专利名称：益生菌双层包埋微囊工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种益生菌双层包埋微囊工艺。
背景技术：
目前市场上的益生菌产品层出不穷，但大多数的益生菌产品是未经包埋处理的益生菌产品，例如酸奶、益生菌口服液或营养液、冻干菌粉等，由于人体的胃酸、胆汁酸有杀菌作用，这些益生菌进入人体后会失活，而不能发挥其理想的疗效，且不耐久存。已有技术中已有几种对益生菌产品的包埋技术，其中一种是巨包埋型益生菌，它是利用硬胶囊包裹，它能保护乳酸菌通过胃部，但是硬胶囊不易溶解、不耐久存；还有一种微胶囊包埋型益生菌产品，这种微胶囊包埋型耐久存、耐胃酸，但是热稳定性不好，水活度对它影响大，同时凝胶不易溶解，在肠道中需要4-6小时左右才能溶解释出；CNO1107518.X公开了一种活性双歧联菌株耐酸肠溶微囊，其复合肠溶性材料为漂白虫胶、羧甲基纤维素硬酯酸镁；或邻苯二甲酸醋酸纤维素、邻苯二甲酸二乙酯、司盘80、硬酯酸等，其制备方法是先将冻干菌于包衣锅中啧雾造粒，再以菌粉微粒为囊心物，以复合肠溶性材料为囊衣液，通过流化喷雾法制得；其囊心物和囊衣液的用量比例为2～3∶1～1.5(重量/体积)。这种方法较好地解决了耐久存、耐胃酸的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供另一种耐久存、耐胃酸、耐胆汁酸、能在到达小肠后立即溶解释放、吸附肠道黏膜定殖，且工艺更加简单、成本更低的益生菌的双层包埋微囊工艺。
本发明包括以下步骤①按已有技术将益生菌混合发酵培养、微过滤离心集菌；②菌奶蛋白包埋液的制备将益生菌浓缩液75％、奶蛋白15％、囊芯辅料聚乙烯吡咯烷酮PVP K30、纤维寡糖10％，在温度30℃以下、湿度55％以下、洁净度10万级的环境中进行搅拌混合30分钟，均质20分钟；③制备肠溶性胶体包膜液其复合材料为变性淀粉12-20％、阿拉伯胶4-8％、聚乙二醇6-10％，海藻酸钠4-8％，壳聚糖3-5％，60％的浓度为0.9％氯化钠混合溶解；高速剪切乳化分散，过100目筛，超声波超声15min制成混悬肠溶胶包膜液；④流化喷雾法制备包埋微囊按菌奶蛋白包埋液与肠溶性胶体的比为1∶1，控制液速5mL/min，进口温度35℃，出口温度30℃，喷嘴雾化压力0.4MPa，干燥空气流量400m3/h，再经冷冻干燥后制成成品。
制成的微囊菌粉为奶白色或奶黄色细颗粒粉末，再用这些菌粉可以制备胶囊剂、冲剂、片剂等产品。
所述益生菌可以为两岐双岐杆菌、婴儿双岐杆菌、长双岐杆菌、短双岐杆菌、青春双岐杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、嗜热链球菌.
这种双层包埋微囊工艺，益生菌外层的蛋白质及肠溶性胶体的溶解度会随水溶液的pH值而改变，最外层的胶体在胃酸中凝结，保护益生菌使它不会被胃酸、胆汁酸杀死而失活；当益生菌进入较高pH值的十二指肠时，肠溶性胶体则会自然分解溶化，释放出益生菌，同时，蛋白质层在小肠中还能缓冲胆汁及胆酸对菌体未复活前可能之伤害，一方面帮助益生菌附着在肠壁绒毛上，同时提供益生菌繁殖所需营养，藉此生长定植。另外，该包覆层还能有效隔离益生菌与外界直接接触，对温度以及空气中水分较不敏感，因此活菌浓度可以长久维持而不衰减。故这种方法生产的益生菌制剂能在常温下长期保存、进入人体后不会失活，能发挥理想的疗效，工艺更加简单、成本更低。
具体实施例方式
实施例1双歧杆菌微囊的制备1.按已有技术进行混合发酵培养双歧杆菌、微过滤离心集菌；2.菌奶蛋白包埋液的制备将双歧杆菌浓缩液75克、奶蛋白15克、囊芯辅料(聚乙烯吡咯烷酮PVP K30、纤维寡糖)10克在温度30℃以下、湿度55％以下、洁净度10万级的环境中进行搅拌混合30分钟，均质20分钟；3.制备肠溶胶包膜液变性淀粉16克、阿拉伯胶6克，聚乙二醇8克，海藻酸钠6克，壳聚糖4克，加至60毫升浓度为0.9％氯化钠溶液中，混匀，高速剪切乳化分散，过100目筛，超声波超声15min制成混悬肠溶胶包膜液。
