液体组合物的制作方法

1.本发明涉及一种液体组合物。


背景技术：

2.已知非聚合物儿茶素类具有抗氧化作用、抗菌作用、除臭作用、血胆固醇抑制作用、α-淀粉酶活性抑制作用等各种化学
·
生理活性作用，被用作显示出生理活性作用的食品组合物的原材料或抗氧化剂等。抗氧化剂具有通过自身氧化来避免其他原材料氧化劣化的作用，但非聚合物儿茶素类随着时间经过，容易氧化劣化，非聚合物儿茶素类的残存率会慢慢降低，因此，保存稳定性不足。
3.以前，作为提升非聚合物儿茶素类的保存稳定性的技术，例如提出了使抗坏血酸等抗氧化剂及环状寡糖以一定比率溶解于含有非聚合物儿茶素类的水性溶剂中(专利文献1)。
4.(专利文献1)日本特开2010-168318号公报


技术实现要素：

5.本发明提供一种液体组合物，其含有如下成分(a)、(b)及(c)：
6.(a)非聚合物儿茶素类，其含量为0.04～0.6质量％；
7.(b)抗坏血酸或其盐，其含量为0.0001～0.2质量％；及
8.(c)阳离子性物质，其含量为0.0005～0.4质量％，
9.成分(c)相对于成分(a)的结合常数为1.0
×
104m-1
以上。
具体实施方式
10.即便添加了抗坏血酸或环状寡糖，也无法获得预期的劣化抑制效果，非聚合物儿茶素类的稳定化仍不充分。
11.本发明涉及一种非聚合物儿茶素类得以稳定的液体组合物。
12.本发明人鉴于上述课题进行了研究，其结果发现：通过相对于特定量的非聚合物儿茶素类，分别以特定量含有抗坏血酸或其盐及特定的阳离子性物质，能够提升非聚合物儿茶素类的稳定性。
13.根据本发明，能够提供一种非聚合物儿茶素类得以稳定的液体组合物。因此，通过使用本发明的液体组合物，可以充分期待由非聚合物儿茶素类所产生的各种化学
·
生理活性作用。
14.[液体组合物]
[0015]
在本说明书中，“液体组合物”是指在常温(20℃
±
15℃)下为液状的组合物。
[0016]
本发明的液体组合物含有非聚合物儿茶素类作为成分(a)。此处，在本说明书中，“(a)非聚合物儿茶素类”是包括儿茶素、没食子儿茶素、表儿茶素及表没食子儿茶素等非没食子酸酯体与儿茶素没食子酸酯、没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯及表没
食子儿茶素没食子酸酯等没食子酸酯体的总称。在本发明中，含有上述8种非聚合物儿茶素类中的至少一种即可。再者，成分(a)的来源并无特别限定，例如可以为化学合成品，也可以为从含有非聚合物儿茶素类的植物中提取的提取物。
[0017]
本发明的液体组合物中成分(a)的含量为0.04～0.60质量％，从提升生理效果及非聚合物儿茶素类的稳定性的观点出发，优选为0.05质量％以上，更优选为0.06质量％以上，进一步优选为0.07质量％以上，另外，从风味平衡的观点出发，优选为0.2质量％以下，更优选为0.19质量％以下，进一步优选为0.18质量％以下。作为成分(a)的含量范围，在本发明的液体组合物中，优选为0.05～0.2质量％，更优选为0.06～0.19质量％，进一步优选为0.07～0.18质量％。再者，成分(a)的含量基于上述8种非聚合物儿茶素类的合计量而定义。另外，成分(a)的含量可以通过通常已知的测定法中适于测定试样的状况的分析法来进行测定，例如可以通过液相色谱法进行分析。具体而言，可以列举下述实施例中记载的方法。再者，测定时也可以根据需要为了适合装置的检测范围而将试样冷冻干燥，或为了适合装置的分离能力而去除试样中的夹杂物等适当实施处理。
[0018]
本发明的液体组合物含有抗坏血酸或其盐作为成分(b)。抗坏血酸及其盐可以单独使用，也可以并用。
