本发明属于动物饲料
技术领域：
，涉及一种改善断奶仔猪肠道健康的饲料添加剂及其制备与应用。
背景技术：
：仔猪的健康在很大程度上受到其肠道健康的影响，这是因为仔猪的肠道是消化和吸收营养物质的重要场所，对维护仔猪正常、健康的生长发育有着极其重要的作用。目前，随着养猪行业朝着规模化、集约化的方向发展，仔猪提前断奶技术在各大养猪场得到了广泛应用。断奶会给仔猪带来巨大的应激，在仔猪提前断奶的这一阶段，其消化道的发育还不够完善，各项生理机能都还不健全，对外界各种因素的变化表现较为敏感，并且由于营养来源发生变化，易使仔猪的肠道黏膜受到破坏，并进一步导致摄入的营养物质不能很好地被消化吸收，最终使得断奶仔猪的生长发育受阻，免疫力下降，影响了仔猪的健康。因此，建立保障仔猪肠道健康的饲料营养调控技术集成体系，保障高效适宜的营养供给，确保仔猪肠道的健康显得极为重要。为了改善断奶仔猪的肠道健康，通常的做法是使用抗生素等药物，提高仔猪的免疫力。然而，使用抗生素等传统方法会导致断奶仔猪肠道菌群失衡，并引起药物残留和抗药性增强等多方面的负效应，已经无法从根本上解决仔猪肠道健康的问题。因此，开发出毒副作用小，无残留，能促进断奶仔猪生长又能防治疾病的绿色饲料添加剂，成为了畜牧工作者努力的方向和研究的热点。技术实现要素：本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种改善断奶仔猪肠道健康的饲料添加剂及其制备与应用。本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：一种改善断奶仔猪肠道健康的饲料添加剂，该饲料添加剂包括以下组分及重量份含量：乳酸菌素40-60份、三丁酸甘油酯20-40份及β-甘露聚糖酶10-25份。乳酸菌素的最佳添加量是40-60份，这是因为乳酸菌素需要有一个可以充分发挥其作用的浓度范围，若添加量低于40份，则乳酸菌素的浓度过低，无法达到预期效果；若添加量高于60份，则会造成断奶仔猪的生产性能有所下降。这表明，乳酸菌素存在一个使断奶仔猪生产性能得以最佳体现的添加范围，若超出这个范围，断奶仔猪的生产性能便无法进一步提高。这可能是因为有足够数量的乳酸菌进入肠道并萌发成有代谢活性的细胞，形成厌氧环境，并足以使肠道微生态环境保持平衡，此时进入肠道内的乳酸菌，由于在厌氧条件下不繁殖，并且不在肠道定值，因而随其数量的增加不再体现有益的添加效益。三丁酸甘油酯属于酸化剂，有一个最适合的作用范围，即20-40份。若三丁酸甘油酯的添加量过少，则无法充分发挥酸化剂的作用；若添加量过多，则会造成肠道过酸，不利于断奶仔猪的生长。β-甘露聚糖酶的不同添加量，会影响断奶仔猪对饲料的利用效率，因此，β-甘露聚糖酶同样存在一个最佳的添加量，即10-25份之间。在这个范围内，β-甘露聚糖酶可以有效降低日粮中的nsp，释放细胞养分，降低食靡粘度，有利于营养物质的吸收和利用。若β-甘露聚糖酶的添加量过低，则无法达到效果；而添加量过高，便不会对饲料的利用率发挥显著促进作用。进一步地，该饲料添加剂包括以下组分及重量份含量：乳酸菌素45-55份、三丁酸甘油酯25-40份及β-甘露聚糖酶10-25份。进一步地，该饲料添加剂包括以下组分及重量份含量：乳酸菌素50-53份、三丁酸甘油酯23-35份及β-甘露聚糖酶15-24份。进一步地，所述的乳酸菌素由乳酸菌在ph值为6.5-7的培养液中发酵而成。进一步地，所述的β-甘露聚糖酶的酶活力为35000-45000u/g。一种改善断奶仔猪肠道健康的饲料添加剂的制备方法，该方法包括以下步骤：1)分别将乳酸菌素、三丁酸甘油酯及β-甘露聚糖酶过80目筛；2)将乳酸菌素、三丁酸甘油酯及β-甘露聚糖酶混合均匀，即得到所述的饲料添加剂。进一步地，所述的乳酸菌素的制备方法为：在无氧条件下，将乳酸菌加入至培养液中发酵36-60h，后经沉淀、透析、浓缩，即得到所述的乳酸菌素。进一步地，所述的培养液的ph值为6.5-7。乳酸菌素的活性与培养液的ph值有关，经大量实验研究表明，将培养液的ph值控制在6.5-7，最终得到的乳酸菌素的活性最高。