本发明涉及合生元技术领域，尤其涉及一种浆水合生元的制备方法。
背景技术
浆水是我国西北地区特有的一种发酵蔬菜制品，其产生历史悠久，千百年来深受广大人民群众喜爱。浆水主要是以时令蔬菜或是山野菜为原料，通常以面汤和农家传统的“酸菜引子”启动发酵。发酵中不添加任何佐料，发酵类型以低盐自然发酵为主，其发酵过程兼具醋酸发酵、酒精发酵和乳酸发酵，而以乳酸发酵为主。浆水清爽可口，含有大量益生菌，如乳酸菌及酵母菌等，这些益生菌能改善肠道菌群结构、促进肠道中有益菌的增殖、抑制有害菌的生长，提高机体特异性或非特异性免疫力，有利于抵御各种疾病的发生。
益生元（又称双歧因子）是一种非消化性的碳水化合物，可以选择性地促进肠道内有益菌的增殖，主要包含低聚糖类、藻类以及一些天然植物，由于双歧因子不能被人体分解、吸收和利用，在肠道内被益菌群分解和利用，从而促进有益菌群的生长，在改善肠道微生态、促进脂质、蛋白质与矿物类代谢方面具有重要意义。而低聚糖是一类由2～10个单糖通过糖苷键连接而成、具有直链或支链的低聚合度糖类，主要包含低聚异麦芽糖、低聚果糖、低聚木糖、低聚壳聚糖、低聚半乳糖、纤维低聚糖、水苏糖、异麦芽酮糖、乳酮糖和低聚龙胆糖等，其具有促进双歧杆菌等有益菌的增殖，抑制内毒素、保护肝脏功能、调节肠胃功能、防止便秘、减少血氨浓度、促进矿物元素的吸收、合成族维生素、低能量或无能量、不会引起龋齿、激活免疫、抗衰老、抗肿瘤、降低血清胆固醇及降低血压等功能。
合生元是指益生菌和益生元相互协同的混合制剂，益生菌可以直接补充人体内的有益菌，益生元可以给益生菌的生长和繁殖提供更有利的环境，二者相互协调不仅可以发挥益生菌的生理细菌的活性作用，而且能够选择性增加有益菌的数量，能够提高外源性活菌的生存率，延长其作用时间（产品货架期），刺激肠道内外源性及内源性细菌的定植与存活，同步改善肠道内菌群结构，吸附肠道内的病原菌，对人体起到真正的保健作用。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一种操作简单、成本低、快速且安全的浆水合生元的制备方法。
为解决上述问题，本发明所述的一种浆水合生元的制备方法，其特征在于：将浆水益生菌冻干菌剂与益生菌营养物质、益生元及酸化剂混合均匀后即得；所述益生菌冻干菌剂与所述益生元的质量比为1:10~1:50；所述益生菌营养物质是指按每kg所述浆水益生菌冻干菌剂添加蛋白胨1~100g、牛肉膏2~8g、蔗糖1~50g、酵母粉1~20g、碘酸钾1~3g、磷酸二氢钠0.5~2.5g、硫酸镁0.1~1g、复合维生素0.01~10g、复合氨基酸0.01~10g，氯化钠1~10g；所述酸化剂添加量为所述浆水益生菌冻干菌剂质量的1‰~20‰；
所述浆水益生菌冻干菌剂按下述方法制得：
⑴配制浆水液体培养基：
a.辅料的准备：将用于制作浆水的蔬菜去除泥沙、根及烂叶，清洗干净后于沸水中焯水1~5min，捞出后沥干、冷却，切段备用；
b.面汤的制备：将水煮沸后缓慢加入面粉，进行缓慢搅拌，待面粉糊化后停止加热，冷却至室温即得面汤；所述面粉与所述水的重量比为1：50~100；
c.发酵底物的制备：将所述步骤a的蔬菜段与所述步骤b的面汤进行混合，即得发酵底物；所述蔬菜段与所述面汤的质量比为1:5~15；