[0019]
成分(b)可以为l体，也可以为d体，也可以为这些的混合物(例如，外消旋体)。其中优选为l体。作为盐，例如可以列举：钠盐、钾盐等碱金属盐；镁盐、钙盐等碱土金属盐等。作为成分(b)，其来源并无特别限定，例如可以为化学合成品，也可以为市售品，也可以来自原料。
[0020]
本发明的液体组合物中的成分(b)的含量为0.0001～0.2质量％，从非聚合物儿茶素类的稳定性的观点出发，优选为0.001质量％以上，更优选为0.005质量％以上，进一步优选为0.008质量％以上，而且，优选为0.18质量％以下，更优选为0.1质量％以下，进一步优选为0.08质量％以下。作为该成分(b)的含量范围，在本发明的液体组合物中，优选为0.001～0.18质量％，更优选为0.005～0.1质量％，进一步优选为0.008～0.08质量％。再者，在成分(b)为盐的形态的情况下，成分(b)的含量设为换算成抗坏血酸量的值。成分(b)的含量可以通过通常已知的抗坏血酸的分析法进行测定。具体而言，可以列举下述实施例中记载的方法。另外，测定时也可以根据需要为了适合装置的检测范围而将试样冷冻干燥，或为了适合装置的分离能力而去除试样中的夹杂物等适当实施处理。
[0021]
从提升非聚合物儿茶素类的稳定性的观点出发，本发明的液体组合物中成分(a)与成分(b)的质量比[(b)/(a)]优选为0.0001以上，更优选为0.01以上，进一步优选为0.03以上，进一步更优选为0.099以上，而且，优选为4以下，更优选为1.1以下，进一步优选为0.6以下，进一步优选为0.4以下，进一步更优选为0.15以下。作为该质量比[(b)/(a)]的范围，优选为0.0001～4，更优选为0.01～1.1，进一步优选为0.099～0.6，进一步更优选为0.099～0.15。另外，该质量比[(b)/(a)]也可以为0.03～0.4。
[0022]
本发明的液体组合物含有阳离子性物质作为成分(c)。在本说明书中，“阳离子性物质”是指与水接触时带正电荷的物质。阳离子性物质通常在分子内具有阳离子性基团，作为该阳离子性基团，例如可以列举：伯氨基、仲氨基、叔氨基等氨基；季铵基、鏻基等鎓盐基；精氨酰基(arginyl)、赖氨酰基(lysyl)、组氨酰基、胍基等氨基酸残基；咪唑基等杂环基。再者，在阳离子性物质具有阳离子性基团及阴离子性基团两者的情况下，只要分子整体带正
电荷即可。
[0023]
此处，本发明人出于以下的原因从非聚合物儿茶素类的稳定化的观点出发而着眼于“阳离子性物质”。即，已知非聚合物儿茶素类从b环开始被氧化，变成茶黄素等多聚体。本发明人着眼于这样的氧化机理，认为通过使非聚合物儿茶素类的b环的电子密度降低，可以使非聚合物儿茶素类稳定。而且，认为具有吸电子性的阳离子性物质对于降低非聚合物儿茶素类的b环的电子密度的目的而言特别有效。
[0024]
另外，本发明人发现：该阳离子性物质中，为了达成非聚合物儿茶素类的稳定化，对于非聚合物儿茶素类的结合常数为1.0
×
104m-1
以上的阳离子性物质容易与非聚合物儿茶素类进行分子间的相互作用，从而特别有效。在本说明书中，“结合常数”是表示阳离子性物质相对于非聚合物儿茶素类的结合亲和力的指标，是指结合常数的值越大，则与非聚合物儿茶素类的相互作用越强。
[0025]
