本发明涉及一种对胃粘膜具有辅助保护作用的弱碱性甘草饮料的制备方法,属于食品饮料技术领域。
背景技术:
随着我国经济社会发展,国民饮食习惯和结构也在不断变化。生活节奏的变快和各种竞争压力加剧了人们不规律饮食、暴饮暴食、频繁饮酒、大量饮酒和重口味麻辣饮食等行为,使胃肠道功能紊乱,引起消化不良,直接诱发和导致了胃粘膜损伤。慢性胃粘膜损伤主要由长期饮用浓茶、酗酒、吸烟,经常暴饮暴食,食物过冷、过热、过酸、过咸或长期服用阿司匹林或保泰松等引起。急性胃黏膜损伤常见于成人,由大量饮酒、药物刺激或急性应激诱发。随着国民对保健养生的重视,保健饮料的研发备受关注。目前,尚未出现以甘草和天然弱碱性天然温泉水为原料,具有胃粘膜辅助保护和改善胃肠道功能的饮料。
技术实现要素:
本发明所要解决的技术问题是克服现有技术和产品不足,提供一种弱碱性甘草饮料的制备方法,该饮料具有胃粘膜辅助保护作用,改善胃肠道功能,对大量饮酒造成的胃粘膜损伤具有较好的预防保护作用,经常饮用可有效避免因饮酒造成的胃粘膜损伤,预防保护作用明显。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下:
一种弱碱性甘草饮料的制备方法,主要以甘草和天然弱碱性温泉水为原料,经粉碎、提取浓缩、调配灌装步骤制得弱碱性甘草饮料,弱碱性甘草饮料ph值7.1-7.9。
而且,1)所述粉碎步骤为:将甘草粉碎,得到甘草粗粉;2)所述提取浓缩步骤为:以天然弱碱性温泉水调配浓度为40%-80%乙醇溶液,按照1∶20-1∶80的料液比对甘草粗粉进行有效成分提取。提取罐温度加热至70-110℃,提取时间2-10小时,趁热过滤至浓缩罐,减压浓缩回收乙醇,制得甘草浓缩液;3)所述调配灌装步骤为:甘草浓缩液中加入一定量的天然弱碱性温泉水混匀,调节弱碱性甘草饮料的ph值至7.1-7.9、甘草酸含量不低于0.05mg/ml,然后灌装,灭菌。
而且,1)所述粉碎步骤为:将甘草粉碎,得到甘草粗粉;2)所述提取浓缩步骤为:将甘草粗粉与天然弱碱性温泉水调配的浓度为60%乙醇溶液按照1∶30的料液比,置于提取罐中,然后加热至90℃,提取3个小时,趁热过滤至浓缩罐中,减压浓缩回收乙醇,制得甘草浓缩液;3)所述调配灌装步骤为:向甘草浓缩液中加入一定量的天然弱碱性温泉水混匀,调节弱碱性甘草饮料的ph值至7.1-7.9、甘草酸含量不低于0.05mg/ml,然后灌装,灭菌。
而且,1)所述粉碎步骤为:将甘草粉碎,得到甘草粗粉;2)所述提取浓缩步骤为:以天然弱碱性温泉水调配浓度为40%-80%乙醇溶液,按照1∶20-1∶80的料液比对甘草粗粉进行有效成分提取。提取罐温度加热至70-110℃,提取时间2-10小时,趁热过滤至浓缩罐,减压浓缩回收乙醇,制得甘草浓缩液;3)所述调配灌装步骤为:甘草浓缩液中加入一定量的天然弱碱性温泉水混匀,调节弱碱性甘草饮料的ph值至7.1-7.9、甘草酸含量不低于0.1mg/ml,然后灌装,灭菌。
而且,1)所述粉碎步骤为:将甘草粉碎,得到甘草粗粉;2)所述提取浓缩步骤为:以天然弱碱性温泉水调配浓度为40%-80%乙醇溶液,按照1∶20-1∶80的料液比对甘草粗粉进行有效成分提取。提取罐温度加热至70-110℃,提取时间2-10小时,趁热过滤至浓缩罐,减压浓缩回收乙醇,制得甘草浓缩液;3)所述调配灌装步骤为:甘草浓缩液中加入一定量的天然弱碱性温泉水混匀,调节弱碱性甘草饮料的ph值至7.1-7.9、甘草酸含量不低于0.2mg/ml,然后灌装,灭菌。
