高效防控水稻稻瘟病的植物精油的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及农业科技领域，尤其是一种高效防控水稻稻瘟病的植物精油。
【背景技术】
[0002] 水稻是我国的主要粮食作物之一，水稻稻瘟病是由水稻稻瘟病菌 识7^^)引起的真菌病害，世界各国水稻产区均有发生，同时也是影响我国水稻生产安全最 严重的病害之一。目前，防治水稻稻瘟病一般都是化学农药，如稻瘟灵、咪鲜胺、三环唑等， 由于这些化学农药的广泛使用，导致三"R"问题日趋严重，已引起社会高度关注。因此，研 宄与开发高效、安全的生物农药防控水稻稻瘟病已成为植保专家的重要研宄课题，也是水 稻生产可持续发展的必由之路，而植物源农药作为生物农药的一部分，其开发研宄一直是 新农药研宄的热点课题之一。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是：提供一种高效防控水稻稻瘟病的植物精油，它高效的、安全，对 环境友好，以克服现有技术的不足。
[0004] 本发明是这样实现的：高效防控水稻稻瘟病的植物精油，其主效成分为柠檬醛及 香矛酉全。
[0005] 所述的柠檬醛及香茅醛的质量比为2: 1。
[0006] 为了进一步验证本发明的技术效果，将本发明的产品进行条件试验。
[0007] 实验材料 1. 1. 1供试病原菌 水稻稻瘟病病菌ZB15 grisea)采自田间自然发病水稻植株上的病菌，经 本实验室分离、纯化、鉴定后保存备用。
[0008] 供试药剂 供试药剂为山苍子精油中2种成分：柠檬醛、香茅醛（贵州大学作物保护研宄所自制， 含量均大于90%。） 1.2实验方法 1. 2. 1菌丝生长速率抑制法 参照慕立义的研宄方法，将供试山苍子精油活性化合物分别稀释成系列浓度梯度的母 液，按一定比例加入到融化好的PDA培养基中，混合后倒入灭菌的培养皿中，制成系列浓度 梯度的含柠檬醛培养基平板。供试的稻瘟病菌株，先在PDA培养基上，置于28°C下培养7-10 d，菌落长至培养皿边缘时，用直径为5 mm的打孔器在菌落边缘打取菌饼，然后将菌饼移到 上述含药的培养基平板中央。以不加药的平板培养基为对照。每平板接种1块，每处理3 次重复，28°C全黑暗培养。待对照菌丝长至培养皿直径的三分之二时，用"十"字交叉法测 定各处理的菌落生长直径，每皿用十字交叉测量四次直径，计算菌丝生长速率抑制率及EC 5tl 值。
[0009] 孢子萌发抑制法
a.采用米糠培养基产孢的方法：称取20 g米糠加入到约800 mL水中，煮沸约10 min， 然后加入10 g蔗糖和10-15 g琼脂，琼脂融化后，定容1000 mL，再加热煮沸。将培养基分 装在三角瓶中，灭菌后倒入直径90 mm的培养皿中，30-40 mL/皿，不加盖，使培养基表面水 分风干（培养基表面有冷凝水会影响稻瘟病的生长）。取培养好的菌丝块，分多点接种到培 养基平板上，置于28°C恒温培养箱中大约10 d，菌丝长满全皿进行产孢培养，将少许无菌水 倒入培养皿中，用灭菌过的毛笔轻轻刷洗培养基表面，刷洗力度适中，太轻气生菌丝未被洗 掉，产孢量少，刷的太重，平板表面的菌丝容易受伤，影响产孢量。然后置于365 nm黑光灯 下12:12(L:D)、T: 28°C左右培养，48 h后，培养基表面即产生大量孢子，表现为一层青灰色 的新鲜霉层，倒入少量无菌水，用毛笔轻轻刷洗霉层表面，过滤、镜检，调配成所需浓度的孢 子悬浮液。
[0010] b.测定：将供试药剂配成系列浓度的稀释液，各取0.5 mL药液至10 mL的试管 中，再加入4. 5 mL孢子悬浮液，混匀，配成含山苍子精油活性化合物系列浓度的孢子悬浮 液，以不含药孢子悬浮液作空白对照，每处理3次重复，于28°C恒温黑暗培养20-24 h后， 摇匀，用滴管各吸取少量孢子悬浮液置于洁净的凹型玻片上，盖上盖玻片，在20 X 10倍 显微镜下观察孢子萌发情况，每个处理随机检查孢子200个左右，凡孢子芽管大于孢子的 短半径时即算萌发，否则不算萌发，对照萌发率95%以上，计算孢子萌发抑制率及EC m值。
[0011] 共度系数（CTC)值计算 采用孙云沛法求出毒力指数、理论毒力指数、实际毒力指数及混剂的共毒系数CTC值， 并据此作出综合评价，CTC>120表示增效作用，80〈CTC < 120表示相加作用，CTC < 80表示 拮抗作用。
[0012] 共毒系数CTC值计算公式如下：
式中Ax-药剂A在混剂中的百分含量； Bx-药剂B在混剂中的百分含量。