在本发明中，对非聚合物儿茶素类与阳离子性物质的相互作用进行热力学分析，通过等温滴定热量测定(itc)来求出结合常数。在等温滴定热量测定中，在25℃、ph值6.0的条件下，使用非聚合物儿茶素类及阳离子性物质进行滴定，测量分子彼此结合时所产生的微小的热量变化。然后，可以根据所获得的滴定曲线求出非聚合物儿茶素类与阳离子性物质的结合比(n)、结合常数(ka)、结合的焓变化(δh)。进一步，可以根据下述式(1)算出结合的自由能变化(δg)，根据下述式(2)算出结合的熵变化(δs)。具体而言，可以列举下述实施例中记载的方法。再者，在等温滴定热量测定中，例如可以使用microcal公司制造的等温滴定型热量计(vp-itc)。
[0026]
δg＝-rtlnka
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
(1)
[0027]
δg＝δh－tδs
ꢀꢀꢀꢀꢀ
(2)
[0028]
[式中，r表示气体常数，t表示绝对温度，ka表示结合常数。]
[0029]
成分(c)相对于非聚合物儿茶素类的结合常数为1.0
×
104m-1
以上，从提升非聚合物儿茶素类的稳定性的观点出发，优选为2.0
×
104m-1
以上，更优选为3.0
×
104m-1
以上，进一步优选为4.0
×
104m-1
以上。再者，该结合常数的上限并无特别限定，优选为1000
×
104m-1
以下，进一步优选为100
×
104m-1
以下，进一步更优选为7.0
×
104m-1
以下。作为该成分(c)相对于非聚合物儿茶素类的结合常数的范围，优选为1.0
×
104m-1
以上1000
×
104m-1
以下，更优选为2.0
×
104m-1
以上100
×
104m-1
以下，进一步优选为3.0
×
104m-1
以上7.0
×
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以下，进一步更优选为4.0
×
104m-1
以上7.0
×
104m-1
以下。
[0030]
将相对于非聚合物儿茶素类的结合常数的一例列举如下。鱼精蛋白相对于非聚合物儿茶素类的结合常数为4.2
×
104m-1
，乳铁蛋白相对于非聚合物儿茶素类的结合常数为5.9
×
104m-1
，hiv-tat相对于非聚合物儿茶素类的结合常数为5.9
×
104m-1
，pvec相对于非聚合物儿茶素类的结合常数为5.1
×
104m-1
。
[0031]
作为成分(c)，只要结合常数为1.0
×
104m-1
以上，就没有特别限定，例如可以列举：阳离子性蛋白质、阳离子性聚合物、阳离子表面活性剂，适当选择相对于非聚合物儿茶素类的结合常数为1.0
×
104m-1
以上的阳离子性物质即可。成分(c)可以含有一种或两种以上。再者，成分(c)的来源并无特别限定，例如可以为化学合成品，也可以为市售品，也可以来自原料。
[0032]
在本说明书中，“阳离子性蛋白质”是指由具有正电荷的两个以上的氨基酸形成，
在所选择的生理ph值等ph值下具有净正电荷的蛋白质，是也包含肽(低聚物)、多肽的概念。
[0033]
阳离子性蛋白质可以为由具有正电荷的同种氨基酸构成的蛋白质，也可以为由具有正电荷的两个以上的异种氨基酸构成的蛋白质。另外，阳离子性蛋白质也可以包含具有正电荷的氨基酸及具有负电荷的氨基酸两者，等电点必须为8以上。再者，作为具有正电荷的氨基酸，例如可以列举：精氨酸、赖氨酸、组氨酸、胍等，另外，作为具有负电荷的氨基酸，例如可以列举：天冬氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、酪氨酸等。
[0034]
作为阳离子性蛋白质的具体例子，例如可以列举：鱼精蛋白、乳铁蛋白、聚赖氨酸、聚精氨酸、聚鸟氨酸、核仁素、精胺、组朊、蜂毒肽、爪蟾抗菌肽(magainin)ii、防御素、内源性抗微生物多肽(protegrin)、天蚕素、聚乙烯亚胺、溶菌酶、木瓜蛋白酶、酸处理明胶、hiv-tat、pvec等。
