一种烟沫固体有机废弃物腐熟菌剂及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一株具有耐烟碱能力的菌株N1,菌株N1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC8143，保藏日期为2013年9月9日；及其在降解烟沫固体有机废弃物上的应用。一株具有耐烟碱能力的菌株N2，菌株N2保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC8144，保藏日期为2013年9月9日；及其在降解烟沫固体有机废弃物上的应用。进一步公开了一种烟沫固体有机废弃物腐熟菌剂，包含菌株N1和菌株N2。并公开了一种烟沫固体有机废弃物腐熟菌剂的制备方法，步骤为：发酵菌株N1和N2将菌株N1和菌株N2发酵液复合得到所述腐熟菌剂。
【专利说明】一种烟沬固体有机废弃物腐熟菌剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及微生物领域，尤其涉及一种烟沫固体有机废弃物腐熟菌剂。
【背景技术】
[0002]我国烟草的种植面积和产量均居世界首位，目前国内外烟草主要用作卷烟。作为烟草生产大国，我国烟草种植面积约130万hm2，年产量450~500万t。在卷烟加工生产中会产生大量的烟叶、烟沫等下脚料废弃物，我国烟草废弃物的年总量约在90~100万t，约占总产量的25%，其中大部分被废弃，不仅造成了资源的浪费，而且严重污染环境。
[0003]烟沫废弃物指的是除去具有烘烤价值叶片以外的烟草茎株部分，包括烟茎、烟根、土脚叶、“优化结构”政策优化掉的叶片、烟花、烟种、腋芽。烟草体内己经检测出的化学物超过1000多类，主要包括各种烃、芳香烃、醛、酮、留醇、醇、醌、酯、生物碱、色素、类异戊二烯衍生物、氨基酸和蛋白类等十几大类物质。进一步细分，鉴定出包括植物碱、有机酸、蛋白质、淀粉、甘油三脂、糖类、单宁、果胶、纤维素等3000多种化合物，其中多数化合物是光合作用的产物，具有很高的使用价值。
[0004]对废弃烟叶的综合利用，一直受到国内外研究者的重视。有很多的研究报道:如从废弃烟叶中提取烟碱，生产烟碱农药；提取茄尼醇用于生产辅酶QlO等药物；从未成熟的鲜烟叶中提取泪水大豆蛋白质的烟草蛋白质，作为优质饲料的添加剂等，但尚有大量的烟草废弃物未得到很好的利用。由于烟草废弃物中有很强的植物毒性的烟碱存在，虽然含有丰富的有机质，不能作为有机肥直接施于土壤，单独堆肥腐熟耗时较长，烟碱降解效果差，且不仅会造成环境污染和浪费资源，还可能导致滋生病虫害的传播。目前国内常通过添加大量的植物秸杆和烟草废弃物堆放一块，以稀释降解不彻底的烟碱对农作物带来的负面影响，可使烟草废弃物成为很好的有机肥源。
[0005]高附加值的农业废弃物的 肥料化利用，特别是高附加值的生物有机肥及有机无机复合肥的开发制，不但能解决环境污染问题，而且可以为农业生产提供大量的有机肥料，是减少农业面源污染、节约资源发展可持续农业和循环经济的重要途径。在农业废弃物高附加值肥料化利用过程中，加快升温速度缩短堆腐时间是有机肥生产经济效益的关键，而接种菌剂是加快堆肥升温、促进发酵腐熟过程的措施。本发明主要是筛选出能够使烟沫废弃物高效腐熟的微生物菌种，使烟沫废弃物能够资源化利用，不仅能够解决烤烟区的环境问题，而且能为烟农带来更多的收入。
【发明内容】
[0006]有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种烟沫固体有机废弃物腐熟菌剂，来有效降解烟沫固体有机废弃物。
[0007]为实现上述目的，本发明提供了一株具有耐烟碱能力的菌株NI，菌株NI保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC8143，保藏日期为2013年9月9曰。[0008]进一步地，本发明提供了另一株具有耐烟碱能力的菌株N2，菌株N2保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC8144，保藏日期为2013年9月9曰。
[0009]保藏机构地址:北京市朝阳区北辰西路I号院中科院微生物研究所，邮编:100101，电话:86-10-64807355。
[0010]进一步地，本发明提供了菌株NI在降解烟沫固体有机废弃物上的应用。
[0011]进一步地，本发明提供了菌株N2在降解烟沫固体有机废弃物上的应用。
