专利名称：紫菜藻胆蛋白粉的制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明属于营养品的加工领域，更具体地说，是涉及紫菜藻胆蛋白粉的制备工艺。
背景技术：
紫菜内含有特殊的色素蛋白-藻胆蛋白(phycobiliproteins, PBP),这是一
类存在于红藻、蓝绿藻和隐藻中的重要光合色素蛋白复合物，它能把捕获的光能高效传递给叶绿素，从而使海藻的光合作用得以发生。藻胆蛋白在藻类中的含量可达细胞干重的25% -28%,它包括藻红蛋白(phycoerythrin,PE)、藻蓝蛋白(phycocyanin,PC)、另Ij藻蓝蛋白(allo-phycocyanin,APC)和藻红蓝蛋白(phycoery-throcyanin)。藻胆蛋白是一种非常重要的光动力药物的原料，特有的光敏效应可辅助激光治癌，在病灶部位富集，吸收光后高效产生自由基和活泼态氧，从而实现对肿瘤细胞的杀伤。有光毒性而没有暗毒性，在人体内代谢快，藻胆蛋白还具有抗氧化清除自由基和提高免疫力的功效。其制作的免疫荧光标记抗体，检测灵敏度远远高于传统的荧光标记物，可用于特殊分子定位和重要分子检测，包括 SARS病毒的免疫分子检测，能准确地诊断肿瘤、确定病变部位和病情轻重程度等。藻胆蛋白可作为功能因子用于保健食品和功能食品及特殊饲料，同时还是理想的天然色素，可大量用于食品工业和化妆品工业等，无毒副作用，是安全的添加剂。此外，最新研究发现它在光学信息存储与处理、快速光电探测、人工神经网络等方面也具有潜在的应用前景。但由于藻胆蛋白分离纯化的困难，现有的藻胆蛋白商品价格昂贵，使它的应用受到了一定的限制。尽管有不少人试图将藻胆蛋白基因转入微生物中以实现藻胆蛋白的大规模生产，但用转基因方法生产藻胆蛋白还有很长的一段路要走，目前从海藻中提取分离藻胆蛋白仍是获得藻胆蛋白的主要途径。我国对藻类开发利用的力度和深度还很小，大部分仅限于简单的食用，出口产品也只限于初制品，还未应用高科技进行深层次的加工和利用。而藻类的一些高科技深加工产品则主要依靠进口，作为药物使用价格十分昂贵。目前藻红蛋白的生产基本由美国Sigma公司垄断，国内有以红毛菜、紫球藻和螺旋藻作为原料提取藻红蛋白的报导，目前仍处于研究阶段，未有成品进入市场销售。我国海域宽广，藻类资源十分丰富，是世界上最大的紫菜生产大国，我国紫菜养殖和加工又主要集中在苏、浙、闽沿海，其产量占全国的95%以上。江苏省如东县条斑紫菜生产量占全国总量的50% .紫菜的市场价格是红毛菜的1/10，小球藻和螺旋藻的1/3。选用紫菜提取藻胆蛋白，具有成本低，得率高的优点。紫菜中的藻胆蛋白其大部分主要是藻红蛋白(PE)。由于已报道的藻胆蛋白分离纯化方法复杂，导致生产成本太高无法大量制备以满足潜在的市场需求。
发明内容
本发明就是针对上述问题，提供了一种简单有效的、适合大量生产的紫菜藻胆蛋白粉的制备工艺。为实现本发明的上述目的，本发明的工艺步骤为
I.紫菜细胞破碎工艺先用粉碎机将紫菜粉碎，然后将粉碎后的紫菜粉末放入水中浸泡5 10小时，取出浸泡物，用超声波进行粉碎。2.藻胆蛋白粗提物的制备直接用蒸馏水或低盐溶液浸泡藻体细胞，使其溶胀、破裂、释放出藻胆蛋白。蒸馏水浸泡要10天，低盐溶液浸泡要3 4天。称取5. 99g紫菜粉，用蒸馏水浸泡，充分溶胀。经过12天后，用74微米的滤布过滤，并将滤液在4°C下5500g离心20min，去除藻体残渣，取紫红色上清液即为藻胆蛋白粗提物。
