专利名称：一种高活性医用光合菌的培养方法和固体活菌的加工方法
技术领域：
本发明涉及医药领域，尤其涉及一种高活性医用光合菌的培养及药用固体 光合菌活菌的加工方法。
背景技术：
自20世纪70年代以来，日本、美国、德国、英国等广泛开展了光合细 菌的研究开发，因其含有丰富的营养成分和生物活性物质而被开发成多种保 健食品。光合细菌能够增强动物的抗氧化能力，经动物实验表明其具有延緩 衰老、免疫调节的作用。据美国商务部透露，仅1992年，美国保健品中约有 5.5% ~6.5%的品种加有不同比重的光合细菌菌液。美国太空署曾拨款3200 万美元，开发研制在宇宙飞船内制造光合细菌食品的新技术，为宇航员长期 滞留太空提供食品保障。其中最具代表性的当属新奥尔良■贝鲁斯潘有限公 司投产的PGH浓缩液，富含维生素、人体所需的微量元素、氨基酸等营养成 分，可调节内分泌，提高机体自身的免疫力。还有一种叫"米格申"的含光合 细菌菌液的饮料在健全中枢神经系统，预防老年痴呆等方面效果显著。在曰 本，光合细菌饮料也因具有延緩衰老的作用以及在防止心脏病、脑梗死、癌 症等方面的神奇功效而备受青睐。日本生物化学工业公司生产的一种"紫色光 合细菌保健食品"还申请了专利。我国已经有人将光合细菌和其他益生菌一起 制成EM(effective microorganisms，有益微生物群)菌剂，并进行了相关报道。 由中国科学院研究生院与山西安泰生物工程公司共同研制开发的"安泰369 口 服液"就是利用光合细菌作为母液发酵制成的微生态保健饮品，经试验表明其 具有延緩衰老、抑制肿瘤、免疫调节等多种功效。王梦亮等于1995年开发了 一种经过微生物发酵而形成的含有光合细菌菌体蛋白及其代谢分泌物、有机 硒化合物和中草药发酵物的混合物，并申请了中国专利。此光合细菌制剂能 够减少X射线引起的白细胞减少及染色体变异，能够增加小鼠的巨嗟细胞吞 噬量，具有非常明显的保健治疗作用。
由于光合细菌含有丰富的营养成分和生物活性物质，对人体具有保健作 用，因此，其在医药保健品方面的应用越来越受到国内外研究者的关注。有 研究表明，在光合细菌培养基中添加一定浓度的木瓜、栝楼、女贞子、郁金 等中草药的浸提液，不仅可以明显促进光合细菌的生长，还可以提高其抑菌 作用。且光合细菌本身能够完全或部分对抗免疫抑制剂的免疫抑制作用，对
3小鼠的免疫器官与免疫功能有一定的保护作用。近年来，利用光合细菌的代 谢作用对中药进行生物技术处理，又开辟一新的研究领域。太原康强药业有 限公司研究开发的一种以中草药为原料，利用现代生物工程技术研制而成的 富硒光合细菌制剂，能够明显提高癌症患者的免疫功能，并且具有一定的抑 瘤作用。刘俊清等利用光合细菌，以还原态硒化物发酵合成了多种生物活性 的有机硒化合物，并且制成了以硒蛋白、硒酸多糖和富硒卟啉色素为主要成 分的"康强硒"制剂，此制剂能够辅助治疗恶性肺瘤，提高患者的免疫力等。史 国富等对康强胶嚢的应用进行了详细的报道，并高度评价了其采用中药复方 与光合细菌发酵技术相结合的独特制备工艺技术，指出该技术是传统中药与 现代生物技术的结合应用，对以后的中药研究、应用、开发作出了新的贡献。 刘继彪等用光合细菌菌液发酵中药，制成了口服液、冷冻干燥产品等中药制 剂，该制剂能够纠正机体内环境微量元素平衡紊乱，促使癌细胞向正常细胞 转化并最终全部恢复成正常细胞，对恶性肿瘤治疗有较显著的疗效，并申请 了国家专利。