[0035]
在本说明书中，“阳离子性聚合物”是指主链或侧链具有阳离子性基团的高分子化合物，不包含“阳离子性蛋白质”。
[0036]
在阳离子性聚合物中，除了仅具有阳离子性基团且不具有阴离子性基团的阳离子性聚合物以外，也存在具有阳离子性基团及阴离子性基团，且整体显示出阳离子性的两性聚合物。再者，阳离子性聚合物可以为均聚物，也可以为共聚物。
[0037]
作为阳离子性聚合物，只要分子整体具有正电荷，就并无特别限定，例如可以列举：聚烯丙胺盐酸盐、聚胺砜盐酸盐、聚乙烯胺盐酸盐、壳聚糖乙酸盐、阳离子化淀粉、阳离子化瓜尔胶、阳离子化塔拉胶、阳离子化刺槐豆胶、阳离子化聚乙烯醇、阳离子化纤维素、季化聚乙烯基吡咯烷酮、聚二烯丙基季铵盐(例如二烯丙基二甲基氯化铵)等。
[0038]
在本说明书中，“阳离子表面活性剂”是指分子内具有亲油基部分及亲水基部分，且溶于水时亲水基部分解离成离子而带正电荷的化合物。
[0039]
作为阳离子表面活性剂，从提升非聚合物儿茶素类的稳定性的观点出发，优选为分子内具有一个以上的不饱和烃基的阳离子表面活性剂，分子内具有一个以上的长链饱和烃基的阳离子表面活性剂，例如可以列举下述式(a)所表示的化合物。
[0040][0041]
(式中，r1、r2相互独立地表示碳原子数1～3的饱和烃基。
[0042]
r3、r4相互独立地表示碳原子数3～20的饱和或不饱和的烃基。
[0043]
a-表示阴离子。)
[0044]
作为r1～r4所涉及的饱和烃基，例如可以列举烷基，可以为直链状及支链状的任一者。
[0045]
作为r4所涉及的不饱和饱和烃基，例如可以列举烯基，可以为直链状及支链状的任一形态。再者，不饱和烃基的不饱和键的位置可以为分子链内及分子链末端的任一者，可以存在于任意的位置。
[0046]
作为a-所涉及的阴离子，并无特别限定，例如可以列举：卤化物离子、硼阴离子、磷阴离子、羧酸阴离子、硫酸阴离子、有机磺酸阴离子。
[0047]
作为阳离子表面活性剂的具体例子，例如可以列举：二烯丙基二甲基氯化铵、鲸蜡基三甲基氯化铵、硬脂基三甲基氯化铵、异硬脂基三甲基氯化铵、月桂基三甲基氯化铵、山嵛基三甲基氯化铵、十八烷基三甲基氯化铵、椰油基三甲基氯化铵、鲸蜡基三甲基溴化铵、硬脂基三甲基溴化铵、月桂基三甲基溴化铵、异硬脂基月桂基二甲基氯化铵、二鲸蜡基二甲基氯化铵、二硬脂基二甲基氯化铵、二椰油基二甲基氯化铵等。
[0048]
作为本发明所使用的阳离子性物质的分子量，从非聚合物儿茶素类的稳定性提升、操作性的观点出发，优选为100da以上，更优选为200da以上，进一步优选为300da以上，而且，优选为100000da以下，更优选为95000da以下，进一步优选为90000da以下。作为该分子量的范围，优选为100～100000da，更优选为200～950000da，进一步优选为300～90000da。再者，阳离子性物质的分子量设为通过凝胶渗透色谱法测得的值。
[0049]
其中，作为阳离子性物质，从提升非聚合物儿茶素类的稳定性的观点出发，优选为选自阳离子性蛋白质、阳离子化聚合物及阳离子表面活性剂中的一种以上，更优选为选自阳离子性蛋白质及阳离子表面活性剂中的一种以上，进一步优选为阳离子性蛋白质，进一步优选为选自鱼精蛋白、乳铁蛋白、hiv-tat、pvec、鲸蜡基三甲基氯化铵及聚二烯丙基二甲基氯化铵中的一种或两种以上，从对液体组合物赋予作为食品的优选的风味的观点出发，进一步更优选为选自鱼精蛋白及乳铁蛋白中的一种以上。
[0050]
