一种洋桔梗开放式组织培养基及其制备方法
【专利摘要】本发明提供一种洋桔梗开放式组织培养基及其制备方法，按1L培养基重量计，所述培养基包括以下组分：蔗糖25?35g，琼脂6?12g，大蒜粗提液80?120 ml，大量元素4090mg，CaCl2·2H2O 440 mg，微量元素38.23mg；细胞分裂素1mg，铁盐65.1mg；有机物3.1mg；肌酸100mg。本发明培养基使用时无需高压灭菌，同时也无需严格的无菌操作即能实现植物在相对开放的条件下良好生长，大大降低成本，有利于将植物组织培养技术的应用与推广。
【专利说明】
一种洋桔梗开放式组织培养基及其制备方法
技术领域
[0001]本发明涉及组培技术领域，尤其涉及一种洋桔梗开放式组织培养基及其制备方法。
【背景技术】
[0002]由于传统的植物组织培养需要在严格的无菌环境条件下进行操作，对工作条件要求苛刻，操作不容易掌控，需要投入大量的人力、物力，且传统组培苗存在生长缓慢，污染严重，存活率低等问题，使得植物组织培养在实际的工农业生产中难以得到广泛应用与推广。目前兴起的开放式组织培养则是通过专门配置的培养基来使组培植物在抑菌环境下生长，使植物在相对开放的条件下可以良好生长。既能够降低成本，又利于将植物组织培养技术应用与推广到工厂化育苗生产实践中，本发明即是开发的专门针对洋桔梗开放式组培液。
【发明内容】
[0003]鉴于现有技术的不足，本发明在于提供一种洋桔梗开放式组织培养基及其制备方法，用以实现洋桔梗的开放式组织培养方法。
[0004]本发明的技术方案如下:
一种洋桔梗开放式组织培养基，其中，按IL培养基重量计，所述培养基包括以下组分: 鹿糖25-35g;
琼脂6-12g;
大蒜粗提液 80-120 ml;
细胞分裂素 Img ；
萘乙酸0.5mg;
KNO31900mg；
NH4NO31650mg；
MgSO4.7H20 370mg；
KH2PO4170mg；
CaCl2.2H20 440mg；
MnSO4.4H20 22.3mg；
ZnSCU.7H2O 8.6mg ；
H3BO36.2mg ；
KI0.83mg；
Na2MoC>4.7H2O 0.25mg；
CoCL2.6H2O 0.025mg；
CuSO4.5H20 0.025mg；
铁盐65.lmg;
有机物3.lmg; 肌酸10mg;
其中，大蒜粗提物浓度为3g/ml。
[0005]所述的洋桔梗开放式组织培养基，其中，按IL培养基重量计，所述培养基包括以下组分:
鹿糖30g;
琼脂9g;
大蒜粗提液 100 ml ；
细胞分裂素 Img ；
萘乙酸0.5mg;
KNO31900mg；
NH4N031650mg；
MgSO4.7H20 370mg；
KH2PO4170mg；
CaCl2.2H20 440mg；
MnSO4.4H20 22.3mg；
ZnS04.7H2O 8.6mg；
H3BO36.2mg ；
KI0.83mg；
Na2Mo04.7H2O 0.25mg；
CoCL2.6H2O 0.025mg；
CuSO4.5H20 0.025mg；
铁盐65.lmg;
有机物3.lmg;
肌酸10mg;
其中，大蒜粗提物浓度为3g/ml。
[0006]所述的洋桔梗开放式组织培养基，其中，按IL培养基重量计，所述铁盐由以下组分组成:
Na2~EDTA 37.3mg；
FeSO4.4H20 27.8mg0
[0007]所述的洋桔梗开放式组织培养基，其中，按IL培养基重量计，所述有机物由以下组分组成:
甘氨酸2mg;
盐酸吡哆醇VB6 0.5mg；
盐酸硫铵素VB1 0.lmg；
烟酸0.5mg。
