经过高压灭菌的医用镊子、医用剪刀、将消毒过的白术腋芽置于无菌培养皿中剪去腋芽受伤的部位，接种于初代培养基中:l/2MS+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，PH = 6.0，培养于光照时间20h/d，光强20001x，温度24±2°C的培养室中，培养4-5d后，观察到腋芽开始生长。
[0075]2.愈伤组织诱导培养:培养15d待苗长到3_5cm左右，在紫外灭菌30分钟后的超净工作台上将苗从培养瓶中取出，置于无菌培养皿中，用高压灭菌后的医用镊子和医用剪刀修剪其腋芽后转接到愈伤组织诱导培养基中:1/2MS+L Omg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，PH = 6.0，培养于光照时间20h/d，光强20001x，温度24±2°C的培养室中，培养4-8天后，观察到腋芽开始有愈伤组织形成。
[0076]3.愈伤组织增殖培养:在超净工作台上，将形成的愈伤组织用灭菌后的医用镊子拿出放到无菌培养皿中，用医用剪刀除去表面的培养基接种到增殖培养基中:MS+1.5mg/L 6-BA+l.5mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，PH = 6.0，培养于光照时间20h/d，光强20001x，温度24±2°C的培养室中，培养3_5d后，观察到白术愈伤组织开始生长，每个培养周期45d，愈伤组织直径平均增大10.0-13.5倍。
[0077]4.愈伤组织丛生芽诱导培养:在超净工作台上，将培养到2.5-4cm的愈伤组织用灭菌后的医用镊子拿出放到无菌培养皿中，用医用剪刀切成直径0.3cm的小块，按5块/瓶接种于愈伤组织丛生芽诱导培养基中:l/2MS+2.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，PH = 6.0，培养于光照18h/d，光强20001x，温度24±2°C的培养室中，培养
6-8d后，观察到白术愈伤组织开始生长芽。平均生芽数为4-6个/块，20-30个/瓶。
[0078]5.丛生芽生根培养:在灭菌超净工作台上，将培养到2cm左右的白术丛生芽剪切后按3芽/瓶“品字形”排列转按到生根培养基中:l/4MS+lmg/L NAA蔗糖30g/L+琼脂粉7g/L，PH = 6.0，培养于光照20h/d，光强20001x，温度24±2°C的培养室中，5_7d后观察到有根和芽生长，培养30d以后，平均生根数为5-6根/芽，15-18根/瓶。
[0079]6.炼苗移栽:当白术组培苗根长2cm左右时，将培养瓶从组培室移除，置于炼苗室常温闭瓶炼苗3d，旋松盖子2d，全开盖2d ;炼苗完成后，将白术苗从培养瓶中移出，放入清水盆中，小心洗去根部琼脂，然后捞出，移栽至泥炭土苗圃中，浇透水，每天早晚清水喷洒叶面保湿，5d后减少喷水次数；然后每5天浇灌一次低浓度营养液，营养液为1/2MS大量元素、微量元素、铁盐，15d后，统计成活率，成活率为94-96.8%。
[0080]实施例4
[0081]选取选择优势类型、优良单株、健壮、幼嫩的白术腋芽作为外植体，对其进行无菌处理:取茎上的幼芽，修剪多余的叶片，表面灰尘颗粒用软毛刷除去；自来水冲洗干净(60分钟)，吸干芽体表面的水分，在灭菌后的超净工作台上用75%的酒精浸泡30秒，无菌水冲洗3次，然后换用0.1%氯化汞溶液浸泡60秒，无菌水冲洗3次，最后用5%次氯酸钠溶液浸泡10分钟，期间不断搅拌，无菌水冲洗4次，倒出多余的无菌水，将腋芽放置培养皿中待用。
[0082]按照以下步骤繁殖白术种苗:
[0083]1.白术种苗的初代培养:使用经过高压灭菌的医用镊子、医用剪刀、将消毒过的白术腋芽置于无菌培养皿中剪去腋芽受伤的部位，接种于初代培养基中:l/2MS+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，PH = 5.8，培养于光照时间10h/d，光强1500x，温度24±2°C的培养室中，培养6-7d后，观察到腋芽开始生长。
[0084]2.愈伤组织诱导培养:培养20d待苗长到3_5cm左右，在紫外灭菌30分钟后的超净工作台上将苗从培养瓶中取出，置于无菌培养皿中，用高压灭菌后的医用镊子和医用剪刀修剪其腋芽后转接到愈伤组织诱导培养基中:l/2MS+0.8mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，PH = 5.8，培养于光照时间17h/d，光强19001x，温度24±2°C的培养室中，培养8-12天后，观察到腋芽开始有愈伤组织形成。
