本发明涉及生物领域，具体地，本发明涉及冬虫夏草寄主幼虫饲料，饲料制备方法及其饲养冬虫夏草寄主幼虫的方法。
背景技术：
：冬虫夏草性甘、温平、无毒，是著名的滋补强壮药，常用肉类炖食，有补虚健体之效。适用于治疗肺气虚和肺肾两虚、肺结核等所致的咯血或痰中带血、咳嗽。气短、盗汗等，对肾虚阳痿、腰膝酸疼等亦有良好的疗效，也是老年体弱者的滋补佳品。药理学现代研究结果中，冬虫夏草含有虫草酸约7％，碳水化合物28.9％，脂肪约8.4％，蛋白质约25％，脂肪中82.2％为不饱和脂肪酸，此外，尚含有维生素b12、麦角脂醇、六碳糖醇、生物碱等。冬虫夏草具有免疫调节作用，既能增加免疫系统细胞、组织数量，促进抗体产生，增加吞噬、杀伤细胞数量、增强其功能，又可以调低某些免疫细胞的功能；是抗癌的活性物质，在体外具有明确的抑制、杀伤肿瘤细胞的作用；能提高细胞能量，减轻疲劳；还能调节心脏功能，降低心脏对氧的消耗，抗心律失常；调节肝脏功能，减轻肝损伤、抗肝纤维化；调节呼吸系统功能，具有扩张支气管、平喘、祛痰、防止肺气肿的作用；调节肾脏功能，减轻毒性物质对肾脏的损害；调节造血功能，增强骨髓生成血细胞的能力；降低血液中的胆固醇和甘油三酯，提高对人体有利的高密度脂蛋白，减轻动脉粥样硬化；此外，还具有直接抗病毒、调节中枢神经系统功能、调节性功能等作用。近来，由于生态环境的退化和人为的过度采挖，虫草的产量大幅下降，由此，冬虫夏草寄主幼虫的饲养以及进一步的培植冬虫夏草的系统有待提高。技术实现要素：本申请是基于发明人对以下事实和问题的发现和认识作出的：现有的蝙蝠蛾幼虫的饲养中所用的蝙蝠蛾幼虫人工饲料保质期短、不利于机械化操作，目前还处于实验室饲养阶段。本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明提出了一种新的人工饲料配方及粘膜的制备方法，利于饲料保鲜、以及在联体培育盘饲养中进行饲料自动化投放，提高工作效率，以便人工饲养蝙蝠蛾幼虫能有序循环下去，促进人工冬虫夏草的培植。在本发明的第一方面，本发明提出了一种冬虫夏草寄主幼虫饲料。根据本发明的实施例，所述饲料以松香甘油酯包裹。发明人发现，松香甘油酯包裹饲料可以在饲料的表面形成一层隔离膜，有效将饲料饲养周期从20天左右延长到40天以上，从而可减少更换饲料的频率和病原微生物传播的几率。以松香甘油酯包裹形成的冬虫夏草寄主幼虫固化饲料，利于饲料在制备、周转、贮藏、饲养过程中机械化以及规模化操作。根据本发明的实施例，上述饲料还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：根据本发明的实施例，所述饲料包括珠芽蓼和鹅绒萎陵菜。发明人通过筛选实验发现，饲料中添加高原植物-珠芽蓼和鹅绒萎陵菜，幼虫的年存活率明显强于添加其它高原植物，珠芽蓼和鹅绒萎陵菜含有的营养成分和比例比较适合幼虫生长需求。根据本发明实施例的冬虫夏草寄主幼虫饲料能够有效刺激幼虫取食，提供幼虫生长所需营养成分，补充幼虫发育过程所需生长因子。根据本发明的实施例，所述珠芽蓼和鹅绒萎陵菜是以粉末的形式提供的。发明人发现，珠芽蓼和鹅绒萎陵菜以粉末的形式提供，更加有利于幼虫的取食以及营养成分在幼虫体内的吸收。根据本发明的实施例，所述饲料还可以进一步包括:琼脂粉、燕麦粉、大豆粉、蔗糖以及柠檬酸以及蒸馏水。