[0013] 结果与分析 根据农药生物测定技术中，两种成分混用的联合作用计算法，算出各种混合比例的共 毒系数，山苍子精油活性化合物柠檬醛与香茅醛按不同比例组合对稻瘟病菌菌丝生长抑制 毒力测定结果如表1所示。在试验设定的配比下，柠檬醛与香茅醛配比为1:10时，对菌丝 生长的抑制表现为拮抗作用；配比为1:8、1:6、4 :1、6:1、8:1、10:1时，对菌丝生长的抑制表 现为相加作用；而配比为1: 4、1: 2、I: I、2:1时，对菌丝生长的抑制表现为增效作用。其中配 比为2:1的EC5tl值为17. 16 μ g/mL，明显低于作为单一成分时柠檬醛和香茅醛对稻瘟病菌 的EC5tl值，也明显低于春雷霉素的EC 5Q值，且其共毒系数为最高，达到了 259. 14,增效作用 最明显。
[0014]山苍子精油活性化合物柠檬醛与香茅醛按不同比例组合对稻瘟病菌孢子萌发抑 制毒力测定结果如表2所示。柠檬醛与香茅醛不同配比对稻瘟病孢子萌发的抑制作用存在 着明显的差异，其中柠檬醛与香茅醛配比为1:10、1:8时，对孢子萌发的抑制表现为拮抗作 用；配比为1:6、1 :4、6:1、8:1、10:1时，对孢子萌发的抑制表现为相加作用；而配比为1:2、 1:1、2:1、4:1时，对孢子萌发的抑制表现为增效作用。其中配比为2:1的EC 5tl值为20. 19 μ g/mL，明显低于作为单一成分时的柠檬醛和香茅醛的EC5tl值，也明显低于春雷霉素的EC5tl 值。而且其共毒系数为最高，达到了 196. 86,增效作用最明显。
[0015] 小结 本发明涉及一种用于防治水稻稻瘟病的植物精油主效成分组合，它由柠檬醛和香茅醛 按2 :1的质量比组成。这个组合在室内对稻瘟病菌菌丝生长和孢子萌发的EC5tl值分别为 17. 16 μ g/mL和20. 19 μ g/mL，共毒系数CTC值分别达到了 259. 14和196. 86,从这个数据 可看出此组合不仅用量少而且对菌丝生长和孢子萌发的抑制都具有明显的增效作用。故可 以本发明的方案为基础，研制出一种新型的、高效的、绿色安全的防治水稻稻瘟病菌的植物 源农药。注：ND表不未检出。
[0016] 由于采用了上述技术方案，与现有技术相比，本发明通过将柠檬醛和香茅醛进行 复配混用，该组合对水稻稻瘟病的菌丝生长和孢子萌发的抑制都具有明显的增效作用，防 治效果可达75%左右，防治效果显著，能有效降低农药的用量，不仅减小了劳动强度，节省 了成本，解决滥施农药的问题。本发明简单易行，材料来源广泛，成本低廉，使用效果好。
【具体实施方式】
[0017] 下面结合实施例对本发明更具体的描述，但本发明的实施方案不限于这些实施 例，实施例中所述的份数均以重量计。
[0018] 本发明的实施例：称取97%柠檬醛原药13. 32份和96%香茅醛原药6. 66份，加入 乳化剂0P-10 10份，ox-7513 30份，助溶剂10份，稳定剂1份，水补足，剪切1小时，即得 20%柠檬醛?香茅醛微乳剂（ME)。
[0019] 用以上所得的20%柠檬醛?香茅醛ME防治水稻稻瘟病田间药效试验，试验效果汇 总如下： 2014年8月在贵州黄平县旧州镇水稻试验田，该地区历年均有稻瘟病的发生，试验地 水稻品种为凯香优1号，土壤肥力中上等，地势平整，灌溉条件良好，试验区的水肥管理和 其他栽培条件基本一致。试验于水稻抽穗至灌浆期穗颈瘟发生时用20%柠檬醛?香茅醛 ME800倍液喷雾，间隔7天后第二次施药，施药器械为3WBJ-16DZ多功能静电喷雾器。以6% 春雷霉素可湿性粉剂（WP) 800倍液为对照。
[0020] 防治稻瘟病的效果见表3,20%柠檬醛?香茅醛ME800倍液在药后7天的防效为 76. 65%，药后14天有所上升，防效达到86. 64%，与6%春雷霉素 WP800倍液的防治效果表现 差异显著。
【主权项】
1. 一种高效防控水稻稻瘟病的植物精油，其特征在于：其主效成分为柠檬醛及香茅 醛。2. 根据权利要求1所述的高效防控水稻稻瘟病的植物精油，其特征在于：所述的柠檬 醛及香茅醛的质量比为2:1。
【专利摘要】本发明公开了一种高效防控水稻稻瘟病的植物精油，其主效成分为柠檬醛及香茅醛。本发明通过将柠檬醛和香茅醛进行复配混用，该组合对水稻稻瘟病的菌丝生长和孢子萌发的抑制都具有明显的增效作用，防治效果可达75%左右，防治效果显著，能有效降低农药的用量，不仅减小了劳动强度，节省了成本，解决滥施农药的问题。本发明简单易行，材料来源广泛，成本低廉，使用效果好。
【IPC分类】A01P3/00, A01N35/02
【公开号】CN104920359
【申请号】CN201510361355
【发明人】李明, 李荣玉, 吴小毛, 卢春
【申请人】贵州大学
【公开日】2015年9月23日
【申请日】2015年6月28日