[0085]3.愈伤组织增殖培养:在超净工作台上，将形成的愈伤组织用灭菌后的医用镊子拿出放到无菌培养皿中，用医用剪刀除去表面的培养基接种到增殖培养基中:MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，PH = 5.8，培养于光照时间10h/d，光强15001x，温度24±2°C的培养室中，培养5_7d后，观察到白术愈伤组织开始生长，每个培养周期45d，愈伤组织直径平均增大8.2-10.5倍。
[0086]4.愈伤组织丛生芽诱导培养:在超净工作台上，将培养到2.5-4cm的愈伤组织用灭菌后的医用镊子拿出放到无菌培养皿中，用医用剪刀切成直径0.3cm的小块，按5块/瓶接种于愈伤组织丛生芽诱导培养基中:1/2MS+L5mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，PH = 5.8，培养于光照12h/d，光强1500x，温度24±2°C的培养室中，培养
6-10d后，观察到白术愈伤组织开始生长芽。平均生芽数为4-5个/块，20-25个/瓶。
[0087]5.丛生芽生根培养:在灭菌超净工作台上，将培养到2cm左右的白术丛生芽剪切后按3芽/瓶“品字形”排列转按到生根培养基中:l/4MS+0.5mg/L NAA蔗糖30g/L+琼脂粉7g/L，PH = 5.8，培养于光照10h/d，光强15001x，温度24±2°C的培养室中，10_13d后观察到有根和芽生长，培养30d以后，平均生根数为4-5根/芽，12-15根/瓶。
[0088]6.炼苗移栽:当白术组培苗根长2cm左右时，将培养瓶从组培室移除，置于炼苗室常温闭瓶炼苗3d，旋松盖子2d，全开盖2d ;炼苗完成后，将白术苗从培养瓶中移出，放入清水盆中，小心洗去根部琼脂，然后捞出，移栽至泥炭土苗圃中，浇透水，每天早晚清水喷洒叶面保湿，5d后减少喷水次数；然后每5天浇灌一次低浓度营养液，营养液为1/2MS大量元素、微量元素、铁盐，15d后，统计成活率，成活率为91.9-93.3%。
[0089]实施例5
[0090]选取选择优势类型、优良单株、健壮、幼嫩的白术腋芽作为外植体，对其进行无菌处理:取茎上的幼芽，修剪多余的叶片，表面灰尘颗粒用软毛刷除去；自来水冲洗干净(60分钟)，吸干芽体表面的水分，在灭菌后的超净工作台上用75%的酒精浸泡30秒，无菌水冲洗3次，然后换用0.1%氯化汞溶液浸泡60秒，无菌水冲洗3次，最后用5%次氯酸钠溶液浸泡10分钟，期间不断搅拌，无菌水冲洗4次，倒出多余的无菌水，将腋芽放置培养皿中待用。
[0091]按照以下步骤繁殖白术种苗:
[0092]1.白术种苗的初代培养:使用经过高压灭菌的医用镊子、医用剪刀、将消毒过的白术腋芽置于无菌培养皿中剪去腋芽受伤的部位，接种于初代培养基中:l/2MS+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，PH = 5.9，培养于光照时间15h/d，光强18001x，温度24±2°C的培养室中，培养5-7d后，观察到腋芽开始生长。
[0093]2.愈伤组织诱导培养:培养18d待苗长到3_5cm左右，在紫外灭菌30分钟后的超净工作台上将苗从培养瓶中取出，置于无菌培养皿中，用高压灭菌后的医用镊子和医用剪刀修剪其腋芽后转接到愈伤组织诱导培养基中:l/2MS+0.7mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，PH = 5.9，培养于光照时间15h/d，光强18001x，温度24±2°C的培养室中，培养8-12天后，观察到腋芽开始有愈伤组织形成。
[0094]3.愈伤组织增殖培养:在超净工作台上，将形成的愈伤组织用灭菌后的医用镊子拿出放到无菌培养皿中，用医用剪刀除去表面的培养基接种到增殖培养基中:MS+1.25mg/L 6-BA+0.75mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，PH = 5.8，培养于光照时间18h/d，光强19001x，温度24±2°C的培养室中，培养4_6d后，观察到白术愈伤组织开始生长，每个培养周期35d，愈伤组织直径平均增大8.5-12.8倍。
[0095]4.愈伤组织丛生芽诱导培养:在超净工作台上，将培养到2.5-4cm的愈伤组织用灭菌后的医用镊子拿出放到无菌培养皿中，用医用剪刀切成直径1.0cm的小块，按5块/瓶接种于愈伤组织丛生芽诱导培养基中:1/2MS+1.75mg/L 6-BA+0.35mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，PH = 5.9，培养于光照15h/d，光强18001x，温度24±2°C的培养室中，培养
7-8d后，观察到白术愈伤组织开始生长芽。平均生芽数为4-6个/块，20-30个/瓶。
[0096]5.丛生芽生根培养:在灭菌超净工作台上，将培养到2cm左右的白术丛生芽剪切后