光合细菌作为一种营养丰富的光能自养菌，在人类生活的多方面都具有 重要作用，并且已经在世界上许多国家得到广泛应用。随着现代工业的发展， 河流、湖泊、近海水域、池塘、养殖池等受污染的机会增加，人们的生活水 平不断提高，对鱼、肉、虾产品需求量逐年增大，水域污染对水产养殖业造 成巨大的危害，为解决这些问题，减少有机废物的排放并合理处理，有必要 扩大光合细菌的养殖数量增加它的活性来满足环保、养殖、种植等需求，而 选择合适的菌林以及适当的培养条件非常关键。所以高活性光合细菌的优化 培养技术非常需求。
光合细菌虽然是一个非常古老的微生物菌种，但在医药保健品方面的应用 国外早已大量使用，而在我国才刚刚起步。近年来，随着细胞务子生物学的 应用与发展，生物技术为中药研究提供了全新的思路，在中药开发中具有很 大的优势与广阔的应用前景。其中，中草药及其有效生物活性成分的发酵生 产在具有中国特色的生物技术医药工业中应用最广泛。用光合细菌对中药进 行生物技术处理是这一技术领域新的探索，为现代新药的研究开发，提供了 一种全新的思路和方法，具有极大的研究价值，目前光合菌培募大部分应用 于农业、养殖业及环保产业，因此迫切需要培养高活性医药用光合菌，适用 于医药产业的需要。在中国申请号为20061000126.6的中国专利申请中公开一种光合菌培养方 法，其包括提供经滤菌处理的培养液；使该项培养液盛装于透明塑料瓶内； 添加少量光合菌种原至前述透明塑料瓶内进行培养。上述发明的优势主要是 采用市面上常见的透明宝特瓶为光合菌的培养容器，光源采用最自然的太阳 光，在生产设备的投资方面可节省昂贵的发酵槽投资成本。其培养条件为培 养温度10至37°C ，优选为15至35, 。C光照度为800至12000Lux，优选为 1000至10000Lux,培养14至15天。 '
也就是说，随着细胞分子生物学的应用与发展，生物技术为中药研究提 供了全新的思路，用光合细菌对中药进行生物技术处理是这一技术领域新的 探索，为现代新药的研究开发，提供了一种全新的思路和方法，具有极大的 研究价值，因此迫切需要培养高活性医药用光合菌和药用固体光合菌活菌适 应医药产业的需要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种培养高活性医用光合菌的培养方法 本发明的第二目的在于提供一种药用固体光合菌活菌的加工方法。 一种高活性医用光合菌的培养方法，包括
在1000公斤的透明的PET树脂桶内加800公斤纯化水及培养基，所述培 养基配方包括醋酸钠3.7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氬钾l公斤、磷酸氬 二钾1公斤、硫酸镁1公斤、氯化钙0.8公斤、碳酸氢钠0.5^>斤、酵母浸膏 l公斤(以上均符合食品添加剂的标准)、符合食用标准的氯化钠l公斤、 符合药用标准的维生素B1 100克、维生素B2 100克、维生素B6 100克、 生物素D 2公斤、亚硒酸钠300克、葡萄糖酸锌500克等；
于洁净的日光温室内，温度为25°C—3°C2,加菌种200公斤，自然光照条 件下培养7--IO天，获得培养成熟的光合菌(检测每毫升大于60个亿)。
一种药用固体光合菌活菌的加工方法，包括
在1000公斤的透明的PET树脂桶内加800公斤纯化水及培乔基，所述培 养基配方包括醋酸钠3.7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氬钾l公斤、磷酸氬 二钾1公斤、硫酸镁1公斤、氯化钙0.8公斤、碳酸氢钠0.5公斤、酵母浸膏 l公斤(以上均符合食品添加剂的标准)、符合食用标准的氯化钠l公斤、符 合药用标准的维生素B1 100克、维生素B2 100克、维生素B6 100克、 生物素D2公斤、亚硒酸钠300克、葡萄糖酸锌500克等； .
