C反应蛋白检测用试纸条和试纸卡的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及一种C反应蛋白检测用试纸条和试纸卡。
【背景技术】
[0002]C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)是指在机体受到感染或组织损伤时血楽中一些急剧上升的蛋白质的统称。C反应蛋白可以激活补体和加强吞噬细胞的吞噬而起调理作用，从而清除入侵机体的病原微生物和损伤，坏死，凋亡的组织细胞，在机体的天然免疫过程中发挥重要的保护作用。近年来，人们逐渐认识到原来传统意义中正常水平的C反应蛋白的轻度升高与冠状动脉事件、中风及周围血管病相关，是一项独立的危险因素。通过提高检测灵敏度，能够实现对超敏C反应蛋白的定量测定。超敏C反应蛋白检测即是针对正常范围0-10.0mg/L的C反应蛋白浓度水平设计的，对低浓度的准确性要求更高，检测极限可达 0.005mg/L-0.20mg/L。
[0003]量子点尺寸介于几个nm至几十nm之间。它通常是由无机核以及包覆在核表面的有机分子所构成。对于量子点来说，当其尺寸达到一定的临界值时，材料的行为将呈现出量子特性，材料的结构和性质也将会发生从宏观到微观的改变。基于量子点独特光学性质开发的试纸条具备了很高的检测灵敏度，特别是适用于低浓度水平(如pg/ml-ng/ml)待检物含量的准确测定，但是其检测的线性范围不够宽，在相同的一套检测体系范围内，无法实现高值样品的准确定量。稀土材料荧光寿命长、发射光谱窄、Stokes位移大，非常有利于消除背景荧光和杂散光的干扰等众多优点。因此，单独使用量子点时，无法兼顾到低端的检测灵敏度以及宽线性范围。而通过联合应用其他与量子点具有相似的激发波长和发射波长的荧光元素或者荧光材料，将有望获得更宽的线性范围，并且可以实现在同一套荧光检测系统中进行荧光信号结果的读取，也更有利于在临床的推广及应用。
【实用新型内容】
[0004]抟术问题
[0005]C反应蛋白的检测需要满足高灵敏度、良好线性范围、快速、方便等要求。因此，需要一种能满足上述需求的C反应蛋白检测用试纸条和试纸卡。
[0006]技术方案
[0007]一方面，本实用新型提供了一种C反应蛋白检测用试纸条，其特征在于，所述试纸条包括依次搭接粘贴的以下组件:
[0008]i)用于加入待测物并使所述待测物与检测试剂反应的待测物加样反应区，其中所述待测物加样反应区包被有以下检测试剂:由量子点和稀土荧光材料分别单独标记的第一抗体以及由生物素标记的第二抗体，所述第一抗体和第二抗体分别特异性识别C反应蛋白的不同表位，
[0009]ii)用于检测所述待测物是否存在的待测物检测区，其中所述待测物检测区具有相互间隔的检测带和质控带，所述检测带固定有亲和素，所述质控带固定有抗鼠IgG的抗体，和
[0010]iii)吸水区。
[0011]在一个实施方式中，所述试纸条进一步包括布置有待测物加样反应区、待测物检测区和吸水区的底板。
[0012]在一个实施方式中，所述量子点为微球形式且具有2nm-30nm的粒径范围，且所述量子点选自以下组中:CdTe、CdSe, PbSe, InP和GaN。
[0013]在一个实施方式中，所述待测物加样反应区上进一步包被有微球，其中所述微球负载有所述稀土荧光材料和所述第一抗体。
[0014]在一个实施方式中，所述微球的粒径大小为50nm_400nm。
[0015]在一个实施方式中，所述微球的粒径大小为100nm-300nm。
[0016]在一个实施方式中，所述微球的粒径大小为10nm或300nm。
[0017]另一方面，本实用新型提供了一种C反应蛋白检测用试纸卡，其特征在于，所述试纸卡包括以下部分:
[0018]i)前述任一项实施方式所述的试纸条，和
[0019]ii)包覆前述任一项实施方式所述的试纸条的外壳，其中所述外壳包括:
