一种解淀粉芽孢杆菌和苦参碱的杀菌杀虫组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于农用杀菌剂及杀虫剂领域，具体设及一种解淀粉芽抱杆菌和苦参碱的 杀菌杀虫组合物。
【背景技术】
[0002] 解淀粉芽抱杆菌(BaciIlus amyIoliquefaciens)属革兰阳性芽抱杆菌，是一种与 枯草芽抱杆菌亲缘性很高的细菌，在自然界中分布广泛。解淀粉芽抱杆菌生长过程中可W 产生一系列具有广泛地抑制真菌和细菌的活性的代谢产物，在生物防治方面具有广阔的应 用前景，已逐步成为具有生物农药开发潜力的微生物，目前利用解淀粉芽抱杆菌防治草替 灰霉病、水稻细菌性条斑病、水稻恶苗病害的研究已有报道。但目前解淀粉芽抱杆菌在农业 生产应用过程中，还存在一些问题，筛选出的高生物活性菌株较少，农药品种制剂单一，用 药量大，防治效果不高，见效慢，有效期内活性物质如活菌数降低、芽抱活性减弱、菌株效能 不稳定等。因此，筛选高生物活性的生防菌、进一步开发高效、稳定生物农药品种并在生产 中推广应用，前景广阔，意义深远。、天然性的特点， 苦参碱(polyoxin)苦参碱是从豆科植物苦参的干燥根、植株、果实中提取制成的一种 生物碱。作为一种植物源农药，苦参碱只对特定的生物产生作用，且在大自然中能迅速分 解，最终产物为二氧化碳和水，具有特定性和天然性的特点。苦参碱的活性成分是由多组化 学结构相近和不相近的物质组成，在表现生物活性时各组成成分相辅相成，共同发挥作用， 对相应的害虫也不会直接完全毒杀，而是控制害虫生物种群数量，不易使防治对象产生抗 药性，能长期使用。与一般高毒、高残留的化学农药相比，苦参碱绿色、环保，已被广泛应用 于粮食作物，水果和蔬菜等作物晒虫、菜青虫等害虫的防治。
【发明内容】
[0003] 本发明分别采用稀释平板法分离和平板对時法筛选，获得一株对灰梨抱、灰葡萄 抱等多种真菌具有显著抑制作用的解淀粉酶芽抱杆菌(WHIG),并在此基础上提供了一种该 解淀粉芽抱杆菌和苦参碱的新型杀菌杀虫组合物，对草替灰霉病、白粉病和晒虫具有较好 的防治效果，同时极大提高了防治效率。本发明提供的杀菌杀虫组合物其中有效成分均为 生物或生物源农药，专利产品转化和推广后能大量减少化学农药的使用，同时两种有效成 分的复配扩大了药剂防治谱，减少用药次数，从而实现经济、高效、环保的发明目的。 本发明获得的生防菌株WHIG已于2015年4月15日在中国微生物菌种保藏管理委员会普 通微生物中屯、保藏，保藏编号号为CGMCC NO. 10722,分类命名为解淀粉芽抱杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。保藏单位信息如下： 单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、； 地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号； 邮编:100101; 电话:01064807355。
[0004] 本发明的技术方案如下： 采用稀释平板法从上壤中分离多株细菌，利用平板对時法，测定它们对灰梨抱、灰葡萄 抱等真菌的抑制活性，获得具有显著抑菌效果的细菌。通过形态学及种水平保守基因 gy巧 的序列相似性进行鉴定，并命名。
[0005] W筛选获得的解淀粉芽抱杆菌与和苦参碱复配得到杀菌杀虫组合物，其中解淀粉 芽抱杆菌含量为(10~50)亿CFU/g，苦参碱的质量百分数为(0.1~1)%。
[0006] 所述的杀菌杀虫组合物，最优选的解淀粉芽抱杆菌含量为20亿CFU/g，苦参碱的质 量百分数为0.3%。