5于洁净的日光温室内，温度为25-°C—32°C,加菌种200公斤，自然光照条 件下培养7…10天,获得培养成熟的光合菌(检测每毫升大于60个亿)；
光合菌100公斤、低聚异构麦芽糖6.5公斤、蔗糖IO公斤、生物素…D 3 公斤、维生素E 2公斤于零下-80。C在2小时内冻成冰，然后在50。C抽真空， 蒸发干得光合菌冻干粉,全精工包包装在铝箔袋备用。全部生产过程在100万 级净化，符合GMP生产要求的条件下完成。 本专利和以前专利比4交具有以下优点
1、 产量大、工艺简单，台湾苏先生专利使用塑料瓶培养产量小，操作烦 瑣，使用PET1000公斤的塑料桶培养产量大。
2、 以前专利使用PE、 PVC塑料瓶培养不利于培养出高生物活性的光合 菌，因为PE和PVC的助剂经太阳光照射后有部分助剂挥发影响光合菌的活 性，因此这种方法培养的光合菌液生物活性低，同时残留有害物质于菌液不 适合药用。
3、 使用洁净的日光温室比较好控制温度，使用空调和遮阳网，温度控制的 好，不利于杂菌生长，保障了光合菌的菌抹的纯度，而以前专利只是开放性培 养，难免温度过高与过低影响培养质量和菌抹纯度。
4、 本专利使用的培养基提供了全面的多种营养元素，保障了光合菌合成 分泌的需求，保障可以合成更多的生物活性物质而以前专利培养基营养比较 单一，不能合成更多的活性分泌物。
5、 本专利使用的培养基全部符合食品、药品生产的要求，最终产品符合 药用要求。
6、 使用大桶培养，不仅产量高，而且有利于緩冲太阳光的照射吸光温度 过高，台湾苏先生专利无法做无法作到緩沖太阳光照射后的温度升的快和降 的快的缺点
7、 生产的菌液活菌数量，菌液中活性成分的含量大大提高，'前任专利因 为上述种种条件无法生产高生物活性适合药用的光合菌。
8、 本专利培养的时间短，不仅可以提高产量而且可以大大节约人工成本。
9、 本专利提供的培养基营养更全面，光合菌利用可以产生更多生物活性物质。
具体实施例方式
6以下具体说明本发明。一种高活性医用光合菌的培养方法，包括在1000公斤的透明的PET树脂桶内加800公斤纯化水及培养基，所述培 养基配方包括醋酸钠3.7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氢钾l公斤、磷酸氬 二钾1公斤、硫酸镁1公斤、氯化钙0.8公斤、碳酸氢钠0.5公斤、酵母浸膏 l公斤(以上均符合食品添加剂的标准)、符合食用标准的氯化钠l公斤、 符合药用标准的维生素B1 100克、维生素B2 100克、维生素B6 100克、 生物素D2公斤、亚硒酸钠300克、葡萄糖酸锌500克等； -于洁净的日光温室内，温度为2°C5-32°C，加菌种200公斤，自然光照条 件下培养7…10天,获得培养成熟的光合菌(检测每毫升大于60个亿)。一种药用固体光合菌活菌的加工方法，包括在1000公斤的透明的PET树脂桶内加800公斤纯化水及培养基，所述培 养基配方包括醋酸钠3.7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氬钾l/》斤、磷酸氮 二钾1公斤、硫酸镁1公斤、氯化钾0.8公斤、碳酸氲钠0.5公斤、酵母浸膏 l公斤(以上均符合食品添加剂的标准)、符合食用标准的氯化钠l公斤、 符合药用标准的维生素B1 100克、维生素B2 100克、维生素B6 100克、 生物素D 2 />斤、亚竭酸钠300克、葡萄糖酸锌500克等；于洁净的日光温室内，温度为25-°C—32°C，加菌种200公斤，'自然光照条 件下培养7…10天,获得培养成熟的光合菌(检测每毫升大于60个亿)；光合菌100公斤、低聚异构麦芽糖6.5公斤、蔗糖10公斤、生物素D 3 公斤、维生素E 2公斤于零下-80。C在2小时内冻成冰,然后在50。C抽真空， 蒸发干得光合菌冻干粉(水分小于5%),全精工包包装在铝箔袋夸，全部生产 过程在100万级净化，符合GMP生产要求的条件下完成。实例一1、培养基配方醋酸钠3。 7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氬钾 1公斤、磷酸氢二钾1公斤、硫酸镁1公斤、氯化钙0.8公斤、碳酸氬钠0.5 公斤、酵母浸膏1公斤(以上均符合食品添加剂的标准)、氯化钠1公斤(食 用标准)、(后边的符合药用标准)维生素B1 IOO克、维生素.B2 IOO克、 维生素B6 100克、生物素D2公斤、亚硒酸钠300克、葡萄糖酸锌500克 等、纯化水800公斤等。2、培养方法；在1000公斤的透明的PET树脂桶内加800公斤纯化水及上 述培养基，于洁净的日光温室内，温度为25-°C—3°C2，加菌种200公斤，自然光照条件下培养7…10天，检测光合菌的数量可高达80亿个/毫升， 一般控 制在70…80亿个/毫升为培养成熟。
