本发明涉及生物医药
技术领域：
，尤其涉及一种增强抗衰老功效的蜂王浆多肽提取方法。
背景技术：
：蜂王浆（royaljelly），又名蜂皇浆、蜂皇乳、蜂王乳、蜂乳，是蜜蜂巢中培育幼虫的青年工蜂咽头腺的分泌物，是供给将要变成蜂王的幼虫的食物，也是蜂王终身的食物。所谓蜂王浆就是青壮年蜜蜂食用花粉后分泌的一种乳状物，此乳状物就像哺乳动物的乳汁并且极具营养价值和免疫功能而且含有极高的长寿因子，蜜蜂和蜂王在卵期是一样的，孵化后吃三天蜂王浆以后改为吃蜂蜜和花粉的长成蜜蜂，孵化后一直食用蜂王浆的长成蜂王，蜜蜂的寿限在一至六个月而蜂王因一直食用蜂王浆一般能活五到七年。蜂王浆的颜色是根据蜜蜂食用花粉的不同而稍有改变一般分为乳白色和微黄色。蜂王浆的主要作用包括：1、辅助降低血糖。此作用主要因其含有的胰岛素样肽类推理得来，胰岛素样肽类是治疗糖尿病的特效药物。实验证明，每天10克蜂王浆与林中灵合用食用有治疗糖尿病和失眠的作用。2、抗氧化功效。此作用是蜂王浆被大众普遍肯定的作用，它对细胞的修复以及再生具有很强的作用。在蜂王浆中检测出的超氧化物歧化酶（sod）是抗氧化的主要成分。3、降低血脂。蜂王浆含有人体必须的维生素达10种以上，能平衡脂肪代谢和糖代谢，可降低肥胖者的高血脂和高血糖，非常适合肥胖型糖尿病患者。4、控制血管扩张、降低血压。这个结论来自于其所含的10－羟基－癸烯酸（王浆酸）以及王浆主要蛋白-1。5、保护肝脏。蜂王浆不仅能够杀灭肝炎病毒，并且能抑制病毒在肝脏细胞内复制。蜂胶中的黄酮类等物质有降低转氨酶作用，促进肝细胞再生，防止肝硬变，此类患者，不适合服用含酒精的蜂胶制品，而应服用不含酒精的含量较高的蜂胶软胶囊或浓缩液。6、抗菌、消炎。蜂王浆有抗菌和对伤口感染具有促进愈合的作用。试验也表明，蜂王浆的抗菌谱为大肠杆菌、金黄色葡萄球伤寒杆菌、链球菌、变形杆菌、枯草杆菌、结核杆菌、星状发癣菌和表皮癣菌等。蜂王浆的抗菌消炎作用与ph有关。当ph为4.5时抗菌最强，ph为7时，抗菌性减弱，ph为8时，抗菌性消失。蜂王浆的ph为3.5～4.5之间，因此，在天然的状况下，它的抗菌消炎性最强。7，抗衰老作用，和强化性功能作用，同时还有抗辐射，增强记忆力的作用。新鲜蜂王浆含有多种生理活性物质，但贮存不当极容易发生腐烂变质，失去原有的生物活性和营养价值。研究表明，蜂王浆的变质主要是其所含有的蛋白质发生变化，从而导致一系列的化学发音促使其变质，但是蜂王浆所含的蛋白质品种多，为了提升这些蛋白质在体内的吸收效果，增强其药性，有必要研究一种蜂王浆多肽的提取方法。技术实现要素：基于
背景技术：
存在的技术问题，本发明提出了一种增强抗衰老功效的蜂王浆多肽提取方法。本发明的技术方案如下：一种增强抗衰老功效的蜂王浆多肽提取方法，包括以下步骤：a、酶解：在蜂王浆中加入胰蛋白酶解液、蓝莓汁和0.9%的生理盐水，在35-40℃条件下酶解60min；b、酶失活：将酶解后的液体在100℃沸水中煮沸2-3min，迅速降温至3-5℃；c、离心：用去离子水与蜂王浆混合均匀后，在5000-8000rpm条件下，离心5min，得到蜂王浆上清液；d、过滤：采用孔径为0.25-0.35μm的超滤膜过滤过滤；e、冷冻干燥：采用真空冷冻干燥机进行处理，即可得到蜂王浆多肽。优选的，所述的蓝莓汁为新鲜蓝莓榨汁后的汁液。优选的，所述的蓝莓汁在榨汁后4h内使用。优选的，所述的步骤a中，各原料的重量百分比如下：蜂王浆50-65%胰蛋白酶解液2-5%蓝莓汁20-30%0.9%的生理盐水余量。本发明的有益之处在于：本发明为了提高蜂王浆的利用效果，提供了一种蜂王浆多肽的提取方法；加入胰蛋白酶进行酶解后可以提高蛋白质的利用率；加入蓝莓汁和生理盐水后，蓝莓汁中的植物性生理活性物质与蜂王浆中的生理活性物质相配合，抗衰老效果更佳；本发明的方法简单，效果好，不但提高了蜂王浆中蛋白质的利用率，而且增强了其抗衰老效果。