专利名称：一种促进紫色非硫细菌悬浮生长培养基的制作方法
技术领域：
本发明属于微生物学、微生态学领域。具体的说，涉及一种促进紫色非硫细菌悬浮生长的培养基。
背景技术：
紫色非硫细菌属于红螺菌科(Iihodospirillaceae)是一类变化多样的紫色光合细菌(phototrophic purple bacteria，PNS)。能在厌氧光照、好氧黑暗条件下以不同的生理代谢方式生长繁殖，具有丰富的代谢多样性。由于它的细胞干物质中蛋白质含量高达到 60%以上，其蛋白质氨基酸组成比较齐全，细胞中还含有多种维生素，尤其是B族维生素极为丰富，Vb2、叶酸、泛酸、生物素的含量也较高，同时还含有大量的类胡萝卜素、辅酶Q等生理活性物质。因此具有很高的营养价值，这正是它在水产养殖中作为饵料及作为饲料添加成分物质基础。同时，菌体在生长过程中可以有效利用水体中有机物有效降低水体COD值， 实现水产饲料和水处理的双重作用。紫色非硫细菌推广和应用的关键是培养的菌体应有较高的菌体浓度，目前的常规培养基主要配方为氯化铵1. Og,乙酸钠3. 5g，氯化镁0. Ig,氯化钙0. Ig,磷酸二氢钾 0. 6g，磷酸氢二钾0. 4g，酵母膏0. lg，水IOOOmI，pH7. 2.使用此培养基配方在培养过程中菌体会出现沉淀生长现象，影响菌体生长的微环境，不利于菌体总浓度的提高。
发明内容
为解决以上问题，本发明提供了一种促进紫色非硫细菌悬浮生长培养基，本发明的紫色非硫细菌培养基，可有效促进菌体悬浮生长，提高菌体最终培养浓度。本发明采用的技术方案是在前述常规培养基中，添加0.2% 的吐温80，即每1000ml基本培养基，添加2 IOml吐温80。优选的培养基每1000ml加IOml吐温80。调节本发明培养基pH为7. 2，121°C灭菌25分钟，将紫色非硫细菌接种于培养基中，置于光照培养箱中，光照条件20001UX，温度32°C。紫色非硫细菌沉淀现象随吐温80的增加而减弱，当每1000ml加IOml吐温80时， 基本不出现沉淀现象，培养6天OD66tl达3. 5，继续增加吐温80对菌体生长有抑制作用，因此选用10ml/L吐温80的添加比较适宜，但考虑添加成本可根据实际情况适当增加。本发明的有益效果1、采用本发明培养基培养紫色非硫细菌，最大生长量明显提高。具体表现为采用本发明培养基培养的紫色非硫细菌较常规培养基培养菌体的OD66tl最终浓度提供70%以上，采用本发明培养基菌体的最终OD66tl可达到3. 5以上，见附图中a ；而常规培养基一般仅能达到1. 9 2.0，见附图中b。2、用本发明培养基培养的紫色非硫细菌用于水产养殖水体的净化，效果明显。按紫色非硫细菌的20kg/hm2用量一次性撒入鱼塘，试验池比对照池改善明显，COD下降40%， 氨氮减少55.6%
本发明培养基(添加IOml吐温80/L)与常规培养基，在培养紫色非硫细菌的过程中，光密度OD66tl的变化图。附图中a代表发明培养基、b代表常规培养基。
具体实施例方式实施例1 (一 )促进紫色非硫细菌悬浮生长培养基配制基本培养基氯化铵1. Og,乙酸钠3. 5g，氯化镁0. Ig,氯化钙0. Ig,磷酸二氢钾 0. 6g，磷酸氢二钾0. 4g，酵母膏0. lg,7jc 1000mI,pH7. 2.在上述培养基中，加吐温805ml。( 二 )紫色非硫细菌的培养将上述培养基pH调节为7. 2，121°C灭菌25分钟，将紫色非硫细菌按培养基体积 3%接种于培养基中，置于光照培养箱中，光照条件20001UX，温度32°C。培养结果光照培养6天后，菌体生长进入稳定期，菌液中无菌体沉淀现象，菌液 OD660 到达 3. 0实施例2:(一 )促进紫色非硫细菌悬浮生长培养基配制基本培养基氯化铵1. Og,乙酸钠3. 5g，氯化镁0. Ig,氯化钙0. lg，磷酸二氢钾 0. 6g，磷酸氢二钾0. 4g，酵母膏0. lg,7jc IOOOmI, pH7. 2.在上述培养基中，加加吐温80 10ml。( 二)紫色非硫细菌的培养将上述培养基pH调节为7. 2，121°C灭菌25分钟，将紫色非硫细菌按培养基体积 3%接种于培养基中，置于光照培养箱中，光照条件20001UX，温度32°C。培养结果光照培养4天后，菌体生长进入稳定期，菌液OD66tl到达3. 5。
权利要求
1.一种促进紫色非硫细菌悬浮生长培养基，其特征有常规培养基、吐温80组成。在常规培养基中每IOOOml添加0. 2% 的吐温80。常规培养基为氯化铵1. Og,乙酸钠3. 5g，氯化镁0. Ig,氯化钙0. Ig,磷酸二氢钾0. 6g，磷酸氢二钾0. 4g，酵母膏0. Ig,水 IOOOmI，ρΗ7· 2.
2.根据权利1的要求，培养的紫色非硫细菌菌液或干粉制剂。
全文摘要
本发明公开了一种经过改造可以有效促进紫色非硫细菌悬浮生长的培养基。采用的技术方案是在常规培养基中添加添加0.2％～1％的吐温80。采用此培养基培养紫色非硫细菌可有效解决菌体生长过程中沉淀问题，与常规培养基相比，用本发明的培养基培养菌体最终培养浓度更高，菌液OD660达到3.5。
文档编号C12N1/20GK102477409SQ20111025921
公开日2012年5月30日 申请日期2011年9月5日 优先权日2011年9月5日
发明者周浩, 张柏松, 方井霞, 杜凤梅 申请人:周浩