专利名称：一种显著改善化橘红提取物口感的方法及应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药保健技术领域，具体是一种显著改善化橘红提取物口感的方法及应用。
背景技术：
化橘红为芸香科植物化州柚Citrus grandis Tomentosa或柚Citrus grandis(L. ) Osbeck的未成熟或近成熟的干燥外层果皮。化橘红中富含黄酮类成分，如柚皮苷、野漆树苷、柚皮素等，其中以柚皮苷含量最高。柚皮素为柚皮苷的苷元，具有比柚皮苷更强的抗氧化活性(Cavia-Saiz, M.，J Sci Food Agric, 2010)。柚皮苷是柚皮中的苦味物质，其在水中的苦味阈值为20mg/L，但I. 5mg/L即可以被感觉到。柚皮苷的脱苦工艺是目前的研究热点，柚苷酶法脱苦具有专一性强，对化橘红中其他营养成分无破坏的优点，是较为理想的脱苦方法。柚苷酶由a-L-鼠李糖苷酶和^ -D-葡萄糖苷酶组成，a -L-鼠李糖苷酶可将柚皮苷水解成樱桃苷和鼠李糖，樱桃苷的苦味约为柚皮苷的1/3，而樱桃苷可在3-D-葡萄糖苷酶的作用下生成没有苦味的柚皮素和葡萄糖。Chien等用高效液相色谱法(HPLC)证实这一水解顺序(Journal of Food and DrugAnalysis，2001)。如今在食品工业中，生物酶脱苦法已经广泛应用于柑橘类果汁中。王鸿飞等，利用柚皮苷酶对柑橘类果汁进行了脱苦研究，结果表明，柚皮苷酶能在不影响柑橘果汁品质的情况下较好地去除苦味(农业工程学报，2004)。
发明内容
本发明的目的是针对以上现有技术存在的不足，提供一种显著改善化橘红提取物口感的方法，可显著改善传统化橘红饮品甚苦的口感，所提取的化橘红提取物抗氧化能力增强，且方法安全简单，成本低廉。本发明还公开一种所述显著改善口感的化橘红提取物的应用。为了实现上述目的，本发明是这样实现的一种显著改善化橘红提取物口感的方法，其包括如下步骤取化橘红粗颗粒，加体积比浓度为5 10%食用乙醇溶液或水，加热回流提取，过滤，滤液浓缩，加乙醇溶液沉淀，取滤液回收乙醇，加水稀释，加入柚苷酶液，一定条件下反应，加热煮沸，浓缩，减压干燥或冷冻干燥得粉末状提取物即化橘红提取物。优选方案的具体步骤如下取化橘红粗颗粒，第一次加化橘红粗颗粒重量20 25倍的体积比浓度为5 10%的食用乙醇溶液或水，浸泡0. 5 I小时后，加热至沸腾回流I. 5 2小时，滤过；在药渣中第二次加化橘红粗颗粒重量20 25倍体积比浓度为5 10%的食用乙醇溶液或水，加热至沸腾回流I. 5 2小时，滤过；合并滤液；滤液浓缩至生药含量为0. 8 I. 2g/mL，加入体积比浓度为85 97%乙醇溶液，边加边搅拌，使浓缩滤液含乙醇量达到60% 85%的体积比浓度，继续加入体积比浓度为60% 85%乙醇溶液使乙醇达到化橘红粗颗粒的6 9体积倍量，搅拌10 20分钟后，滤过，滤渣用体积比浓度为60% 85%乙醇溶液分次洗涤，并入滤液，回收乙醇，此时得到生药含量为0. 8 I. 2g/mL浓缩液，加入蒸馏水将提取物稀释至生药含量为0. lg/mL，以生药含量lmg/mL加入0. 5 I. 5U柚苷酶的比例进行脱苦，50 60° C温度下反应100 150分钟，加热煮沸后，浓缩，减压干燥或冷冻干燥得粉末状提取物即化橘红提取物。本发明还提供所述的化橘红提取物在食品方面的应用。所述的化橘红提取物可以制成如泡腾片、咀嚼片、冲剂等固体制剂。所述泡腾片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤A.