而且,1)所述粉碎步骤为:将甘草粉碎,得到甘草粗粉;2)所述提取浓缩步骤为:以天然弱碱性温泉水调配浓度为40%-80%乙醇溶液,按照1∶20-1∶80的料液比对甘草粗粉进行有效成分提取。提取罐温度加热至70-110℃,提取时间2-10小时,趁热过滤至浓缩罐,减压浓缩回收乙醇,制得甘草浓缩液;3)所述调配灌装步骤为:甘草浓缩液中加入一定量的天然弱碱性温泉水混匀,调节弱碱性甘草饮料的ph值至7.1-7.9、甘草酸含量不低于0.3mg/ml,然后灌装,灭菌。
而且,1)所述粉碎步骤为:将甘草粉碎,得到甘草粗粉;2)所述提取浓缩步骤为:以天然弱碱性温泉水调配浓度为40%-80%乙醇溶液,按照1∶20-1∶80的料液比对甘草粗粉进行有效成分提取。提取罐温度加热至70-110℃,提取时间2-10小时,趁热过滤至浓缩罐,减压浓缩回收乙醇,制得甘草浓缩液;3)所述调配灌装步骤为:甘草浓缩液中加入一定量的天然弱碱性温泉水混匀,调节弱碱性甘草饮料的ph值至7.1-7.9、甘草酸含量不低于0.4mg/ml,然后灌装,灭菌。
而且,所述天然弱碱性温泉水来源于内蒙古自治区赤峰市敖汉旗四家子镇热水汤,又称敖汉温泉水;敖汉温泉水ph值7.1-7.9,偏硅酸含量25-126.5mg/l,锂、锶含量分别0.2-1.2和0.2-1.2mg/l,属于弱碱性医疗矿泉水。
而且,所述调配灌装步骤中,可以根据个人的口味和实际需要加入甜味剂,甜味剂可以是蔗糖,三氯蔗糖,木糖醇,麦芽糖醇,阿斯巴甜,甜菊糖,葡萄糖,安赛蜜中的一种或是几种。
本发明选用的甘草,收载于2015版中国药典,药食同源,味甘、性平,归心、肺、脾、胃经,用于脾胃虚弱,脘腹疼痛等。甘草主要成分为甘草酸,其含量不得低于2.0%。
甘草酸含量的测定方法:高效液相色谱法,具体的测定方法和步骤采用2015版中国药典第86页-第87页(中国医药科技出版社)记录的方法进行测定。
2015版中国药典对最粗粉、粗粉、中粉、细粉、最细粉和极细粉的规定如下:
最粗粉:指能全部通过一号筛,但混有能通过三号筛不超过20%的粉末;
粗粉:指能全部通过二号筛,但混有能通过四号筛不超过40%的粉末;
中粉:指能全部通过四号筛,但混有能通过五号筛不超过60%的粉末;
细粉:指能全部通过五号筛,并含能通过六号筛不少于95%的粉末;
最细粉:指能全部通过六号筛,并含能通过七号筛不少于95%的粉末;
极细粉指能全部通过八号筛,并含能通过九号筛不少于95%的粉末。
二号筛850μm±29μm24目、四号筛250μm±9.9μm65目、五号筛180μm±7.6μm80目、六号筛150μm±6.6μm100目、七号筛125μm±5.8μm120目、八号筛90μm±4.6μm150目、九号筛75μm±4.1μm200目。
本发明的优点和积极效果:
(1)本发明以甘草和天然弱碱性温泉水为原料,制得弱碱性甘草饮料,通过甘草有效成分与天然弱碱性温泉水协同作用,发挥辅助保护胃黏膜的功效,改善胃肠道环境。
(2)本发明制备工艺简单,成本低廉、适合规模化生产,本发明制得弱碱性甘草饮料,不含防腐剂、调味剂等化学添加剂。
(3)本发明以天然弱碱性温泉水调配乙醇作为提取液,具有如下优点:一方面弱碱性乙醇提取液能促进甘草酸等有效成份的溶出,提高有效成分的提取率;另一方面简化了除去提取液中纯净水,再加入天然弱碱性温泉水的工艺步骤;还使弱碱性甘草饮料从提取至调配灌装,其ph值始终保持在一定的区间范围,质量稳定。
