一种鸭跖草幼茎再生植株诱导培养基的制作方法

本发明涉及一种鸭跖草幼茎再生植株诱导培养基，属于鸭跖草培养基技术领域。

背景技术：

鸭跖草(commelinacommunis)为鸭跖草科鸭跖草属一年生草本植物，别名碧竹子、翠蝴蝶、淡竹叶等。鸭跖草是药食同源植物，其全身可入药，有清热利水、凉血解毒之功效，可治水肿、小便不利、感冒、丹毒、腮腺炎、黄疸等病症。同时，鸭跖草也具有较高的观赏价值，是书橱、几架等良好的盆栽装饰植物。由于其具有重要的药用和观赏价值，近年来被广泛利用。但在生产过程中，常规的扦插或分株栽培方式繁殖系数低，难以满足生产需求。

技术实现要素：

本发明的目的是为了解决上述现有技术存在的问题，进而提供一种鸭跖草幼茎再生植株诱导培养基。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

方案一：一种鸭跖草幼茎再生植株诱导培养基，由大量元素、微量元素、激素、铁盐、有机质和碳源组成；

所述大量元素由浓度为300～400mg/l的nh4no3、900～1000mg/l的kno3、100～200mg/l的kh2po4、300～400mg/l的mgso4·7h2o和100～200mg/l的cacl2·2h2o组成；

所述微量元素由浓度为6.0～6.5mg/l的h3bo3、22.0～22.5mg/l的mnso4·4h2o、8.5～9.0mg/l的znso4·7h2o、0.25mg/l的na2moo4·2h2o、0.025mg/l的cuso4·5h2o和0.025mg/l的cocl2·6h2o组成；

所述激素由浓度为0.5～2.0mg/l的6-苄基氨基嘌呤、0.5～1.0mg/l的吲哚乙酸和0.1～0.5mg/l的萘乙酸组成；

所述铁盐由浓度为37.3mg/l的na2-edta和27.8mg/l的feso4·7h2o组成；

所述有机质由浓度为100mg/l的c6h12o6、0.5mg/l的c6h5no2、0.1mg/l的c12h17cln4os·hcl、0.5mg/l的c8h11o3n·hcl和2mg/l的c2h5no2组成；

所述碳源为28g/l的蔗糖并附加6g/l的琼脂。

方案二：一种鸭跖草幼茎再生植株诱导培养基，由大量元素、微量元素、激素、铁盐、钙盐、有机质和碳源组成；

所述大量元素由浓度为300～400mg/l的nh4no3、900～1000mg/l的k2so4、100～200mg/l的kh2po4、300～400mg/l的mgso4·7h2o和100～200mg/l的cacl2·2h2o组成；

所述微量元素由浓度为6.0～6.5mg/l的h3bo3、22.0～22.5mg/l的mnso4·4h2o、8.5～9.0mg/l的znso4·7h2o、0.25mg/l的na2moo4·2h2o和0.25mg/l的cuso4·5h2o组成；

所述激素由浓度为0.5～1.0mg/l的吲哚乙酸和0.1～0.5mg/l的萘乙酸组成；

所述铁盐由浓度为37.3mg/l的na2-edta和27.8mg/l的feso4·7h2o组成；

所述钙盐由浓度为556mg/l的ca(no3)2·4h2o组成；

所述有机质由浓度为100mg/l的c6h12o6、0.5mg/l的c6h5no2、0.1mg/l的c12h17cln4os·hcl、0.5mg/l的c8h11o3n·hcl和2mg/l的c2h5no2组成；

所述碳源为28g/l的蔗糖并附加6g/l的琼脂。

使用本发明的培养基对鸭跖草幼茎进行再生植株培育，可显著提升幼茎丛生苗诱导率，芽增殖明显，缩短生根时间，提高生根率，易诱导再生植株。2018年通过应用该培养基，幼茎丛生苗诱导率可达90.5％，较现有ms培养基提高约10％。增殖率达80.2％，较现有ms培养基提高约9％；增殖系数可达13.5％。生根系数可达15.8，生根率达100％。本发明操作简单、适用性广，可节约成本约35％，可有效解决人工栽培鸭跖草有性繁殖困难、无性繁殖系数低等问题，促进鸭跖草的推广与利用。