作为优选的技术方案，所述的培养液为mrs培养基。根据说明，配制培养液，并将培养液的ph调到6.5-7。进一步地，采用硫酸铵进行沉淀。乳酸菌素是一种多肽类物质，属于蛋白质。硫酸铵沉淀法是粗分离蛋白时常用的纯化和浓缩技术。蛋白质的溶解度和盐浓度密切相关，每种蛋白质的溶解度不同，因此可以用不同浓度的盐溶液来沉淀不同的蛋白质。硫酸铵的溶解度大，解离形成大量的nh4+，so42-离子，会结合大量的水分子，使蛋白质的溶解度下降，另外，其温度系数小，不易使蛋白质变性，因此，采用硫酸铵沉淀法对蛋白质进行粗分离时，后续可采用层析技术进一步纯化蛋白，效率更高。一种改善断奶仔猪肠道健康的饲料添加剂的应用，将该饲料添加剂加入至断奶仔猪的基础日粮中，按重量百分比计，所述的饲料添加剂的添加比例为2-4％。本发明中，各组分的作用如下：乳酸菌素是乳酸菌在代谢过程中通过核糖体合成机制产生的一种具有抑菌活性的多肽，能够调整或维持肠道内微生态平衡，促进乳酸菌等有益菌增殖，抑制大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌的生长，增强机体免疫功能，促进营养物质的吸收和转化，从而可以达到防病治病、提高动物饲料转化率和畜禽生产性能的效果。三丁酸甘油酯是由1分子甘油三酯和3分子丁酸酯化而形成，与丁酸盐相比具有不易挥发、半衰期长、无臭味等优点。三丁酸甘油酯在胃液中不分解，在肠道中经过胰脂肪酶的作用，缓慢释放生成丁酸和甘油。其中，丁酸是肠道上皮细胞的主要能量源，可显著刺激肠上皮细胞增殖，增加小肠绒毛高度，进而促进养分吸收、增强免疫力、改善动物健康。β-甘露聚糖酶是一种半纤维素水解酶，不但可以消除日粮中甘露聚糖类物质的抗营养作用，还可以将甘露聚糖类物质降解成甘露寡糖。甘露寡糖与病原菌在肠壁上的受体具有相似结构，它与病原菌表面的类丁质也有很强的结合力，可竞争性地与病原菌结合，使其无法附植在肠壁上，结合后的甘露寡糖不能提供病原菌生长所需的营养素，致使病原菌死亡而失去致病能力。通过在断奶仔猪的饲料中加入本发明饲料添加剂，可以选择性地杀死肠道内的一些致病菌，并保护和促进有益菌的生长，同时可以调节肠粘膜电解质和水分的平衡以及胃肠菌群平衡，改善肠道的微环境。其中，三丁酸甘油酯在肠道中经过胰腺脂肪酶的作用，释放出丁酸，与乳酸菌素协同，可以增强抑制病原微生物生长的能力，促进有益菌的生长，调节机体的肠道健康；再结合β-甘露聚糖酶，能将日粮中的甘露聚糖降解为甘露寡糖等低聚糖，甘露寡糖可竞争性地与病原菌结合，结合后的甘露寡糖不能提供病原菌生长所需的营养素，致使病原菌彻底死亡，而失去致病能力，从而促进机体的健康发育。常规的玉米-豆粕日粮中含有一定量的非淀粉性多糖，尤其是豆粕类饲料中含有更多的β-甘露聚糖。β-甘露聚糖在一定条件下能与水分子相互作用，增加了食靡的粘度，会影响营养物质的吸收。通过在畜禽饲粮中加入β-甘露聚糖酶，可以使日粮中的甘露聚糖类物质降解为甘露寡糖，甘露寡糖可以作为肠道内有益菌的营养物质，与乳酸菌素协同，增强有益菌的繁殖力，使肠道内的ph下降，抑制了有害菌的生长。同时，加入的三丁酸甘油酯可以顺利通过胃而不被胃分解，在肠道中释放自由丁酸和甘油，作用于肠道后端，促进肠黏膜细胞增殖，改善肠道细胞的发育以及维护结肠的屏障功能。现有技术中代替抗生素改善肠道的饲料添加剂，大多都是使用微生态制剂或者中草药，而本发明使用的乳酸菌素是某些乳酸菌在代谢过程中通过核糖体合成机制产生的具有抑菌活性的多肽或前提多肽，其本质是蛋白质。该乳酸菌素的抑菌范围很广，同时产生菌株对其所产生的乳酸菌素具有自身的免疫性。乳酸菌素作为饲料添加剂，进入动物机体的消化道内可以被蛋白水解酶消化吸收，对肠道内正常菌群的生存无不良影响。可以避免致病菌如沙门氏菌等对饲料的污染，从而减少动物感染的途径；畜禽通过采食含有乳酸菌素的饲料或饮水进入畜禽肠道，在不改变肠道内正常菌群的条件下，抑制某些病原菌的生长，起到维护机体肠道健康的目的，进而增强机体的抗病力；畜禽饲喂乳酸菌素，可以改善畜禽的生产性能，提高畜禽产品品质和数量。