发明人发现，饲料中添加适量的燕麦粉和大豆粉，不会显著影响幼虫的生长，而低海拔辅料燕麦粉和大豆粉可以减少高原植物在饲料中的用量进而降低饲料成本；同时蔗糖能够更进一步刺激幼虫的取食；而柠檬酸作为天然防腐剂，配方中添加柠檬酸对蝙蝠蛾幼虫生长无副作用，而能够有效延长饲料的平均饲养周期；琼脂化学结构稳定，不易被菌丝分解利用，由琼脂作为凝固剂可有效将液体培养基转化为固体培养基。根据本发明的实施例，基于100ml的蒸馏水，所述珠芽蓼的用量为5.5-8g，所述鹅绒萎陵菜的用量为8-12g。发明人通过用量筛选实验发现，珠芽蓼的用量低于5.5g，则饲养效果显著不好，但高于8g后，饲养效果并没有显著提高，为了保护高原环境和成本控制，配方中珠芽蓼粉用量范围优化为5.5～8g；同样，鹅绒萎陵菜低于8g，则饲养效果显著不好，但高于12g后，饲养效果没有显著提高，为了保护高原环境和成本控制，配方中鹅绒萎陵菜粉用量范围优化为8～12g。根据本你发明的实施例，基于100ml的蒸馏水，所述琼脂粉的用量为5-10g，所述燕麦粉的用量为1.5-3g，所述大豆粉的用量为1.2-2g，所述蔗糖的用量为2-3g，所述柠檬酸的用量为0.2-0.4g。发明人通过实验发现，上述成分在上述用量范围内，既可满足冬虫夏草寄主幼虫生长的需求，又可进一步有效刺激幼虫取食，有效延长饲料的饲养周期。在本发明的第二方面，本发明提出了一种冬虫夏草寄主幼虫饲料。根据本发明的实施例，基于100ml蒸馏水，所述饲料包括：5.5-8g珠芽蓼粉，8-12g鹅绒萎陵菜粉，5-10g琼脂粉，1.5-3g燕麦粉，1.2-2g大豆粉，2-3g蔗糖，0.2-0.4g柠檬酸，其中，所述饲料以松香甘油酯包裹。根据本发明实施例的冬虫夏草寄主幼虫饲料，以高原幼虫最喜食高原植物为主，刺激幼虫取食，提供幼虫生长所需营养成分，补充幼虫发育过程所需生长因子，并辅以低海拔常见栽培植物，利用根据本发明实施例的饲料饲养幼虫，幼虫年存活率％、平均蛹重、平均产卵量均处于优良的水平。同时，本申请的饲料以松香甘油酯包裹时，饲料成型性好、饲养周期较长，利于饲料在制备、周转、贮藏、饲养过程中机械化操作。在本发明的第三方面，本发明提出了一种制备冬虫夏草寄主幼虫饲料的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：(1)向100ml蒸馏水中加入琼脂粉和蔗糖，并在121℃条件下高压蒸汽灭菌30min；(2)将珠芽蓼粉、鹅绒萎陵菜粉、燕麦粉、大豆粉加入步骤(1)所得溶液中，当温度降至55℃时，加入柠檬酸；(3)在无菌环境下机械分割步骤(2)产物，所述分割后的饲料粒径的大小为1.5cm；(4)将松香甘油酯快速喷洒到分割后的饲料，所述松香甘油酯的温度为80℃，以便获得包裹有松香甘油酯的饲料。上述制备饲料的方法，操作简单，并且保证了饲料中原料的营养成分的不会流失，饲料成分混合均匀、饲料洁净，能够满足幼虫饲养的卫生要求。所制备的饲料饲养幼虫，幼虫年存活率％、平均蛹重、平均产卵量均处于优良的水平。且上述操作条件下进行松香甘油酯包裹饲料，松香甘油酯在饲料表面成膜均匀，饲料成型性好，所制备的饲料饲养周期较长，利于人工饲料在制备、周转、贮藏、饲养过程中机械化操作。根据本发明的实施例，上述方法还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：根据本发明的实施例，所述珠芽蓼的用量为5.5-8g，所述鹅绒萎陵菜的用量为8-12g，所述琼脂粉的用量为5-10g，所述燕麦粉的用量为1.5-3g，所述大豆粉的用量为1.2-2g，所述蔗糖的用量为2-3g，所述柠檬酸的用量为0.2-0.4g。