按照下列重量份数取原料化橘红提取物5 10份、维生素C 3 5份、阿斯巴 甜0. I 0. 5份、甘露醇6 12份、碳酸氢钠14 20份、朽1檬酸10 14份、酒石酸5 7份、羧甲基淀粉钠I 3份、聚乙二醇-6000 I 3份、化橘红挥发油P -环糊精包合物I 3份、聚乙烯吡咯烷酮-K30 (PVP-K30) 0. 5 2份;B.取化橘红提取物，加入甘露醇混合制成药材软材，过24目筛；柠檬酸、酒石酸、羧甲基淀粉钠、维生素C、聚乙烯吡咯烷酮-K30、阿斯巴甜与适量甘露醇混合制成酸系统软材，过24目筛；碳酸氢钠、聚乙二醇-6000混合制成碱系统软材，过24目筛；将三种软材分别制粒、烘干、加入化橘红挥发油0 -环糊精包合物混合整粒，温度25°C，湿度30%条件下，旋转式压片机压制成片。所述的化橘红提取物可以制成功能饮料、口服液等液体剂型。本发明所述的化橘红提取物在显著改善口感的同时，还可以增强化橘红提取物抗氧化作用强度，在增强机体免疫力、抗衰老、预防心脑血管疾病等功能的保健食品的应用。本发明所阐述的显著改善化橘红提取物口感的方法，其有益效果在于I.所得到的化橘红提取物对比原药材提取液苦味降低，脱苦率达到98. 88%如图I所示，更适合作为食品或保健食品的原料。2.具有较高的得率，得率为原药材的69. 39%。3.所得到的化橘红提取物具有更强的抗氧化活性(DPPH清除率增加0. 11%)，作为抗氧化功能的保健食品原料，具有独特的优势。
图I为四种对照品UPLC图谱(其中，I柚皮苷、2野漆树苷、3柚皮素、4芹菜素)；图2为化橘红柚苷酶解前的UPLC图谱(其中，I柚皮苷、2野漆树苷、3柚皮素、4芹菜素)；图3为化橘红柚苷酶解后UPLC图谱(其中I柚皮苷、2野漆树苷、3柚皮素、4芹菜素)。
具体实施例方式以下结合具体实施例对本发明进行详细的说明。实施例I一种显著改善化橘红提取物口感的方法，其步骤包括取化橘红粗颗粒，第一次加化橘红粗颗粒重量23倍体积比浓度为5 10%食用乙醇溶液或水溶液，浸泡0. 5小时后，加热回流2小时，滤过；在药渣第二次加化橘红粗颗粒重量23倍体积比浓度为5 10%食用乙醇溶液或水溶液，加热回2小时，滤过，合并滤液。滤液浓缩至生药含量为lg/mL，，缓缓加入体积比浓度为95%乙醇溶液，边加边搅拌，使其含乙醇量达到体积比浓度为78. 5%，继续加入体积比浓度为78. 5%乙醇溶液使其达到化橘红粗颗粒重量的7倍量，搅拌15分钟后,滤过,滤渣用适量78. 5%浓度的乙醇溶液分次洗涤，并入滤液，回收乙醇,此时浓缩得到的生药含量为0. 8 I. 2g/mL，加入适量蒸馏水将提取物稀释，优选将提取物稀释至生药含量为0. lg/mL,以生药含量lmg/mL加入IU柚苷酶的比例进行脱苦，54°C温度下反应132分钟，加热煮沸杀酶，浓缩，减压干燥或冷冻干燥得粉末状提取物即化橘红提取物。实施例2一种显著改善化橘红提取物口感的方法，其步骤包括取化橘红粗颗粒，第一次加化橘红粗颗粒重量21倍体积比浓度为5 10%食用乙醇溶液或水溶液，浸泡0. 8小时后，力口热回流I. 6小时，滤过；在药渣第二次加化橘红粗颗粒重量21倍体积比浓度为5 10%食用乙醇溶液或水溶液，加热回I. 6小时，滤过，合并滤液。滤液浓缩至生药含量为I. lg/mL,缓缓加入体积比浓度为93%乙醇溶液，边加边搅拌，使其含乙醇量达到体积比浓度为70%，、继续加入70%浓度乙醇溶液使其达到化橘红粗颗粒重量的8. 5倍量，搅拌15分钟后，滤过，滤渣用70%浓度乙醇溶液分次洗涤，并入滤液，回收乙醇，加入适量蒸馏水将提取物稀释至生药含量为0. 2g/mL,以生药含量I. 5mg/mL加入IU柚苷酶的比例进行脱苦，59°C温度下反应171分钟，加热煮沸杀酶，浓缩，减压干燥或冷冻干燥得粉末状提取物即化橘红提取物。