专利名称：同生培养法生产苏云金杆菌的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种苏云金杆菌生产的新技术，即用二种菌--苏云金杆菌和氧化葡萄糖酸杆菌混合同生工艺，生产苏云金杆菌。
苏云金杆菌制剂是一类应用广泛的生物杀虫剂。自1938年面世以来需求量逐年上升，现世界上年销售额已达10亿美元。随着现代无公害农业的发展，其需求量将会出现更大的增长。为促进该生物杀虫剂的快速发展，人们曾对制约其发展的诸多问题进行了研究，其中一个关键是降低成本。多年来，通过菌种选育，培养方式和培养条件的改善，生产成本在逐年下降，但幅度不大。价格偏高一直是影响其快速发展的一主要障碍。
本发明的目的，即针对上述情况对苏云金杆菌与氧化葡萄糖杆菌混合同生进行了系统研究，查明它们在同生中的相互间作用及最适反应状态，确定生产工艺，在高效生产2-酮基-L-古龙酸的同时，生产出苏云金杆菌，实现苏云金杆菌生产的超低成本。
本发明的主要技术特征是选苏云金杆菌并与氧化葡萄糖酸杆菌1∶20～30混合，在含1～2％山梨糖种子培养基中，在28～33℃条件下振荡同生培养20～24小时至二菌菌数之比为1/10～20，以10～15％接种量接于含山梨糖为6～14％的发酵培养液中，在28～33℃的条件下好氧发酵48～60小时至山梨糖含量降至1mg/ml以下，苏云金杆菌芽孢达109～1011个/ml，发酵清液转入2-酮基-L-古龙酸提取工艺离出菌体，残渣干燥至商品粉剂。
本发明通过苏云金杆菌与氧化葡萄糖酸杆菌混合同生，完好地将生物杀虫剂与2-酮基-L-古龙酸二类生产融为一体，可使万吨维生素C二步发酵厂每年从2-酮基-L-古龙酸收率提高中，增效2000～2500万元，从产出的苏云金杆菌中获利1000万。经济效益大，社会和环境效益显著。
实施例1.分别挑取苏云金杆菌B.tsp.529和氧化葡萄糖酸杆菌按1∶20于3升含2％山梨糖培养液中，在29℃条件下振荡培养24小时，转入0.5M3种子罐中(内含300升2％山梨糖种子培养液)，在29℃条件下培养至二菌菌数比为1/10～20，接入4M3发酵罐中(内含2800升10％山梨糖发酵培养液)，29℃好氧发酵52小时，山梨糖降至0.68mg/ml。2-酮基-L-古龙酸转化率达88.65％，较对照组合菌系提高6.4个百分点，生成的苏云金杆菌芽孢3.2×1010个/ml，达到苏云金杆菌在通常的淀粉培养基中形成的孢子量。制剂杀虫效果明显，施用适应性强。
2.选苏云金杆菌B.tsp.203与氧化葡萄糖酸杆菌混合，按上述好氧发酵48小时，山梨糖降至0.32mg/ml。2-酮基-L-古龙酸转化率达85.50％，较对照组合菌系提高3.2个百分点，生成的苏云金杆菌芽孢3.9×1010个/ml。
3.选苏云金杆菌B.tsp.553与氧化葡萄糖酸杆菌混合，按上述好氧发酵48小时，山梨糖降至0.61mg/ml。2-酮基-L-古龙酸转化率达86.44％，较对照组合菌系提高4.2个百分点，生成的苏云金杆菌芽孢3.5×1010个/ml。
权利要求
1.一种同生培养法生产苏云金杆菌，其特征在于选苏云金杆菌与氧化葡萄糖酸杆菌1∶20～30混合，在含1～2％山梨糖种子培养基中，在28～33℃条件下振荡同生培养20～24小时至二菌菌数之比为1/10～20，以10～15％接种量接于含山梨糖为6～14％的发酵培养液中，在28～33℃的条件下好氧发酵48～60小时至山梨糖含量降至1mg/ml以下，苏云金杆菌芽孢达109～1011个/ml，发酵清液转入2-酮基-L-古龙酸提取工序，残渣干燥至商品粉剂。
全文摘要
本发明涉及一种苏云金杆菌生产的新技术,即用二种菌——苏云金杆菌和氧化葡萄糖酸杆菌混合同生工艺,生产苏云金杆菌。其主要特点是选苏云金杆菌与氧化葡萄糖酸杆菌混合,在含1～2%山梨糖种子培养基中,培养种液至二菌菌数之比为1/10～20,以10～15%接种量接于含山梨糖为6～14%的发酵培养液中,好氧发酵至山梨糖含量降至1mg/ml以下,2－酮基－L－古龙酸发酵转化率达85～90%,生成的苏云金杆菌芽孢达10
文档编号C12N1/20GK1360024SQ0013434
公开日2002年7月24日 申请日期2000年12月21日 优先权日2000年12月21日
发明者张忠泽, 张成刚, 刘阳, 陈纲 申请人:张忠泽