本发明涉及一种肉用野山鸡饲料，尤其涉及的是一种二次固体发酵红茶渣及其制备方法和应用。
背景技术：
应激(stress)是畜禽对不良环境或机体内部因子刺激产生的一种非特异性应答反应，引起机体神经和内分泌的异常变化，导致新陈代谢、免疫和抗氧化系统紊乱，从而降低动物生产性能，严重时会导致动物死亡。在现代化、集约化和规模化畜禽养殖过程中，畜禽面临更为复杂多变的应激源，如环境因素(饮水、灰尘、温度、辐射、有害气体等)、疾病因素(有害微生物、腹泻、炎症等)、饲养管理因素(饲养密度、运输、转群、限制饲养等)。总之，一切造成机体不适并导致机体损伤的因子均可称为应激源。这些应激因子不断影响机体神经和激素系统，产生多种不良生理应激，降低其免疫力和抗氧化能力，增加营养元素的消耗，最终使畜禽生产性能下降，造成较大经济损失。
随着消费者对肉品质质量要求越来越高，目前肉用野山鸡在我国饲养量明显增加，养殖形势优良，经济效益可观。但是肉用野山鸡营养与饲料研究在我国还处于初步阶段，特别是缺乏1-2周龄肉用野山鸡的饲料配方，使得育雏前期野山鸡生长性能降低，死亡率偏高，无疑会造成较大的经济损失。
1-2周龄野山鸡由于生理阶段特别是胃肠道功能等发育不健全，对应激源十分敏感，容易发生应激反应，从而降低生产性能，提高死亡率，引起较大的经济损失。且1-2周龄野山鸡对各种应激源非常敏感，特别是机体所需营养成分逐渐由卵黄提供转为由营养物质提供，会造成肠道应激。此外，环境变化、运输、转群等均会对肉雏野山鸡造成不同程度的应激，降低生长性能和成活率。因此按照饲养标准，亟待开发一种效果明显、作用稳定、方法简便、安全无毒、无残留的一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料及饲料。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种二次固体发酵红茶渣及其制备方法和应用，从肠道健康、氧化应激、神经水平三个方面发挥抗应激功效，提高1-2周龄肉用野山抗热应激能力。
本发明是通过以下技术方案实现的：一种二次固体发酵红茶渣的制备方法，包括如下步骤：
(1)以75％的红茶渣和经高压灭菌后的15％菜粕、20％棉粕混合后，加入发酵菌种，在1000ml三角瓶中进行发酵；其中，75％的红茶渣、15％菜粕、20％棉粕为质量百分比；
(2)一次发酵：步骤(1)使用的发酵菌种为混合菌，所述混合菌包括枯草芽孢杆菌和短小孢杆菌，且枯草芽孢杆菌(菌液浓度)和短小孢杆菌(菌液浓度)以体积比1:2比例混合，发酵物与混合菌以100-120g：1-1.05ml的比例混合发酵，步骤(1)得到的混合物在为32℃培养3天，进行一次发酵，在一次发酵培养过程中每隔1h翻转一次；
(3)二次发酵：一次发酵结束后，取出步骤(2)的发酵物，重新接种混合真菌，混合真菌包括米曲霉和黑曲霉，且米曲霉和黑曲霉以体积比1:1比例混合，每100g发酵物接种个混合真菌。在30℃培养3天，进行二次发酵，在二次发酵培养过程中每隔5h翻转一次；
(4)烘干：经步骤(3)发酵结束后，烘干步骤(3)得到的发酵物，即为二次固体发酵红茶渣。
本发明还公开了一种二次固体发酵红茶渣，所述二次固体发酵红茶渣通过权利要求1所述的一种二次固体发酵红茶渣的制备方法制备而成。
本发明还公开了一种二次固体发酵红茶渣的应用，其特征在于：所述二次固体发酵红茶渣用于制备1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预饲料。
本发明还公开了一种二次发酵红茶渣的应用，所述二次固体发酵红茶渣用于制备1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料。
本发明还公开了一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料，其特征在于，以重量份计，由以下组分组成：延胡索酸5、柠檬酸10、双乙酸钠2、乙酸钠2、丁酸钠4、苯乙酸1、苯甲酸6、谷氨酰胺100、酵母硒30、虾青素3、γ-氨基丁酸12、复合低聚糖130、二次固体发酵红茶渣695，所述二次固体发酵红茶渣通过权利要求1所述的一种二次固体发酵红茶渣的制备方法制备而成。
作为上述方案的进一步优化，