4.流化喷雾法制备包埋微囊按菌奶蛋白包埋液与肠溶胶包膜液的比为1∶1，控制液速5mL/min，进口温度35℃，出口温度30℃，喷嘴雾化压力0.4MPa，干燥空气流量400m3/h，再经冷冻干燥后制成成品。
结果与分析细菌计数方法采用倾注平板计数法。
微胶囊形态取固定后的微胶囊反应液1滴于载玻片上，加少许龙胆紫溶液后，加盖玻片，在低倍镜下观察；可见微胶囊呈小球形，直径10～30μm，活菌聚集在微胶囊核心部位，每个微胶囊含100～200个活菌菌体。
包被率将微胶囊产品用水溶解后以4000r/min离心30min，计数沉淀物中活菌含量。未被包被的活菌为原始菌数的1％～3％，即包被率为97％以上。
性能检测结果(一)双歧杆菌冻干粉、双歧杆菌微囊在人工胃液中耐酸性能比较在人工胃液(PH1.2)中处理4h后，冻干粉、微囊的存活率比较见表1表1冻干粉、微囊的耐酸比较结果
从表1可看出冻干粉的存活率很低，双层包埋微囊的存活率达到87.8％，耐酸性大大提高。
(二)双层包埋微囊双歧杆菌在人工肠液中的溶出双层包埋微囊在人工肠液处理30min后，活菌数为1.05×1010，溶出前为1.15×1010)，其溶出率为91.3％(三)双歧杆菌冻干粉、双歧杆菌微囊的贮存稳定性实验(1)恒温加速贮存稳定性实验具体条件恒温40℃、相对湿度(RH)70％的试验环境中，结果见表2
表2恒温加速贮存期内活菌数的变化
双歧杆菌微囊经3个月恒温加速试验后，测得双歧杆菌存活率均在70％以上；相当于室温下贮存1年以上。而双歧杆菌冻干粉在3个月后活菌数不足原菌数的万分之一。
(2)长效稳定性实验双歧杆菌冻干粉及双歧杆菌微囊在23℃和30℃贮藏18个月后产品活性的比较结果是冻干粉在23℃和30℃贮藏18个月后测得双歧杆菌存活率分别为15％和0.05％，而双歧杆菌微囊在23℃和30℃贮藏18个月后测得双歧杆菌存活率分别为70％以上和48％左右。
权利要求
1.益生菌双层包埋微囊工艺，其特征在于包括以下步骤①按已有技术将益生菌混合发酵培养、微过滤离心集菌；②菌奶蛋白包埋液的制备将益生菌浓缩液75％、奶蛋白15％、囊芯辅料聚乙烯吡咯烷酮PVP K30、纤维寡糖10％，在温度30℃以下、湿度55％以下、洁净度10万级的环境中进行搅拌混合30分钟，均质20分钟；③制备肠溶性胶体包膜液其复合材料为变性淀粉12-20％、阿拉伯胶4-8％、聚乙二醇6-10，海藻酸钠4-8，壳聚糖3-5，60％的浓度为0.9％氯化钠，混合均匀，高速剪切乳化分散，过100目筛，超声波超声15min制成混悬肠溶胶包膜液；④流化喷雾法制备包埋微囊按菌奶蛋白包埋液与肠溶性胶体的比为1∶1，控制液速5mL/min，进口温度35℃，出口温度30℃，喷嘴雾化压力0.4MPa，干燥空气流量400m3/h，再经冷冻干燥后制成成品。
2.根据权利要求1所述的益生菌双层包埋微囊工艺，其特征在于所述益生菌为两岐双岐杆菌、婴儿双岐杆菌、长双岐杆菌、短双岐杆菌、青春双岐杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、嗜热链球菌。
全文摘要
本发明公开了一种益生菌双层包埋微囊工艺。是以益生菌浓缩液75％、奶蛋白15％、囊芯辅料10％与由变性淀粉12－20％、阿拉伯胶4－8％、聚乙二醇6－10，海藻酸钠4－8，壳聚糖3－5，60％的浓度为0.9％氯化钠构成的肠溶性胶体经流化喷雾法制备耐酸双层包埋肠溶微囊。这种双层包埋微囊工艺制备的产品耐久存、耐胃酸、耐胆汁酸、能在到达小肠后立即溶解释放、吸附肠道黏膜定殖，且工艺更加简单、成本更低。
文档编号C12N11/00GK1884513SQ20061003187
公开日2006年12月27日 申请日期2006年6月23日 优先权日2006年6月23日
发明者肖宏, 苏小平, 李敏艳 申请人:肖宏