[0008]所述的洋桔梗开放式组织培养基，其中，所述大蒜粗提物通过如下过程制备:取去皮大蒜，剁碎后加适量70%乙醇，用榨汁机榨取蒜汁，然后通过2层纱布过滤，取滤液，将滤液通过40001'/111；[11离心机离心8111；[11，取上清液，用70%乙醇定容至1001111，得到3.(^/111]^的大蒜粗提液，于4°C保存。
[0009]—种如上所述的洋桔梗开放式组织培养基的制备方法，其中，所述方法为:将除蔗糖、琼脂、大蒜粗提物之外的组分按照预定分量称取并混合，使用0.5mol/L盐酸溶液和
0.5mol/L氢氧化钠溶液将培养基液调PH5.8-5.9,按比例称取加入蔗糖、琼脂后加热煮融混匀，待培养基冷却至50°C时加入大蒜粗提物，制得所需培养基。
[0010]有益效果:本发明提供一种洋桔梗开放式组织培养基及其制备方法，该培养基使用时无需高压灭菌，同时也无需严格的无菌操作即能实现植物在相对开放的条件下良好生长，大大降低成本，有利于将植物组织培养技术的应用与推广。
【具体实施方式】
[0011]本发明提供一种洋桔梗开放式组织培养基及其制备方法，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0012]本发明的洋桔梗开放式组织培养基，其中，按IL培养基重量计，所述培养基包括以下组分:
鹿糖25-35g;
琼脂6-12g;
大蒜粗提液 80-120 ml;
细胞分裂素 Img ；
萘乙酸0.5mg;
KNO31900mg;
NH4NO31650mg；
MgSO4.7H20 370mg；
KH2PO4170mg；
CaCl2.2H20 440g；
MnSO4.4H20 22.3mg；
ZnSCU.7H2O 8.6mg ；
H3BO36.2mg ；
KI0.83mg；
Na2Mo04.7H2O 0.25mg；
CoCL2.6H2O 0.025mg；
CuSO4.5H20 0.025mg；
铁盐65.lmg;
有机物3.lmg;
肌酸10mg;
其中，大蒜粗提物浓度为3g/ml ο
[0013]较佳实施例中，按IL培养基重量计，所述培养基包括以下组分:
庶糖30g;
琼脂9g;
大蒜粗提液 100 ml; 细胞分裂素 Img ；
萘乙酸0.5mg;
KNO31900mg；
NH4N031650mg；
MgSO4.7H20 370mg；
KH2PO4170mg；
CaCl2.2H20 440g；
MnSO4.4H20 22.3mg；
ZnS04.7H2O8.6mg；
H3BO36.2mg ；
KI0.83mg；
Na2Mo04.7H2O 0.25mg；
CoCL2.6H2O 0.025mg；
CuSO4.5H20 0.025mg；
铁盐65.lmg;
有机物3.lmg;
肌酸10mg;
其中，大蒜粗提物浓度为3g/ml ο而所述铁盐由以下组分组成:
Na2~EDTA37.3mg；
FeSO4.4H20 27.8mg0
[0014]进一步地，所述有机物由以下组分组成:
甘氨酸2mg;
盐酸吡哆醇VB6 0.5mg；
盐酸硫铵素VB1 0.lmg；
烟酸0.5mg。
[0015]具体实施例中，所述大蒜粗提物通过如下过程制备:取去皮大蒜，刹碎后加适量70%乙醇，用榨汁机榨取蒜汁，然后通过2层纱布过滤，取滤液，将滤液通过4000r/min离心机离心8min，取上清液，用70%乙醇定容至10ml，得到3.0g/mL的大蒜粗提液，于4°C保存。
[0016]本发明还提供一种如上所述的洋桔梗开放式组织培养基的制备方法，其中，所述方法为:将除蔗糖、琼脂、大蒜粗提物之外的组分按照预定分量称取并混合，使用0.5mol/L盐酸溶液和0.5mol/L氢氧化钠溶液将培养基液调PH5.8-5.9,按比例称取加入蔗糖、琼脂后加热煮融混匀，待培养基冷却至50°C时加入大蒜粗提物，制得所需培养基。