以重量份计，由以下组分组成：延胡索酸10、柠檬酸8、双乙酸钠3、乙酸钠2、丁酸钠4、苯乙酸1、苯甲酸6、谷氨酰胺90、酵母硒30、虾青素3、γ-氨基丁酸10、复合低聚糖120、二次固体发酵红茶渣713。
作为上述方案的进一步优化，
所述复合低聚糖为甘露低聚糖、低聚麦芽糖、异麦芽低聚糖、果糖低聚糖、大豆低聚糖、低聚木糖中的两种及其以上以任意比例混合的低聚糖。
本发明还公开了一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激饲料，以重量份计，由以下组分组成：玉米40-50、豆粕15-20、菜粕5-10、鱼粉1-2、骨粉1-2、小麦15-20、蚯蚓蛋白粉0-1、麦麸3-5；豆油0-1.5、菜油0-0.5、棕榈油0-0.5、碳酸钙1-1.8、磷酸氢钙1-1.5、dl-蛋氨酸0-2、添加剂预混料2-2.5和抗热应激预混料1-2，所述抗热应激预混料为权利要求5-7任一所述的一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料。
作为上述方案的进一步优化，
以重量份计，由以下组分组成：玉米42.1、豆粕16、菜粕7、鱼粉2、骨粉1-2、小麦20、蚯蚓蛋白粉1、麦麸3；豆油1.5、菜油0.5、棕榈油0.5、碳酸钙1.5、磷酸氢钙1.4、添加剂预混料2.5和抗热应激预混料2。
作为上述方案的进一步优化，
以重量份计，由以下组分组成：玉米41.5、豆粕15.6、菜粕8、鱼粉2、骨粉1、小麦20、蚯蚓蛋白粉1、麦麸3；豆油1.5、菜油0.5、棕榈油0.5、碳酸钙1.5、磷酸氢钙1.4、添加剂预混料2.5和抗热应激预混料1.6。
与已有技术相比，本发明的一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料及饲料的有益效果体现在：
1、本发明的一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料及饲料中，包含延胡索酸、柠檬酸、双乙酸钠、乙酸钠、丁酸钠、苯乙酸和苯甲酸，相对于现有配方中的单一酸化剂，效果好，有效降低一种1-2周龄肉用野山鸡的消化道ph，抑制有害微生物的生长，促进有益微生物的繁殖，优化肠道区系，提高营养物质消化率，增强1-2周龄肉用野山鸡抗热应激能力。
其中，本发明的一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料及饲料中，还包含谷氨酰胺、酵母硒、虾清素、复合低聚糖、γ-氨基丁酸、二次固体发酵红茶渣，以上各元素在本发明的一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料及饲料中的作用如下：
谷氨酰胺：提高1-2周龄肉用野山鸡抗应激作用和免疫力，促进1-2周龄肉用野山鸡小肠生长发育和肠绒毛形态结构正常，促进多种养分的合成代谢，缓解热应激造成的多种应激损伤。
酵母硒：是优质有机硒源，吸收率高，具有显著的抗应激作用，并增强1-2周龄肉用野山鸡的免疫力。
虾青素即3，3′-二羟基-4，4′-二酮基-β，β′-胡萝卜素，是天然界最强的抗氧化剂之一，可有效清除机体内自由基，提高1-2周龄肉用野山鸡的抗应激能力，提高应激时1-2周龄肉用野山鸡的生长性能。
复合低聚糖又称化学益生素，可改善微生态环境，有利于有益菌如地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等的增殖，代谢产物有机酸降低肠内ph值，抑制有害菌如沙门氏菌、大肠杆菌和腐败菌的繁殖，维护肠道健康，提高1-2周龄肉用野山鸡抗应激能力。
二次固体发酵红茶渣，成本较低，含有一定量的茶多酚，包括黄烷醇类(儿茶素)、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等，可清除1-2周龄肉用野山鸡体内自由基，具有较强的解毒和抗氧化应激的功效。此外，二次固体发酵红茶渣具有特殊香气，可提高1-2周龄肉用野山鸡采食量，促进营养吸收。
