专利名称：一种腈水解酶及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明属于酶学领域，具体地说，涉及一种微生物来源的腈水解酶及其制备方法 和应用。
背景技术：
腈水解酶是一种具有广泛底物适应性的生物催化剂，可以催化腈水解生成相应的 羟基酸。由于天然腈化物的广泛存在，使很多微生物都或多或少具有降解腈化物的能力。目 前已有多种微生物来源的腈水解酶被报道，其反应底物多种多样，具体如以下表1所示表1、用于制备腈水解酶的菌株及其对应的水解底物
权利要求
1.一种微生物来源的腈水解酶，其特征在于所述腈水解酶的氨基酸序列如SEQ IDNO 20 所示。
2.如权利要求1所述的腈水解酶，其特征在于所述腈水解酶的DNA序列如SEQIDNO 19所示。
3.如权利要求1所述的腈水解酶，其特征在于所述腈水解酶来源于 Arthrobacternitroguajacolicus 菌。
4.如权利要求3所述的腈水解酶，其特征在于所述ArthrcAacter nitroguajacolicus 菌的保藏号为 CGMCC No. M05。
5.如权利要求1 4中任一项所述的腈水解酶的制备方法，其特征在于所述方法包 括对Arthrobacter nitroguajacolicus菌进行发酵以获得腈水解酶。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于所述Arthrobacternitroguajacolicus菌 的保藏号为CGMCC No. M05。
7.如权利要求5或6所述的方法，其特征在于用于发酵的培养基的配方如下 葡萄糖 1. 5wt%，蛋白胨 1. Owt%,MgSO4 ·7Η20 0. 05wt%,KH2PO4 0. 05wt%,K2HPO4 ·3Η200. 05wt %，谷氨酸纳0. 075wt %，半胱氨酸盐酸盐0. 015wt %，苯甲腈0. 025 % (体积)， ρΗ7· O。
8.如权利要求5所述的方法，其特征在于所述方法还包括对发酵液进行固液分离以 及对固液分离获得的细胞进行破壁的步骤。
9.如权利要求1 4中任一项所述的腈水解酶的应用，其特征在于用于水解3-羟基 丁腈生产3-羟基丁酸。
全文摘要
本发明公开了一种微生物来源的腈水解酶及其制备方法和应用。本发明提供的腈水解酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO20所示。本发明提供的腈水解酶可以通过对Arthrobacternitroguajacolicus菌进行发酵而获得。本发明提供的腈水解酶可用于水解3-羟基丁腈生产3-羟基丁酸，反应的水解副产物少，条件温和，时空产率高，此外，3-羟基丁腈水溶性好，反应可以在纯水相中进行，有利于酶的稳定，因而具有很高的工业化生产潜力。
文档编号C12R1/06GK102031247SQ20091019678
公开日2011年4月27日 申请日期2009年9月29日 优先权日2009年9月29日
发明者唐璐敏, 朱健, 薛建萍, 郝婷婷 申请人:上海市农药研究所, 薛建萍