[0020]i1-Ι)设置有加样孔和检测孔的卡盖，其中所述加样孔开口于所述待测物加样反应区的上侧，以暴露出所述待测物加样反应区的部分区域，所述检测孔开口于所述待测物检测区的上侧，以暴露出所述检测带和所述质控带的全部区域，和
[0021]i1-2)与所述卡盖彼此连接的底座。
[0022]有益效果
[0023]在本实用新型的试纸条中，联合应用量子点与稀土荧光材料，极好的克服了单独应用量子点或者稀土荧光材料存在的低值灵敏度和检测线性范围无法兼顾的问题；通过引入生物素亲和素级联放大系统，进一步提高了检测灵敏度；加样反应区的设计相比于单独的加样区和反应区的设计更为简单，大幅简化了生产工艺及流程；试纸条形状和结构的设计充分考虑了通过荧光检测仪读取结果的需要，使得试纸条具有更广泛的应用空间；和试剂卡易于携带、保存及在荧光检测仪中读数。
【附图说明】
[0024]图1本实用新型的C反应蛋白检测用试纸条的侧视示意图；
[0025]图2本实用新型的C反应蛋白检测用试纸条的俯视示意图；和
[0026]图3本实用新型的C反应蛋白检测用试纸卡的示意图。
[0027]附图标记:
[0028]I底板6质控带 11对应检测带的区域
[0029]2待测物加样反应区7底座 12对应质控带的区域
[0030]3待测物检测区 8卡盖
[0031]4吸水区9加样孔
[0032]5检测带10检测孔
【具体实施方式】
[0033]下文中将参照附图来更详细地描述示例性实施方式。所述附图用于图示说明本实用新型，而非对其进行限制。
[0034]图1是本实用新型的C反应蛋白检测用试纸条的侧视示意图。
[0035]如图1所示，本实用新型的试纸条包括底板I和在底板I上依次搭接粘贴的待测物加样反应区2、待测物检测区3和吸水区4。
[0036]待测物加样反应区2用于接收待测物以及随后待测物与其上包被抗体的结合反应。本实用新型的试纸条所适合检测的待测物包括但不限于血清、血浆、尿液。加样反应区的设计相比于单独的加样区和反应区的设计更为简单，大幅简化了生产工艺及流程。
[0037]待测物加样反应区2上进一步包被有以下检测试剂:由量子点和稀土荧光材料分别单独标记的第一抗体以及由生物素标记的第二抗体，所述第一抗体和第二抗体分别特异性识别C反应蛋白的不同表位。
[0038]在本实用新型中，术语“标记”包括采用化学或物理方法使抗C反应蛋白的第一抗体与量子点和稀土荧光材料直接连接。然而，标记也可以通过其它方式完成，例如稀土荧光材料和抗C反应蛋白的第一抗体可通过例如同时包埋或负载在微球上的方式达到“标记”的目的。因此，在一个实施方式中，待测物加样反应区2上可进一步具有微球(未示出)，所述微球上同时包埋或负载有稀土荧光材料和抗C反应蛋白的第一抗体。在一个实施方式中，包埋或负载在所述微球上的稀土荧光材料和抗C反应蛋白的第一抗体之间可以具有化学连接，例如以稀土荧光材料标记的抗C反应蛋白的第一抗体的形式存在于所述微球上。在另一个实施方式中，包埋或负载在所述微球上的稀土荧光材料和抗C反应蛋白的第一抗体之间可以不具有化学连接，即所述微球上包埋或负载有彼此间无化学连接的稀土荧光材料和抗C反应蛋白的第一抗体。在后一种实施方式中，待测物加样反应区2上具有由量子点标记的抗C反应蛋白的第一抗体，以及负载在微球上的稀土荧光材料和抗C反应蛋白的第一抗体。
[0039]在一个实施方式中，所述微球可以为聚合物微球，例如聚苯乙稀微球。在一个实施方式中，微球的粒径大小范围在50nm-400nm之间，优选在100nm-300nm之间，更优选为10nm 或 300nm。
[0040]制备稀土荧光微球的方法是现有技术已知的，包括但不限于:包埋法，即在聚合物微球的聚合反应过程中加入稀土材料配合物；键合法，即使稀土元素离子与聚合物侧链上的官能团发生配位反应得到稀土荧光微球；以及溶胀法和包覆法。后两种方法均是在单分散的微球(如