一种抑菌农药组合物及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明设及农药组合物在抑制病原真菌方面的应用，尤其设及一种抑菌农药组合 物及其用途。
【背景技术】
[0002] 近年来，国内外学者对抑菌杀虫植物资源筛选做了大量的研究工作，发现了许多 具有抑菌杀虫活性的植物资源。例如，Wilson等从345种植物和49种植物精油中筛选出 13种植物和4种精油具有较强的抑菌活性。又如，Viuda-Marto等研究发现巧樣、相枯、葡 萄抽和厮澄4种精油对霉菌生长的影响通常与食物腐败有关，发现甜澄精油对黑曲霉最有 效，相枯精油能抑制黄曲霉的生长，抽子精油对黄青霉抑制最有效。相枯精油被认为是最合 适的替代品用做食品工业的添加剂。
[0003]相橘是多年生的常绿小乔木，资源丰富、优良品种繁多，具有四千多年的栽培历 史，目前是我国生产面积最大的水果。然而，相橘的加工产生过程中会产生大量废弃皮渣。 针对运些废弃皮渣，目前资源化利用和处理的主要方式有：卫生填埋、提取有效活性物质、 生产有机肥等。研究开发其中的杀虫和抑菌活性物质，是相橘皮渣综合利用的较好途径。近 些年来，相橘中的活性物质在防治病原菌等方面的作用日益得到重视，但其抑菌的主要成 分和机理目前还不十分清楚。
[0004] 目前，虽然已有关于相橘中的活性物质的杀虫和抑菌活性的相关研究，但是运些 研究中所提及的活性物质能够起到抑菌作用的应用范围和方式等仍有一定的局限，同时 运些研究也都未说明其提取物中所含的抑菌活性物质分别是什么，因此有进一步研究的必 要。
【发明内容】
[0005] 本发明的第一目的在于提供一种抑菌农药组合物，该抑菌农药组合物可用作高效 抑制胶抱炭痘菌等多种病原真菌的杀菌农药。
[0006] 本发明的技术方案具体如下：
[0007]-种抑菌农药组合物，其特征在于：它包括巧樣締、芳精醇、β-羡締、α-松油醇、 巧樣醒、月桂締和正己醒。
[000引作为进一步限定，上述抑菌农药组合物具体可由巧樣締、芳精醇、β-羡締、α-松 油醇、巧樣醒、月桂締和正己醒组成。
[0009] 作为再进一步明确，上述各个物质的用量范围，按重量份数计分别为巧樣締3~ 50份、芳精醇1~20份、β-羡締0. 01~3份、α-松油醇0. 1~5份、巧樣醒0. 1~5份、 月桂締0.5~10份和正己醒0.01~2份。
[0010]为进一步提高上述抑菌农药组合物的抑菌效率，作为再进一步优选，上述各个物 质的用量范围，按重量份数计分别为巧樣締5~50份、芳精醇5~10份、β-羡締1~3 份、α-松油醇2~4份、巧樣醒1~5份、月桂締4~7份和正己醒1~2份。
[0011] 作为更进一步优选，上述各个物质的用量，按重量份数计分别为巧樣締45份、芳 精醇15份、β-羡締2份、α-松油醇3份、巧樣醒4份、月桂締7份和正己醒1. 5份。
[0012] 本发明中的上述抑菌农药组合物，可制备成用于抑制胶抱炭痘菌 (Colletotrichumgloeosprioides)、相橘褐色蒂腐病菌值iaporthecitri)、相橘黑腐病 菌（AlternariacitriJ、相橘青霉菌（Penicilliumitali州m)、相橘黑斑病菌（Gui即ardia citricarpa)或/和相橘绿霉菌（Penicilliumdigitatum)的杀菌农药。
[0013] 本发明具有W下有益效果：
[0014] 本发明公开了一种抑菌农药组合物，它能作为一种农药杀菌剂，对胶抱炭痘菌、相 橘褐色蒂腐病菌、相橘黑腐病菌、相橘青霉菌、相橘黑斑病菌和相橘绿霉菌等多种病原真菌 均具有良好的抑制作用。它不仅为相橘中活性物质的开发利用提供了新途径，也为将相橘 中的活性物质应用于抑菌农药的研发提供了依据。
【具体实施方式】
[0015] 下面通过具体实施例对本发明进行具体描述，在此指出W下实施例只用于对本发 明进行进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，本领域的技术熟练人员可W根 据上述
【发明内容】
对本发明作出一些非本质的改进和调整。
[001引实施例1
[0017] 一种抑菌农药组合物，它由巧樣締、芳精醇、β-羡締、α-松油醇、巧樣醒、月桂締 和正己醒组成；其各个物质的用量，按重量份数计分别为巧樣締45. 53份、芳精醇15. 34份、 β-羡締2. 10份、α-松油醇3. 33份、巧樣醒4. 13份、月桂締7. 77份和正己醒1. 51份。