[0017]本发明提供一种洋桔梗开放式组织培养基及其制备方法，该培养基使用时无需高压灭菌，同时也无需严格的无菌操作即能实现植物在相对开放的条件下良好生长，大大降低成本，有利于将植物组织培养技术的应用与推广。
[0018]应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
【主权项】
1.一种洋桔梗开放式组织培养基，其特征在于，按IL培养基重量计，所述培养基包括以下组分: 鹿糖25-35g; 琼脂6-12g; 大蒜粗提液80-120 ml; 细胞分裂素Img; 萘乙酸0.5mg; KNO31900mg; NH4NO31650mg； MgSO4.7H20370mg； KH2PO4170mg； CaCl2.2H20440mg； MnSO4.4H2022.3mg； ZnSCU.7H2O8.6mg; H3BO36.2mg ； KI0.83mg； Na2Mo04.7H2O0.25mg; CoCL2.6H2O0.025mg； CuSO4.5H200.025mg； 铁盐65.1mg; 有机物3.1mg; 肌酸10mg; 其中，大蒜粗提物浓度为3g/ml ο2.根据权利要求1所述的洋桔梗开放式组织培养基，其特征在于，按IL培养基重量计，所述培养基包括以下组分: 庶糖30g; 琼脂9g; 大蒜粗提液100 ml; 细胞分裂素Img; 萘乙酸0.5mg; KNO31900mg; NH4N0s1650mg； MgSO4.7H20370mg； KH2PO4170mg； CaCl2.2H20440mg； MnSO4.4H2022.3mg； ZnSCU.7H2O8.6mg; H3BO36.2mg ； KI0.83mg； Na2Mo04.7H2O 0.25mg； CoCL2.6H2O 0.025mg； CuSO4.5H20 0.025mg； 铁盐65.1mg; 有机物3.1mg ； 肌酸10mg; 其中，大蒜粗提物浓度为3g/ml。3.根据权利要求2所述的洋桔梗开放式组织培养基，其特征在于，按IL培养基重量计，所述铁盐由以下组分组成: Na2~EDTA37.3mg； FeSO4.4H20 27.8mg04.根据权利要求2所述的洋桔梗开放式组织培养基，其特征在于，按IL培养基重量计，所述有机物由以下组分组成: 甘氨酸2mg; 盐酸吡哆醇VB6 0.5mg； 盐酸硫铵素VB1 0.lmg； 烟酸0.5mg。5.根据权利要求1所述的洋桔梗开放式组织培养基，其特征在于，所述大蒜粗提物通过如下过程制备:取去皮大蒜，剁碎后加适量70%乙醇，用榨汁机榨取蒜汁，然后通过2层纱布过滤，取滤液，将滤液通过4000r/min离心机离心8min，取上清液，用70%乙醇定容至10ml，得到3.0g/mL的大蒜粗提液，于4°C保存。6.—种如权利要求1-5任一项所述的洋桔梗开放式组织培养基的制备方法，其特征在于，所述方法为:将除蔗糖、琼脂、大蒜粗提物之外的组分按照预定分量称取并混合，使用0.5mol/L盐酸溶液和0.5mol/L氢氧化钠溶液将培养基液调PH5.8-5.9,按比例称取加入蔗糖、琼脂后加热煮融混匀，待培养基冷却至50°C时加入大蒜粗提物，制得所需培养基。
【文档编号】A01H4/00GK105850744SQ201610309908
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年5月11日
【发明人】周权驹, 许桂莲, 陈春晓, 杨泉女, 王蕴波
【申请人】佛山科学技术学院