3、最终产品冻干，冻干的方法如下光合菌IOO公斤、低聚异构麦芽糖6。 5公斤、蔗糖10公斤、生物素…D 3公斤、维生素E 2公斤于零下-80度 在2小时内冻成冰,然后在50度抽真空,蒸发干得光合菌冻干粉.精工包包装在 铝箔袋备用,全部过程在100万及净化条件下完成，最后4全验无杂菌.冻干的光 合菌粉240个亿/克活菌，全部生产过程在IOO万级净化，符合GMP生产要 求的条件下完成。
实例二、培养基配方醋酸钠5公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氢钾O。 5 公斤、磷酸氢二钾O。 5公斤、硫酸镁1公斤、氯化钙0.8公斤、碳酸氢钠1 公斤、酵母浸膏1公斤(以上均符合食品添加剂的标准)、氯化钠1公斤(食
用标准)、(后边的符合药用标准)维生素B1 IOO克、维生素B2 IOO克、 维生素B6 100克、生物素D 2公斤、亚硒酸钠300克、葡萄糖酸锌500 克等、纯化水800公斤等。
2、培养方法；在1000公斤的透明的PET树脂桶内加800公斤纯化水及上 述培养基，于洁净的日光温室内，温度为25—°C-32°C,加菌种2'00公斤，自 然光照条件下培养7…10天，检测光合菌的数量可高达70亿个/毫升， 一般控 制在70…80亿个/毫升为培养成熟。
最终产品冻干，冻干的方法如下光合菌100公斤、低聚异构麦芽糖6。 5 公斤、蔗糖10公斤、生物素…D 3公斤、维生素E 2公斤于零下-80度在 2小时内冻成冰，然后在50度抽真空,蒸发干得光合菌冻干粉.全#工包备用,全 部过程在100万及净化条件下完成,最后检验无杂菌.冻干的光合菌粉200个亿 /克活菌活菌。全精工包包装在铝箔袋备用,冻干的光合菌粉200个亿/克活菌个 活菌，全部生产过程在IOO万级净化，符合GMP生产要求的条件下完成。
以上公开的仅为本发明的几个具体实施例，但本发明并非局限于此，任 何本领域的技术人员能思之的变化，都应落在本发明的保护范围内。
权利要求
1、一种高活性医用光合菌的培养方法，其特征在于，包括在1000公斤的透明的PET树脂桶内加800公斤纯化水及培养基，所述培养基配方包括醋酸钠3.7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氢钾1公斤、磷酸氢二钾1公斤、硫酸镁1公斤、氯化钙0.8公斤、碳酸氢钠0.5公斤、酵母浸膏1公斤，上述原料符合食品添加剂的标准，符合食用标准的氯化钠1公斤、符合药用标准的维生素B1 100克、维生素B2 100克、维生素B6 100克、生物素D2公斤、亚硒酸钠300克、葡萄糖酸锌500克；于洁净的日光温室内，温度为25℃---32℃，加菌种200公斤，自然光照条件下培养7---10天，获得培养成熟的光合菌。
2、 一种固体光合菌活菌的加工方法，其特征在于，包括在1000公斤的透明的pet树脂桶内加800公斤纯化水及培养基，所述培 养基配方包括醋酸钠3.7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氢钾l公斤、磷酸氢 二钾1公斤、硫酸镁1公斤、氯化4丐0.8公斤、碳酸氢钠0.5公斤、酵母浸膏 l公斤，上述原料符合食品添加剂的标准符合食用标准的氯化钠l公斤，以上 原料均符合食品添加剂标准、符合药用标准的维生素b1 100克、维生素b2 100克、维生素b6 100克、生物素d2公斤、亚硒酸钠300克、.葡萄糖酸锌 500克；于洁净的日光温室内，温度为25-°c—3°c2，加菌种200公斤，自然光照条 件下培养7…io天,获得培养成熟的光合菌，检测每毫升60个亿以上；光合菌100公斤、低聚异构麦芽糖6.5公斤、蔗糖10公斤、生物素d 3 公斤、维生素e 2公斤于零下-8(rC在2小时内冻成水,然后在50。c抽真空， 蒸发干得水分不超过5%的光合菌冻干粉，精工包包装在铝箔袋备用，全部生 产过程在100万級净化，符合gmp生产要求的条件下完成。
全文摘要
一种高活性医用光合菌的培养方法，包括在1000公斤的透明的PET树脂桶内加800公斤纯化水及培养基，所述培养基配方包括醋酸钠3.7公斤、醋酸氨2公斤、磷酸二氢钾1公斤、磷酸氢二钾1公斤、硫酸镁1公斤、氯化钙0.8公斤、碳酸氢钠0.5公斤、酵母浸膏1公斤，以上均符合食品添加剂的标准，符合食用标准的氯化钠1公斤、符合药用标准的维生素B1 100克、维生素B2 100克、维生素B6 100克、生物素D2公斤、亚硒酸钠300克、葡萄糖酸锌500克等；于洁净的日光温室内，温度为25℃-32℃，加菌种200公斤，自然光照条件下培养7-10天，获得培养成熟的光合菌检测每毫升60个亿以上)。本发明还公开了对药用固体光合菌进行加工的工艺。本发明为现代新药的研究开发，提供了一种全新的思路和方法，具有极大的研究价值。
文档编号C12N1/20GK101624575SQ200810249539
公开日2010年1月13日 申请日期2008年12月26日 优先权日2008年12月26日
发明者于建敏, 红 周, 蒙 魏 申请人:魏 蒙;周 红;于建敏