附图说明

图1为本发明实施例3中鸭跖草的增殖情况照片。

图2为本发明实施例6中得到鸭跖草的生根苗照片。

图3为本发明实施例6中鸭跖草的生根情况照片。

图4为本发明实施例6中鸭跖草瓶内开花现象照片。

具体实施方式

下面将结合附图对本发明做进一步的详细说明：本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式，但本发明的保护范围不限于下述实施例。

实施例1

本实施例一种鸭跖草幼茎再生植株诱导培养基，由大量元素、微量元素、激素、铁盐、有机质和碳源组成；

所述大量元素由浓度为300～400mg/l的nh4no3、900～1000mg/l的kno3、100～200mg/l的kh2po4、300～400mg/l的mgso4·7h2o、100～200mg/l的cacl2·2h2o组成；

所述微量元素由浓度为6.0～6.5mg/l的h3bo3、22.0～22.5mg/l的mnso4·4h2o、8.5～9.0mg/l的znso4·7h2o、0.25mg/l的na2moo4·2h2o、0.025mg/l的cuso4·5h2o和0.025mg/l的cocl2·6h2o组成；

所述激素由浓度为0.5～2.0mg/l的6-苄基氨基嘌呤(6-ba)、0.5～1.0mg/l的吲哚乙酸(iba)和0.1～0.5mg/l的萘乙酸(naa)组成；

所述铁盐由浓度为37.3mg/l的na2-edta和27.8mg/l的feso4·7h2o组成；

所述有机质由浓度为100mg/l的c6h12o6、0.5mg/l的c6h5no2、0.1mg/l的c12h17cln4os·hcl、0.5mg/l的c8h11o3n·hcl和2mg/l的c2h5no2组成；

所述碳源为28g/l的蔗糖并附加6g/l的琼脂。

所述大量元素中的nh4no3浓度为330mg/l。

所述微量元素中的h3bo3浓度为6.2mg/l。

所述微量元素中的的znso4·7h2o浓度为8.7mg/l。

所述激素中的6-苄基氨基嘌呤浓度为0.9mg/l。

本实施例的培养基可做为鸭跖草幼茎诱导增殖分化培养基。

实施例2

本实施例一种鸭跖草幼茎再生植株诱导培养基，由大量元素、微量元素、激素、铁盐、钙盐、有机质和碳源组成；

所述大量元素由浓度为300～400mg/l的nh4no3、900～1000mg/l的k2so4、100～200mg/l的kh2po4、300～400mg/l的mgso4·7h2o和100～200mg/l的cacl2·2h2o组成；

所述微量元素由浓度为6.0～6.5mg/l的h3bo3、22.0～22.5mg/l的mnso4·4h2o、8.5～9.0mg/l的znso4·7h2o、0.25mg/l的na2moo4·2h2o和0.25mg/l的cuso4·5h2o组成；

所述激素由浓度为0.5～1.0mg/l的吲哚乙酸(iba)和0.1～0.5mg/l的萘乙酸(naa)组成；

所述铁盐由浓度为37.3mg/l的na2-edta和27.8mg/l的feso4·7h2o组成；

所述钙盐由浓度为556mg/l的ca(no3)2·4h2o组成；

所述有机质由浓度为100mg/l的c6h12o6、0.5mg/l的c6h5no2、0.1mg/l的c12h17cln4os·hcl、0.5mg/l的c8h11o3n·hcl和2mg/l的c2h5no2组成；