[0018] 为了得出上述抑菌农药组合物的组成，本例还进行了W下探究：
[0019] ①将夏澄果皮洗净惊干，50°C烘干后粉碎过筛，之后按照料液比为12. 5ml/g分别 加入石油酸、无水乙醇、丙酬、乙酸乙醋，保鲜膜封口，50°C超声波萃取40min，减压过滤，重 复Ξ次，再将收集的滤液减压浓缩制得提取物；②提取来源选择为红枯种子，提取方法同 ①；③澄油（伏令夏澄果皮提取物）。
[0020] 夏澄果皮和红枯种子的4种提取物对胶抱炭痘菌的抑制作用的研究：
[0021] 采用菌丝生长速率法进行测定：在8个240M^培养基中分别加入夏澄果皮和红枯 种子的四种提取物各lOmU摇匀后取15mL倒入直径为9cm的培养皿内，制成混有提取物的 平板培养基，其中提取物的浓度80mg/mU同时制备只含有等量4种溶剂的PDA培养基平板， 用于对照。在培养好的胶抱炭痘菌菌落边缘用灭菌的打孔器取5mm直径的菌丝块，分别移 到制备好的平板培养基上，每种提取物设置Ξ个重复，28°C光照培养72h，待对照菌落长至 培养皿2/3时，采用十字交叉法测量菌落直径，计算菌落直径平均值和菌丝生长抑制率，其 结果见下表1。
[0022] 菌丝生长抑制率（％ ) = [1-(处理菌落直径-菌饼直径）/(对照菌落直径-菌饼 直径）]X100。
[0023] 表1夏澄果皮和红枯种子的4种提取物对胶抱炭痘菌的抑制作用
[0024]
[00巧]注：表中数字为平均值+标准误，同一系列中凡小写字母不同表示在0. 05水平差 异显著（t测验），下表同。
[0026] 根据表1可知：夏澄果皮和红枯种子的四种提取物对胶抱炭痘菌都有抑制作用； 其中，夏澄果皮的乙醇提取物对胶抱炭痘菌的抑制率达54. 86%，红枯种子的乙醇提取物的 抑制率达60. 95%。
[0027] 夏澄果皮的乙醇提取物对六种病原真菌的抑制作用的研究：
[0028] 其测定方法同上述菌丝生长速率法，且具体是将胶抱炭痘菌、相橘褐色蒂腐病菌、 相橘黑腐病菌、相橘青霉菌、相橘黑斑病菌和相橘绿霉菌等六种病原真菌的菌饼分别接到 含有夏澄果皮的乙醇提取物的平板培养基上，提取物的浓度40mg/mU每个菌种设置Ξ个重 复，然后放于28Γ恒溫培养，待对照菌落长至培养皿2/3时，计算菌落直径平均值和菌丝生 长抑制率，其测定结果见下表2。
[0029] 表2夏澄果皮的乙醇提取物对六种植物病原真菌的抑制作用
[0030]
[oosli_根据表2可知：夏澄果皮的乙醇提取物对六种植物病原真菌均有不同程度的抑制 作用，其中，对相橘黑斑病菌抑菌效果最好，对相橘褐色蒂腐病菌、胶抱炭痘菌、相橘青霉菌 等抑菌效果相对较好，对相橘黑腐病菌效果稍差。
[0032] 澄油对六种病原真菌的抑制作用的研究：
[0033] 其测定方法同上述菌丝生长速率法，具体是将W上6种病原真菌的菌饼分别接 到含有上述澄油的平板培养基上，澄油的浓度50mg/mU每个菌种设置Ξ个重复，然后放于 28Γ恒溫光照培养，待对照菌落长至培养皿2/3时，计算菌落直径平均值和菌丝生长抑制 率，根据测定结果得知：澄油对6种病原真菌均有不同的抑制作用，其中，对相橘绿霉菌抑 制率77. 02%，胶抱炭痘菌等抑制率在69%W上，而对相橘黑斑病菌的抑菌效果相对较差， 但其抑菌率仍在50. 36%~88. 72%之间。
[0034] 为了明确其中的抑菌活性成分主要包括有哪些物质，本例中还对夏澄果皮、红枯 种子和澄油等相橘提取物中活性成分进行了GC-MS分析：
[003引（1)供试材料度澄果皮乙醇提取物、红枯种子乙醇提取物和澄油；
[003引似主要仪器：7890A/5975C气相色谱-质谱仪（GC-M巧
[0037] (3)夏澄果皮乙醇提取物、红枯种子乙醇提取物和澄油的GC-MS分析：分别称取 3mL供试材料中的提取物，放于20mL螺口样品瓶中，加入3.Og氯化钢，用聚四氣乙締隔垫 密封，于40°C磁力揽拌器上平衡加热15分钟，用DVB/CAR/PDMS50/30um萃取头顶空吸附 40分钟，将萃取头插入GC进样，解析5分钟；内标物的量：2uL环己酬；色谱条件：色谱柱： HP-5MS;载气：氮气1血/min:进样口溫度：250°C，不分流进样；程序升溫：35°C保持5分钟， W3°C/min升至180°C保持2分钟，再W5°C/min升至240°C，保持2分钟；质谱条件：接口