专利名称：谷丙转氨酶干化学法快速测定试剂条及其制造方法
技术领域：
本发明涉及一种快速检测试剂条及其制造方法，特别是涉及一种检测谷丙转氨酶的试剂条和制造方法。
背景技术：
试剂条主要用于对人体内GPT含量进行快速定性检测，了解人体目前肝脏损伤程度及判断治疗效果，也可以对健康人群进行常规的检查以检测肝功能。目前试剂条处于开发成熟期，利用该试剂条及配套比色卡即可直接进行相关检测。这种试剂条存在的问题主要是难以对检测结果进行准确的定量。
发明内容
本发明的目的在于提供一种谷丙转氨酶干化学法快速测定试剂条及其制造方法，以使得临床上不依赖专业的仪器也能直接检测人体内GPT的含量，使得原本必须在医院内由专业人士进行的实验操作在其他任何地方，由非专业人士同样也能快速地进行并且得到相对准确的结果。
按照本发明提供的技术方安，谷丙转氨酶干化学法快速测定试剂条包括有一定硬度的硬质板条，在板条上粘附有吸附了反应物质的载体膜，反应物质包括α-酮戊二酸、L-丙氨酸及丙酮酸氧化酶与过氧化氢酶，其特征是在板条上粘附一层吸附了α-酮戊二酸的载体膜，在吸附着α-酮戊二酸的载体膜上再分别粘附一层吸附了丙酮酸氧化酶与过氧化氢酶的载体膜和吸附了L-丙氨酸的载体膜，在吸附了L-丙氨酸的载体膜上还粘附有一个用来均衡样品的网状预过滤装置，在最外层的载体膜上粘附一层透明保护膜，以保护整个反应装置。
吸附了丙酮酸氧化酶与过氧化氢酶的载体膜和吸附了L-内氨酸的载体膜相互隔开。所述试剂条还包括对应的比色卡。载体膜为一种商品化的纤维膜；反应物质还包括显色底物。
生产谷丙转氨酶干化学法快速测定试剂条的方法，其特征在于，a、制备吸附有L-丙氨酸的载体膜将250～450mM的L-丙氨酸溶液浸润载体膜，再将浸润后的载体膜在室温下晾干；b、制备吸附有丙酮酸氧化酶与过氧化氢酶的载体膜以40～120U/ml的丙酮酸氧化酶与40～120U/ml的过氧化氢酶溶液浸润载体膜，再将浸润后的载体膜在室温下晾干；c、制备吸附有α-酮戊二酸的载体膜以15～50mM的α-酮戊二酸溶液浸润载体膜，再将浸润后的载体膜在室温下晾干；d、待上述载体膜完全干燥后，按照反应顺序，先将吸附有α-酮戊二酸的载体膜粘附在硬质板条上，再在吸附有α-酮戊二酸的载体膜上粘附吸附了丙酮酸氧化酶与过氧化氢酶的载体膜和吸附了L-丙氨酸的载体膜，然后在最外层载体膜上粘附保护膜，得到本产品。
本文所述的mM指毫摩尔，为浓度单位；U/ml指每毫升多少个活性单位；U/L指每升多少活性单位。
本发明的优点是巧妙地利用干化学的原理，并创造性地将整个反应过程中的主要参与物质预先固相化，使检测GPT的过程大大缩短并且简化。现场检测只需5分钟，并且在检测过程中如果是定性或者半定量检测的话，不需要任何辅助设备，这使得现场快速检测或者家庭自检成为可能。
图1为本发明的示意图。
具体实施例方式
如图所示在一定硬度的PVC硬质板条6上粘附吸附了反应物质的载体膜，反应物质包括α-酮戊二酸、L-丙氨酸及丙酮酸氧化酶与过氧化氢酶，在板条6上粘附一层吸附了α-酮戊二酸的载体膜5，在吸附着α-酮戊二酸的载体膜5上再分别粘附一层吸附了丙酮酸氧化酶与过氧化氢酶的载体膜1和吸附了L-丙氨酸的载体膜4，在吸附了L-丙氨酸的载体膜4上还粘附有一个用来均衡样品的网状预过滤装置3，在最外层的载体膜上粘附一层透明保护膜2，以保护整个反应装置。吸附了丙酮酸氧化酶与过氧化氢酶的载体膜1和吸附了L-丙氨酸的载体膜4相互隔开。所述试剂条还包括对应的比色卡。载体膜为一种商品化的纤维膜；反应物质还包括显色底物。
