合酶由0.12重量份超氧化物歧化酶，2重量份菠萝蛋白酶，2.5重量份纤维素酶，1.3重量份脂肪酶，1.2重量份淀粉酶，0.06重量份低聚糖酶和0.08重量份木瓜蛋白酶组成。
本实施例还提供了一种上述蛋白复合酶制剂的制备方法，该制备方法是将超氧化物歧化酶，菠萝蛋白酶，纤维素酶，脂肪酶，淀粉酶，低聚糖酶，木瓜蛋白酶，沸石粉，葡萄糖和水混合后加氧搅拌均匀，在35℃-37℃、ph为5.7的条件下有氧发酵10天后加入葡萄糖继续有氧发酵至第45天，然后调整ph至6.5-6.8进行后成熟期培育，在发酵期间每隔15h搅拌一次，每次搅拌30min，待后成熟期培育完成后静置45天，过滤得蛋白复合酶制剂。
为说明本发明蛋白复合酶制剂所能够取得的有益效果，进行了如下实验：
1、为了验证蛋白复合酶制剂薄床清洁养殖、降解粪便方面的效果，特在哈尔滨市肇东五站养猪场进行试验，实验时间为夏季。分别以菌剂发酵床和本发明蛋白复合酶制剂垫料床养殖仔猪，其中：以本发明实施例3制备的蛋白复合酶制剂添加到垫料中制备蛋白复合酶垫料床为实验组，具体方法是将本发明实施例3制备的蛋白复合酶制剂、锯末和稻壳的混合物和水混合，其中锯末与稻壳的质量比为1：2，蛋白复合酶与垫料原料的质量比为1：1000，水的添加量是添加至所述生猪养殖用生态降解垫料的含水量为50％，获得垫料，将制得的垫料按照15m的厚度平铺在猪舍内，命名为蛋白复合酶薄床；以现有添加生物菌剂的发酵床作为对照组，用现有发酵床的发酵菌剂代替蛋白复合酶制剂，其余采用与实验组相同的配方和方法制备垫料，按照70cm的厚度平铺在猪舍内(该厚度的是根据实践经验确定的能够满足承载足够发酵菌剂发挥降解效果的垫料厚度)，命名为生物发酵厚床。猪舍均为半封闭式，猪舍长60m，宽10m，随机选择300头15～20kg健康无病的仔猪，分成两组，组间体重差异不显著(p<0.05)。每组150组，分别在发酵厚床和复合酶薄床猪舍的环境下进行饲养。试验组与对照组均饲喂全价配合饲料。在猪出栏之前定期监测2栋猪舍的温度、湿度、氨气、硫化氢含量。猪出栏后检测肉质。
试验结果：对照组厚床产热温度较高、最高可达80℃，对猪危害极大，且厚床需要定期翻动，由于厚度较大翻动费时费力，甚至需要重型机械才可翻动。对照组的厚床在4-6h时，粪便部分降解，产热大，温度高，猪长势缓慢，且由于发酵不完全导致腐败菌存活使得圈舍异味较重，蚊蝇孳生。该垫料床的使用寿命为3年。
实验组的蛋白复合酶薄床在养殖过程中垫床表面温度夏季<30℃，适宜猪生长。4-6h完全降解粪尿中的腐败菌和有害物质，消除圈舍异味，无蚊蝇孳生。薄床通过猪主动拱食进行翻动，无需人工翻动，节省人工、机械成本、水电费成本约50元/天左右。粪在酵床中可快速充分发酵、生成有优质机肥。肉质经权威机构检测，达到国家aa级标准。
2、为了验证蛋白复合酶在寒地水稻种植过程中，增产、促早熟、降农残方面的作用，特在新乐乡新民村水稻田进行试验。
试验方法：
1)配制溶液：将实施例3蛋白复合酶制剂与水按照质量比为1:300进行混合，配制成蛋白复合
酶溶液；
2)苗床上分别在一叶一心期、2叶一心期、3叶一心期及插秧前15小时各喷施一遍配制的蛋
白复合酶溶液。
3)本田采用大区对比法，不设重复。分别在插秧后3-5天、分蘖期、孕穗期、灌浆期各喷施
一次配制的蛋白复合酶溶液。
4)将收获后的大米送检sgs进行农残检测。
试验结果：与对照相比，施用蛋白复合酶的水稻可以千粒重得到提高，成熟期提前5-7天，增产8％-10％。送检sgs结果显示：509项农残检测为零。
3、为了验证蛋白复合酶对沙糖桔黄龙病防治效果，在广东省封开县杏花镇、江口镇进行试验。将实施例3蛋白复合酶制剂与水按照质量比为1:300进行混合，配制成蛋白复合酶溶液，使用实施例3制备的蛋白复合酶溶液对沙糖桔果树培根，观察毛根情况，并观察土壤改良有机质增加情况。用蛋白复合酶溶液喷施叶面后测查木虱存活量的变化，观察春梢生长变化及控梢作用，观察经脉及叶片变化，测定开花量及坐果率，观察枝条叶片，果实发育是否正常等各项检测、观察、评定工作。实验亩数为9亩。
试验结果：土壤改良后土壤有机质增加，土质松软，增加透气性，有害病毒灭绝，三个月后土壤恢复生机，土壤中有很多蚯蚓出现。主根恢复生机，可见大量毛根。枝叶生长，叶片增大，变绿，坐果率大大提高。使用复合酶一年后，坐果率提高，秋季果实饱满，水分充足，糖分增加，经检测后未发现黄龙病病毒。复合酶在治理沙糖桔黄龙病实验过程中获得了可喜成绩，植物在复合酶的作用下，根系丛生，枝繁叶茂，坐果率恢复较快，果实饱满，糖分较高，口味较好，受到当地果农的赞扬。
虽然本发明已以较佳的实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可以做各种改动和修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。