一种带有桔黄花色标记性状的甘蓝型油菜恢复系选育方法与流程

本发明涉及一种甘蓝型油菜恢复系选育方法，属于农作物育种技术领域。

背景技术：

术语解释：

回交：两个亲本杂交后，子一代与其亲本之一再进行杂交，称为回交。

回交育种：采用多次回交，再经过自交，从而育成新品种的方法。

轮回亲本：回交育种中重复多次使用的亲本。

非轮回亲本：回交育种中只在第一次杂交时使用1次的亲本。

bc1：回交一次。

bc1f1：回交一次的一代。

bcnf1：回交n次的一代。

bc1f2：回交一次后自交一次的二代。

bcnf2：回交n次后自交一次的二代。

目前，我国80％以上的油菜生产使用杂交品种。其中三系杂交油菜制种包括恢复系隔离繁殖种子以及恢复系和不育系杂交制种。要实现三系杂交种高产稳产，杂交种制种纯度必须达到85％以上。利用三系配套生产的杂交种，纯度的降低必然导致产量的下降。杂交种纯度每下降1％，产量将下降0.2％至0.4％。亲本不纯是一个影响杂交种纯度的最直接因素，例如恢复系含杂株1％，可导致杂交种纯度下降1％。在大田生产中，油菜杂交制种的亲本纯度应达到99％以上。

在甘蓝型油菜育种过程中，可以使用标记性状区分育种材料，使得与普通油菜差异明显，除杂后，可以达到理想的亲本纯度。目前，科研人员采用了一些标记性状培育育种材料，但这些性状受环境影响较大，在实际应用中受到一些限制。例如，以心叶紫色作为标记性状，在制种生产过程中，在苗期受秋、冬季节温度下降的影响，一般油菜都会变色，不易分辨。以叶片无蜡粉作为标记性状，在大田生产中难以识别，操作难度高，工作量大，在识别过程中容易存留假种。

技术实现要素：

传统的恢复系后代所有植株的花瓣颜色与亲本相同，为黄色。当后代出现杂株时，杂株很难被识别、拔除。为了克服现有技术中甘蓝型油菜的标记性状不明显，不容易鉴别群体的纯度的缺陷。本发明提供了一种性状明显的带有桔黄花色标记性状的甘蓝型油菜恢复系选育方法。当恢复系后代出现杂株时，杂株与恢复系纯合后代之间会出现明显的形态差异，在开花期容易被识别。

本发明通过下述技术方案来实现。一种带有桔黄花色标记性状的甘蓝型油菜恢复系选育方法，步骤如下：

(1)选择甘蓝型油菜恢复系的黄花单株(jjrfrf)为母本，以带有桔黄花色标记性状的甘蓝型油菜自交系(jjnn)为父本，杂交获得f1代黄花群体(jjrfn)；

(2)以步骤(1)中获得的f1代黄花单株(jjrfn)自交，获得f2代群体；

(3)以步骤(2)中获得的f2代群体中筛选桔黄花单株(jjrfrf)，选择并标记与不育系母本测交后子代出现育性全部恢复可育的桔黄花单株(jjrfrf)；

(4)以步骤(3)中选择后获得的桔黄花单株(jjrfrf)作为母本(非轮回亲本)；

(5)以步骤(4)中获得的桔黄花单株(jjrfrf)与甘蓝型油菜恢复系的黄花单株(jjrfrf)父本(轮回亲本)进行第一次回交，获得bc1f1代黄花回交群体(jjrfrf)；

(6)以步骤(5)中获得的bc1f1代黄花回交群体(jjrfrf)自交，获得bc1f2代群体。

(7)重复步骤(5)和(6)的回交和自交过程，进行至第五次回交和第六次自交，在bc5f2代群体中选择桔黄花单株(jjrfrf)，连续自交三代，并与甘蓝型油菜恢复系配组的不育系进行测交，筛选出f1代可育率达100％，且杂种优势强和综合性状良好的父本株系为带有桔黄花标记性状的甘蓝型油菜恢复系。

进一步的，鉴定带有桔黄花色标记性状的甘蓝型油菜恢复系纯度的方法为：(1)恢复系桔黄花亲本单株(jj)自交后代为桔黄花(jj)，黄花杂株(jj)为黄花，以及黄花杂株与恢复系桔黄花亲本的杂交后代为黄花(jj)，(2)在初花期，杂株容易被识别；在盛花期，拔除黄花杂株；(3)成熟后从母本植株上收获的种子为恢复系种子。

本发明利用桔黄花标记性状的恢复系，开花时，黄花杂株在桔黄花的恢复系内容易识别，可以全部拔除，能使恢复系的纯度提高到100％。

标记性状具有特异性，为一对隐性基因控制的性状，性状稳定，不受环境条件影响，性状明显，容易识别。在恢复系繁育过程中，利于识别和拔除杂株，防止混杂其他种子，保障恢复系种子纯度。

在大田生产用种的杂交种制种过程中，在开花期易于识别恢复系和不育系，在终花期，比较容易彻底割除恢复系，又不易错割除授粉后的不育系，保障杂交种的种子纯度和产量。

附图说明

图1是带有桔黄花色标记性状的甘蓝型油菜恢复系选育流程图。

桔黄花色基因型jj黄花色基因型jj和jj

恢复系恢复基因的基因型rfrf不带有恢复基因的基因型nn。

图2是鉴定恢复系纯度原理图。

恢复系桔黄花色基因型jj

恢复系后代杂株黄花色基因型j。

图3是甘蓝型油菜恢复系283or(左)与桔黄花色甘蓝型油菜恢复系jh-or(右)在花期主花序对比。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。