[0012]进一步地，本发明提供了一种烟沫固体有机废弃物腐熟菌剂，包含菌株NI和菌株N2，其中，NI为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens), N2为母牛分枝杆菌(Mycobacterium vaccae)。
[0013]优选地，所述菌剂中菌株NI与菌株N2的菌体数量比为1:3-3:1
[0014]进一步地，本发明提供了一种烟沫固体有机废弃物腐熟菌剂的制备方法，包括如下步骤:
[0015]1)、发酵菌株NI
[0016]牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，NaC15.0g，pH7.0，170rpm，30°C摇床培养24h ；
[0017]2)、发酵菌株N2
[0018]牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，NaC15.0g，pH7.0，170rpm，30°C摇床培养24h ；
[0019]3)、菌株复配
[0020]将菌株NI和菌株N2发酵液复合得到所述腐熟菌剂。
[0021]优选地，步骤3)中，菌株NI和菌株N2发酵液体积比为1:3。
[0022]菌株NI和菌株N2具有显著的降解纤维素的能力，且具有良好的烟碱耐性。
【专利附图】
【附图说明】
[0023]图1是N1+N2菌株对烟碱的降解情况
【具体实施方式】
[0024]实施例1菌株筛选
[0025]纤维素降解菌筛选培养基:CMC-Na5g,KH2PO4Ig,尿素 0.5g，(NH4) 2S040.5g，MgSO4 ? 7H200.5g, FeSO4 ? 7H207.5mg, MnSO4 ? H202.5mg, ZnSO4 ? 7H203.6mg, CoCl2 ? 6H203.7mg,CaCl20.5g，0.02%刚果红，16g琼脂，去离子水定容至1L。
[0026]牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏5g，蛋白胨10g，NaC15g，固体加琼脂16g，用于细菌的分离、培养。
[0027]PDA培养基:马铃薯(去皮)200g，蔗糖(或葡萄糖)20g,固体加琼脂16g，用于真菌的分离、培养。
[0028]刚果红琼脂培养基是较好的分离筛选培养基，纤维素降解菌能够在红色平板上形成透明圈，且透明圈/菌落直径比值大小大致反映其降解纤维素能力的高低。筛选得到的两株具有降解纤维素能力的菌株命名为NI和N2。从表1可以看出，将菌株按降解纤维素能力为N2>N1。
[0029]表1菌株降解纤维素能力
[0030]
【权利要求】
1.一株具有耐烟碱能力的菌株N1，菌株N1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC8143，保藏日期为2013年9月9日。
2.如权利要求1所述的菌株N1，在降解烟沫固体有机废弃物上的应用。
3.一株具有耐烟碱能力的菌株N2，菌株N2保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC8144，保藏日期为2013年9月9日。
4.如权利要求3所述的菌株N2，在降解烟沫固体有机废弃物上的应用。
5.一种烟沫固体有机废弃物腐熟菌剂，其特征在于，所述菌剂中包含所述菌株N1和所述菌株N2。
6.如权利要求5所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂中菌株N1与菌株N2的菌体数量比为 1:3-3:1。
7.一种烟沫固体有机废弃物腐熟菌剂的制备方法，包括如下步骤: 1)、发酵菌株N1 牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，NaC15.0g，pH7.0，170rpm，30°C摇床培养24h ； 2)、发酵菌株N2 牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，NaC15.0g, pH7.0，170rpm，30°C摇床培养24h ； 3)、菌株复配 将菌株N1和菌株N2发酵液复合得到所述腐熟菌剂。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤3)中，菌株N1和菌株N2发酵液体积比为 1:3-3:1。
【文档编号】C12N1/20GK103642718SQ201310594153
【公开日】2014年3月19日 申请日期:2013年11月22日 优先权日:2013年11月22日
【发明者】李想, 刘艳霞, 石俊雄 申请人:贵州省烟草科学研究院