一种植物源杀菌剂及其制备方法和应用与流程

本发明属于新型杀菌剂技术领域，具体涉及一种植物源杀菌剂及其制备方法和应用。

背景技术：

苹果轮纹病又名疣皮病或粗皮病，由贝氏葡萄座腔菌引起的真菌病害，主要危害苹果树的枝干、嫰梢及果实。该病在中国、日本及朝鲜的苹果主产区均有发生。其中中国中部高温多雨地区发病更为严重，常年烂果率可达20～30％，多雨年份多达40～50％甚至60～70％。因此苹果轮纹病成为中国当前苹果生产上最为严重的病害之一，同时也使中国苹果产业遭受巨大的经济损失。

目前对苹果轮纹病的防治主要依靠化学农药，如戊唑醇、多菌灵和代森锰锌。化学农药的长期使用会使病害产生抗药性，而且会造成农药残留危害人体健康。

技术实现要素：

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种植物源杀菌剂及其制备方法和应用，取料天然无污染，无农药残留，植物抑菌成分对苹果轮纹病菌具有较强的抑制作用，可以从根本上防治苹果轮纹病。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种植物源杀菌剂，所述杀菌剂包括以下质量百分含量的原料：八角茴香提取物18～25％，石菖蒲提取物3～8％，博落回提取物3～8％，增溶剂8～12％，乳化剂8～12％，增稠剂0.8～1.2％，防冻剂0.8～1.2％和余量的水。

优选的是，所述八角茴香提取物、石菖蒲提取物和博落回提取物的提取溶剂均为甲醇、乙醇和丙酮中的一种或几种。

优选的是，所述八角茴香提取物、石菖蒲提取物和博落回提取物在提取时，所述八角茴香、石菖蒲及博落回和提取溶剂的体积比均为1:5。

优选的是，所述角茴香提取物、石菖蒲提取物和博落回提取物的制备方法，均为：分别将八角茴香、石菖蒲和博落回洗净、烘干粉碎；分别将粉末与提取溶剂按1:5的体积比混合后，浸提12小时或连续回流4～8小时，过滤，减压浓缩，得提取物原液。

优选的是，所述乳化剂包括乳化剂1601、分散剂123k、乳化剂el-40和吐温80中的一种或多种。

优选的是，所述增稠剂包括黄原胶、阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮中的一种或多种。

优选的是，所述防冻剂包括乙二醇、丙三醇、异丙醇中的一种或多种。

本发明还提供了所述杀菌剂的制备方法，包括以下步骤：将八角茴香提取物、石菖蒲提取物、博落回提取物、增溶剂、乳化剂、增稠剂、防冻剂和水按所述比例混合，得所述杀菌剂。

本发明还提供了所述杀菌剂在抑制和/或治疗苹果轮纹病中的应用。

优选的是，所述杀菌剂的ec50值为0.2650mg/ml。

本发明提供了一种植物源杀菌剂，以八角茴香、石菖蒲以及博落回的提取物作为有效成分，取材天然，有利于节约成本，同时属于纯中药制剂，在自然条件下易于分解，不会污染土壤及地下水，不会对动植物造成危害；植物中活性成分的提取简单易行，有利于进行工业化生产；均由植物提取物加工而成，而植物提取物是一种多成分的混合物，对病菌可能有多个作用位点，因此不易产生抗药性。本发明实施例中通过抑菌圈实验，验证了所述杀菌剂的抑菌效果，最终测得毒力回归方程为y＝7.0710+3.5906，ec50值为0.2650mg/ml，相关系数为0.7600，可见所述抑菌剂对苹果轮纹病菌具有较强的抑制作用，可以从根本上防治苹果轮纹病。

附图说明

图1为本发明所述杀菌剂对苹果轮纹病菌菌丝生长抑制图，其中a为对照组，b为实验处理组。

具体实施方式

本发明提供了一种植物源杀菌剂，所述杀菌剂包括以下质量百分含量的原料：八角茴香提取物18～25％，石菖蒲提取物3～8％，博落回提取物3～8％，增溶剂8～12％，乳化剂8～12％，增稠剂0.8～1.2％，防冻剂0.8～1.2％和余量的水。

本发明所述杀菌剂优选包括以下质量百分含量的原料：八角茴香提取物19～22％，石菖蒲提取物4～6％，博落回提取物4～6％，增溶剂9～10％，乳化剂9～10％，增稠剂0.9～1％，防冻剂1％和余量的水，更优选包括八角茴香提取物20％，石菖蒲提取物5％，博落回提取物5％，增溶剂10％，乳化剂10％，增稠剂1％，防冻剂1％和余量的水。

