提高人体免疫力的配方奶粉及其制备方法与应用与流程

1.本发明涉及功能性乳制品领域，具体地，本发明涉及一种提高人体免疫力的配方奶粉及其制备方法与应用。


背景技术：

2.乳铁蛋白是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白，中性粒细胞颗粒中具有杀菌活性的单体糖蛋白，其分子量为80kda，主要由乳腺上皮细胞表达和分泌。研究表明，乳铁蛋白是动物初乳中的天然蛋白质，是一种多功能蛋白质，具有广谱抗菌，抗病毒感染作用，能调节体内铁的平衡；调节骨髓细胞的生成，促进细胞的生长；调节机体免疫功能，增强机体抗病能力；抑制人体肿瘤细胞的作用；能同多种抗生素及抗真菌制剂协同作用，更有效地治疗疾病。乳铁蛋白是世界上公认的母乳成分中帮助宝宝增强免疫力的优质营养元素。
3.双歧杆菌是一种厌氧的革兰氏阳性杆菌，其末端常常分叉，故名双歧杆菌。双歧杆菌在人体肠内发酵后可产生乳酸和醋酸，能提高钙、磷、铁的利用率，促进铁和维生素d的吸收。双歧杆菌发酵乳糖能产生半乳糖，半乳糖是构成脑神经系统中脑苷脂的成分，与婴儿出生后脑的迅速生长有密切关系。此外，双歧杆菌还可以产生维生素b1、b2、b6、b12及丙氨酸、缬氨酸、天冬氨酸和苏氨酸等人体必需的营养物质，对于人体具有不容忽视的重要营养作用。
4.肠道是人体最大的免疫器官，它拥有人体免疫细胞(淋巴细胞)的60-70％，占人体免疫球蛋白iga总量的60％在肠道中。肠道有关淋巴组织对人体免疫力有重要影响，有证据表明常患肠胃感染和呼吸道感染的人群40％缺乏iga。增强肠道有关淋巴组织，可增强肠道健康和全身免疫功能。有关研究表明，健康人比衰老多病之人的肠道的双歧杆菌数量要多，但腐败菌则前者比后者少。
5.cn108029768a公开了一种含乳铁蛋白和益生菌的婴幼儿配方奶粉及其制备方法。以牛乳及其制品为主要原料，添加乳铁蛋白、动物双歧杆菌bb-12以及其他营养成分。乳铁蛋白的添加量为10mg-100mg/100g奶粉，动物双歧杆菌bb-12的添加量为10-100mg/100g。
6.cn110122589a公开了一种含乳铁蛋白和益生菌的调制乳粉及其制备方法。以牛乳制品为主要原料，添加益生菌-海藻酸钠微胶囊粉末和乳铁蛋白以及其他营养成分，模拟母乳营养成分，适于正常婴幼儿食用，可有效改善婴幼儿的肠道环境，提高婴幼儿的免疫力。但经计算该调制乳粉中乳铁蛋白添加量高达21％-42％。
7.现有技术中对于同时含乳铁蛋白和益生菌的乳粉的研究多是处于起步阶段，仍需要进行更深入更广泛的研究。


技术实现要素：

8.本发明的一个目的在于提供一种具有提高免疫力功效的奶粉。
9.本发明的另一目的在于提供制备所述具有提高免疫力功效的奶粉的方法。
10.本发明的另一目的在于提供所述奶粉在提高免疫中的应用。
11.本发明人在研究过程中发现在奶粉中添加不同来源的双歧杆菌，且达到一定的比例，会显著增强双歧杆菌在肠道中的定植能力，从而会使肠道的有益菌的数量比单一来源双歧杆菌或其他比例双歧杆菌的多。配合乳铁蛋白，可显著增强免疫系统。因此，有必要结合乳铁蛋白的特性对现有益生菌调制乳粉进行配方改进，从而提高免疫力。
12.一方面，本发明提供了一种具有提高免疫力功效的奶粉，该奶粉中包含乳铁蛋白和双歧杆菌，其中，乳铁蛋白的含量为20-90mg/100g，双歧杆菌的含量为106～108cfu/g，并且所述双歧杆菌包括双歧杆菌bb-12和双歧杆菌hn019。
13.根据本发明的具体实施方案，本发明的奶粉中，所述双歧杆菌bb-12与双歧杆菌hn019的活菌数或重量比例为0.25～4：1(相同重量的双歧杆菌bb-12与双歧杆菌hn019中的活菌数基本相同)。
14.根据本发明的具体实施方案，本发明的奶粉，其可以为婴幼儿或成人配方奶粉。
15.根据本发明的具体实施方案，本发明的奶粉，其是将乳铁蛋白和双歧杆菌以粉末的形式添加到奶粉基质中混合得到的。