d.将蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏5g、柠檬酸氢二铵2g、一水葡萄糖20g、吐温-801.0ml、三水乙酸钠5g、三水磷酸氢二钾2g、七水硫酸镁0.58g、一水硫酸锰0.25g溶于1l所述发酵底物中，使其ph值至6.2~6.6后于121℃灭菌20min，冷却至室温后即得浆水液体培养基；
⑵高密度富集发酵培养：：将市售浆水按10%~30%的接种量接入所述浆水液体培养基中，在温度为28~30℃、转速为160~180r/min的摇瓶中培养1~2天，即得高密度的浆水益生菌发酵菌液；
⑶浆水益生菌细胞的制备：将所述高密度的浆水益生菌发酵菌液于温度4℃，3000~6000r/min的条件下离心10min，之后在8000~10000r/min的条件下离心20min，弃去上清液，收集沉淀物即为浆水益生菌细胞；
⑷保护剂的制备：将经121℃灭菌20min处理的质量百分数为2%~10%的麦芽糖与经115℃灭菌15min处理的质量百分比为3%~12%的脱脂奶粉按1：1的体积比混合均匀，即得保护剂；
⑸将所述浆水益生菌细胞与所述保护剂按1：1的体积比充分混合，置于-80℃冰箱中预冻3h后，在冷阱温度-40℃，真空度10pa下真空冷冻干燥24h，即得浆水益生菌冻干菌剂。
所述益生元是指麦芽低聚糖葡萄糖、低聚异麦芽糖葡萄糖、环状糊精葡萄糖、龙胆二糖葡萄糖、偶联糖葡萄糖、低聚糖果糖、潘糖葡萄糖、海藻糖葡萄糖、蔗糖低聚糖葡萄糖、牛乳低聚糖半乳糖、壳质低聚糖乙酰氨基葡萄糖、大豆低聚糖半乳糖、果糖型低聚糖半乳糖、半乳糖低聚糖半乳糖及木糖低聚糖中的一种或多种。
所述酸化剂是指乳酸、柠檬酸、延胡索酸中的一种或多种。
所述步骤a中的蔬菜为芹菜、白菜、长叶青菜、包菜、萝卜缨、蒲公英、葛蓬草、茼蒿、小青菜、苜蓿中的一种或几种。
本发明与现有技术相比具有以下优点：
1、本发明将低聚糖（益生元）与传统的发酵食品浆水相结合，获得一种可用于调节胃肠道菌群的功能性保健品，其方法操作简便、成本低、易于实施，绿色环保，安全。
2、本发明所制备的浆水酸爽可口，浆水菜脆爽可口，加入益生元不仅可以赋予一定的风味，还可具有一定调节胃肠道菌群保健功能。
具体实施方式
实施例1一种浆水合生元的制备方法，将浆水益生菌冻干菌剂与益生菌营养物质、益生元及酸化剂混合均匀后即得。
其中：益生菌冻干菌剂与益生元的质量比（kg/kg）为1:10。益生元是指麦芽低聚糖葡萄糖、低聚异麦芽糖葡萄糖、环状糊精葡萄糖、龙胆二糖葡萄糖、偶联糖葡萄糖、低聚糖果糖、潘糖葡萄糖、海藻糖葡萄糖、蔗糖低聚糖葡萄糖、牛乳低聚糖半乳糖、壳质低聚糖乙酰氨基葡萄糖、大豆低聚糖半乳糖、果糖型低聚糖半乳糖、半乳糖低聚糖半乳糖及木糖低聚糖中的一种或多种。
益生菌营养物质是指按每kg浆水益生菌冻干菌剂添加蛋白胨1g、牛肉膏2g、蔗糖1g、酵母粉1g、碘酸钾1g、磷酸二氢钠0.5g、硫酸镁0.1g、复合维生素0.01g、复合氨基酸0.01g，氯化钠1g。
酸化剂是指乳酸、柠檬酸、延胡索酸中的一种或多种。酸化剂添加量为浆水益生菌冻干菌剂质量的1‰。
浆水益生菌冻干菌剂按下述方法制得：
⑴配制浆水液体培养基：
a.辅料的准备：将用于制作浆水的蔬菜去除泥沙、根及烂叶，清洗干净后于沸水中焯水1~5min，捞出后沥干、冷却，切段备用；