生产谷丙转氨酶干化学法快速测定试剂条的方法，其特征在于，a、制备吸附有L-丙氨酸的载体膜4将L-丙氨酸溶液(250～450mM)浸润载体膜，室温下晾干；b、制备吸附有丙酮酸氧化酶与过氧化氢酶的载体膜1以丙酮酸氧化酶(40～120U/ml)与过氧化氢酶溶液(40～120U/ml)浸润载体膜，室温下晾干；c、制备吸附有α-酮戊二酸的载体膜5以α-酮戊二酸溶液(15～50mM)浸润载体膜，室温下晾干；d、待上述载体膜完全干燥后，按照反应顺序，先将吸附有α-酮戊二酸的载体膜5粘附在硬质板条6上，再在吸附有α-酮戊二酸的载体膜5上粘附吸附了丙酮酸氧化酶与过氧化氢酶的载体膜1和吸附了L-丙氨酸的载体膜4，然后在最外层载体膜上粘附保护膜2，得到本产品。
用本发明的方法制造的试剂条，因各种物质都预先被固相化，所以在规定条件下可以保存18个月，适合大规模推荐使用。
操作过程如下(1)、将试剂条按照需要数量取出，待用；(2)、采32U/L被检测者的末梢血/血浆/血清，直接滴加在试剂条上端的均衡网上；(3)、反应5～10分钟后，观察下端透明膜后的颜色；(4)、结果判断出现明显的蓝色即为阳性(超过40U/L)；无色或浅蓝色即为阴性(低于40U/L)。
本发明所述的载体膜即指吸附有反应物质的膜，一般处理方法即将反应物质融解于溶液中，然后用膜吸附该溶液，加以干燥即得到载体膜，在使用时，由于溶液的复融作用，原来被吸附的反应物质被重新释放出来参与反应。
权利要求
1.一种谷丙转氨酶干化学法快速测定试剂条，包括有一定硬度的硬质板条(6)，在板条(6)上粘附有吸附了反应物质的载体膜，反应物质包括α-酮戊二酸、L-丙氨酸及丙酮酸氧化酶与过氧化氢酶，其特征是在板条(6)上粘附一层吸附了α-酮戊二酸的载体膜(5)，在吸附着α-酮戊二酸的载体膜(5)上再分别粘附一层吸附了丙酮酸氧化酶与过氧化氢酶的载体膜(1)和吸附了L-丙氨酸的载体膜(4)，在吸附了L-丙氨酸的载体膜(4)上还粘附有一个用来均衡样品的网状预过滤装置(3)，在最外层的载体膜上粘附一层透明保护膜(2)，以保护整个反应装置。
2.如权利要求1所述的谷丙转氨酶干化学法快速测定试剂条，其特征在于吸附了丙酮酸氧化酶与过氧化氢酶的载体膜(1)和吸附了L-丙氨酸的载体膜(4)相互隔开。
3.如权利要求1所述的谷丙转氨酶干化学法快速测定试剂条，其特征在于所述试剂条还包括对应的比色卡。
4.如权利要求1所述的谷丙转氨酶干化学法快速测定试剂条，其特征在于载体膜为一种商品化的纤维膜；反应物质还包括显色底物隐性色素。
5.一种生产谷丙转氨酶干化学法快速测定试剂条的方法，其特征在于，a、制备吸附有L-丙氨酸的载体膜(4)将250～450mM的L-丙氨酸溶液浸润载体膜，再将浸润后的载体膜在室温下晾干；b、制备吸附有丙酮酸氧化酶与过氧化氢酶的载体膜(1)以40～120U/ml的丙酮酸氧化酶与40～120U/ml的过氧化氢酶溶液浸润载体膜，再将浸润后的载体膜在室温下晾干；c、制备吸附有α-酮戊二酸的载体膜(5)以15～50mM的α-酮戊二酸溶液浸润载体膜，再将浸润后的载体膜在室温下晾干；d、待上述载体膜完全干燥后，按照反应顺序，先将吸附有α-酮戊二酸的载体膜(5)粘附在硬质板条(6)上，再在吸附有α-酮戊二酸的载体膜(5)上粘附吸附了丙酮酸氧化酶与过氧化氢酶的载体膜(1)和吸附了L-丙氨酸的载体膜(4)，然后在最外层载体膜上粘附保护膜(2)，得到本试剂条。
全文摘要
本发明公开了谷丙转氨酶干化学法快速测定试剂条及其制造方法。目的是提供一种能快速半定量/定量检测谷丙转氨酶在人体内的含量是否正常的试剂条及其制造方法。检测谷丙转氨酶(GPT)的试剂条，包括用来支撑整个反应的PVC硬质板条，板条上带有吸附着L－丙氨酸和丙酮酸氧化酶、α－酮戊二酸的载体膜。本发明的产品为一次性检测用耗材，属于快速微量检测。GPT的检测范围为0～1000U/L，对于快速判断人体内GPT的含量具有重要意义。
文档编号C12Q1/52GK1987461SQ200610161430
公开日2007年6月27日 申请日期2006年12月12日 优先权日2006年12月12日
发明者盛青松 申请人:盛青松