本发明的液体组合物中的成分(c)的含量为0.0005～0.4质量％，从提升非聚合物儿茶素类的稳定性的观点出发，优选为0.0008质量％以上，更优选为0.001质量％以上，进一步优选为0.0051质量％以上，而且，优选为0.3质量％以下，更优选为0.1质量％以下，进一步优选为0.049质量％以下。作为该成分(c)的含量范围，在本发明的液体组合物中，优选为0.0008～0.3质量％，更优选为0.001～0.1质量％，进一步优选为0.0051～0.049质量％。再者，成分(c)的含量可以通过通常已知的测定法中适于测定试样的状况的分析法进行测定，例如可以通过液相色谱法进行分析。具体而言，可以列举下述实施例中记载的方法。再者，测定时也可以根据需要为了适合装置的检测范围而将试样冷冻干燥，或为了适合装置的分离能力而去除试样中的夹杂物等适当实施处理。
[0051]
从提升非聚合物儿茶素类的稳定性的观点出发，本发明的液体组合物中成分(a)与成分(c)的质量比[(c)/(a)]优选为0.0008以上，更优选为0.001以上，进一步优选为0.0099以上，进一步更优选为0.055以上，而且，优选为10以下，更优选为0.6以下，进一步优选为0.5以下，进一步更优选为0.15以下。作为该质量比[(c)/(a)]的范围，优选为0.0008～10，更优选为0.001～0.6，进一步优选为0.0099～0.6，进一步更优选为0.0099～0.5，进一步更优选为0.055～0.15。
[0052]
本发明的液体组合物可以使用溶剂作为成分(d)来制备成液状。
[0053]
作为成分(d)，只要将成分(a)、成分(b)及成分(c)分散或溶解，且不与这些成分反应，可以适当选择使用。
[0054]
作为成分(d)，例如可以列举：水、生理盐水、缓冲剂。作为水，例如可以列举：离子交换水、蒸馏水、天然水。作为缓冲剂，例如可以列举：硼酸缓冲剂、磷酸缓冲剂、碳酸缓冲剂、柠檬酸缓冲剂、乙酸缓冲剂、甘氨酸缓冲剂、甘氨酰甘氨酸缓冲剂、三羟甲基氨基甲烷缓冲剂(tris buffer)、天冬氨酸、天冬氨酸盐、ε-氨基己酸。
[0055]
本发明的液体组合物中的成分(d)的含量优选为90质量％以上，更优选为95.0质
量％以上，进一步优选为97.0质量％以上，而且优选为99.9质量％以下，更优选为99.7质量％以下，进一步优选为99.5质量％以下。作为该成分(d)的含量范围，在本发明的液体组合物中，优选为90～99.9质量％，更优选为95.0～99.9质量％，更优选为97.0～99.7质量％，进一步优选为97.0～99.5质量％。
[0056]
本发明的液体组合物的ph值优选为4以上，更优选为4.5以上，进一步优选为5以上，而且优选为7以下，更优选为6.8以下，进一步优选为6.5以下。作为该ph值的范围，优选为4～7，更优选为4.5～6.8，进一步优选为5～6.5。再者，ph值设为将温度调整为20℃，通过ph计测得的值。
[0057]
从提供澄清度高的饮料的观点出发，本发明的液体组合物的浊度(20℃)优选为800ntu以下，更优选为500ntu以下，进一步优选为300ntu以下，特别更优选为250ntu以下。另外，从饮用时提供良好的口感的观点出发，浊度(20℃)优选为0.1ntu以上，更优选为1ntu以上，进一步优选为5ntu以上，进一步优选为40ntu以上。作为该浊度的范围，优选为0.1～800ntu，更优选为1～500ntu，进一步优选为5～300ntu，特别更优选为40～250ntu。此处，“ntu”是使用福尔马肼(formazin)浊度标准的福尔马肼浊度的测定单位。再者，浊度设为使用浊度计，以20℃、波长范围850nm、90