(4)本发明所用天然温泉水来源于内蒙古自治区赤峰市敖汉旗四家子镇热水汤,称敖汉温泉水。经内蒙古自治区产品质量检验研究院(camf2015050023)和中科通标检验检测技术服务有限公司(camf2014050257)检测,敖汉温泉水符合国家饮用天然矿泉水检验各项标准(gb/t8538-2008),敖汉温泉水ph值7.1-7.9,偏硅酸含量25-126.5mg/l,锂、锶含量分别0.2-1.2和0.2-1.2mg/l,属于弱碱性医疗矿泉水。
(5)本发明中的甘草提取液经减压浓缩,乙醇将优先被回收,可反复利用,降低了生产成本,避免浪费,制备工艺绿色环保。
(6)实验结果表明:甘草酸含量为0.1mg/ml、ph7.1-7.9的弱碱性甘草饮料灌胃慢性萎缩性胃炎大鼠,其改善胃肠道环境、降低血清mda含量、提高sod含量的作用与86.7mg/ml浓度胃康灵胶囊相等,较模型组有明显的抑制胃溃疡形成作用。按实验动物与人体表面积比等效剂量换算,弱碱性甘草饮料中甘草酸含量应不低于0.05mg/ml。
(7)弱碱性甘草饮料对慢性萎缩性胃炎模型大鼠干预作用实验结果表明:弱碱性甘草饮料组血清mda含量较模型组有明显的降低,说明弱碱性甘草饮料较好的抑制了血清mda的升高,其抑制mda升高的作用与胃康灵胶囊相等。从机理角度说明了弱碱性甘草饮料具有降低胃粘膜的攻击因子mda含量,减少自由基损伤胃粘膜的功效;弱碱性甘草饮料组血清sod含量高于其他3组,较模型组和空白组明显提升了血清sod含量,增强了机体对自由基的清除能力,说明弱碱性甘草饮料能较好的保护胃粘膜,其清除机体自由基作用明显优于胃康灵胶囊;从胃粘膜损伤面积计数评价看,弱碱性甘草饮料能够明显抑制胃部溃疡面的形成。
(8)弱碱性甘草饮料对无水乙醇引起大鼠胃粘膜损伤的保护作用实验结果表明:各组平均得分情况:空白组1分、模型组7分、弱碱性甘草饮料4分、胃康灵(阳性对照)组5.71分。模型组胃粘膜脱落和出血表明了无水乙醇对胃粘膜损伤严重,提示大量饮酒可直接导致胃出血、胃粘膜损伤。弱碱性甘草饮料对大量饮酒造成的胃粘膜损伤具有较好的预防保护作用,与模型组比较有显著差异,且效果优于胃康灵组。从胃粘膜损伤计分可看出弱碱性甘草饮料具有很好的预防胃粘膜急性损伤作用,经常饮用可有效避免因大量饮酒造成的胃粘膜损伤。
附图说明
图1为慢性萎缩性胃炎模型组1号大鼠胃粘膜损伤情况;
图2为慢性萎缩性胃炎空白组9号大鼠胃粘膜损伤情况;
图3为空白组无水乙醇引起大鼠胃粘膜损伤情况;
图4为模型组无水乙醇引起大鼠胃粘膜损伤情况;
图5为弱碱性甘草饮料组无水乙醇引起大鼠胃粘膜损伤情况;
图6为胃康灵(阳性对照)组无水乙醇引起大鼠胃粘膜损伤情况。
具体实施方式
下面结合实施例,对本发明的原理和特征进行描述,但本发明的实施方式不限于此,不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
下述实施实例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法;所使用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
实施例1
一种弱碱性甘草饮料的制备方法,主要以甘草和天然弱碱性温泉水为原料,经粉碎、提取浓缩、调配灌装步骤制得弱碱性甘草饮料,其ph值7.1-7.9。
1)所述粉碎步骤为:将甘草粉碎,得到甘草粗粉;