本发明的一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料及饲料利用复合抗应激添加剂来提高肉鸡抗热应激能力，添加剂中延胡索酸、柠檬酸、双乙酸钠、乙酸钠、丁酸钠、苯乙酸、苯甲酸、谷氨酰胺和低聚糖可从维护肠道健康方面，提高肉畜野山鸡抗应激能力；酵母硒、虾青素、二次固体发酵红茶渣(有效成分：茶多酚等)可清除肉畜野山鸡机体内自由基、提高抗氧化应激能力；γ-氨基丁酸可从神经水平发挥抗应激能力。本发明的一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料及饲料，从肠道健康、氧化应激、神经水平三个方面发挥抗应激功效，具有较好的应用效果。
2、本发明的一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料及饲料，优化1-2周龄野山鸡肠道微生物区系，促进有益菌的生长，维护肠道健康，使1-2周龄肉用野山鸡尽快适应进食行为。
3、本发明的一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料及饲料，提高1-2周龄肉用野山鸡的抗氧化应激能力，增强其免疫力和抗病能力，提高1-2周龄肉用野山鸡的生长性能和成活率；
4、本发明的一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料及饲料，使用的饲料原料、谷氨酰胺、双乙酸钠、红茶渣、混合菌种等均符合饲料卫生标准、农业部及国家标准，不会对肉鸡的营养价值造成不良影响，更加安全环保。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明，本发明实施例在以本技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1
一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料，以重量份计，由以下组分组成：延胡索酸5、柠檬酸10、双乙酸钠2、乙酸钠2、丁酸钠4、苯乙酸1、苯甲酸6、谷氨酰胺100、酵母硒30、虾青素3、γ-氨基丁酸12、复合低聚糖130、二次固体发酵红茶渣695。
实施例1中的谷氨酰胺、延胡索酸、柠檬酸、双乙酸钠、乙酸钠、丁酸钠、苯乙酸、苯甲酸、谷氨酰胺、酵母硒、虾青素、γ-氨基丁酸均为市面上购买的常用商品，纯度为饲料级。
实施例1中的复合低聚糖为甘露低聚糖和低聚麦芽糖的混合低聚糖，且甘露低聚糖和低聚麦芽糖以1:1比例混合。
实施例1中的二次固体发酵红茶渣通过下述加工工艺制备而成：
(1)以75％的红茶渣和经高压灭菌后的15％菜粕、20％棉粕混合后，加入发酵菌种，在1000ml三角瓶中进行发酵；其中，75％的红茶渣、15％菜粕、20％棉粕为质量百分比。
(2)一次发酵：步骤(1)使用的发酵菌种为混合菌，所述混合菌包括枯草芽孢杆菌和短小孢杆菌，且枯草芽孢杆菌(菌液浓度od600＝0.5-1)和短小孢杆菌(菌液浓度od600＝0.5-1)以体积比1:2比例混合，发酵物与混合菌以100-120g：1-1.05ml的比例混合发酵，步骤(1)得到的混合物在为32℃培养3天，进行一次发酵，在一次发酵培养过程中每隔1h翻转一次；
(3)二次发酵：一次发酵结束后，取出步骤(2)的发酵物，重新接种混合真菌，混合真菌包括米曲霉和黑曲霉，且米曲霉和黑曲霉以体积比1:1比例混合，每100g发酵物接种1×106-1×108个混合真菌。在30℃培养3天，进行二次发酵，在二次发酵培养过程中每隔5h翻转一次；
(4)烘干：经步骤(3)发酵结束后，烘干步骤(3)得到的发酵物，即为二次固体发酵红茶渣。
实施例2
一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料，以重量份计，由以下组分组成：
延胡索酸10、柠檬酸8、双乙酸钠3、乙酸钠2、丁酸钠4、苯乙酸1、苯甲酸6、谷氨酰胺90、酵母硒30、虾青素3、γ-氨基丁酸10、复合低聚糖120、二次固体发酵红茶渣713。
实施例2中的谷氨酰胺、延胡索酸、柠檬酸、双乙酸钠、乙酸钠、丁酸钠、苯乙酸、苯甲酸、谷氨酰胺、酵母硒、虾青素、γ-氨基丁酸均为市面上购买的常用商品，纯度为饲料级。
实施例2中的复合低聚糖为异麦芽低聚糖、果糖低聚糖、大豆低聚糖、低聚木糖的混合低聚糖，其中异麦芽低聚糖、果糖低聚糖、大豆低聚糖、低聚木糖以1:2:1:2的比例混合。
实施例2中的二次固体发酵红茶渣通过下述加工工艺制备而成：
(1)以80％的红茶渣和经高压灭菌后的13％的菜粕、7％棉粕混合后，加入发酵菌种，在1000ml三角瓶中进行发酵；其中，80％的红茶渣、13％菜粕、7％棉粕为质量百分比。
