一种异养菌测试瓶的生产方法
【专利摘要】本发明涉及一种异养菌测试瓶的生产方法，属应用微生物检测方法【技术领域】，其特征在于在常温下，按重量百分比分别取氯化钠0.5%、蛋白胨1.0%、牛肉膏0.3%、蒸馏水98.2%；將氯化钠、蛋白胨、牛肉膏依次用蒸馏水溶解,加入到容器中混合、充分摇匀，并用0.5mol/L氢氧化钠溶液调节其pH值到7.4--7.6，即配制成制取异养菌测试瓶所需的培养液。用液体分装器将所配制的培养液按每瓶9.0ml装入西林瓶中，经加盖、封口、高温灭菌，冷却后即制成异养菌测试瓶。本发明所生产的异养菌测试瓶能够快速准确地测定水样中的异养菌的菌数，操作简单、可大大提高工作效率，能满足工业循环冷却水水质检测和水质控制等方面的实际工作需求。
【专利说明】一种异养菌测试瓶的生产方法
【技术领域】：
[0001] 本发明涉及一种异养菌测试瓶的生产方法，属应用微生物检测方法【技术领域】。
【背景技术】：
[0002] 在科研和生产实际工作中，常常需要对微生物的数量进行测定。如对水体、空气、 土壤等环境中的微生物的测定有利于监测和评价其污染程度；对饮用水中和工业循环冷却 水中的微生物的测定可评价其是否达标；对油田污水注水中的微生物数量的测定则有助于 评价污水注水的水质等。因此，微生物数量的测定对科研和生产实际工作具有十分重要的 指导作用和现实意义。
[0003] 微生物测定常用的方法有平板菌落计数法和绝迹稀释法。平板菌落计数法是根据 每个活的微生物能长出一个菌落的原理设计，取一定容量的菌悬液，作一系列的倍比稀释， 然后将定量的稀释液进行平板培养，根据培养出的菌落数及稀释倍数，计算出培养物中的 活菌数；而绝迹稀释法是将待测定的水样逐级注入到试管中进行接种稀释，直到最后一个 试管中无菌生长为止，然后根据微生物生长情况和稀释倍数，计算出水样中微生物的数目。 这两种方法都有明显的不足，平板菌落计数法测定结果误差较大，绝迹稀释法操作极为繁 琐、费时。
[0004] 以绝迹稀释法为基本原理的异养菌测试瓶法，充分吸收了绝迹稀释法的优点，它 操作极为简单，生长指示明显，结果准确可靠，操作不需专业人员即可掌握，从而大大地 改善了微生物的测定方法。
[0005] 在工业循环冷却水、油田污水注水中普遍存在着异养菌，异养菌是一群必须以各 种有机物为营养代谢合成自身有机物的好氧和兼性厌氧细菌的统称。它们能以水体中的各 种有机化合物等为碳源进行生长繁殖。因此，异养菌的存在不仅会污染水质，而且还可造成 设备、管道的严重腐蚀和管道、地层的堵塞。为了有效控制异养菌的危害，需对异养菌进行 准确测定。目前，国内外普遍采用平板菌落计数法测定水体中的异养菌，但该法测定结果误 差较大，并繁琐、费时。
[0006] 因此，传统的检测技术存在明显缺陷，亟待研究开发出一种简单、准确的异养菌检 测的新方法、新工具。因此，研制用于检测水体中的异养菌的测试瓶具有重要的实际意义。
【发明内容】
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[0007] 为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种异养菌测试瓶的生产方 法，使所生产的测试瓶能够快速准确地测定水样中的异养菌的菌数，以满足工业循环冷却 水水质检测和水质控制等方面的实际工作需求。
[0008] 本发明是通过如下技术方案来实现上述目的的。
[0009] 在常温下，按重量百分比分别取氯化钠0. 5%、蛋白胨1. 0%、牛肉膏0. 3%、蒸馏水 98. 2% ;將氯化钠、蛋白胨、牛肉膏依次用蒸馏水溶解，加入到容器中混合、充分摇匀，并用 0. 5mol/L氢氧化钠溶液调节其pH值到7. 4-7. 6,即配制成制取异养菌测试瓶所需的培养 液；将12ml模制西林瓶清洗干净、干燥，用液体分装器将所配制的培养液按每瓶9. Oml装入 瓶中，然后加盖、封口；将经加盖封口的测试瓶用高温蒸汽灭菌锅在121°C条件下进行高温 灭菌20分钟，冷却后即制成异养菌测试瓶。
[0010] 本发明与现有的技术相比具有如下有益效果：