实施例3一种显著改善化橘红提取物口感的方法，其步骤包括取化橘红粗颗粒，第一次加化橘红粗颗粒重量22倍体积比浓度为5 10%食用乙醇溶液或水溶液，浸泡0. 5小时后，加热回流2小时，滤过；在药渣第二次加化橘红粗颗粒重量22倍体积比浓度为5 10%食用乙醇溶液或水溶液，加热回I. 5小时，滤过，合并滤液。滤液浓缩至生药含量为lg/mL，缓缓加入体积比浓度为95%乙醇溶液，边加边搅拌，使其含乙醇量达到体积比浓度为82%，继续加入适量一定浓度乙醇溶液使其达到化橘红粗颗粒重量的8. I倍量，搅拌15分钟后，滤过,滤渣用82%浓度乙醇溶液分次洗涤，并入滤液，回收乙醇，加入适量蒸馏水将提取物稀释，以生药含量I. 3mg/mL加入IU柚苷酶的比例进行脱苦，60°C温度下反应114分钟，加热煮沸杀酶，浓缩，减压干燥或冷冻干燥得粉末状提取物即化橘红提取物。试验例I响应面法优化化橘红酶解工艺I仪器与样品I. I仪器美国Waters ACQUITY UPLC系统(QSM四元溶剂管理系统、FTN样品管理系统自动进样器、CH-A型柱温箱、UPLC专用二极管阵列检测器、真空脱气机、Empowerf色谱工作站)，BP211D型电子天平(德国SartoriUs公司)，KQ-500型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)，HH-S6数显恒温水浴锅(常州普天仪器制造有限公司)。I. 2材料95份乙醇溶液均为分析纯；二苯基苦味酰基自由基(DPPH OSigma公司，水为怡宝水；I. 2材料乙腈(色谱纯)，甲醇(色谱纯)，冰乙酸(优级纯)，水为怡宝水；对照品柚皮苷、野漆树苷、柚皮素(均为自制，采用峰面积归一化法计算，纯度分别为98. 21份、99. 32份、98. 68份)，芹菜素(北京恒元启天化工技术研究院，批号520-36-5)；I. 3样品化橘红粗提取物(改善前)，化橘红提取物(改善后)。2方法与结果2. I色谱条件
ACQUITY UPLC BEH C18 色谱柱(2. ImmX 50mm，I. 7um);流动相A 甲醇，B :0. I 份乙酸水溶液(v/v)，梯度洗脱:0 2min，20份 60份A ;2 3min，60份 60份A ;3 3. 5min, 60份 20份A ；3. 5 5min，20份 20份A ;梯度曲线均为直线。流速0. 5mL .mirT1 ;柱温35°C ；检测波长337nm ;进样量0. 5 y L。2. 2对照品溶液的制备精密称取经105°C干燥至恒重的柚皮苷、野漆树苷、柚皮素、芹菜素对照品适量，力口甲醇溶解，摇匀，配制成柚皮苷、野漆树苷、柚皮素、芹菜素浓度分别为20mg/mL、0. 3mg/mL、
I.5mg/mL、0. 04mg/mL的混合对照品储备液。2. 3供试品的制备精密称定样品粉末0. 2g,每个样品平行做3份，加甲醇20mL，密塞，超声波提取30min，取出，放凉，摇匀，滤过，并用甲醇洗涤滤器和滤渣数次，滤液全部转移到50mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，取适量用0. 22 y m滤膜滤过，即得。2. 4脱苦率计算取5mL供试液至试管中，根据要求加入柚苷酶液0. 5mL，在指定的条件下进行酶解反应。取反应后的供试液0.2mL至试管中，加入甲醇1.8mL，过0.22pm微孔滤膜。按照曾霖霖(食品工业科技，2011)方法，脱苦率以水解柚皮苷的程度表示。其计算公式为Db= (C-C1)/CX 100 份式中Db——脱苦率，份；C——原供试液柚皮苷含量(mg/mL) ——柚苷酶处理后柚皮苷含量(mg/mL)。2. 5响应面法优化酶解工艺采用响应面法试验进行酶解工艺优化,根据Box-Behnken的中心试验设计原理，以酶用量、PH值、温度及时间作为考察因素，采用三因素三水平，进行响应面设计，见下表。响应面因素水平表