2)所述提取浓缩步骤为:以天然弱碱性温泉水调配浓度为40%-80%乙醇溶液,按照1∶20-1∶80的料液比对甘草粗粉进行有效成分提取。提取罐温度加热至70-110℃,提取时间2-10小时,趁热过滤至浓缩罐,减压浓缩回收乙醇,制得甘草浓缩液;
3)所述调配灌装步骤为:甘草浓缩液中加入一定量的天然弱碱性温泉水混匀,调节弱碱性甘草饮料的ph值至7.1-7.9、甘草酸含量不低于0.05mg/ml,然后灌装,灭菌。
作为优选方案,所述天然弱碱性温泉水来源于内蒙古自治区赤峰市敖汉旗四家子镇热水汤,又称敖汉温泉水;敖汉温泉水ph值7.1-7.9,偏硅酸含量25-126.5mg/l,锂、锶含量分别0.2-1.2和0.2-1.2mg/l,属于弱碱性医疗矿泉水。
实施例2
一种弱碱性甘草饮料的制备方法,主要以甘草和天然弱碱性温泉水为原料,经粉碎、提取浓缩、调配灌装步骤制得弱碱性甘草饮料,其ph值7.1-7.9。
1)所述粉碎步骤为:将甘草粉碎,得到甘草粗粉;
2)所述提取浓缩步骤为:将甘草粗粉与天然弱碱性温泉水调配的浓度为60%乙醇溶液按照1∶30的料液比,置于提取罐中,然后加热至90℃,提取3个小时,趁热过滤至浓缩罐中,减压浓缩回收乙醇,制得甘草浓缩液;
3)所述调配灌装步骤为:向甘草浓缩液中加入一定量的天然弱碱性温泉水混匀,调节弱碱性甘草饮料的ph值至7.1-7.9、甘草酸含量不低于0.05mg/ml,然后灌装,灭菌。
作为优选方案,所述天然弱碱性温泉水来源于内蒙古自治区赤峰市敖汉旗四家子镇热水汤,又称敖汉温泉水;敖汉温泉水ph值7.1-7.9,偏硅酸含量25-126.5mg/l,锂、锶含量分别0.2-1.2和0.2-1.2mg/l,属于弱碱性医疗矿泉水。
实施例3
一种弱碱性甘草饮料的制备方法,主要以甘草和天然弱碱性温泉水为原料,经粉碎、提取浓缩、调配灌装步骤制得弱碱性甘草饮料,弱碱性甘草饮料ph值7.1-7.9;
1)所述粉碎步骤为:将甘草粉碎,得到甘草粗粉;
2)所述提取浓缩步骤为:将甘草粗粉与天然弱碱性温泉水调配的浓度为40%乙醇溶液按照1∶80的料液比,置于提取罐中,加热至100℃,提取5小时,趁热过滤至浓缩罐,减压浓缩回收乙醇,制得甘草浓缩液;
3)所述调配灌装步骤为:甘草浓缩液中加入一定量的天然弱碱性温泉水混匀,调节弱碱性甘草饮料的ph值至7.1-7.9、甘草酸含量不低于0.1mg/ml,然后灌装,灭菌。
作为优选方案,所述天然弱碱性温泉水来源于内蒙古自治区赤峰市敖汉旗四家子镇热水汤,又称敖汉温泉水;敖汉温泉水ph值7.1-7.9,偏硅酸含量25-126.5mg/l,锂、锶含量分别0.2-1.2和0.2-1.2mg/l,属于弱碱性医疗矿泉水。
实施例4
一种弱碱性甘草饮料的制备方法,主要以甘草和天然弱碱性温泉水为原料,经粉碎、提取浓缩、调配灌装步骤制得弱碱性甘草饮料,弱碱性甘草饮料ph值7.1-7.9;
1)所述粉碎步骤为:将甘草粉碎,得到甘草粗粉;
2)所述提取浓缩步骤为:将甘草粗粉与天然弱碱性温泉水调配的浓度为80%乙醇溶液按照1∶20的料液比,置于提取罐中,加热至110℃,提取4小时,趁热过滤至浓缩罐,减压浓缩回收乙醇,制得甘草浓缩液;
3)所述调配灌装步骤为:甘草浓缩液中加入一定量的天然弱碱性温泉水混匀,调节弱碱性甘草饮料的ph值至7.1-7.9、甘草酸含量不低于0.2mg/ml,然后灌装,灭菌。
