要加15_20g琼脂，加入20g葡 萄糖，搅拌均匀，充分溶解后稍冷却补足水至1000ml，分装后121°C灭菌20分钟，冷却后备 用。
[0040] 二、实验方法
[0041] 采用生长速率法。
[0042] 1、先将12种植物病原菌在PDA平板上25°C培养2d左右待用。
[0043] 2、将PDA培养基加热溶化，冷却至45_50°C，分别加入不同浓度的丁苯羟酸制成含 0、2. 5、5和IOmM药液的培养基（对照中加入相应体积的二甲基亚砜），并分别倒入培养皿 中冷却。
[0044] 3、以无菌操作手续，用打孔器在培养2d的各菌株菌丝边缘（生长状况尽量一致） 打取圆形菌饼（直径0. 60cm)，再用接种针挑至含药平板中央，然后将培养皿倒置于培养箱 (25°C )中培养。
[0045] 4、于处理后不同时间观察测定菌丝的生长情况，并采用十字交叉法测得直径并处 理数据，计算抑制率并拍照。
[0046] 抑制率（％) = (对照菌丝直径-处理菌丝直径）/对照菌丝直径X 100
[0047] 每个处理重复3次。
[0048] 三、丁苯羟酸对12种植物病原菌菌丝生长的抑菌效果
[0049] 番茄灰霉病菌：番茄灰霉病菌寄主广泛，可侵染番茄、黄瓜、茄子、菜豆、青椒、芹 菜、莴笋、莴苣等多种蔬菜。
[0050] 小麦赤霉病菌：赤霉病是一种毁灭性病害，可引起穗腐，造成严重减产和品质降 低。随着全球气候变暖、耕作制度和方式的改变，小麦赤霉病不断蔓延扩展，常常造成小麦 减产、品质降低，且受侵染的小麦籽粒中含有真菌毒素，可引起人畜中毒和严重疾病。该病 菌除危害小麦外，还能侵染大麦、燕麦、水稻、玉米等多种禾本科作物以及鹅冠草等禾本科 杂草，此外，还可侵染大豆、棉花、红薯等作物。
[0051] 烟草赤星病菌：烟草赤星菌寄主范围较广，除烟草外，还可侵染棉花、花生、大豆、 番茄、桃、李、小麦等多种植物，引起斑点、根腐病等症状。
[0052] 番前枯萎病菌：番前枯萎病菌的专化性极强，只危害番前。该菌主要侵染植物导管 组织，通过阻塞木质部物质和水分运输引起植物萎蔫。它是一种严重危害蔬菜品质和产量 的土传性病害，番茄的幼苗期到成株期期间均受到枯萎病菌的侵染。番茄枯萎病又叫萎蔫 病，在老菜棚室发生严重。
[0053] 蓝莓枝枯病菌：该病菌属于拟盘多毛孢属，是一种重要的植物病原菌，可寄生大约 五十多科的植物，植物受害后表现为叶斑、腐烂、溃疡等症状，严重影响产品的产量和品质。 因此，研宄拟盘多毛孢菌对农林作物的生产具有重要的经济意义。目前，生产上的蓝莓主栽 品种，如蓝丰、公爵和蓝美人等，均有枝枯病发生，显著影响其果实产量和品质。
[0054] 苹果炭疽叶枯病菌：苹果炭疽叶枯病是由炭疽病菌引起的一种叶部病害，主要危 害苹果的嘎拉、金冠、乔纳金、秦冠等品种，造成苹果树大量落叶和果实严重腐烂，树势严重 削弱，导致次年绝产。富士、红星等品种高度抗病，发病的嘎拉和相邻未发病的富士苹果树 在果园内对比非常明显。苹果炭疽菌叶枯病主要危害叶片，并导致大量落叶。
[0055] 蓝莓拟茎点枝枯病菌：寄主主要有落叶松属、桃、梨属、越橘属、建始槭等植物。
[0056] 黄瓜棒孢叶斑病菌：该病菌寄主范围广泛，传播方式多样。近几年经调查发现，由 黄瓜棒孢叶斑病菌引起的黄瓜、番茄等蔬菜的叶斑病在中国的山东、河北、辽宁、内蒙古等 11个省市区大面积发生，造成了严重的经济损失。
[0057] 苹果轮纹病菌：苹果轮纹病又名粗皮病、轮纹烂果病，是苹果枝干部和果实上的重 要生物灾害，常引起苹果枝干树皮粗糙、局部性坏死和果实腐烂。患病植株坐果率低，导致 树体衰弱和产量减少，甚至绝产毁园。近年来，随着易感品种富士苹果的大面积栽培，苹果 轮纹病发病率逐年增加，危害面积不断扩大，已成为中国苹果生产中的严重病害，严重威胁 着苹果产业的可持续发展。
[0058] 番茄早疫病菌：该病除直接危害茎、叶、果外，还可抑制番茄生长和果实形成，露地 和保护地受害都较重，常年减产20% -30%，严重时可达5既以上，甚至绝产。此病原寄主 范围广泛，除危害番茄外，还可危害茄子、辣椒和马铃薯等茄科蔬菜作物。
[0059] 水稻稻瘟病菌：该病菌不仅侵染水稻，还能侵染小麦、大麦和粟等农作物，甚至侵 染植物的根部，对农业生产造成严重的危害。