权利要求
1.一种显著改善化橘红提取物ロ感的方法，其特征在于，其包括的步骤如下取化橘红粗颗粒，加体积比浓度为5 10%的食用こ醇溶液或水溶液，加热回流提取，滤过，滤液浓縮，加こ醇沉淀，取滤液回收こ醇，加水稀释，加入柚苷酶，加热煮沸，浓缩，干燥得粉末状提取物。
2.如权利要求I所述的显著改善化橘红提取物ロ感的方法，其特征在于，具体步骤为取化橘红粗颗粒，第一次加化橘红粗颗粒重量20 25倍的体积比浓度为5 10%的食用こ醇溶液或水，浸泡后，加热回流I. 5 2小时，滤过；在药渣中第二次加化橘红粗颗粒重量20 25倍体积比浓度为5 10%的食用こ醇溶液或水，加热回流I. 5 2小时，滤过；合并滤液；滤液浓缩至生药含量为O. 8 I. 2g/mL，加入体积比浓度为85 97%こ醇溶液，使浓缩滤液含こ醇量达到60% 85%的体积比浓度，继续加入体积比浓度为60% 85%こ醇溶液使こ醇达到化橘红粗颗粒的6 9体积倍量，滤过，滤渣用体积比浓度为60% 85%乙醇溶液分次洗涤，并入滤液，回收こ醇；加入蒸馏水将提取物稀释，以生药含量lmg/mL加入O.5 I. 5U柚苷酶的比例进行脱苦，50 60° C温度下反应100 150分钟，加热煮沸后，浓缩，干燥得粉末状提取物即化橘红提取物。
3.根据权利要求I或者2所述的化橘红提取物在食品方面的应用。
4.根据权利要求3所述的化橘红提取物在食品方面的应用，其特征在于，制成固体制齐 。
5.根据权利要求4所述的化橘红提取物在食品方面的应用，其特征在于，所述固体制剂为泡腾片。
6.根据权利要求5所述泡腾片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤 Α.按照下列重量份数配备取原料化橘红提取物5 10份、维生素C 3 5份、阿斯巴甜O. I O. 5份、甘露醇6 12份、碳酸氢钠14 20份、朽1檬酸10 14份、酒石酸5 7份、羧甲基淀粉钠I 3份、聚こニ醇-6000 I 3份、化橘红挥发油β -环糊精包合物I 3份、聚こ烯吡咯烷酮-Κ30 O. 5 2份； B.取化橘红提取物，加入甘露醇制成药材软材；柠檬酸、酒石酸、羧甲基淀粉钠、维生素C、聚こ烯吡咯烷酮-Κ30、阿斯巴甜和甘露醇制成酸系统软材；碳酸氢钠、聚こニ醇-6000制成碱系统软材；将三种软材分别制粒、烘干、加入化橘红挥发油β -环糊精包合物混合整粒，温度在15 30°C，旋转式压片机压制成片。
7.根据权利要求3所述的化橘红提取物在食品方面的应用，其特征在于，制成液体剂型。
全文摘要
本发明公开了一种利用生物酶技术显著改善化橘红提取物口感的方法，其包括的步骤如下取化橘红粗颗粒，加5～10%食用乙醇溶液或水溶液，加热回流提取，过滤，滤液浓缩，加乙醇沉淀，取滤液回收乙醇，加水稀释，加入柚苷酶液，一定条件下反应，加热煮沸，浓缩，减压干燥或冷冻干燥得粉末状提取物。本发明并公开了其在研发医药保健和功能食品的应用。本发明获得的化橘红提取物显著改善了传统化橘红提取物甚苦的口感，并能增强其抗氧化功效，可应用于化橘红食品和保健食品制备。
文档编号A23L1/29GK102657362SQ20121015964
公开日2012年9月12日 申请日期2012年5月21日 优先权日2012年5月21日
发明者林励, 王莲婧 申请人:广州中医药大学