本发明涉及一种蛋白的提取方法，具体涉及一种从萤火虫蛹中提取蛋白的方法。
背景技术：
：：萤火虫是昆虫纲鞘翅目萤科中能够发光的昆虫的俗称，而萤火虫成虫多数种类只喝水或吃花粉和花蜜，或者直接利用幼虫期贮藏的油脂。由于没有进食大量的混杂的食物，因此成虫体内的成分纯净，异体蛋白含量少。萤火虫体内富含多种昆虫蛋白，包括荧光素与多种生物酶，而这些昆虫蛋白的成分较为丰富，且氨基酸配比合理，能全面的补充人体所需的营养，能有效促进体质虚弱、营养不良等情况的恢复，有助于进一步加强机体的免疫防御功能。而将其水解后复配添加进饲料中就得到了氨基酸饲料。技术实现要素：：本发明的目的在于，提供一种从萤火虫蛹中提取蛋白的方法，以解决上述技术问题。本发明通过以酶组合物的形式有效水解萤火虫，能高效的得到大量优质蛋白，同时进一步经过脱腥能加入到氨基酸饲料中。为实现上述目的，本发明提供如下方案：本发明提供一种从萤火虫蛹中提取蛋白的方法，包括如下步骤：(1)收集萤火虫蛹，洗净，烘干，粉碎过40～60目筛，得萤火虫蛹粉末；(2)往步骤(1)中萤火虫蛹粉末中加入1～3倍量的乙酸乙酯，进行脱脂处理，得脱脂萤火虫蛹粉末；(3)往步骤(2)中脱脂萤火虫蛹粉末中加入2～5倍量的蒸馏水，加入1～3％的混合酶，摇匀，升温至40～60℃，搅拌震荡反应1～3h，然后进行灭酶，过滤，取酶解液；(4)将步骤(3)的酶解液进行离心分离，收集下层液体；(5)将步骤(4)的下层液体加入大孔树脂中进行脱腥处理5～10h，过滤，得萤火虫蛹蛋白水解液。进一步的，所述步骤(3)中混合酶为胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶按比例1:1组成。进一步的，所述步骤(3)中灭酶条件：升温至90～100℃后保温5～10min。进一步的，所述步骤(4)中离心分离条件：转速为8000～9000r/min，时间为10～60min。进一步的，所述萤火虫蛹蛋白水解液能应用于饲料中。进一步的，本发明还提供一种液体氨基酸饲料，包含如下重量份的组分：萤火虫蛹蛋白水解液8～15份、赖氨酸2～6份、亮氨酸2～6份、甘氨酸4～7份、蜂蜜0.5～2份、木糖醇1～3份、纯净水20～30份。与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：(1)本发明通过利用水对蛋白质结构中较薄弱的部位进行破坏，促使蛋白质的分子结构舒张，而同时使用的胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶则可以进一步从舒张的位置开始进行水解，有助于提高水解效率，减少水解时间；(2)本发明提取的萤火虫蛹蛋白经过水解和脱腥，能应用于多种领域，将其应用于液体氨基酸饲料中，能通过补充多种氨基酸，从而促进动物免疫力提高。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明。实施例1一种萤火虫蛹蛋白水解液的制备方法，包括以下步骤：(1)收集萤火虫蛹，洗净，烘干，粉碎过50目筛，得萤火虫蛹粉末；(2)往步骤(1)中萤火虫蛹粉末中加入2倍量的乙酸乙酯，进行脱脂处理，得脱脂萤火虫蛹粉末；(3)往步骤(2)中脱脂萤火虫蛹粉末中加入3.5倍量的蒸馏水，加入2％的混合酶，混合酶为胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶按比例1:1组成，摇匀，升温至50℃，搅拌震荡反应2h，然后在升温至95℃后保温8min条件下进行灭酶，过滤，取酶解液；(4)将步骤(3)的酶解液在转速为8500r/min下进行离心分离40min，收集下层液体；(5)将步骤(4)的下层液体加入大孔树脂中进行脱腥处理8h，过滤，得萤火虫蛹蛋白水解液。