16.根据本发明的具体实施方案，本发明的奶粉中，所述奶粉基质可以是现有技术的常规奶粉配方，例如可以是在生牛乳或生羊乳、全脂奶或全脂奶粉、脱脂奶或脱脂奶粉的基础上，选择添加浓缩牛奶蛋白、乳清粉、乳清蛋白粉、白砂糖、乳糖、固体玉米糖浆、麦芽糊精、菊粉、低聚果糖(fos)、低聚半乳糖(gos)的一种或多种成分制备得到的。
17.根据本发明的具体实施方案，本发明的奶粉，每100g的该奶粉中还包括：维生素a 120-1000ugre，维生素d 2-12.5ug，维生素e1-31mgα-te，维生素b
6 0.1-16mg，维生素c14-100mg，叶酸42-500ug，钙400-1600mg，镁30-280，铁2.5-28mg，锌3-25mg，牛磺酸15-80mg。
18.另一方面，本发明还提供了所述奶粉的制备方法，其包括：
19.将奶粉配方中除乳铁蛋白和双歧杆菌外的成分湿法混料，进行均质并杀菌，之后浓缩干燥，得到奶粉基质；
20.将得到的干燥奶粉基质与乳铁蛋白、双歧杆菌bb-12、双歧杆菌hn019干法混合，制备得到本发明的所述奶粉。
21.根据本发明的具体实施方案，本发明的奶粉的制备方法中，除了奶粉基质与乳铁蛋白、双歧杆菌bb-12、双歧杆菌hn019干法混合过程，均可参照现有技术的常规操作进行。本发明中，优选地，湿法混料温度47℃-48℃，时间28min-35min。混合料液优选在50-55℃温度下均质。杀菌优选为温度90℃-91℃，时间15s-25s。浓缩过程优选为50℃-55℃浓缩浓度53-56％。干燥时主进风温度优选179℃-182℃、排风温度优选85℃-90℃。
22.根据本发明的具体实施方案，本发明的奶粉的制备方法中，奶粉基质与乳铁蛋白、双歧杆菌bb-12、双歧杆菌hn019干法混合时，控制混合温度在50℃以下，优选45℃以下。
23.另一方面，本发明还提供了所述奶粉在制备提高免疫力的食品中的应用。
24.根据本发明的具体实施方案，本发明的奶粉的所述提高免疫力包括增强双歧杆菌在肠道中的定植能力、和/或增强巨噬细胞吞噬能力。
25.本发明通过实验证实了本发明的奶粉具有良好的增强双歧杆菌在肠道中的定植能力以及增强巨噬细胞吞噬能力的功效。
附图说明
26.图1a和图1b显示了按照实施例1制备的奶粉的检测结果报告。
27.图2显示了摄入不同双歧杆菌bb-12与hn019的重量比的本发明的奶粉的小鼠的粪便中的双歧杆菌数的对数值的关系。
具体实施方式
28.为了对本发明的技术特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，现结合具体实施例及对本发明的技术方案进行以下详细说明，应理解这些实例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。实施例中，各原始试剂材料均可商购获得，未注明具体条件的实验方法为所属领域熟知的常规方法和常规条件，或按照仪器制造商所建议的条件。
29.实施例1
30.本实施例提供了一种提高人体免疫力的配方奶粉。每100g奶粉包含以下成分：生牛乳420g、脱脂奶粉30g、白砂糖12.5g、乳糖5g、碳酸钙1g、磷脂0.2g、维生素a430μgre、维生素d6.2μg、维生素e2.30mgα-te、维生素k40.0μg、维生素b10.75mg、维生素b20.75mg、维生素c20.0mg、烟酰胺2.80mg、叶酸140μgdef、泛酸3.20mg、胆碱110.0mg、铁8.1mg、锌9.0mg、叶黄素150μg、牛磺酸37.5mg、乳铁蛋白20mg。双歧杆菌bb-12的添加量为2
×
106cfu/g、双歧杆菌hn019的添加量为2
×
106cfu/g。
31.本实施例的奶粉的制备过程如下：
32.1)将除乳铁蛋白和双歧杆菌外的成分湿法混料(温度47℃，时间30min)；
33.2)在58℃温度下均质；
34.3)杀菌(温度91℃，时间25s)；
35.4)浓缩(温度50℃，浓缩浓度55％)；
36.5)干燥(主进风温度180℃、排风温度87℃)；
37.6)干混：将得到的干燥奶粉与乳铁蛋白、双歧杆菌bb-12、双歧杆菌hn019干法混合为成品。
38.实施例2