[0007] 所述的杀菌杀虫组合物，其剂型加工为水悬浮剂、可湿性粉剂。采用的农用杀菌剂 助剂包括表面活性剂、分散剂、增稠剂、消泡剂、填料等各类助剂，采用的表面活性剂可W为 十二烷基苯横酸钢、下二基糞横酸钢、木质素横酸钢、木质素横酸巧、烷基酪聚氧乙締基酸、 烷基酪聚氧乙締基憐酸醋、藍麻油聚氧乙締酸等中的一种或多种;采用的增稠剂可W为黄 原胶、聚乙締醇等;采用的消泡剂可为憐酸醋类消泡剂和有机娃消泡剂中一种或多种;所采 用的填料可为白炭黑、高岭±、凹凸棒±等中的一种或多种。
[0008] 所述的杀菌杀虫组合物用于防治草替晒虫及草替灰霉病、白粉病等等多种作物虫 害和真菌性病害。
[0009]
【具体实施方式】： 下面结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明的实质并不限于下述实施例。
[0010] 实施例1 10亿CFU/g解淀粉芽抱杆菌? 0.5%苦参碱水剂的制备方法:按质量百分比(解淀粉芽抱 杆菌除外）。
[001。 解淀粉芽抱杆菌 10亿CFU/g; 苦参碱 0.5%; 木质素横酸钢 6%; 烷基酪聚氧乙締基憐酸醋 4%; 黄原胶 0.1%; 凹凸棒± 3%; 有机娃消泡剂 0.3%; 水 余量。
[0012] 制备方法:根据配方，将W上组分(解淀粉芽抱杆菌除外)按比例称量，加入球磨机 球磨30分钟，过滤，抽入分散罐高速剪切3分钟后经砂磨机充分研磨，控制固体组分粒子直 径在2微米W内，研磨结束后，称量并引入解淀粉芽抱杆菌母液，揽拌均匀，抽入分散罐高速 剪切3分钟，过滤，即得悬浮剂产品。
[0013] 实施例2 20亿CFU/g解淀粉芽抱杆菌? 0.3%苦参碱水悬浮剂的制备方法:按质量百分比(解淀粉 芽抱杆菌除外）。
[0014] 解淀粉芽抱杆菌 20亿CFU/g; 苦参碱 0.3%; 木质素横酸巧 6%; 藍麻油聚氧乙締酸 4%; 聚乙締醇 0.1%; 憐酸醋消泡剂 0.3%; 凹凸棒± 3%; 水 余量。
[001引制备方法，同实施例1。
[0016] 实施例3 30亿CFU/g解淀粉芽抱杆菌? 0.2%苦参碱水剂的制备方法:按质量百分比(解淀粉芽抱 杆菌除外）。
[0017] 解淀粉芽抱杆菌 30亿CFU/g; 苦参碱 0.5%; 木质素横酸巧 6%; 烷基酪聚氧乙締基憐酸醋 4%; 黄原胶 0.1%; 有机娃消泡剂 0.3%; 水 余量。
[0018] 制备方法：同实施例1。
[0019] 实施例4 50亿CFU/g解淀粉芽抱杆菌? 0.1%苦参碱水剂的制备方法:按质量百分比(解淀粉芽抱 杆菌除外）。
[0020] 解淀粉芽抱杆菌 50亿CFU/g; 苦参碱 0.1%; 木质素横酸巧 6%; 藍麻油聚氧乙締酸 4%; 聚乙締醇 0.1%; 憐酸醋消泡剂 0.3%; 凹凸棒± 3%; 水 余量。
[0021] 制备方法，同实施例1。
[0022] 实施例5 10亿CRJ/g解淀粉芽抱杆菌? 0.3%苦参碱可湿性粉剂的制备方法:按质量百分比。
[0023] 解淀粉芽抱杆菌 10亿肌J/g; 苦参碱 0.3%; 十二烷基苯横酸纳 2% 木质素横酸钢 4%; 白炭黑 7%; 高岭± 余量/2 ; 凹凸棒± 余量/2。
[0024] 制备方法:然后按W上组分配方(解淀粉芽抱杆菌除外）比例加入混合机混合均匀 后进行气流粉碎，粉碎完成后充分揽拌均匀，将适量解淀粉芽抱杆菌发酵液用气流粉碎产 物进行吸附，干燥，即可得可湿性粉剂产品。
[002引实施例6 10亿CRJ/g解淀粉芽抱杆菌? 0.5%苦参碱可湿性粉剂的制备方法:按质量百分比。