(2)一次发酵：步骤(1)使用的发酵菌种为混合菌，所述混合菌包括枯草芽孢杆菌和短小孢杆菌，且枯草芽孢杆菌(菌液浓度od600＝0.5-1)和短小孢杆菌(菌液浓度od600＝0.5-1)以体积比1:1比例混合，发酵物与混合菌以100-120g：1-1.05ml的比例混合发酵，步骤(1)得到的混合物在为32℃培养2.5天，进行一次发酵，在一次发酵培养过程中每隔1h翻转一次；
(3)二次发酵：一次发酵结束后，取出步骤(2)的发酵物，重新接种混合真菌，所述混合真菌包括米曲霉和黑曲霉，其中，米曲霉和黑曲霉以1:2比例混合，每100g发酵物接种1×106-1×108个混合真菌。在28℃培养4天，进行二次发酵，在二次发酵培养过程中每隔4h翻转一次；
(4)烘干：经步骤(3)发酵结束后，烘干步骤(3)得到的发酵物，即为二次固体发酵红茶渣。
实施例3
一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激饲料，以重量份计，由以下组分组成：玉米42.1、豆粕16、菜粕7、鱼粉2、骨粉1-2、小麦20、蚯蚓蛋白粉1、麦麸3；豆油1.5、菜油0.5、棕榈油0.5、碳酸钙1.5、磷酸氢钙1.4、添加剂预混料2.5和抗热应激预混料2。
其中添加剂预混料包括维生素、微量元素和酶制剂。维生素选自维生素a、维生素e、维生素d3、维生素b1、维生素b2、维生素、维生素、烟酸、泛酸、叶酸和生物素中的一种、两种或多种；微量元素选自硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸锌、亚硒酸钠、碘酸钙和氯化钴中的一种、两种或多种。
实施例4
一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激饲料，以重量份计，由以下组分组成：玉米41.5、豆粕15.6、菜粕8、鱼粉2、骨粉1、小麦20、蚯蚓蛋白粉1、麦麸3；豆油1.5、菜油0.5、棕榈油0.5、碳酸钙1.5、磷酸氢钙1.4、添加剂预混料2.5和抗热应激预混料1.6。
实验一：
采用单因素对比，利用本发明的一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激饲料和常规的1-2周龄肉用野山鸡饲料喂养1日肉用野山鸡，每组180只，实验2周，自由饮水和采食，实验过程中记录采食量、体重和成活率，具体参见表1。
表1
其中：a，b–不同代表差异显著(p<0.05).n＝180只肉鸡；sem–标准误
实验组和对照组初重无显著差异，经过循环热应激处理后，添加抗应激预混料的试验组的末重、增重、采食量和成活率显著高于对照组。热应激明显降低肉用野山鸡生产性能，而本发明的一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激饲料可以较大缓解这种负面效应，具有较好的抗热应激功效。
实验二：
采用单因素对比，利用本发明的一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激饲料和常规的1-2周龄肉用野山鸡饲料喂养1日肉用野山鸡，每组100只，实验120天，自由饮水和采食，实验过程中记录采食量和体重。其中，前15天，实验组喂养本发明优选实施例4的1-2周龄肉用野山鸡抗热应激饲料+实施例2的1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料，对照组喂养常规1-2周龄肉用野山鸡饲料。从15日龄-120日龄，实验组和对照组均喂养相同的全价配合饲料。
试验二的结果：14日龄时，试验组平均体重为74.5g，料肉比是1.73，死亡率0.81％；对照组平均体重为70.5g，料肉比是1.78，死亡率1.92％。120日龄时，试验组平均体重为1638g，料肉比是3.22，死亡率1.42％；对照组平均体重为1512g，料肉比是3.43，死亡率2.19％。
由结果可知，喂养本发明的一种1-2周龄肉用野山鸡抗热应激预混料及饲料有效提高肉用野山鸡的体重，降低其死亡率和料肉比，可以创造更大的经济效益。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。