所述碳源为28g/l的蔗糖并附加6g/l的琼脂。

所述大量元素中的k2so4浓度为940mg/l。

所述微量元素中的h3bo3浓度为6.4mg/l。

所述微量元素中的mnso4·4h2o浓度为22.3mg/l。

所述激素中的萘乙酸浓度为0.35mg/l。

本实施例的培养基可做为鸭跖草幼茎诱导生根培养基。

实施例3

一种鸭跖草幼茎再生植株诱导培养基的配置方法，步骤如下：

为了提高配制培养基的工作效率，一般将常用的基本培养基配制成10～200倍的浓缩贮备液，即母液。母液贮存于冰箱中，使用时，将它们按一定的比例进行稀释混合，可多次使用。

步骤一：大量元素。

配制大量元素母液时要分别称量，分别溶解，在定容时按(表1)中的序号依次加入容量瓶中，以防出现沉淀。倒入磨口试剂瓶中，贴好标签和做好记录后，放入冰箱内保存。

所述大量元素由浓度为300～400mg/lnh4no3、900～1000mg/lkno3(诱导增殖分化培养基使用kno3)或k2so4(诱导生根培养基将kno3替换成k2so4)、100～200mg/lkh2po4、300～400mg/lmgso4·7h2o、100～200mg/lcacl2·2h2o组成。

表1大量元素母液(配1l20倍的母液)

步骤二：微量元素。

在配制微量元素母液时，要分别称量，分别溶解，定溶时不分先后次序，可随意加入溶量瓶中定容(表2)。倒入磨口试剂瓶中，贴好标签和做好记录后，放入冰箱内保存。

所述微量元素由浓度为6.0～6.5mg/lh3bo3、22.0～22.5mg/lmnso4·4h2o、8.5～9.0mg/lznso4·7h2o、0.25mg/lna2moo4·2h2o、0.025mg/lcuso4·5h2o(诱导增殖分化培养基)或0.25mg/lcuso4·5h2o(诱导生根培养基)、0.025mg/lcocl2·6h2o组成；

表2微量元素母液(配制1l100倍母液)

步骤三：铁盐与钙盐(诱导增殖分化培养基只加铁盐，诱导生根培养基还需再加入钙盐)。

铁盐无机化合物需要单独配成螯合物母液(表3)。配制方法：称取5.56g硫酸亚铁和7.46g乙二胺乙酸二钠，分别用450ml的去离子水溶解，分别适当加热不停搅拌，分别溶解后将硫酸亚铁溶液缓缓加入到乙二胺四乙酸二钠溶液中，将两种溶液混合在一起，最后用去离子水定容于1000ml，倒入棕色贮液瓶中，贴好标签做好记录后放入冰箱内保存。

所述铁盐由浓度为37.3mg/lna2-edta、27.8mg/lfeso4·7h2o组成；所述钙盐由浓度为556mg/lca(no3)2·4h2o组成。

表3铁盐与钙盐母液(配1l200倍母液)

步骤四：有机质。

分别称取各种有机物(表4)，分别溶解后，用蒸馏水或去离子水定容于1000ml，放入细口瓶中备用，贴好标签和做好记录后，放入冰箱内保存。

所述有机质由浓度为100mg/lc6h12o6、0.5mg/lc6h5no2、0.1mg/lc12h17cln4os·hcl、0.5mg/lc8h11o3n·hcl、2mg/lc2h5no2组成；

表4有机物母液(配1l100倍母液)

步骤五：激素。

配成0.1mg/ml的溶液各100ml。配制6-苄基腺嘌呤(6-ba)溶液时先用hcl助溶，配制naa溶液时先用无水乙醇助溶，再用蒸馏水分别定容至100ml，倒入棕色贮液瓶中，贴好标签做好记录后放入冰箱内保存。