发明人发现，在上述用量范围内，既可保证较好的饲养效果，又可有效地保护高原环境和成本控制，满足冬虫夏草寄主幼虫生长的需求，有效刺激幼虫取食，有效延长饲料的饲养周期。在本发明的第四方面，本发明提出了一种饲养冬虫夏草寄主幼虫的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括给所述冬虫夏草寄主幼虫喂食前面所述的饲料，或前面所述方法制备的饲料。利用根据本发明实施例的方法饲养冬虫夏草寄主幼虫，幼虫年存活率％、平均蛹重、平均产卵量均处于优良的水平。根据本发明的实施例，所述冬虫夏草寄主幼虫饲养在温度为-2-14℃、湿度为30％-90％、洁净度为100万级的条件下。上述饲养条件是在发明人根据1981年至2010年青藏高原及周边约205个气象台站月值气象数据的当月平均值，以及昼夜温差(分别参考冷暖季历史数据)设定的，模拟了幼虫生长所需要的气候环境，更加适宜冬虫夏草寄主幼虫的生长。根据本发明的实施例，冬虫夏草寄主幼虫饲养盘中高原土湿度为45％-65％，高原土厚度为0.3-0.6cm。发明人发现，45％-65％的高原土湿度能提供蝙蝠蛾幼虫适宜的生长微环境，0.3-0.6cm厚的高原土能满足蝙蝠蛾幼虫钻洞习性和活动空间，进而在高原土湿度为45％-65％，高原土厚度为0.3-0.6cm的环境能更好的满足蝙蝠蛾幼虫生长的需要，进一步促进冬虫夏草寄主幼虫的生长。根据本发明的具体实施例，所述饲养是在联体培育盘进行的，饲养过程中采用饲料自动化投放。因而有效提高了工作效率，人工饲养蝙蝠蛾幼虫能有序循环下去，促进全人工冬虫夏草的培植。根据本发明的再一具体实施例，所述联体培育盘由32(4*8)个单元格组成，单个单元培育盘规格为长6cm*宽4cm*高3cm，上面加盖。所述联体培育盘能做到单独培养，避免幼虫撕咬合和病原的传播。根据本发明的再一具体实施例，所述冬虫夏草寄主幼虫是驯化后性状稳定的蝙蝠蛾幼虫。驯化后的蝙蝠蛾幼虫更加适应人为创造的仿生态系统，种群个体生活周期趋于同步化，相较野生幼虫更适合用于人工冬虫夏草的培植。具体实施方式下面详细描述本发明的实施例，所述实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。本研究模拟所使用的历史气候数据来自中国气象局国家气象信息中心气象资料室最新的《中国地面气候资料月值数据集》，该数据集包括全国752个气象站点的月值数据，并由国家气象信息中心进行质量控制。从该数据集中整理了青藏高原及周边约205个气象台站自1981年至2010年的月值气象数据，并选取降水、温度、日照率等模型输入气象参数的月均值数据，整理后建立气象数据库。本研究模拟青藏高原进行幼虫饲养，幼虫生长所需温度、降水、日照率参数设定取青藏高原气象数据库当月平均值，每月根据数据库更改一次洁净区温度、湿度和日照率参数，其中高原温差每天根据冷暖季进行调节，即冷季(10月～3月)，昼夜温差设定2℃，暖季(4月～9月)，昼夜温差设定5℃。可得幼虫饲养条件：温度控制范围：-2-14℃；湿度控制范围：30％-90％；饲养间洁净度要求：100万级，操作人员需穿戴相应洁净服进行实验。人工饲料于培育盘中的参数为：无菌高原土湿度控制在45％-65％；培育盘底部高原土厚度为0.3-0.6cm。