3.藻胆蛋白的纯化将藻胆蛋白的粗提液加入到15% 45%梯度饱和硫酸氨溶液进行盐析实验，其饱和硫酸氨溶液梯度设置如下15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%，4°C过夜，并在4°C下20000g冷冻离心15min，取沉淀，并将沉淀溶于低浓度的磷酸盐缓冲液(pH 6.8)中，测其吸光值，以备进行下一步纯化工作。4.藻胆蛋白溶液的浓缩干燥将上述纯化后的藻胆蛋白用旋转真空蒸发仪蒸至物料呈紫红色胶状(控温在40°C以内)。干燥后分别得到藻红蛋白的质量为O. 643g，藻蓝蛋白O. 452g。
具体实施例方式本发明以紫菜为原料，对紫菜藻胆蛋白粉进行了制备，该发明的制备步骤为I.紫菜细胞破碎工艺先用粉碎机将紫菜粉碎，然后将粉碎后的紫菜粉末放入水中浸泡5 10小时，取出浸泡物，用超声波进行粉碎。2.藻胆蛋白粗提物的制备直接用蒸馏水或低盐溶液浸泡藻体细胞，使其溶胀、破裂、释放出藻胆蛋白。蒸馏水浸泡要10天，低盐溶液浸泡要3 4天。称取5. 99g紫菜粉，用蒸馏水浸泡，充分溶胀。经过12天后，用74微米的滤布过滤，并将滤液在4°C下5500g离心20min，去除藻体残渣，取紫红色上清液即为藻胆蛋白粗提物。3.藻胆蛋白的纯化将藻胆蛋白的粗提液加入到15% 45%梯度饱和硫酸氨溶液进行盐析实验，其饱和硫酸氨溶液梯度设置如下15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%，4°C过夜，并在4°C下20000g冷冻离心15min，取沉淀，并将沉淀溶于低浓度的磷酸盐缓冲液(pH 6.8)中，测其吸光值，以备进行下一步纯化工作。4.藻胆蛋白溶液的浓缩干燥将上述纯化后的藻胆蛋白用旋转真空蒸发仪蒸至物料呈紫红色胶状(控温在40°C以内)。干燥后分别得到藻红蛋白的质量为O. 643g，藻蓝蛋白O. 452g。
权利要求
1.紫菜藻胆蛋白粉的制备工艺以紫菜为原料，对紫菜藻胆蛋白粉进行了制备，其特征在于本发明的制备步骤为 (1)紫菜细胞破碎工艺 先用粉碎机将紫菜粉碎，然后将粉碎后的紫菜粉末放入水中浸泡5 10小时，取出浸泡物，用超声波进行粉碎； (2)藻胆蛋白粗提物的制备 直接用蒸馏水或低盐溶液浸泡藻体细胞，使其溶胀、破裂、释放出藻胆蛋白。蒸馏水浸泡要10天，低盐溶液浸泡要3 4天； 称取5. 99g紫菜粉，用蒸馏水浸泡，充分溶胀。经过12天后，用74微米的滤布过滤，并将滤液在4°C下5500g离心20min，去除藻体残渣，取紫红色上清液即为藻胆蛋白粗提物； (3)藻胆蛋白的纯化 将藻胆蛋白的粗提液加入到15% 45%梯度饱和硫酸氨溶液进行盐析实验，其饱和硫酸氨溶液梯度设置如下15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%，41过夜，并在41下20000g冷冻离心15min，取沉淀，并将沉淀溶于低浓度的磷酸盐缓冲液(pH 6.8)中，测其吸光值，以备进行下一步纯化工作； (4)藻胆蛋白溶液的浓缩干燥 将上述纯化后的藻胆蛋白用旋转真空蒸发仪蒸至物料呈紫红色胶状(控温在40°C以内)； 干燥后分别得到藻红蛋白的质量为O. 643g，藻蓝蛋白O. 452g。
全文摘要
紫菜藻胆蛋白粉的制备工艺属于营养品的加工领域，更具体地说，是涉及紫菜藻胆蛋白粉的制备工艺。本发明提供了一种简单有效的、适合大量生产的紫菜藻胆蛋白粉的制备工艺。本发明的制备步骤为紫菜细胞破碎工艺；藻胆蛋白粗提物的制备；藻胆蛋白的纯化。
文档编号A23L1/305GK102871133SQ201110194790
公开日2013年1月16日 申请日期2011年7月13日 优先权日2011年7月13日
发明者祁婉芸 申请人:祁婉芸