所述激素由浓度为0.5～2.0mg/l的6-苄基氨基嘌呤(6-ba)、0.5～1.0mg/l吲哚乙酸(iba)和0.1～0.5mg/l萘乙酸(naa)组成。

步骤六：碳源。所述碳源为28g/l的蔗糖，并附加6g/l的琼脂。

步骤七：培养基配制顺序：将已配制好的母液按照顺序排好，根据母液倍数计算相应需要量；称取蔗糖和琼脂，倒入锅中加入少量水加热溶解；按照大量元素、微量元素、铁盐或钙盐、有机质母液的顺序倒入锅中加热煮沸，将溶解后的蔗糖和琼脂加入搅拌均匀；倒入烧杯中加入激素，调节ph值至5.6～5.8，定容。分装在培养瓶中，放入高压锅中121℃条件下灭菌20min取出自然冷却。

步骤八：后期维护管理，待培养基配置完成，将其放在阴凉干燥处保存，并且为保证效果，应在配置完成后一个月内使用完毕。

应用上述实施例制备的产品，幼茎丛生苗诱导率在40％至90.5％之间；增殖率在68％至80.2％之间；增殖系数在4.75至13.5之间，生根率在75％至100％之间。生根系数在2.13至15.8之间。

实施例4

一种鸭跖草幼茎再生植株诱导培养基的配置方法，按照如下步骤操作：

步骤一：大量元素。所述大量元素由浓度为300～400mg/lnh4no3、900～1000mg/lkno3、100～200mg/lkh2po4、300～400mg/lmgso4·7h2o、100～200mg/lcacl2·2h2o组成。

步骤二：微量元素。所述微量元素由浓度为6.0～6.5mg/lh3bo3、22.0～22.5mg/lmnso4·4h2o、8.5～9.0mg/lznso4·7h2o、0.25mg/lna2moo4·2h2o、0.025mg/lcuso4·5h2o、0.025mg/lcocl2·6h2o组成；

步骤三：铁盐。所述铁盐由浓度为37.3mg/lna2-edta、27.8mg/lfeso4·7h2o组成；

步骤四：有机质。所述有机质由浓度为100mg/lc6h12o6、0.5mg/lc6h5no2、0.1mg/lc12h17cln4os·hcl、0.5mg/lc8h11o3n·hcl、2mg/lc2h5no2组成；

步骤五：激素。所述激素由浓度为为1.0mg/l的6-苄基氨基嘌呤(6-ba)和0.1mg/l萘乙酸(naa)组成。

步骤六：碳源。所述碳源为28g/l的蔗糖，并附加6g/l的琼脂。

步骤七：培养基配制顺序：将已配制好的母液按照顺序排好，根据母液倍数计算相应需要量；称取蔗糖和琼脂，倒入锅中加入少量水加热溶解；按照大量元素、微量元素、铁盐或钙盐、有机质母液的顺序倒入锅中加热煮沸，将溶解后的蔗糖和琼脂加入搅拌均匀；倒入烧杯中加入激素，调节ph值至5.6～5.8，定容。分装在培养瓶中，放入高压锅中121℃条件下灭菌20min取出自然冷却。

步骤八：后期维护管理，待培养基配置完成，将其放在阴凉干燥处保存，并且为保证效果，应在配置完成后一个月内使用完毕。

应用本实施例的产品，幼茎丛生苗诱导率为90.5％，增殖率为80.2％，增殖系数为13.5，生根率为75％。生根系数为2.13。

实施例5

一种基于鸭跖草幼茎再生植株诱导培养基的配置方法，按照如下步骤进行：

步骤一：大量元素。所述大量元素由浓度为300～400mg/lnh4no3、900～1000mg/lkno3、100～200mg/lkh2po4、300～400mg/lmgso4·7h2o、100～200mg/lcacl2·2h2o组成。

步骤二：微量元素。所述微量元素由浓度为6.0～6.5mg/lh3bo3、22.0～22.5mg/lmnso4·4h2o、8.5～9.0mg/lznso4·7h2o、0.25mg/lna2moo4·2h2o、0.025mg/lcuso4·5h2o、0.025mg/lcocl2·6h2o组成；