本发明所述八角茴香提取物、石菖蒲提取物和博落回提取物的提取溶剂优选均为甲醇、乙醇和丙酮中的一种或几种，更优选为乙醇。本发明所述八角茴香提取物、石菖蒲提取物和博落回提取物在提取时，所述八角茴香、石菖蒲及博落回和提取溶剂的体积比优选均为1:5。

在本发明中，所述角茴香提取物、石菖蒲提取物和博落回提取物的制备方法，优选均为：分别将八角茴香、石菖蒲和博落回洗净、烘干粉碎；分别将粉末与提取溶剂按1:5的体积比混合后，浸提12小时或连续回流4～8小时，过滤，减压浓缩，得提取物原液。本发明所述粉碎后的粒径优选小于60目。本发明在所述提取时，优选的浸提4次。本发明所述浸提或连续回流时的温度优选为30～45℃。

本发明所述乳化剂包括乳化剂1601、分散剂123k、乳化剂el-40和吐温80中的一种或多种，更优选为乳化剂1601。本发明所述增稠剂优选包括黄原胶、阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮中的一种或多种，更优选为黄原胶。本发明所述防冻剂优选包括乙二醇、丙三醇、异丙醇中的一种或多种，更优选为丙三醇。

本发明还提供了所述杀菌剂的制备方法，包括以下步骤：将八角茴香提取物、石菖蒲提取物、博落回提取物、增溶剂、乳化剂、增稠剂、防冻剂和水按所述比例混合，得所述杀菌剂。

本发明在制备所述杀菌剂时，优选的将该三种植物提取物原液按比例混合后依次加入增溶剂、乳化剂、增稠剂、防冻剂以及溶剂等辅料，制成所述杀菌剂。

本发明还提供了所述杀菌剂在抑制和/或治疗苹果轮纹病中的应用。

本发明所述杀菌剂的ec50值为0.2650mg/ml。

下面结合实施例对本发明提供的植物源杀菌剂及其制备方法和应用进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

将采集到的八角茴香、石菖蒲以及博落回洗净，于通风处阴干，或于45℃下烘干，分别粉碎后过60目筛。将过筛后的植物粉末放入多功能提取罐中，加入溶剂乙醇进行提取，植物粉末与溶剂的比例为1:5，每次浸提时间为12小时，反复浸提4次，收集提取液，并将其减压浓缩至一定浓度。取八角茴香、石菖蒲以及博落回提取物30kg加入增溶剂10kg加入混合釜中，室温下混合1.5h，依次再加入乳化剂10kg、增稠剂1kg、防冻剂1kg、溶剂48kg混合均匀，获得防治苹果轮纹病的植物源杀菌剂。

实施例2

将采集到的八角茴香、石菖蒲以及博落回洗净，于通风处阴干，或于45℃下烘干，分别粉碎后过60目筛。将过筛后的植物粉末放入多功能提取罐中，加入溶剂丙酮进行提取，减压浓缩。取八角茴香、石菖蒲以及博落回提取物30kg加入增溶剂15kg加入混合釜中，室温下混合3h，依次再加入乳化剂5kg、增稠剂1kg、防冻剂1kg、溶剂48kg混合均匀，获得防治苹果轮纹病的植物源杀菌剂。

实施例3

杀菌剂对苹果轮纹病菌室内毒力测定

1.供试药剂

由实施例1中制备的植物源杀菌剂。

2.供试病菌

苹果轮纹病菌(botryosphaeria)。

3.试验方法

采用菌丝生长速率法测定：设2个处理，即该杀菌剂和空白对照。将该水乳剂加入到熔化的pda培养基中，是最终浓度分别为1.000、0.500、0.250、0.125、0.063mg/ml，充分摇匀倒入已灭菌的培养皿中，待培养基凝固后，用直径为0.6cm的打孔器从已培养4～5天的病菌菌落边缘制取菌块，用接种针将菌块接种到含药培养基上，菌丝面朝下，每皿一块，每处理重复5次，至于25℃恒温培养箱中培养，72小时后采用十字交叉法测量菌落直径。以式i计算抑菌率：

利用excel和dps软件处理数据，计算抑菌率、毒力方程和有效抑制中浓度ec50，结果如表1～2和图1所示。

表1不同浓度该杀菌对苹果轮纹病菌在48h、72、96h的抑制作用

表2毒力回归方程、相关系数和抑制中浓度(ec50)

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。