与现有技术相比，本发明具有以下特点：1)通过饲料添加剂中各组分的配合，能够增强抑制病原微生物生长的能力，致使病原微生物彻底死亡，而失去致病能力，并促进有益菌的生长，进而有效改善仔猪的肠道发育状况，缓解应激对肠道组织带来的损伤，维护和充分发挥肠道功能，最终提高仔猪生长性能和健康水平；2)饲料添加剂绿色、安全，无毒副作用，无残留，耐低温贮藏性及热稳定性优异，且制备成本低，适口性好，利于仔猪采食。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。本实施例以本发明技术方案为前提进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。实施例1-4：1.1试验设计本试验采用单因子设计，选择28日龄的体重接近、健康状况一致的杜长大三元猪150头，随机分为5组，每组3个重复，每个重复10头。对照组饲喂基础日粮(见表1-1、表1-2)，基础日粮参考美国nrc(2012)猪营养需要，实施例1-4组分别饲喂基础日粮+不同配方饲料添加剂(见表2)，试验期为28天，试验期间自由采食和饮水。1.2测定指标1.2.1生产性能试验猪在试验开始和试验结束时称重，计算平均日增重；试验猪在试验开始和试验结束时，以每个重复为单位结算耗料量，计算平均日采食量；料重比＝平均日采食量/平均日增重。1.2.2十二指肠、空肠、回肠ph的测定试验结束时，各实施例组每个重复随机选取3头猪，屠宰后迅速将十二指肠、空肠、回肠两端结扎、剪断后用phbj-230便携式ph计直接测各肠段的ph值。1.2.3十二指肠肠道组织形态测定屠宰后迅速将十二指肠剪下一小段，用生理盐水冲洗其内容物后，置于4％多聚甲醛固定液中固定24h，后流水冲洗24h，经逐级递增梯度酒精脱水，二甲苯透明，浸蜡，包埋，制成石蜡切片(每肠段各切三片，每片0.5μm)，切片脱蜡、入水，苏木精-伊红染色(h.e染色)，封片，观察各肠段组织形态。每张切片选取3个视野，每视野连续测定3根绒毛，用hpias-5100高清晰度彩色病理图文分析系统做定量分析，测量其绒毛高度(vh)、隐窝深度(cd)，各指标取平均值。1.2.4数据处理和统计方法所测得的数值均采用spss22.0统计软件进行单因素方差分析，lsd多重比较。结果用平均值±标准差表示。表1-1基础日粮组成日粮组成对照组(wt％)实施例组(wt％)玉米5050豆粕2323膨化大豆88进口鱼粉44乳清粉55谷壳糠63预混料44饲料添加剂03合计100100其中，预混料能够为每千克基础日粮提供如表1-2所示的营养物质。表1-2预混料主要成分表2不同实施例组饲料添加剂组成1.3试验结果1.3.1生产性能表3各组断奶仔猪生产性能试验结果由表3可知，在各组初始重差异不显著(p＞0.05)的情况下，与对照组相比，各实施例组的末重、平均日增重、平均日采食量都显著增加(p＜0.05)，料重比显著降低。其中，实施例3的效果相对更好。1.3.2十二指肠、空肠、回肠ph表4各组断奶仔猪十二指肠、空肠、回肠ph测定结果组别十二指肠空肠回肠对照组5.95±0.13a6.79±0.08a6.59±0.12a实施例15.57±0.18b6.51±0.18b6.33±0.18b实施例25.59±0.13b6.50±0.23b6.35±0.14b实施例35.51±0.14b6.49±0.22b6.31±0.13b实施例45.55±0.17b6.53±0.25b6.37±0.26b由表4可知，与对照组相比，各实施例组的十二指肠、空肠、回肠的ph都显著降低(p＜0.05)。其中，实施例3的效果相对更好。1.3.3十二指肠肠道组织形态的比较表5各组断奶仔猪十二指肠组织形态测定结果组别绒毛高度(μm)隐窝深度(μm)绒毛高度/隐窝深度对照组720.82±11.38a105.51±7.146.85±0.75a实施例1869.51±22.36b107.23±7.268.13±0.86b实施例2865.21±18.36b105.19±8.238.26±0.70b实施例3881.43±25.26b105.15±7.168.40±0.87b实施例4868.13±21.13b106.16±7.628.21±0.68b由表5可知，与对照组相比，各实施例组十二指肠的绒毛高度都显著升高(p＜0.05)。