39.本实施例提供了一种提高人体免疫力的配方奶粉。每100g奶粉包含以下成分：全脂奶粉60g、脱脂奶粉20g、白砂糖10g、乳糖7.5g、乳矿物盐1.5g、磷脂0.2g、维生素d5.0μg、维生素b610mg、铁9mg、锌8.0mg、乳铁蛋白10mg。双歧杆菌bb-12的添加量为3
×
106cfu/g、双歧杆菌hn019的添加量为2
×
106cfu/g。
40.本实施例的奶粉的制备过程如下：
41.1)将除乳铁蛋白和双歧杆菌外的成分湿法混料(温度48℃，时间35min)；
42.2)在55℃温度下均质；
43.3)杀菌(温度90℃，时间25s)；
44.4)浓缩(温度50℃，浓缩浓度56％)；
45.5)干燥(主进风温度182℃、排风温度85℃)；
46.6)干混：将得到的干燥奶粉与乳铁蛋白、双歧杆菌bb-12、双歧杆菌hn019干法混合为成品。
47.实施例3
48.本实施例提供了一种提高人体免疫力的配方奶粉。每100g奶粉包含以下成分：全脂奶粉40g、脱脂奶粉50g、白砂糖12.5g、磷脂0.5g、维生素a430μgre、维生素d6.2μg、维生素e2.30mgα-te、铁7.5mg、乳铁蛋白10mg。双歧杆菌bb-12的添加量为5
×
106cfu/g、双歧杆菌hn019的添加量为5
×
106cfu/g。
49.本实施例的奶粉的制备过程如下：
50.1)将除乳铁蛋白和双歧杆菌外的成分湿法混料(温度48℃，时间35min)；
51.2)在55℃温度下均质；
52.3)杀菌(温度90℃，时间25s)；
53.4)浓缩(温度50℃，浓缩浓度56％)；
54.5)干燥(主进风温度182℃、排风温度85℃)；
55.6)干混：将得到的干燥奶粉与乳铁蛋白、双歧杆菌bb-12、双歧杆菌hn019干法混合为成品。
56.实施例4
57.本实施例提供一种提高人体免疫力的配方奶粉。每100g奶粉包含以下成分：生羊乳450g、脱脂奶粉25g、白砂糖7.5g、麦芽糊精5g、磷脂0.5g、维生素c40mg、铁8.1mg、锌9.0mg、叶黄素150μg、乳铁蛋白90mg。双歧杆菌bb-12的添加量为1
×
106cfu/g、双歧杆菌hn019的添加量为2
×
106cfu/g。
58.本实施例的奶粉的制备过程如下：
59.1)将除乳铁蛋白和双歧杆菌外的成分湿法混料(温度47℃，时间28min)；
60.2)在50℃温度下均质；3)杀菌(温度91℃，时间15s)；
61.4)浓缩(温度50℃，浓缩浓度53％)；
62.5)干燥(主进风温度179℃、排风温度90℃)；
63.6)干混：将得到的干燥奶粉与乳铁蛋白、双歧杆菌bb-12、双歧杆菌hn019干法混合为成品。
64.实施例5
65.本实施例提供一种提高人体免疫力的配方奶粉。每100g奶粉包含以下成分：全脂奶粉65g、脱脂乳350g、乳清蛋白粉10g、白砂糖12.5g、磷脂0.5g、维生素c40mg、乳铁蛋白90mg。双歧杆菌bb-12的添加量为8
×
106cfu/g、双歧杆菌hn019的添加量为2
×
106cfu/g。
66.本实施例的奶粉的制备过程如下：
67.1)将除乳铁蛋白和双歧杆菌外的成分湿法混料(温度48℃，时间35min)；
68.2)在55℃温度下均质；
69.3)杀菌(温度90℃，时间25s)；
70.4)浓缩(温度50℃，浓缩浓度56％)；
71.5)干燥(主进风温度182℃、排风温度85℃)；
72.6)干混：将得到的干燥奶粉与乳铁蛋白、双歧杆菌bb-12、双歧杆菌hn019干法混合为成品。
73.奶粉成分及卫生指标检测结果
74.对各实施例的奶粉成品进行常规检测，检测项目主要包括能量、色泽、滋气味、组织状态、蛋白质、水分、脂肪、碳水化合物、维生素、矿物质等成分含量及卫生指标等。检测报
告显示，各实施例的奶粉成品的各项指标均符合相关要求。图1a和图1b显示了按照实施例1制备的奶粉的检测结果报告。
75.奶粉效果验证试验1：不同比例双歧杆菌bb-12与hn019的奶粉的喂食效果
76.实验动物选用清洁级昆明雌性小鼠，体重18～22g，动物随机分组，每组12只，分为空白对照组、实验组1～6。试验参照中华人民共和国卫生部颁发的《保健食品评价与技术规范(2003版)》进行。
