专利名称：一株可产黄樟油素及桉叶油素的真菌的制作方法
技术领域：
本发明涉及一株从宜宾油樟植株内分离得到的内生真菌，编号为YG42，于2009年 6月19日，以PDA斜面培养的方式保存于北京市朝阳区大屯路中国微生物菌种保藏管理委 员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC3141，分类命名为稀丝头孢霉属Haplotrichum sp.。
背景技术：
宜宾樟油是从油樟树的叶经水蒸气蒸馏提炼出来的，由几十种不同沸点的化学物 质组成，以1，8_桉叶油素、萜品醇、黄樟油素为主要成分，主要用于医药和香料工业。内生 真菌与宿主协同进化，可能合成植物的某些活性代谢产物，可以考虑研究利用内生真菌与 油樟的特殊关系，工业化生产樟油或人为调控油樟内生真菌区系使其早产丰产樟油，从而 解决樟油资源紧缺，来源单一的问题。
发明内容
1株产1，8_桉叶油素、α-萜品醇、黄樟油素的真菌，属于稀丝头孢霉属。采用市售马铃薯及成都科龙试剂厂出产的分析纯试剂配置马铃薯琼脂培养基。培养5天后，菌落直径2 3cm，菌落整体呈绒毛状，正面中心呈绿色，向外渐变为 鹅黄色、白色，背面呈红色(产水溶性红色素)；分生孢子梗多侧生在菌丝上，不分枝，表面 平滑，分生孢子纺锤形，孢痕明显；气生菌丝色较暗。该真菌能够在人工培养条件下产生3种主要的樟油组分物质1，8_桉叶油素、 α-萜品醇、黄樟油素。其中1，8_桉叶油素产量为0.73%，黄樟油素产量为0.对％。发酵 液中1，8_桉叶油素、α-萜品醇、黄樟油素的总含量可达16g/L。
具体实施例方式(1)对该菌株进行诱变育种后工业化发酵生产1，8_桉叶油素、α -萜品醇、黄樟油 素；(2)作为微生态菌剂返接油樟植株，促使其早产、丰产樟油。
图1为0. 5g/mLl，8-桉叶油素与0. 5g/mL黄樟油素混合标样。图2为该油樟内生 真菌发酵液的GC-MS图谱，其中保留时间为9. 433min的峰经质谱数据库检索，与α -萜品 醇的相似度为83%，鉴定为α-萜品醇。序列表<110>宜宾学院，王涛，游玲，张超，魏琴，杜江，黄兴海<120> 一株可产黄樟油素及桉叶油素的真菌<140>2009101638057<141>2009-10-16<160>2 <210>1 <211>1104 <212>DNA
<213> 稀丝头孢霉属(Haplotrichum sp.)
<220>
<22 DmRNA
<400>1gtgatacgagtgcgggctcgcggcccacctcccacccgtgtctctctctacctgttgctt60
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权利要求
1.一株真菌，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的编号为CGMCC3141， 鉴定为稀丝头孢霉属Haplotrichum sp.，其特征是培养5天后，菌落直径2 3cm，菌落整 体呈绒毛状，正面中心呈绿色，向外渐变为鹅黄色、白色，背面呈红色(产水溶性红色素)； 分生孢子梗多侧生在菌丝上，不分枝，表面平滑，分生孢子纺锤形，孢痕明显；气生菌丝色较 暗。其ITS特征序列与Genebank已发表的对应序列最高相似度为97%。
2.根据权利要求1所述的真菌，其特征是能够在人工培养条件下产生3种主要的樟 油组分物质1，8_桉叶油素、α-萜品醇、黄樟油素。其中1，8_桉叶油素产量为0.73%，黄 樟油素产量为0. 。3种成分总量在发酵液中的总含量可达16g/L，相比目前油樟叶出油 率2%，具备一定开发潜力。
全文摘要
一株分离自油樟植株的内生真菌，鉴定为稀丝头孢霉属Haplotrichum sp.，该真菌1，8-桉叶油素产量为0.73％，黄樟油素产量为0.24％。其发酵液中1，8-桉叶油素、α-萜品醇、黄樟油素的总含量可达16g/L。
文档编号C12R1/645GK102071144SQ20091016380
公开日2011年5月25日 申请日期2009年8月6日 优先权日2009年8月6日
发明者张超, 杜江, 游玲, 王涛, 魏琴, 黄兴海 申请人:宜宾学院, 王涛