°
透射散射比较方式测得的值。
[0058]
另外，关于本发明的液体组合物的透明度，优选波长700nm的光的透过率为70％以上。再者，透过率设为使用紫外可见分光光度计，以光程长1cm的石英比色皿测定波长700nm的光的透过率所得到的值，紫外可见分光光度计可以使用岛津制作所制造的uv-160a、uv-1800等。
[0059]
本发明的液体组合物可以按照常规方法进行制造，可以采用适当的方法。例如，可以将成分(a)、成分(b)、成分(c)及根据需要的其他成分以成分(a)、成分(b)及成分(c)的各含量在上述范围内的方式进行混合来制造。成分(a)、成分(b)及成分(c)的混合顺序并无特别限定。
[0060]
作为成分(a)，只要是饮食品的领域中通常使用的，就并无特别限定，例如可以使用市售的试剂，可以以富含成分(a)的植物的提取物的形态含有。
[0061]
作为植物，只要是包含成分(a)且在饮食品的领域中通常使用的植物，就并无特别限定，例如可以列举山茶(camellia)属，例如选自小叶茶(c.sinensis var.sinensis(包含薮北种))、大叶茶(c.sinensis var.assamica)及这些的杂种中的茶叶(camellia sinensis)。茶叶根据其加工方法，可以分为不发酵茶、半发酵茶及发酵茶，可以适当选择使用这些中的一种或两种以上。作为不发酵茶叶，例如可以列举：煎茶、番茶、碾茶、釜炒茶、茎茶、棒茶、芽茶等绿茶茶叶，也可以实施加热加工。另外，作为半发酵茶叶，例如可以列举：铁观音、色种、黄金桂、武夷岩茶等乌龙茶茶叶。进一步，作为发酵茶叶，可以列举：大吉岭、阿萨姆、斯里兰卡等红茶茶叶。茶叶可以使用一种或两种以上。其中，从非聚合物儿茶素类含量、风味的方面出发，优选为不发酵茶叶，进一步优选为绿茶。再者，提取方法及提取条件并无特别限定，可以采用公知的方法。
[0062]
本发明的液体组合物由于非聚合物儿茶素类的稳定性优异，可以充分期待由非聚合物儿茶素类所产生的各种化学
·
生理活性作用，因此，可以应用在广泛的用途。例如可以列举：饮料、点心、调味料、鱼饼、加工肉制品、蒸煮食品、罐头、腌菜、咸烹海味、冷冻食品等饮食品，除此以外，抗菌剂、抗氧化剂、除臭剂、抗病毒剂、抗癌剂等。其中，优选为饮食品，更
优选为饮料，进一步优选为茶饮料。
[0063]
[容器装饮料]
[0064]
本发明的容器装饮料是将上述液体组合物填充至容器中而成的，也可以根据需要将液状组合物浓缩或稀释而填充至容器中。
[0065]
作为容器，只要是通常的包装容器即可，并无特别限定，例如可以列举：以聚对苯二甲酸乙二酯作为主成分的成型容器(所谓的pet瓶)、金属罐、与金属箔或塑料膜复合而成的纸容器、瓶等。
[0066]
另外，本发明的容器装饮料可以经加热杀菌。作为杀菌方法，只要是适合于应适用的法规(在日本为食品卫生法)所规定的条件的杀菌方法，就并无特别限定。例如，将茶饮料填充至容器包装中，塞紧或密封后进行杀菌；或者将经带有自动记录温度计的杀菌器等杀菌后的液体或经过滤器等除菌后的液体自动填充至容器包装中，然后塞紧或密封即可。更具体而言，可以列举：蒸煮杀菌法、高温短时间杀菌法(htst法)、超高温杀菌法(uht法)等。
[0067]
以上基于本发明的实施方式对本发明详细地进行了说明，但本发明并不限定于上述实施方式。本发明可以在不脱离其主旨的范围内进行各种变化。例如，从提升非聚合物儿茶素类的稳定性的观点出发，本发明的液体组合物优选含有特定量的非聚合物儿茶素类及抗坏血酸或其盐，并且含有特定量的相对于非聚合物儿茶素类具有下述结合常数的阳离子性物质。即，本发明提供如下液体组合物。