作为优选方案,所述天然弱碱性温泉水来源于内蒙古自治区赤峰市敖汉旗四家子镇热水汤,又称敖汉温泉水;敖汉温泉水ph值7.1-7.9,偏硅酸含量25-126.5mg/l,锂、锶含量分别0.2-1.2和0.2-1.2mg/l,属于弱碱性医疗矿泉水。
实施例5
一种弱碱性甘草饮料的制备方法,主要以甘草和天然弱碱性温泉水为原料,经粉碎、提取浓缩、调配灌装步骤制得弱碱性甘草饮料,弱碱性甘草饮料ph值7.1-7.9;
1)所述粉碎步骤为:将甘草粉碎,得到甘草粗粉;
2)所述提取浓缩步骤为:将甘草粗粉与天然弱碱性温泉水调配的浓度为50%乙醇溶液按照1∶60的料液比,置于提取罐中,加热至80℃,提取10小时,趁热过滤至浓缩罐,减压浓缩回收乙醇,制得甘草浓缩液;
3)所述调配灌装步骤为:甘草浓缩液中加入一定量的天然弱碱性温泉水混匀,调节弱碱性甘草饮料的ph值至7.1-7.9、甘草酸含量不低于0.3mg/ml,然后灌装,灭菌。
作为优选方案,所述天然弱碱性温泉水来源于内蒙古自治区赤峰市敖汉旗四家子镇热水汤,又称敖汉温泉水;敖汉温泉水ph值7.1-7.9,偏硅酸含量25-126.5mg/l,锂、锶含量分别0.2-1.2和0.2-1.2mg/l,属于弱碱性医疗矿泉水。
实施例6
一种弱碱性甘草饮料的制备方法,主要以甘草和天然弱碱性温泉水为原料,经粉碎、提取浓缩、调配灌装步骤制得弱碱性甘草饮料,弱碱性甘草饮料ph值7.1-7.9;
1)所述粉碎步骤为:将甘草粉碎,得到甘草粗粉;
2)所述提取浓缩步骤为:将甘草粗粉与天然弱碱性温泉水调配的浓度为70%乙醇溶液按照1∶50的料液比,置于提取罐中,加热至90℃,提取8小时,趁热过滤至浓缩罐,减压浓缩回收乙醇,制得甘草浓缩液;
3)所述调配灌装步骤为:甘草浓缩液中加入一定量的天然弱碱性温泉水混匀,调节弱碱性甘草饮料的ph值至7.1-7.9、甘草酸含量不低于0.4mg/ml,然后灌装,灭菌。
作为优选方案,所述天然弱碱性温泉水来源于内蒙古自治区赤峰市敖汉旗四家子镇热水汤,又称敖汉温泉水;敖汉温泉水ph值7.1-7.9,偏硅酸含量25-126.5mg/l,锂、锶含量分别0.2-1.2和0.2-1.2mg/l,属于弱碱性医疗矿泉水。
药效学实验
利用本发明工艺制备弱碱性甘草饮料,通过弱碱性甘草饮料对慢性萎缩性胃炎模型大鼠和急性胃粘膜损伤大鼠的胃粘膜辅助保护作用研究,评价其保健作用。
实验材料与设备
实验动物:sd大鼠
造模试剂:阿司匹林肠溶片、95%乙醇、无水乙醇
治疗试剂:弱碱性甘草饮料(采用本发明制备甘草酸浓度0.1mg/ml)、胃康灵胶囊溶液(除去胶囊衣配制成86.7mg/ml的溶液)、蒸馏水
检测试剂:丙二醛(mda)酶联免疫吸附测定试剂盒(e-el-0060c)、大鼠胞外超氧化物歧化酶(sod3)酶联免疫吸附测定试剂盒(e-el-r1426c)
仪器设备:微型高速离心机c2500-r-230v、电热恒温培养箱icv-450、全自动酶标仪multiskanmk3
1、弱碱性甘草饮料对慢性萎缩性胃炎模型大鼠的作用
1.1实验动物分组
取体重220~250g的sd大鼠30只,随机分为空白组8只、模型组8只、弱碱性甘草饮料7只、胃康灵(阳性对照)组7只。
1.2实验方法
1.2.1大鼠慢性萎缩性胃炎模型复制
模型组、弱碱性甘草饮料组、胃康灵组sd大鼠均灌胃由阿司匹林片配制的2%水杨酸钠与30%乙醇混合溶液,2ml/次/天,每次灌胃造模前后1h禁食禁水,连续造模三周。造模3周后单日禁食不禁水,双日自由进食、进水,并继续用2%水杨酸钠与30%乙醇混合溶液灌胃造模持续3周。空白组按以上方法用蒸馏水灌胃模拟造模。造模第6周末,从模型组和空白组分别随机取1只大鼠观察胃粘膜损伤程度及萎缩情况,判断造模是否成功。