[0026] 解淀粉芽抱杆菌 10亿肌J/g; 苦参碱 0.5%; 十二烷基苯横酸纳 2% 木质素横酸钢 4%; 白炭黑 7%; 高岭± 余量/2 ; 凹凸棒± 余量/2。
[0027] 制备方法，同实施例5。
[002引 实施例7 10亿CRJ/g解淀粉芽抱杆菌? 1%苦参碱可湿性粉剂的制备方法:按质量百分比。
[0029] 解淀粉芽抱杆菌 10亿肌J/g; 苦参碱 8%; 木质素横酸巧 5%; 聚乙締醇 2.5% 硫酸锭 8% 白炭黑 8呢; 高岭± 余量。
[0030] 制备方法:将W上组分按配方比例(解淀粉芽抱杆菌除外)加入混合机混合均匀后 进行气流粉碎，粉碎完成后加入适量解淀粉芽抱杆菌发酵母液和少量纯化水充分揽拌均 匀，挤压造粒，烘干后即可得可湿性粉剂产品。
[0031] 在田间下测定制剂对草替晒虫、灰霉病、白粉病的防治效果： 实验方案如下： 试验作物草替，品种为：丰香;小区面积25m2，4次重复，随机排列，每个处理间设保护 行。
[0032] 供试药剂、对照药剂及用药量： 实施施例1至实施例7制剂用药量为1500g/公顷，对照药剂10亿C即/g亿解淀粉芽抱杆 菌(WHlG)WP制剂用药量为3000g/公顷，1%苦参碱可溶性粉剂制剂用药量为1500g/公顷，另 设喷清水的空白对照。于收获初期进行第一次叶面喷雾处理，7天后进行第二次施药，每次 每公顷喷施药液量为900升，均匀喷雾。施药器械为WS-16型背负式手动喷雾器。在药剂处理 前进行草替晒虫、灰霉病和白粉病基数调查，第二次施药7天后调查晒虫、灰霉病、白粉病发 生情况。
[0033] 调查方法、分级、药效计算均执行中华人民共和国国家标准，《农田药效试验准 则》。
[0034] 试验结果： 表1解淀粉芽抱杆菌?苦参碱组合物二次施药后对草替晒虫、灰霉病和白粉病的田间 防治效果
实验结果(表1)所示:7个制剂施例均对草替晒虫的防效达到70%W上，对草替灰霉病、 白粉病的防效达60% W上。施例1、实施例2、实施例6、施例7对草替晒虫的防效均达到75% W 上，实施例2、实施例3、实施例4对草替灰霉病和白粉病的防效达到65W上，试验结果见附表 Io
【主权项】
1. 一种解淀粉芽孢杆菌和苦参碱的杀菌杀虫组合物，其特征在于:所述的杀菌杀虫组 合物中，解淀粉芽孢杆菌含量为(10~50)亿CFU/g，苦参碱的质量百分数为(0.1~1)%。2. 根据权利要求1所述的杀菌杀虫组合物，其特征在于:所述的解淀粉芽孢杆菌名称为 WHIG，保存号为CGMCC NO. 10722。3. 根据权利要求1所述的杀菌杀虫组合物，其特征在于:所述的杀菌杀虫组合物剂型为 水悬浮剂和可湿性粉剂。4. 根据权利要求1所述的杀菌杀虫组合物可用于防治草莓蚜虫、草莓灰霉病、白粉病等 多种作物虫害及真菌性病害。
【专利摘要】本发明公开了一种含解淀粉芽孢杆菌和苦参碱的杀菌杀虫组合物，其包括由解淀粉芽孢杆菌和苦参碱组成的有效成分，其中添加有适宜的农用助剂，制成常用农药剂型。本发明对草莓蚜虫、草莓灰霉病和草莓白粉病等多种作物虫害和真菌病害有较好的防治效果，能提高防治效率，减少化学农药用药量，有效降低生态破坏和环境污染，对人畜、有益生物、环境安全。CGMCC No.1072220150415
【IPC分类】A01P7/04, A01N63/00, A01N43/90, A01P3/00
【公开号】CN105532735
【申请号】CN201510806657
【发明人】王学峰, 谷春艳, 苏贤岩, 胡飞
【申请人】安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2015年11月21日