[0068]
＜1＞一种液体组合物，其中，含有如下成分(a)、(b)及(c)：
[0069]
(a)非聚合物儿茶素类0.04～0.6质量％、
[0070]
(b)抗坏血酸或其盐0.0001～0.2质量％、及
[0071]
(c)阳离子性物质0.0005～0.4质量％，
[0072]
成分(c)相对于成分(a)的结合常数为3.0
×
104m-1
以上7.0
×
104m-1
以下，优选为4.0
×
104m-1
以上7.0
×
104m-1
以下。
[0073]
＜2＞如上述＜1＞所述的液体组合物，其中，成分(a)的含量优选为0.04～0.2质量％，且成分(b)的含量优选为0.005～0.1质量％。
[0074]
＜3＞如上述＜1＞所述的液体组合物，其中，成分(a)的含量优选为0.06～0.2质量％，且成分(b)的含量优选为0.005～0.1质量％，且成分(c)的含量优选为0.001～0.1质量％。
[0075]
＜4＞如上述＜2＞或＜3＞所述的液体组合物，其中，成分(a)与成分(b)的质量比[(b)/(a)]优选为0.03～0.4。
[0076]
＜5＞如上述＜2＞至＜4＞中任一项所述的液体组合物，其中，成分(a)与成分(c)的质量比[(c)/(a)]优选为0.0099～0.6。
[0077]
＜6＞如上述＜2＞至＜5＞中任一项所述的液体组合物，其中，成分(c)的分子量优选为300～90000。
[0078]
＜7＞如上述＜2＞至＜6＞中任一项所述的液体组合物，其中，ph值为4～7。
[0079]
＜8＞如上述＜2＞至＜7＞中任一项所述的液体组合物，其中，所述液体组合物为饮料。
[0080]
另外，从提升非聚合物儿茶素类的稳定性的观点出发，本发明的液体组合物优选含有特定量的非聚合物儿茶素类及抗坏血酸或其盐，并且含有特定量的下述阳离子性物
质。即，本发明提供如下液体组合物。
[0081]
＜11＞一种液体组合物，其中，含有如下成分(a)、(b)及(c)：
[0082]
(a)非聚合物儿茶素类0.04～0.6质量％、
[0083]
(b)抗坏血酸或其盐0.0001～0.2质量％、及
[0084]
(c)阳离子性物质0.0005～0.4质量％，
[0085]
成分(c)为选自阳离子性蛋白质、阳离子性聚合物及阳离子表面活性剂中的一种或两种以上的阳离子性物质，并且成分(c)相对于成分(a)的结合常数为3.0
×
104m-1
以上7.0
×
104m-1
以下，优选为4.0
×
104m-1
以上7.0
×
104m-1
以下。
[0086]
＜12＞如上述＜11＞所述的液体组合物，其中，成分(a)的含量为0.04～0.2质量％，且成分(b)的含量为0.005～0.1质量％。
[0087]
＜13＞如上述＜11＞所述的液体组合物，其中，成分(a)的含量为0.06～0.2质量％，且成分(b)的含量为0.005～0.1质量％，且成分(c)的含量为0.001～0.1质量％。
[0088]
＜14＞如上述＜12＞或＜13＞所述的液体组合物，其中，成分(a)与成分(b)的质量比[(b)/(a)]优选为0.03～0.4。
[0089]
＜15＞如上述＜12＞至＜14＞中任一项所述的液体组合物，其中，成分(a)与成分(c)的质量比[(c)/(a)]优选为0.0099～0.6。
[0090]
＜16＞如上述＜12＞至＜15＞中任一项所述的液体组合物，其中，成分(c)的分子量优选为300～90000。
[0091]
＜17＞如上述＜12＞至＜16＞中任一项所述的液体组合物，其中，ph值为4～7。