蔬菜为芹菜、白菜、长叶青菜、包菜、萝卜缨、蒲公英、葛蓬草、茼蒿、小青菜、苜蓿中的一种或几种；
b.面汤的制备：将水煮沸后缓慢加入面粉，进行缓慢搅拌，待面粉糊化后停止加热，冷却至室温即得面汤；面粉与水的重量比（kg/kg）为1：50；
c.发酵底物的制备：将步骤a的蔬菜段与步骤b的面汤进行混合，即得发酵底物；蔬菜段与面汤的质量比（kg/kg）为1:5；
d.将蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏5g、柠檬酸氢二铵2g、一水葡萄糖20g、吐温-801.0ml、三水乙酸钠5g、三水磷酸氢二钾2g、七水硫酸镁0.58g、一水硫酸锰0.25g溶于1l发酵底物中，使其ph值至6.2~6.6后于121℃灭菌20min，冷却至室温后即得浆水液体培养基；
⑵高密度富集发酵培养：：将市售浆水按10%的接种量接入浆水液体培养基中，在温度为28℃、转速为160r/min的摇瓶中培养2天，即得高密度的浆水益生菌发酵菌液；
⑶浆水益生菌细胞的制备：将高密度的浆水益生菌发酵菌液于温度4℃，3000r/min的条件下离心10min，去除浆水未完全发酵的菜叶、面粉等固形物；之后在8000r/min的条件下离心20min，弃去上清液，收集沉淀物即为浆水益生菌细胞；
⑷保护剂的制备：将经121℃灭菌20min处理的质量百分数为2%的麦芽糖与经115℃灭菌15min处理的质量百分比为3%的脱脂奶粉按1：1的体积比混合均匀，即得保护剂；
⑸将浆水益生菌细胞与保护剂按1：1的体积比（ml/ml）充分混合，置于-80℃冰箱中预冻3h后，在冷阱温度-40℃，真空度10pa下真空冷冻干燥24h，即得浆水益生菌冻干菌剂。
实施例2一种浆水合生元的制备方法，将浆水益生菌冻干菌剂与益生菌营养物质、益生元及酸化剂混合均匀后即得。
其中：益生菌冻干菌剂与益生元的质量比（kg/kg）为1:50。
益生菌营养物质是指按每kg浆水益生菌冻干菌剂添加蛋白胨100g、牛肉膏8g、蔗糖50g、酵母粉20g、碘酸钾3g、磷酸二氢钠2.5g、硫酸镁1g、复合维生素10g、复合氨基酸10g，氯化钠10g。
酸化剂添加量为浆水益生菌冻干菌剂质量的20‰。
益生元、酸化剂同实施例1。
浆水益生菌冻干菌剂按下述方法制得：
⑴配制浆水液体培养基：
a.辅料的准备：将用于制作浆水的蔬菜去除泥沙、根及烂叶，清洗干净后于沸水中焯水1~5min，捞出后沥干、冷却，切段备用；
蔬菜为芹菜、白菜、长叶青菜、包菜、萝卜缨、蒲公英、葛蓬草、茼蒿、小青菜、苜蓿中的一种或几种；
b.面汤的制备：将水煮沸后缓慢加入面粉，进行缓慢搅拌，待面粉糊化后停止加热，冷却至室温即得面汤；面粉与水的重量比（kg/kg）为1：100；
c.发酵底物的制备：将步骤a的蔬菜段与步骤b的面汤进行混合，即得发酵底物；蔬菜段与面汤的质量比（kg/kg）为1:15；
d.将蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏5g、柠檬酸氢二铵2g、一水葡萄糖20g、吐温-801.0ml、三水乙酸钠5g、三水磷酸氢二钾2g、七水硫酸镁0.58g、一水硫酸锰0.25g溶于1l发酵底物中，使其ph值至6.2~6.6后于121℃灭菌20min，冷却至室温后即得浆水液体培养基；
