一种液体菌种培养双孢蘑菇的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种液体菌种培养双孢蘑菇的方法，属于蘑菇培养技术领域。
【背景技术】
[0002]双孢蘑菇又称白蘑菇、蘑菇、洋蘑菇，欧美各国生产经营者常称之为普通栽培蘑菇或纽扣蘑菇。双孢蘑菇是世界性栽培和消费的菇类，有"世界菇"之称，可鲜销、罐藏、盐渍。双孢蘑菇的菌丝还作为制药的原料。中国双孢蘑菇栽培最多的有福建、山东、河南、浙江等省。栽培方式有菇房栽培、大棚架式栽培和大棚畦栽等。不同地区，不同气候条件和不同季节可采取适合自己的栽培方式。分布极广泛，中国普遍栽培。近年来由于深层培养的研究成功，人们还可利用蘑菇菌丝体生产蛋白质、草酸和菌糖等物质。双孢蘑菇是当今世界上商品化栽培历史最悠久、人工栽培最广泛，总产量最高、消费了量最大、经济效益最好的一种食用菌。据统计，我国年双孢蘑菇产量达到260万多吨。双孢蘑菇含有丰富的蛋白质、多糖、维生素、核苷酸和不饱和脂肪酸，不仅营养丰富，肉质肥厚，味道鲜美，而且高蛋白低脂肪、低热量，享有植物肉之称，有提高人类免疫力，降低血脂、抗肿瘤之功效，是一种不可多得的食药兼用的保健食物。
[0003]随着我国经济的飞速发展，人们对食物要求由过去的温饱型向现在的营养保健型转变，双孢蘑菇的消费量必将大幅度增长，双孢蘑菇栽培有非常广阔的发展前景。目前培养生产双孢蘑菇的方法，大多都是以粪草菌种、木肩菌种、木块菌种、谷粒菌种、人造颗粒菌种等固体菌种培养生产。固体菌种的生产一般是由试管母种扩繁成二级种、三级种，生产周期长、菌龄不一致，污染率高、成本高、需要大量人工和场地，管理困难，不适应于大规模的生产。因此研究出一种生产周期长、菌龄一致的双孢蘑菇培养方法，有效促进双孢蘑菇产业的发展。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的技术问题:针对固体菌种的生产一般是由试管母种扩繁成二级种、三级种，生产周期长、菌龄不一致，污染率高，需要大量人工和场地，导致产量低、生产管理困难、成本高的弊端，提供了一种液体菌种培养双孢蘑菇的方法，本发明是取甘露醇、胰蛋白胨、淀粉和琼脂制得培养基，调节pH后，升温灭菌，接种双孢蘑菇孢子静置培养备用；再取麦芽汁、玉米粉、磷酸钾等物质混合，加入去离子水，高温灭菌后接种备用的双孢蘑菇菌种，静置后摇床振荡培养得双孢蘑菇幼株原液，与蒸馏水混合，加入经粉碎、淋湿发酵、加入石灰水浸泡、灭菌后的甘蔗渣调和，放入聚丙烯塑料袋中培养，经覆土、洒水，在一定温度下培养，即可。本发明生产周期短，生产效率高，所得产品菌龄一致，质量好。
[0005]为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是:
(1)按重量份数计，选取20?65份甘露醇、5?15份胰蛋白胨、15?20份淀粉和20?45份琼脂，搅拌混合形成培养基，加入去离子水稀释pH为5.0?5.5，待稀释完pH后，对其升温至120°C灭菌10?20min，制得微生物培养基，随后将双孢蘑菇孢子接种至微生物培养基中，在18?25°C下静置培养12?16h，得双孢蘑菇菌种备用；
(2)按重量份数计，选取70?84.9份麦芽汁、5?9份玉米粉、7?10份磷酸钾、3?10份硫酸镁和0.1?1.0份维生素，控制转速为200?400r/min，使其搅拌混合均匀，得培养基营养物质；
(3)按质量比1:25，将上述制备的培养基营养物质和去离子水搅拌混合制备得液体培养基，对其升温至98?100°C下高温灭菌25?30min，随后将备用的双孢蘑菇菌种按接种量5%接种至液体培养基上，调节温度至20?25°C静置20?24h，再将其置于150?200r/min的旋转式摇床上振荡培养2?3天，培养得双孢蘑菇幼株原液备用；