如图1、图2所示,通过观察,模型组1号与空白组9号大鼠比较,胃粘膜损伤明显,胃粘膜溃疡清晰可见,胃部萎缩明显,不易摊开,判定造模成功。
1.2.2治疗方案
对慢性萎缩性胃炎模型大鼠的治疗干预,具体每组的治疗方案分别为:
空白组:灌胃蒸馏水治疗,按5ml/kg体积灌胃。
模型组:灌胃蒸馏水治疗,按5ml/kg体积灌胃。
弱碱性甘草饮料:按实验动物与人体表面积比等效剂量换算,弱碱性甘草饮料(甘草酸浓度0.1mg/ml)按5ml/kg体积灌胃。
胃康灵(阳性对照)组:胃康灵胶囊(86.7mg/ml)按5ml/kg体积灌胃。
上述各组大鼠每天灌胃干预一次,其他条件一样,连续灌胃干预14天。
1.2.3检测指标
对慢性萎缩性胃炎模型大鼠胃粘膜损伤面积进行计数评价,并对血清sod、mda含量进行测定。sod和mda可间接反映自由基代谢水平。当胃粘膜损伤时表现为sod活性降低,mda的含量升高。
丙二醛(mda)是胃粘膜的攻击因子之一,它的含量反映机体脂质过氧化的速率及强度,可间接反映组织受自由基损伤的程度。机理是:氧自由基攻击细胞膜中的不饱和脂肪酸,产生mda,破坏细胞膜的完整化增加细胞膜的通透性,诱导炎症介质的产生,引起组织损伤和功能障碍。评判标准是观察弱碱性甘草饮料能否抑制胃粘膜损伤大鼠血清中mda的升高。
超氧化物歧化酶(sod)是胃粘膜的保护因子之一,其活力的高低间接反映机体清除自由基的能力,在生命体的自我保护系统和免疫系统中起重要的作用。机理是:在胃粘膜损伤过程中会大量产生氧自由基,sod通过清除过多的自由基,减轻氧自由基对胃粘膜的损伤。评判标准是观察弱碱性甘草饮料能否增加胃粘膜损伤大鼠血清中sod含量。
1.3实验结果
从表1中可以看出:弱碱性甘草饮料组血清mda含量较模型组有明显的降低,说明弱碱性甘草饮料较好的抑制了血清mda的升高,其抑制mda升高的作用与胃康灵胶囊相等。从机理角度说明了弱碱性甘草饮料具有降低胃粘膜的攻击因子mda含量,减少自由基损伤胃粘膜,引起组织损伤和功能障碍。
弱碱性甘草饮料组血清sod含量均高于其他3组。弱碱性甘草饮料血清sod含量较模型组和空白组明显提升了血清sod含量,增强了机体对自由基的清除能力。结果说明弱碱性甘草饮料能较好的保护胃粘膜,其清除机体自由基作用明显优于胃康灵胶囊。从胃粘膜损伤面积计数评价看,弱碱性甘草饮料能够明显抑制胃部溃疡面的形成。
表1弱碱性甘草饮料对慢性萎缩性胃炎模型大鼠的作用的实验结果
2、弱碱性甘草饮料对无水乙醇引起大鼠胃粘膜损伤的保护作用
2.1实验动物分组
取体重220~250g的sd大鼠30只,随机分为空白组8只、模型组8只、弱碱性甘草饮料组7只、胃康灵(阳性对照)组7只。
2.2实验方法
提前预防给药一周
空白组:灌胃蒸馏水治疗,按5ml/kg体积灌胃。
模型组:灌胃蒸馏水治疗,按5ml/kg体积灌胃。
弱碱性甘草饮料组:将弱碱性甘草饮料用量折算到大鼠灌胃剂量,按5ml/kg体积灌胃。
胃康灵(阳性对照)组:灌胃胃康灵治疗,按5ml/kg体积灌胃。
各组大鼠每天灌胃给药一次,其他条件一样,连续给药7天。
大鼠急性胃粘膜损伤模型复制
第七天预防给药2h后,对模型组、弱碱性甘草饮料、阳性对照组以3ml/kg剂量灌胃无水乙醇,空白组灌胃蒸馏水,1h后处死大鼠,观察胃粘膜损伤程度,并进行计分评价。