其中，实施例3的效果最好。此外，与对照组相比，各实施例组十二指肠的绒毛高度与隐窝深度之比显著提高(p＜0.05)，其中，实施例3的效果最好。由此可见，本饲料添加剂提高了断奶仔猪的生长性能，同时也提高了十二指肠的绒毛高度，降低十二指肠的隐窝深度，改善了断奶仔猪的肠道形态结构。此外，还能有效改善断奶仔猪肠道的ph，抑制有害菌的生长，促进有益菌的生长，促进断奶仔猪肠道健康发育。实施例5：一种改善断奶仔猪肠道健康的饲料添加剂，该饲料添加剂包括以下组分及重量份含量：乳酸菌素40份、三丁酸甘油酯40份及β-甘露聚糖酶10份。其中，乳酸菌素由乳酸菌在ph值为6.5的培养液中发酵而成，β-甘露聚糖酶的酶活力为35000u/g。该饲料添加剂的制备方法包括以下步骤：1)分别将乳酸菌素、三丁酸甘油酯及β-甘露聚糖酶过80目筛；2)将乳酸菌素、三丁酸甘油酯及β-甘露聚糖酶混合均匀，即得到饲料添加剂。其中，乳酸菌素的制备方法为：在无氧条件下，将乳酸菌加入至ph值为7的培养液中发酵36h，后经硫酸铵沉淀、透析、浓缩，即得到乳酸菌素。应用时，将该饲料添加剂加入至断奶仔猪的基础日粮中，按重量百分比计，饲料添加剂的添加比例为4％。实施例6：一种改善断奶仔猪肠道健康的饲料添加剂，该饲料添加剂包括以下组分及重量份含量：乳酸菌素60份、三丁酸甘油酯20份及β-甘露聚糖酶25份。其中，乳酸菌素由乳酸菌在ph值为7的培养液中发酵而成，β-甘露聚糖酶的酶活力为45000u/g。该饲料添加剂的制备方法包括以下步骤：1)分别将乳酸菌素、三丁酸甘油酯及β-甘露聚糖酶过80目筛；2)将乳酸菌素、三丁酸甘油酯及β-甘露聚糖酶混合均匀，即得到饲料添加剂。其中，乳酸菌素的制备方法为：在无氧条件下，将乳酸菌加入至ph值为6.5的培养液中发酵60h，后经硫酸铵沉淀、透析、浓缩，即得到乳酸菌素。应用时，将该饲料添加剂加入至断奶仔猪的基础日粮中，按重量百分比计，饲料添加剂的添加比例为2％。实施例7：一种改善断奶仔猪肠道健康的饲料添加剂，该饲料添加剂包括以下组分及重量份含量：乳酸菌素45份、三丁酸甘油酯40份及β-甘露聚糖酶10份。其中，乳酸菌素由乳酸菌在ph值为6.8的培养液中发酵而成，β-甘露聚糖酶的酶活力为40000u/g。该饲料添加剂的制备方法包括以下步骤：1)分别将乳酸菌素、三丁酸甘油酯及β-甘露聚糖酶过80目筛；2)将乳酸菌素、三丁酸甘油酯及β-甘露聚糖酶混合均匀，即得到饲料添加剂。其中，乳酸菌素的制备方法为：在无氧条件下，将乳酸菌加入至ph值为6.8的培养液中发酵48h，后经硫酸铵沉淀、透析、浓缩，即得到乳酸菌素。应用时，将该饲料添加剂加入至断奶仔猪的基础日粮中，按重量百分比计，饲料添加剂的添加比例为3％。实施例8：一种改善断奶仔猪肠道健康的饲料添加剂，该饲料添加剂包括以下组分及重量份含量：乳酸菌素55份、三丁酸甘油酯25份及β-甘露聚糖酶25份。其中，乳酸菌素由乳酸菌在ph值为6.5-7的培养液中发酵而成，β-甘露聚糖酶的酶活力为37000u/g。实施例9：一种改善断奶仔猪肠道健康的饲料添加剂，该饲料添加剂包括以下组分及重量份含量：乳酸菌素50份、三丁酸甘油酯35份及β-甘露聚糖酶15份。实施例10：一种改善断奶仔猪肠道健康的饲料添加剂，该饲料添加剂包括以下组分及重量份含量：乳酸菌素53份、三丁酸甘油酯23份及β-甘露聚糖酶24份。实施例11：一种改善断奶仔猪肠道健康的饲料添加剂，该饲料添加剂包括以下组分及重量份含量：乳酸菌素52份、三丁酸甘油酯28份及β-甘露聚糖酶20份。上述的对实施例的描述是为便于该
技术领域：
的普通技术人员能理解和使用发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于上述实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。当前第1页12