[0060] 蓝莓枝干溃疡病菌：引起蓝莓枝干溃疡病的病原菌一葡萄座腔菌属是一类世界性 分布的真菌，所导致的树木溃疡病是世界范围内发生的重大病害。其危害的寄主很广，达45 个属（阔叶树40个属、针叶树5个属），对林果木危害严重，可引起桉树、杨树、苹果、石植、 桃树、草决明、杨梅、板栗等寄主植物的枝干溃疡枯萎死亡、干腐、流胶等症状。
[0061] 丁苯羟酸对12种植物病原菌的离体抑菌作用生测结果见表1。
[0062] 表1 丁苯羟酸对12种病原菌菌丝生长的抑制作用测定结果（5d)
[0064] 注：试验中每个处理设三次重复，表中数据为三次重复的平均值。
[0065] 从表1中可知，丁苯羟酸在IOmM时，对半知菌亚门和子囊菌亚门的12种植物病原 菌均有一定的抑制效果。其中对小麦赤霉病菌、黄瓜棒孢叶斑病菌和蓝莓枝枯病菌等8种 植物病原菌的抑制率均在80%以上。另外，其对番茄灰霉病菌和蓝莓拟茎点枝枯病菌的的 抑制率较高，在90 %以上，可对其进行有效防治。
[0066] 丁苯羟酸对12种植物病原菌菌丝生长的抑菌效果图片如图1-12所示，当丁苯羟 酸的浓度在IOmM时，番茄灰霉病菌和蓝莓拟茎点枝枯病菌几乎没有或有很少的菌丝生长。 而对小麦赤霉病菌、烟草赤星病菌和黄瓜棒孢叶斑病菌等10种植物病原菌来说，菌丝生长 很少，或虽有菌丝生长，但与对照相比，菌丝生长较弱，说明丁苯羟酸起到了很好的抑制效 果。
[0067] 以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实 施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施 例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替 换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。
【主权项】
1. 丁苯羟酸在制备用于防治由植物病原菌引起的植物病害的杀菌剂中的用途。2. 根据权利要求1所述的丁苯羟酸在制备用于防治由植物病原菌引起的植物病害的 杀菌剂中的用途，其特征在于：所述植物病原菌为半知菌亚门真菌与子囊菌亚门真菌。3. 根据权利要求1或2所述的丁苯羟酸在制备用于防治由植物病原菌引起的植物病害 的杀菌剂中的用途，其特征在于：所述杀菌剂中丁苯羟酸的有效使用浓度为5-10mM。4. 根据权利要求2所述的丁苯羟酸在制备用于防治由植物病原菌引起的植物病害的 杀菌剂中的用途，其特征在于：所述半知菌亚门真菌包括小麦赤霉病菌、番茄灰霉病菌、番 茄枯萎病菌、蓝莓枝枯病菌、烟草赤星病菌、番茄早疫病菌、黄瓜棒孢叶斑病菌、蓝莓拟茎点 枝枯病菌和水稻稻瘟病菌。5. 根据权利要求2所述的丁苯羟酸在制备用于防治由植物病原菌引起的植物病害的 杀菌剂中的用途，其特征在于：所述子囊菌亚门真菌包括苹果炭疽叶枯病菌、苹果轮纹病 菌、和蓝莓枝干溃疡病菌。6. 根据权利要求1所述的丁苯羟酸在制备用于防治由植物病原菌引起的植物病害的 杀菌剂中的用途，其特征在于：所述杀菌剂中丁苯羟酸的浓度为IOmM时，丁苯羟酸对番茄 灰霉病菌和蓝莓拟茎点枝枯病菌的抑制率最高。7. 根据权利要求1所述的丁苯羟酸在制备用于防治由植物病原菌引起的植物病害的 杀菌剂中的用途，其特征在于：所述植物为苹果、桃、梨、番茄、蓝莓、烟草、黄瓜、水稻、玉米、 小麦和大豆。
【专利摘要】本发明公开了丁苯羟酸在制备用于防治由植物病原菌引起的植物病害的杀菌剂中的用途，本发明通过室内毒力测定，证明了丁苯羟酸对植物病原真菌具有良好的抑制活性。丁苯羟酸作为杀菌剂，具有高效和低毒的优点，适合于植物病害化学防治的要求。目前大量杀菌剂的使用，导致病原菌的抗药性增强，而且传统的杀菌剂对环境污染大、残留高，直接威胁着人类的食品安全。而丁苯羟酸是一种可降解、无污染、对环境友好的小分子化合物，并且其抗药性差、对非靶标生物及人畜安全，能够保证农产品及果蔬的高品质，符合可持续发展的要求，其研究和市场应用前景广阔。
【IPC分类】A01P3/00, A01N37/40
【公开号】CN104920360
【申请号】CN201510341914
【发明人】梁文星, 李德龙, 王光远, 吕斌娜
【申请人】青岛农业大学
【公开日】2015年9月23日
【申请日】2015年6月18日