实施例1蝙蝠蛾幼虫人工饲料的制备本发明中的珠芽蓼粉、鹅绒萎陵菜粉为青藏高原蝙蝠蛾幼虫适生地采挖，去掉杂质、须根等，清水洗净、切片，立刻在55℃干燥，然后粉碎过80目得到。采用上述方法加工简洁，所得粉末能最大限度保留营养成分。采用如下方法制备饲料：三角瓶盛100ml蒸馏水，加入琼脂粉和蔗糖，在121℃条件下高压蒸汽灭菌30min，把热的琼脂溶液倒入烧杯内，将称量好的珠芽蓼粉、鹅绒萎陵菜粉、燕麦粉、大豆粉倒入烧杯中，并不断地用玻璃棒搅拌，在温度降至约55℃时，加入柠檬酸，在无菌环境下先机械分割人工饲料成长1.5cm粒径，然后将冷却至80℃时的热熔松香甘油酯快速喷洒到人工饲料上，达到瞬时凝固，形成表面成粘膜饲料制得饲料组。其中，称取珠芽蓼粉8.0g、鹅绒萎陵菜粉10g、琼脂粉6g、蔗糖2.5g、燕麦粉2.5g、大豆粉2.2g、柠檬酸0.3g和水100ml。采用上述方法制备得到饲料组a。称取珠芽蓼粉7.5g、鹅绒萎陵菜粉11g、琼脂粉6g、蔗糖3g、燕麦粉4g、大豆粉2.7g、柠檬酸0.3g和水100ml。采用上述方法制备得到饲料组b。称取珠芽蓼粉6.5g、鹅绒萎陵菜粉12g、琼脂粉6g、蔗糖2g、燕麦粉3g、大豆粉2.2g、柠檬酸0.3g和水100ml。采用上述方法制备得到饲料组c。称取珠芽蓼粉6.5g、鹅绒萎陵菜粉12g、琼脂粉6g、蔗糖2g、燕麦粉3g、大豆粉2.2g、柠檬酸0.3g和水100ml。采用上述方法但不经热熔松香甘油酯包裹制备得到膜对照组d。采挖、清洗、消毒处理后的新鲜珠芽蓼作为饲料对照组e。采挖、清洗、消毒处理后的新鲜鹅绒萎陵菜作为饲料对照组f。根据公开文献(王宏生)的报道，将配方为小大黄5g、山梨酸0.5g、黄豆粉15g、玉米粉10g、麦麸8g、酵母粉5g、琼脂10g、水100ml的人工饲料作为饲料对照组g。根据刘欣等的公开专利《一种冬虫夏草寄主幼虫饲料及其制备方法》制作饲料对照组h。实施例2不同饲料对蝙蝠蛾幼虫的饲养首先，在培育盘中铺上一层0.3cm后，湿度为55％的无菌高原土，用于幼虫保湿，将实施例1中的七个处理饲料组按照各自方法制备成1.5cm粒径大小，单个培育格放入10g饲料，每格放置一条幼虫，盖上盖后置于100万级洁净区内饲养。其中每个处理饲养100盘，每个培育盘有4*8个培育格，每隔一定时间后更换一次无菌培育盘、饲料、无菌高原土，每个处理所得蛹单独称重，并进行羽化交尾，计算雌虫平均产卵率和产卵量，观察每个处理对应饲料饲养周期。进行了为期三个幼虫时期的饲养，蝙蝠蛾的养护数据如表1所示。表1：由表可知：在饲料平均饲养周期方面，采用本发明的松香甘油酯包裹，如实验组a、b、c、e、f都具有较长的的饲养周期，长达40天以上；在产卵率和平均产卵上量上，采用本发明所述的饲料，如a、b、c、d、e、f都显著高于其它文献人工饲料对照组g、h；在幼虫存活率方面：采用本发明所述的饲料，优于现有饲料或相当，饲料组a\b\c\d优于饲料组g\h；平均蛹重方面：采用本发明所述的饲料，与现有饲料相当。。综合结果可以看出，采用本发明提供的饲料符合蝙蝠蛾幼虫整个生长阶段，幼虫的产卵率显著优于现有技术，优选方案更是减少了高原天然饲料的配比，减少了对高原环境的破坏，且本发明粘膜饲料成型性好、饲养周期较长，利于人工饲料在制备、周转、贮藏、饲养过程中机械化操作。