⑵高密度富集发酵培养：：将市售浆水按30%的接种量接入浆水液体培养基中，在温度为30℃、转速为180r/min的摇瓶中培养1天，即得高密度的浆水益生菌发酵菌液；
⑶浆水益生菌细胞的制备：将高密度的浆水益生菌发酵菌液于温度4℃，6000r/min的条件下离心10min，去除浆水未完全发酵的菜叶、面粉等固形物；之后在10000r/min的条件下离心20min，弃去上清液，收集沉淀物即为浆水益生菌细胞；
⑷保护剂的制备：将经121℃灭菌20min处理的质量百分数为10%的麦芽糖与经115℃灭菌15min处理的质量百分比为12%的脱脂奶粉按1：1的体积比混合均匀，即得保护剂；
⑸将浆水益生菌细胞与保护剂按1：1的体积比（ml/ml）充分混合，置于-80℃冰箱中预冻3h后，在冷阱温度-40℃，真空度10pa下真空冷冻干燥24h，即得浆水益生菌冻干菌剂。
实施例3一种浆水合生元的制备方法，将浆水益生菌冻干菌剂与益生菌营养物质、益生元及酸化剂混合均匀后即得。
其中：益生菌冻干菌剂与益生元的质量比（kg/kg）为1:30。
益生菌营养物质是指按每kg浆水益生菌冻干菌剂添加蛋白胨50g、牛肉膏5g、蔗糖25g、酵母粉10g、碘酸钾2g、磷酸二氢钠1.5g、硫酸镁0.5g、复合维生素5g、复合氨基酸5g，氯化钠5g。
酸化剂添加量为浆水益生菌冻干菌剂质量的10‰。
益生元、酸化剂同实施例1。
浆水益生菌冻干菌剂按下述方法制得：
⑴配制浆水液体培养基：
a.辅料的准备：将用于制作浆水的蔬菜去除泥沙、根及烂叶，清洗干净后于沸水中焯水1~5min，捞出后沥干、冷却，切段备用；
蔬菜为芹菜、白菜、长叶青菜、包菜、萝卜缨、蒲公英、葛蓬草、茼蒿、小青菜、苜蓿中的一种或几种；
b.面汤的制备：将水煮沸后缓慢加入面粉，进行缓慢搅拌，待面粉糊化后停止加热，冷却至室温即得面汤；面粉与水的重量比（kg/kg）为1：70；
c.发酵底物的制备：将步骤a的蔬菜段与步骤b的面汤进行混合，即得发酵底物；蔬菜段与面汤的质量比（kg/kg）为1:10；
d.将蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏5g、柠檬酸氢二铵2g、一水葡萄糖20g、吐温-801.0ml、三水乙酸钠5g、三水磷酸氢二钾2g、七水硫酸镁0.58g、一水硫酸锰0.25g溶于1l发酵底物中，使其ph值至6.2~6.6后于121℃灭菌20min，冷却至室温后即得浆水液体培养基；
⑵高密度富集发酵培养：：将市售浆水按20%的接种量接入浆水液体培养基中，在温度为29℃、转速为170r/min的摇瓶中培养1.5天，即得高密度的浆水益生菌发酵菌液；
⑶浆水益生菌细胞的制备：将高密度的浆水益生菌发酵菌液于温度4℃，4500r/min的条件下离心10min，去除浆水未完全发酵的菜叶、面粉等固形物；之后在9000r/min的条件下离心20min，弃去上清液，收集沉淀物即为浆水益生菌细胞；
⑷保护剂的制备：将经121℃灭菌20min处理的质量百分数为6%的麦芽糖与经115℃灭菌15min处理的质量百分比为7%的脱脂奶粉按1：1的体积比混合均匀，即得保护剂；
⑸将浆水益生菌细胞与保护剂按1：1的体积比（ml/ml）充分混合，置于-80℃冰箱中预冻3h后，在冷阱温度-40℃，真空度10pa下真空冷冻干燥24h，即得浆水益生菌冻干菌剂。