(4)选取新鲜的半榨干的甘蔗渣，将其置于秸杆粉碎机中进行粉碎，并淋湿使其发酵5?8天，每隔12h翻动一次，待发酵完成后，随后将其置于质量浓度为2%的石灰水中进行浸泡10?12h，并在80?90°C下灭菌处理10?15min ；
(5)将步骤(3)制得的双孢蘑菇幼株原液与蒸馏水按质量比1:5搅拌混合，制备得稀释孢蘑菇幼株液，随后通过稀释孢蘑菇幼株液对上述灭菌处理的甘蔗渣调节其水分至65?70%，并将其置于15cmX 30cm的聚丙烯塑料袋中，每袋湿重0.8kg，将其置于20?25°C下培养至菌丝完全长满袋中；
(6)待菌丝完全长出，将其埋于土中，对其表面覆土2?3cm，同时对其洒水保持其湿润，控制空气湿度为80?90%，温度为15?20°C，培养30?40天，即得一种液体菌种培养的双孢蘑菇。
[0006]本发明与其他方法相比，有益技术效果是:
(1)本发明的培养方法成本低于其他方法5%，生产周期短、污染率低，无需大量人工和场地，管理方便；
(2)培养出的双孢蘑菇品质好，产量高于其他方法7%以上，菌龄一致，有利于机械化操作，适合大规模生产。
【具体实施方式】
[0007]首先按重量份数计，选取20?65份甘露醇、5?15份胰蛋白胨、15?20份淀粉和20?45份琼脂，搅拌混合形成培养基，加入去离子水稀释pH为5.0?5.5，待稀释完pH后，对其升温至120°C灭菌10?20min，制得微生物培养基，随后将双孢蘑菇孢子接种至微生物培养基中，在18?25°C下静置培养12?16h，得双孢蘑菇菌种备用；再按重量份数计，选取70?84.9份麦芽汁、5?9份玉米粉、7?10份磷酸钾、3?10份硫酸镁和0.1?1.0份维生素Bi，控制转速为200?400r/min，使其搅拌混合均匀，得培养基营养物质；然后按质量比1:25，将上述制备的培养基营养物质和去离子水搅拌混合制备得液体培养基，对其升温至98?100°C下高温灭菌25?30min，随后将备用的双孢蘑菇菌种按接种量5%接种至液体培养基上，调节温度至20?25°C静置20?24h，再将其置于150?200r/min的旋转式摇床上振荡培养2?3天，培养得双孢蘑菇幼株原液备用；选取新鲜的半榨干的甘蔗渣，将其置于秸杆粉碎机中进行粉碎，并淋湿使其发酵5?8天，每隔12h翻动一次，待发酵完成后，随后将其置于质量浓度为2%的石灰水中进行浸泡10?12h，并在80?90°C下灭菌处理10?15min ;然后将备用的双孢蘑菇幼株原液与蒸馏水按质量比1:5搅拌混合，制备得稀释孢蘑菇幼株液，随后通过稀释孢蘑菇幼株液对上述灭菌处理的甘蔗渣调节其水分至65?70%，并将其置于15cmX30cm的聚丙烯塑料袋中，每袋湿重0.8kg，将其置于20?25°C下培养至菌丝完全长满袋中；最后待菌丝完全长出，将其埋于土中，对其表面覆土 2?3cm，同时对其洒水保持其湿润，控制空气湿度为80?90%，温度为15?20°C，培养30?40天，即得一种液体菌种培养的双孢蘑菇。
[0008]实例1
首先按重量份数计，选取20份甘露醇、15份胰蛋白胨、20份淀粉和45份琼脂，搅拌混合形成培养基，加入去离子水稀释pH为5.0，待稀释完pH后，对其升温至120°C灭菌lOmin，制得微生物培养基，随后将双孢蘑菇孢子接种至微生物培养基中，在18°C下静置培养12h，得双孢蘑菇菌种备用；再按重量份数计，选取70份麦芽汁、9份玉米粉、10份磷酸钾、10份硫酸镁和1.0份维生素Bi，控制转速为200r/min，使其搅拌混合均匀，得培养基营养物质；然后按质量比1:25，将上述制备的培养基营养物质和去离子水搅拌混合制备得液体培养基，对其升温至98°C下高温灭菌25min，随后将备用的双孢蘑菇菌种按接种量5%接种至液体培养基上，调节温度至20°C静置20h，再将其置于150r/min的旋转式摇床上振荡培养2天，培养得双孢蘑菇幼株原液备用；选取新鲜的半榨干的甘