步骤三：铁盐。所述铁盐由浓度为37.3mg/lna2-edta、27.8mg/lfeso4·7h2o组成；

步骤四：有机质。所述有机质由浓度为100mg/lc6h12o6、0.5mg/lc6h5no2、0.1mg/lc12h17cln4os·hcl、0.5mg/lc8h11o3n·hcl、2mg/lc2h5no2组成；

步骤五：激素。所述激素由浓度为和0.1mg/l萘乙酸(naa)组成。

步骤六：碳源。所述碳源为28g/l的蔗糖，并附加6g/l的琼脂。

步骤七：培养基配制顺序：将已配制好的母液按照顺序排好，根据母液倍数计算相应需要量；称取蔗糖和琼脂，倒入锅中加入少量水加热溶解；按照大量元素、微量元素、铁盐或钙盐、有机质母液的顺序倒入锅中加热煮沸，将溶解后的蔗糖和琼脂加入搅拌均匀；倒入烧杯中加入激素，调节ph值至5.6～5.8，定容。分装在培养瓶中，放入高压锅中121℃条件下灭菌20min取出自然冷却。

步骤八：后期维护管理，待培养基配置完成，将其放在阴凉干燥处保存，并且为保证效果，应在配置完成后一个月内使用完毕。

应用本实施例的产品，幼茎丛生苗诱导率为40％，生根率为90％。生根系数为11.4。植株诱导率较低，但较其他浓度配比，该浓度下植株茎秆粗壮，叶片大而颜色深绿，适宜做壮苗培养基。

实施例6

一种基于鸭跖草幼茎再生植株诱导培养基的配置方法，步骤如下：

步骤一：大量元素。所述大量元素由浓度为300～400mg/lnh4no3、900～1000mg/lk2so4、100～200mg/lkh2po4、300～400mg/lmgso4·7h2o、100～200mg/lcacl2·2h2o组成。

步骤二：微量元素。所述微量元素由浓度为6.0～6.5mg/lh3bo3、22.0～22.5mg/lmnso4·4h2o、8.5～9.0mg/lznso4·7h2o、0.25mg/lna2moo4·2h2o、0.25mg/lcuso4·5h2o组成；

步骤三：铁盐与钙盐。所述铁盐由浓度为37.3mg/lna2-edta、27.8mg/lfeso4·7h2o组成；所述钙盐由浓度为556mg/lca(no3)2·4h2o组成。

步骤四：有机质。所述有机质由浓度为100mg/lc6h12o6、0.5mg/lc6h5no2、0.1mg/lc12h17cln4os·hcl、0.5mg/lc8h11o3n·hcl、2mg/lc2h5no2组成；

步骤五：激素。所述激素由浓度为0.5mg/l吲哚乙酸(iba)和0.5mg/l萘乙酸(naa)组成。

步骤六：碳源。所述碳源为28g/l的蔗糖，并附加6g/l的琼脂。

步骤七：培养基配制顺序：将已配制好的母液按照顺序排好，根据母液倍数计算相应需要量；称取蔗糖和琼脂，倒入锅中加入少量水加热溶解；按照大量元素、微量元素、铁盐或钙盐、有机质母液的顺序倒入锅中加热煮沸，将溶解后的蔗糖和琼脂加入搅拌均匀；倒入烧杯中加入激素，调节ph值至5.6～5.8，定容。分装在培养瓶中，放入高压锅中121℃条件下灭菌20min取出自然冷却。

步骤八：后期维护管理，待培养基配置完成，将其放在阴凉干燥处保存，并且为保证效果，应在配置完成后一个月内使用完毕。

应用本实施例的产品，幼茎丛生苗诱导率为58％，生根率为100％。生根系数为15.8。并且在使用此培养基的培养过程中出现了瓶内开花的现象，增加了鸭跖草的观赏时间。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，这些具体实施方式都是基于本发明整体构思下的不同实现方式，而且本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求书的保护范围为准。