具体实施方式实施例1一种增强抗衰老功效的蜂王浆多肽提取方法，包括以下步骤：a、酶解：在蜂王浆中加入胰蛋白酶解液、蓝莓汁和0.9%的生理盐水，在36℃条件下酶解60min；b、酶失活：将酶解后的液体在100℃沸水中煮沸2.5min，迅速降温至4℃；c、离心：用去离子水与蜂王浆混合均匀后，在7500rpm条件下，离心5min，得到蜂王浆上清液；d、过滤：采用孔径为0.30μm的超滤膜过滤过滤；e、冷冻干燥：采用真空冷冻干燥机进行处理，即可得到蜂王浆多肽。所述的蓝莓汁为新鲜蓝莓榨汁后的汁液。所述的蓝莓汁在榨汁后4h内使用。所述的步骤a中，各原料的重量百分比如下：蜂王浆60%胰蛋白酶解液3%蓝莓汁22%0.9%的生理盐水余量。实施例2一种增强抗衰老功效的蜂王浆多肽提取方法，包括以下步骤：a、酶解：在蜂王浆中加入胰蛋白酶解液、蓝莓汁和0.9%的生理盐水，在40℃条件下酶解60min；b、酶失活：将酶解后的液体在100℃沸水中煮沸2min，迅速降温至5℃；c、离心：用去离子水与蜂王浆混合均匀后，在5000rpm条件下，离心5min，得到蜂王浆上清液；d、过滤：采用孔径为0.35μm的超滤膜过滤过滤；e、冷冻干燥：采用真空冷冻干燥机进行处理，即可得到蜂王浆多肽。所述的蓝莓汁为新鲜蓝莓榨汁后的汁液。所述的蓝莓汁在榨汁后4h内使用。所述的步骤a中，各原料的重量百分比如下：蜂王浆50%胰蛋白酶解液5%蓝莓汁20%0.9%的生理盐水余量。实施例3一种增强抗衰老功效的蜂王浆多肽提取方法，包括以下步骤：a、酶解：在蜂王浆中加入胰蛋白酶解液、蓝莓汁和0.9%的生理盐水，在35℃条件下酶解60min；b、酶失活：将酶解后的液体在100℃沸水中煮沸3min，迅速降温至3℃；c、离心：用去离子水与蜂王浆混合均匀后，在8000rpm条件下，离心5min，得到蜂王浆上清液；d、过滤：采用孔径为0.25μm的超滤膜过滤过滤；e、冷冻干燥：采用真空冷冻干燥机进行处理，即可得到蜂王浆多肽。所述的蓝莓汁为新鲜蓝莓榨汁后的汁液。所述的蓝莓汁在榨汁后4h内使用。所述的步骤a中，各原料的重量百分比如下：蜂王浆65%胰蛋白酶解液2%蓝莓汁30%0.9%的生理盐水余量。对比实施例1将实施例1中的蓝莓去除，其余条件不变。下面对实施例1-3以及对比实施例1的蜂王浆多肽进行小鼠灌胃测试，具体测试方法如下：将50只小鼠按体重随机分成5组：空白对照组、实施例1-3和对比实施例1，每组10只，用北京维通利华实验动物技术有限公司提供的标准饲料分笼饲养，自由饮食饮水。适应性喂养5天后进行灌胃试验。每日分别给实验组小鼠灌胃，小鼠定时测定体重，根据体重计算灌胃的量，灌胃量为：0.1g/日/kg，连续灌胃30天。连续灌胃30天，末次灌胃后，各组小鼠禁食16小时（过夜），然后1次性灌胃给予50%乙醇12ml/kg体重，6小时后取材（空白对照组不作处理，不禁食取材），测试肝组织mda含量、sod含量和全血gsh含量。结果表明，各组小鼠体重的增长差异不大，动物在试验过程中活动正常，无异常表现，表明蜂王浆多肽对小鼠的生长发育和健康无不良影响。具体mda含量、sod含量和gsh含量测试结果如下：mda含量（nmol/mg）sod含量（nu/mg）gsh含量（mg/l）空白对照组2.85±0.4015.21±2.120.126±0.022实施例11.65±0.2327.18±2.820.218±0.038实施例21.68±0.2327.93±2.850.212±0.038实施例31.72±0.2527.81±2.810.221±0.037对比实施例12.53±0.3519.25±2.450.153±0.032由以上测试数据可以知道，本发明在酶解时加入蓝莓，具有显著提升多肽抗衰老的效果。以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本
技术领域：
的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。当前第1页12