实施例2一种萤火虫蛹蛋白水解液的制备方法，包括以下步骤：(1)收集萤火虫蛹，洗净，烘干，粉碎过40目筛，得萤火虫蛹粉末；(2)往步骤(1)中萤火虫蛹粉末中加入1倍量的乙酸乙酯，进行脱脂处理，得脱脂萤火虫蛹粉末；(3)往步骤(2)中脱脂萤火虫蛹粉末中加入2倍量的蒸馏水，加入1％的混合酶，混合酶为胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶按比例1:1组成，摇匀，升温至40℃，搅拌震荡反应1h，然后在升温至90℃后保温5min条件下进行灭酶，过滤，取酶解液；(4)将步骤(3)的酶解液在转速为8000r/min下进行离心分离10min，收集下层液体；(5)将步骤(4)的下层液体加入大孔树脂中进行脱腥处理5h，过滤，得萤火虫蛹蛋白水解液。实施例3一种萤火虫蛹蛋白水解液的制备方法，包括以下步骤：(1)收集萤火虫蛹，洗净，烘干，粉碎过60目筛，得萤火虫蛹粉末；(2)往步骤(1)中萤火虫蛹粉末中加入3倍量的乙酸乙酯，进行脱脂处理，得脱脂萤火虫蛹粉末；(3)往步骤(2)中脱脂萤火虫蛹粉末中加入5倍量的蒸馏水，加入3％的混合酶，混合酶为胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶按比例1:1组成，摇匀，升温至60℃，搅拌震荡反应3h，然后在升温至100℃后保温10min条件下进行灭酶，过滤，取酶解液；(4)将步骤(3)的酶解液在转速为9000r/min下进行离心分离60min，收集下层液体；(5)将步骤(4)的下层液体加入大孔树脂中进行脱腥处理10h，过滤，得萤火虫蛹蛋白水解液。实施例4一种液体氨基酸饲料，具体如表1。表1：液体氨基酸饲料重量份萤火虫蛹蛋白水解液12赖氨酸4.0亮氨酸4.0甘氨酸6.0蜂蜜1.2木糖醇2.0纯净水25实施例5一种液体氨基酸饲料，具体如表2。表2：对比例1一种萤火虫蛹蛋白水解液的制备方法，包括以下步骤：(1)收集萤火虫蛹，洗净，烘干，粉碎过50目筛，得萤火虫蛹粉末；(2)往步骤(1)中萤火虫蛹粉末中加入2倍量的乙酸乙酯，进行脱脂处理，得脱脂萤火虫蛹粉末；(3)往步骤(2)中脱脂萤火虫蛹粉末中加入3.5倍量的蒸馏水，加入2％的胰蛋白酶，摇匀，升温至50℃，搅拌震荡反应2h，然后在升温至95℃后保温8min条件下进行灭酶，过滤，取酶解液；(4)将步骤(3)的酶解液在转速为8500r/min下进行离心分离40min，收集下层液体；(5)将步骤(4)的下层液体加入大孔树脂中进行脱腥处理8h，过滤，得萤火虫蛹蛋白水解液。对比例2一种萤火虫蛹蛋白水解液的制备方法，包括以下步骤：(1)收集萤火虫蛹，洗净，烘干，粉碎过50目筛，得萤火虫蛹粉末；(2)往步骤(1)中萤火虫蛹粉末中加入2倍量的乙酸乙酯，进行脱脂处理，得脱脂萤火虫蛹粉末；(3)往步骤(2)中脱脂萤火虫蛹粉末中加入3.5倍量的蒸馏水，加入20倍重量份的0.5％的naoh，反复水洗至中性；再加入20重量份0.5％的feso4浸泡0.5h，水洗至中性，然后在80℃中水浴提取，过滤；(4)将步骤(3)的滤液在转速为8500r/min下进行离心分离40min，收集下层液体；(5)将步骤(4)的下层液体加入大孔树脂中进行脱腥处理8h，过滤，得萤火虫蛹蛋白水解液。蛋白质含量评价为更好地证明本发明所提供的一种萤火虫蛹蛋白水解液提取方法具有优异的效果，选取实施例1、2、3与对比例1、2的提取方法分别提取萤火虫蛹蛋白水解液，对萤火虫蛹蛋白水解液中蛋白质含量进行下表所述测定。提取蛋白质的含量：采用凯氏定氮法测定。表3：实施例1-3和对比例1-2的性能测试结果：实施例1实施例2实施例3对比例1对比例2蛋白质含量％72.0469.3671.0550.7818.04结果表明：从表1中可以看出，由本发明提取的萤火虫蛹蛋白水解液含量均达到了较高水平，且优于对比例。使用胰蛋白酶进行酶解的对比例1与实施例1相比，萤火虫蛹蛋白水解液中蛋白质含量较低；未采用酶解法的对比例2与实施例1相比，萤火虫蛹蛋白水解液中蛋白质含量较低，表明同时使用的胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶则可以进一步从舒张的位置开始进行水解，有助于提高水解效率，减少水解时间，从而获取萤火虫蛹蛋白水解液。上面以举例方式对本发明进行了说明，但本发明不限于上述具体实施例，凡基于本发明所做的任何改动或变型均属于本发明要求保护的范围。当前第1页12