计分评价标准:-胃粘膜未损伤,不见血管充血和出血:1分
-胃粘膜损伤面积小于1/3,部分充血:2-3分
-胃粘膜损伤面积达1/2,充血或部分出血,部分胃粘膜脱落:4-5分
-胃粘膜损伤面积超过2/3,出血充血严重,胃粘膜脱落明显:6-7分
2.3实验结果
2.3.1空白组大鼠胃粘膜情况
从图3可以看出,空白组:胃粘膜未损伤,不见血管充血和出血,得分情况如表2所示。
表2空白组得分评价
2.3.2模型组无水乙醇引起大鼠胃粘膜损伤作用研究
从图4可以看出,模型组:胃粘膜损伤严重,出血和胃粘膜脱落明显,得分情况如表3所示。
表3模型组得分评价
2.3.3弱碱性甘草饮料对无水乙醇引起大鼠胃粘膜损伤的保护作用研究
从图5可以看出,弱碱性甘草饮料组:胃粘膜损伤严重2只,部分出血和充血2只,损伤不明显3只,得分情况如表4所示。
表4弱碱性甘草饮料组得分评价
2.3.4胃康灵(阳性对照)对无水乙醇引起大鼠胃粘膜损伤的保护作用研究
从图5可以看出,胃康灵(阳性对照)组:胃粘膜损伤严重3只,部分出血和充血4只,得分情况如表5所示。
表5胃康灵(阳性对照)得分评价
小结:各组平均得分情况:空白组1分、模型组7分、弱碱性甘草饮料4分、胃康灵(阳性对照)组5.71分。从模型组胃粘膜脱落和出血看出无水乙醇对胃粘膜损伤严重,提示大量饮酒可直接导致胃出血、胃粘膜损伤。弱碱性甘草饮料对大量饮酒造成的胃粘膜损伤具有较好的预防保护作用,与模型组比较有显著差异,且效果优于胃康灵组。从胃粘膜损伤计分可看出弱碱性甘草饮料具有很好的预防胃粘膜急性损伤作用,经常饮用可有效避免因大量饮酒造成的胃粘膜损伤。
3、提取液对甘草酸提取率的影响
3.1实验材料
甘草酸标准品:购自中国药品生物制品检定所,
无水乙醇:分析纯,北京化学试剂厂生产,
实验仪器:主要高效液相色谱,日本岛津公司生产。
3.2实验方法
3.2.1实验指标的测定
甘草酸含量测定:高效液相色谱法,具体的测定方法和步骤采用2015版中国药典第86页-第87页(中国医药科技出版社)记录的方法进行测定。
3.2.2提取工艺
3.2.2.1天然弱碱性温泉水醇提法
提取工艺为:取甘草1000g,将甘草粉碎,得到甘草粗粉;将甘草粗粉与天然弱碱性温泉水调配的浓度为60%乙醇溶液按照1∶30的料液比,置于提取罐中,然后加热至90℃,提取3个小时后,减压浓缩回收乙醇,制得甘草浓缩液后,继续浓缩得到甘草提取浸膏,进行干燥得到干燥品,测定甘草提取物重量及甘草酸含量,甘草提取物重量以干燥品质量计,甘草酸含量是指每克甘草提取物中甘草酸的质量。
(2)纯净水醇提法:
提取工艺为:取与3.2.2.1同批次的甘草1000g,将甘草粉碎,得到甘草粗粉;将甘草粗粉与纯净水调配的浓度为60%乙醇溶液按照1∶30的料液比,置于提取罐中,然后加热至90℃,提取3个小时后,减压浓缩回收乙醇,制得甘草浓缩液后,继续浓缩得到甘草提取浸膏,进行干燥得到干燥品,测定甘草提取物重量及甘草酸含量,甘草提取物重量以干燥品质量计,甘草酸含量是指每克甘草提取物中甘草酸的质量。
3.3实验结论
实验结果如表6所示:以天然弱碱性温泉水调配乙醇作为提取液,甘草提取物重量要大于以纯净水作为提取液的甘草提取物重量,每克甘草提取物中甘草酸的含量也大于以纯净水作为提取液甘草酸的含量,因此以天然弱碱性温泉水调配乙醇作为提取液可以大大促进甘草酸等有效成份的溶出,提高有效成分的提取率。
表6提取液对甘草酸溶出效果的影响