[0011] 1、本发明所生产的异养菌测试瓶，能够快速准确地测定水样中的异养菌的菌数、 生长指示明显、操作简单、可大大提高工作效率。
[0012] 2、培养液为异养菌专用培养液，只适合异养菌生长，所培养出的微生物只是异养 菌，测试工作不会受其它微生物的干扰。
[0013] 3、本发明可准确测定水样中的异养菌的菌数，可用于工业用水检测等领域，在工 业循环冷却水水质检测和水质控制等方面具有广泛的应用前景。
【具体实施方式】：
[0014] 在常温下（以配制1L培养液为例，以此类推)，按重量百分比分别称取氯化钠 5. 0g、蛋白胨10. 0g、牛肉膏3. 0g ;將氯化钠、蛋白胨、牛肉膏依次用蒸馏水溶解，并加入到 1L容量瓶中混合、再用蒸馏水定容到1L刻度线，充分摇匀，测定其酸碱度并用0. 5mol/L氢 氧化钠溶液调节其pH值到7. 4-7. 6,即配制成制取异养菌测试瓶所需的培养液。
[0015] 将12ml模制西林瓶清洗干净、干燥，用液体分装器将所配制的培养液按每瓶 9. 0ml装入瓶中，用A-13型药用胶塞加盖、用普通抗生素玻璃瓶铝盖经专用封口器封口，最 后将经加盖封口的测试瓶用高温蒸汽灭菌锅在121°C条件下进行高温灭菌20分钟，冷却后 即制成异养菌测试瓶。
[0016] 采用异养菌测试瓶测定待测水样中的异养菌的菌数时，采用绝迹稀释法原理，将 待测水样用无菌注射器逐级注入到测试瓶中稀释培养，直到最后一个测试瓶无菌生长为 止，可根据稀释的倍数计算出待测水样中异养菌的数目。
[0017] 实际测定操作可采用以下的方法和步骤：
[0018] (1)准备数支相同的1ml医用注射器，用蒸馏水清洗干净后高温灭菌(高压蒸汽灭 菌锅121°C、0. 105MPa下灭菌15分钟)，冷却备用；
[0019] (2)根据待测水样中异养菌的大致多少，将数个上述所制成的异养菌测试瓶排成 一组，并依次编上序号1、2、3、4......;
[0020] (3)用上述灭菌后的无菌注射器取1. OmL待测水样并注入到1号异养菌测试瓶内， 充分震荡10秒；
[0021] (4)另取一支无菌注射器从摇匀后的1号异养菌测试瓶内取出1. OmL液体注入到 2号异养菌测试瓶内，充分震荡10秒；
[0022] (5)再另取一支无菌注射器从摇匀后的2号异养菌测试瓶内取出1. OmL液体注入 到3号异养菌测试瓶内，充分震荡10秒；
[0023] (6)依次重复上述操作程序，一直到最后一瓶为止；
[0024] (7)把上述加入待测水样后的一组异养菌测试瓶放在30°C或现场温度的培养箱内 培养，经过3天培养后观察测试瓶内的变化，判断异养菌的生长情况；
[0025] (8)判断标准：无异养菌存在的异养菌测试瓶内的培养液无明显变化，而有异养菌 存在的异养菌测试瓶内的培养液变浑变浊，因此，异养菌测试瓶中的培养液变浑变浊，表示
【权利要求】
1. 一种异养菌测试瓶的生产方法，其特征在于在瓶中加入由氯化钠、蛋白胨、牛肉膏 和蒸馏水制成的培养液，经加盖、封口、高温蒸汽灭菌制成。
2. 根据权利要求1所述的一种异养菌测试瓶的生产方法，其特征在于在常温下，按重 量百分比分别取氯化钠0. 5%、蛋白胨1. 0%、牛肉膏0. 3%、蒸馏水98. 2% ;將氯化钠、蛋白胨、 牛肉膏依次用蒸馏水溶解，加入到容器中混合、充分摇匀，并用〇. 5mol/L氢氧化钠溶液调 节其pH值到7. 4-7. 6,即配制成制取异养菌测试瓶所需的培养液。
3. 根据权利要求2所述的一种异养菌测试瓶的生产方法，其特征在于将12ml模制西林 瓶清洗干净、干燥，用液体分装器将所配制的培养液按每瓶9. 0ml装入瓶中，然后加盖、封 □。
4. 根据权利要求3所述的一种异养菌测试瓶的生产方法，其特征在于将经加盖封口的 测试瓶用高温蒸汽灭菌锅在121°C条件下进行高温灭菌20分钟，冷却后即制成异养菌测试 瓶。
【文档编号】C12M1/24GK104046563SQ201310078446
【公开日】2014年9月17日 申请日期:2013年3月13日 优先权日:2013年3月13日
【发明者】易绍金 申请人:长江大学