实施例1-选育带有桔黄花色标记性状的甘蓝型油菜恢复系

甘蓝型油菜恢复系

甘蓝型油菜恢复系为江西省农业科学院作物研究所选育的萝卜细胞质雄性不育系统的恢复系or283。

甘蓝型油菜不育系

甘蓝型油菜不育系为与甘蓝型油菜恢复系or283配组的江西省农业科学院作物研究所选育的萝卜细胞质雄性不育系统的不育系oa11。

甘蓝型油菜自交系

带有桔黄花色标记性状的甘蓝型油菜自交系为江西省农业科学院作物研究所选育的甘蓝型油菜常规品系jh1。

桔黄花色基因型jj黄花色基因型jj和jj

恢复系恢复基因的基因型rfrf不带有恢复基因的基因型nn。

结合图1，过程如下

(1)杂交

2007年3月，以2株甘蓝型油菜恢复系黄花单株为母本，以5株桔黄花jh1为桔黄花父本(jjnn)，杂交，得到60粒杂交后代f1代黄花群体(jjrfn)。

(2)第一次自交

2007年5月，将收获的f1代杂交种子带到青海加代。2007年7月，自交。2007年9月，从20株f1自交获得f2代。

(3)测交以及第一次回交

2008年3月，从230株f2代群体中选择标记编号50株桔黄花单株，记作jh-or-f2(1至50)。以其为父本，以甘蓝型油菜不育系为母本，测交，得到50份测交f1代。选择并标记与不育系母本测交后子代出现育性全部恢复可育的桔黄花单株(jjrfrf)

同时，以标记编号的50株桔黄花f2单株为母本，以5株甘蓝型油菜恢复系为黄花父本(jjrfrf)(轮回亲本)，回交，得到50份回交1代群体bc1f1。

(4)第二次自交

2008年7月，从10份测交鉴定为100％育性恢复的回交1代群体bc1f1中选择10株，自交，获得bc1f2代。

(5)第二次回交

2009年3月，从bc1f2代选择10株桔黄花单株作为母本(非轮回亲本)，以2株甘蓝型油菜恢复系为黄花父本(jjrfrf)(轮回亲本)，进行第二次回交，获得10份回交2代群体bc2f1。

(6)第三次自交

2009年7月，从回交2代群体bc2f1中选择10株，自交，获得bc2f2代。

(7)第三次回交

2010年3月，从bc2f2代选择10株桔黄花单株作为母本(非轮回亲本)，以2株甘蓝型油菜恢复系为黄花父本(jjrfrf)(轮回亲本)，进行第三次回交，获得10份回交3代群体bc3f1。

(8)第四次自交

2010年7月，从回交3代群体bc3f1中选择10株，自交，获得bc3f2代。

(9)第四次回交

2011年3月，从bc3f2代选择10株桔黄花单株作为母本(非轮回亲本)，以2株甘蓝型油菜恢复系为黄花父本(jjrfrf)(轮回亲本)，进行第四次回交，获得10份回交4代群体bc4f1。

(10)第五次自交

2011年7月，从回交4代群体bc4f1中选择10株，自交，获得bc4f2代。

(11)第五次回交

2012年3月，从bc4f2代选择10株桔黄花单株作为母本(非轮回亲本)，以2株甘蓝型油菜恢复系为黄花父本(jjrfrf)(轮回亲本)，进行第五次回交，获得10份回交5代群体bc5f1。

(12)第六次自交

2012年7月，从回交5代群体bc5f1中选择10株，自交，获得bc5f2代。

(13)第七次自交

2013年3月，从回交5代群体bc5f2中选择10株桔黄花单株，自交，获得桔黄花bc5f3代。

(14)测交以及第八次自交

2013年7月，从bc5f3代群体中选择标记编号10株桔黄花单株，记作jh-or-bc5f3(1至10)。以其为父本，以甘蓝型油菜不育系为母本，测交，得到10份测交f1代。

同时，以标记编号的10株桔黄花bc5f3单株，自交，获得10份桔黄花bc5f4代。

(15)隔离繁殖及第九次自交

2013年10月，种植10份测交f1代，每份种植100株。在初花前分别用80目的尼龙网帐隔离繁殖。花期调查测交f1代育性以及收获期考种。

种植10份自交的5代群体bc5f4，每份种植100株，共10个株系，各株系在初花前分别用80目的尼龙网帐隔离繁殖。

筛选出测交f1代可育率达100％，且杂种优势强和综合性状良好的桔黄花bc5f4父本株系为带有桔黄花标记性状的甘蓝型油菜恢复系jh-or。图3是甘蓝型油菜恢复系283or(左)与桔黄花色甘蓝型油菜恢复系jh-or(右)在花期主花序对比。

结合图2，鉴定筛选带有桔黄花色标记性状的甘蓝型油菜恢复系纯度的方法为：(1)恢复系桔黄花亲本单株(jj)自交后代为桔黄花(jj)，黄花杂株(jj)为黄花，以及黄花杂株与恢复系桔黄花亲本的杂交后代为黄花(jj)，(2)在初花期，杂株容易被识别；在盛花期，拔除黄花杂株；(3)成熟后从母本植株上收获的种子为恢复系种子。

以上所揭露的仅为本发明一种较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，本领域普通技术人员可以理解实现上述实施例的全部或部分流程，并依本发明权利要求所作的等同变化，仍属于发明所涵盖的范围。