实施例3高原饲料筛选在本实施中，发明人详细描述了用于饲料的高原植物的筛选：近年来研究发现，冬虫夏草寄主幼虫主要喜食约19科35属的不同植物根茎部分，其中又偏食蓼属、大黄属的植物，如蓼属的圆穗蓼、珠芽蓼、大黄属的小大黄，这些植物多数生长在西藏、四川、云南、青海等高原地带，这与寄主昆虫的分布是一致的。发明人从幼虫年存活率比较高且幼虫偏食的圆穗蓼、珠芽蓼、小大黄、鹅绒萎陵菜、羊角天麻中，考察它们的养虫效果，结果如表2所示：表2：饲料圆穗蓼珠芽蓼小大黄鹅绒萎陵菜羊角天麻幼虫年存活率％41.853.637.147.722.4由于珠芽蓼和鹅绒萎陵菜饲养幼虫的年存活率明显强于其它高原植物所做成的饲料，表明珠芽蓼和鹅绒萎陵菜含有的营养成分和比例比较适合幼虫生长需求，故发明人选择珠芽蓼和鹅绒萎陵菜作为组合饲料的高原成分，以刺激幼虫取食，提供幼虫生长所需营养成分，补充幼虫发育过程所需生长因子。实施例4饲料配方中除高原植物粉之外的其它辅料的筛选在本实施例中，发明人详细介绍了饲料配方中除高原植物粉之外的其它辅料的筛选：发明人设计了几组对照试验，分别考察不同辅料的添加与否对幼虫生长的影响，其中，在饲料组a的基础上不添加燕麦粉，得燕麦对照组；在饲料组a的基础上不添加大豆粉，得大豆对照组；在饲料组a的基础上不添加蔗糖，得蔗糖对照组；在饲料组a的基础上不添加柠檬酸，得柠檬酸对照组将以上对照组与饲料组a一起进行了为期三个幼虫历期的饲养，蝙蝠蛾的养护数据如表3所示，表3：分析表3可知，本方案虽然以高原幼虫最喜食高原植物珠芽蓼和鹅绒萎陵菜为主，但同时添加了低海拔辅料燕麦粉和大豆粉而不会影响幼虫的生长，但可以减少高原饲料的用量，起到保护高原植物和降低成本的作用。蔗糖是蝙蝠蛾幼虫能有效利用的糖类，添加蔗糖具有一定刺激幼虫取食的作用。柠檬酸是天然防腐剂，适量的添加对蝙蝠蛾幼虫生长无副作用。实施例5高原植物粉用量筛选在本实施例中，发明人详细介绍了高原植物粉在饲料中的用量的筛选：珠芽蓼粉用量优化：称取鹅绒萎陵菜粉10g、琼脂粉6g、蔗糖2.5g、燕麦粉2.5g、大豆粉2.2g、柠檬酸0.3g、水100ml以及一定量珠芽蓼粉进行珠芽蓼粉用量优化实验，其中在含有不同量的珠芽蓼粉的饲料饲养幼虫，幼虫的成活率如表4所示：表4：珠芽蓼粉用量4.04.55.05.56.06.57.07.58.08.59.0幼虫年存活率％45.847.450.651.251.351.952.152.552.852.852.9分析表4可以看出，珠芽蓼粉低于5.5g，则幼虫存活率显著降低，但高于8g后，幼虫存活率没有显著变化，饲养效果没有显著提高，因此出于保护高原环境和成本控制的目的，配方中珠芽蓼粉用量范围优化为5.5～8g。鹅绒萎陵菜粉用量优化：称取珠芽粉8g、琼脂粉6g、蔗糖2.5g、燕麦粉2.5g、大豆粉2.2g、柠檬酸0.3g、水100ml以及一定量鹅绒萎陵菜粉进行鹅绒萎陵菜粉粉用量优化实验，其中在含有不同量的鹅绒萎陵菜粉的饲料饲养幼虫，幼虫的成活率如表5所示：表5：鹅绒萎陵菜粉用量56789101112131415幼虫年存活率％42.844.447.651.952.352.852.953.453.553.653.7分析表5可以看出，鹅绒萎陵菜粉低于8g，则饲养效果显著不好，但高于12g后，饲养效果没有显著提高，发明人为了保护高原环境和成本控制，配方中鹅绒萎陵菜粉用量范围优化为8～12g。在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。当前第1页12