77.每只小鼠每日喂食5g奶粉，以奶粉与水的质量比为1：6的比例用蒸馏水配制成奶液，连续灌胃30天，每天1次。按照生牛乳420份、脱脂奶粉30份、白砂糖12.5份、乳糖5份、碳酸钙1份、磷脂0.2份的配方制备奶粉基粉。按照《保健食品评价与技术规范(2003版)》要求，以供给人体每日摄入奶粉中双歧杆菌总添加量(5
×
106cfu/g)的10倍量设计，即除空白对照组外，实验组1～6的奶粉中双歧杆菌的总添加量为5
×
107cfu/g。
78.空白对照组仅喂食奶粉基粉(bb-12、hn019均为0)，实验组1～6分别按照奶粉中双歧杆菌bb-12/hn019的值为0.125、0.25、1、2、4、8喂食。第31天停止喂食并开始采集小鼠新鲜粪便，待粪便排出后迅速装入已经灭菌的塑料管中，立即检测粪便中的双歧杆菌总量，每组取平均值后计算出对数值。摄入不同双歧杆菌bb-12与hn019重量比的实验鼠的粪便中的双歧杆菌数对数值如图2所示。
79.图2显示了摄入不同比例双歧杆菌bb-12与hn019的小鼠的粪便中的双歧杆菌数的对数值的关系。图中显示：当bb-12/hn019的值为0.25、1、2、4时，小鼠粪便中的双歧杆菌总数达到较高水平；并且bb-12/hn019的值为1时，小鼠粪便中的双歧杆菌总数达到最高水平。
80.效果验证试验2：不同添加量的乳铁蛋白与双歧杆菌的奶粉的免疫功效测试
81.实验按照《保健食品评价与技术规范(2003版)》规定方法进行。实验动物选用清洁级昆明雌性小鼠，体重18～22g，动物随机分组，每组12只。分别进行4个实验项目：脏器/体重比例测定、耳肿胀实验、血清溶血素测定、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验。每个实验项目分为阴性对照组、实验组1、实验组2、实验组3、实验组4、实验组5。
82.每只小鼠每日喂食5g奶粉，以奶粉与水的质量比为1：6的比例用蒸馏水配制成奶液，连续灌胃30天，每天1次。按照生牛乳420份、脱脂奶粉30份、白砂糖12.5份、乳糖5份、碳酸钙1份、磷脂0.2份的配方制备奶粉基粉。按照《保健食品评价与技术规范(2003版)》要求，以人体每日摄入奶粉的双歧杆菌和乳铁蛋白含量的10倍量设计。双歧杆菌添加比例按照bb-12/hn019的值为1设计。将奶粉基粉对应表1的各组奶粉中乳铁蛋白和双歧杆菌含量要求与一定量的乳铁蛋白和双歧杆菌干混为成品。
83.表1每个实验项目各组实验小鼠的喂食奶粉情况
84.[0085][0086]
其中阴性对照组仅喂食奶粉基粉，不含乳铁蛋白和双歧杆菌；实验组1和2分别喂食仅含双歧杆菌或乳铁蛋白的奶粉；实验组3、4、5分别喂食乳铁蛋白和双歧杆菌按照不同量组方的奶粉。
[0087]
按照《保健食品评价与技术规范(2003版)》的规定，脏器/体重比例测定、耳肿胀实验、血清溶血素测定、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验，以上四个方面只要有两个方面显示为阳性，即与阴性对照组对比具有显著性差异，则可判定受试样品具有提高免疫力的功能作用。实验结果采用spss软件进行实验数据统计和方差分析，如表2所示。
[0088]
表2效果验证试验结果统计表
[0089][0090][0091]
注：**表示与对照组相比具有极显著差异(p《0.01)；*表示与对照组相比具有显著
差异(p《0.05)
[0092]
从表2中可以看出，本发明的低、中、高乳铁蛋白-双歧杆菌组均显示出提高免疫力的特征，而乳铁蛋白组和双歧杆菌组则无提高免疫力特征。由此可知乳铁蛋白和双歧杆菌按照一定量组方在奶粉中可协同增效，促进机体免疫力的提升。这其中中乳铁蛋白-双歧杆菌组的耳肿胀实验左右耳质量差、半数溶血值hc
50
、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验的吞噬率、吞噬指数等四个指标的数据均具有显著意义，比低乳铁蛋白-双歧杆菌组和高乳铁蛋白-双歧杆菌组呈现出更佳的作用效果。