[0092]
＜18＞如上述＜12＞至＜17＞中任一项所述的液体组合物，其中，所述液体组合物为饮料。
[0093]
＜19＞如上述＜12＞至＜18＞中任一项所述的液体组合物，其中，阳离子表面活性剂优选为下述式(a)所表示的化合物。
[0094][0095]
(式中，r1、r2相互独立地表示碳原子数1～3的饱和烃基。
[0096]
r3、r4相互独立地表示碳原子数3～20的饱和或不饱和的烃基。
[0097]
a-表示阴离子。)
[0098]
另外，从提升非聚合物儿茶素类的稳定性的观点出发，本发明的液体组合物优选含有特定量的非聚合物儿茶素类及抗坏血酸或其盐，并且含有特定量的下述阳离子性物质。即，本发明提供如下液体组合物。
[0099]
＜21＞一种液体组合物，其中，含有如下成分(a)、(b)及(c)：
[0100]
(a)非聚合物儿茶素类0.04～0.6质量％、
[0101]
(b)抗坏血酸或其盐0.0001～0.2质量％、及
[0102]
(c)阳离子性物质0.0005～0.4质量％，
[0103]
成分(c)优选为选自鱼精蛋白、乳铁蛋白、hiv-tat、pvec、鲸蜡基三甲基氯化铵及
聚二烯丙基二甲基氯化铵中的一种或两种以上。
[0104]
＜22＞如上述＜21＞所述的液体组合物，其中，成分(a)的含量为0.04～0.2质量％，且成分(b)的含量为0.005～0.1质量％。
[0105]
＜23＞如上述＜21＞所述的液体组合物，其中，成分(a)的含量为0.06～0.2质量％，且成分(b)的含量为0.005～0.1质量％，且成分(c)的含量为0.001～0.1质量％。
[0106]
＜24＞如上述＜22＞或＜23＞所述的液体组合物，其中，成分(a)与成分(b)的质量比[(b)/(a)]优选为0.03～0.4。
[0107]
＜25＞如上述＜22＞至＜24＞中任一项所述的液体组合物，其中，成分(a)与成分(c)的质量比[(c)/(a)]优选为0.0099～0.6。
[0108]
＜26＞如上述＜22＞至＜25＞中任一项所述的液体组合物，其中成分(c)优选为选自鱼精蛋白及乳铁蛋白中的一种以上。
[0109]
＜27＞如上述＜22＞至＜26＞中任一项所述的液体组合物，其中，ph值为4～7。
[0110]
＜28＞如上述＜22＞至＜27＞中任一项所述的液体组合物，其中，所述液体组合物为饮料。
[0111]
实施例
[0112]
1.非聚合物儿茶素类的分析
[0113]
利用过滤器(0.45μm)过滤试样溶液，使用高效液相色谱仪(型号scl-10avp，岛津制作所制造)，安装导入十八烷基的液相色谱仪用填充柱(l-column tm ods 4.6mmφ
×
250mm，5μm：财团法人化学物质评价研究机构制造)，在柱温度40℃下利用梯度法进行分析。使用栗田工业制造的非聚合物儿茶素类作为非聚合物儿茶素类的标准品，利用校准曲线法定量。流动相a液采用含有0.1mol/l的乙酸的蒸馏水溶液，b液采用含有0.1mol/l的乙酸的乙腈溶液，在试样注入量为10μl，uv检测器波长为280nm的条件下进行。再者，梯度的条件如下所述。
[0114]
浓度梯度条件
[0115][0116][0117]
2.抗坏血酸的分析
[0118]
将试样1～5g添加至5％偏磷酸溶液中(50ml)适当稀释。离心后过滤，取滤液1ml于小试管中，进一步，添加5％偏磷酸溶液1ml之后，添加0.2％二氯酚靛酚溶液100μl及2％硫脲-5％偏磷酸溶液2ml。添加2％2,4-二硝基苯肼-4.5mol/l硫酸0.5ml，在38～42℃下反应16小时。
[0119]
通过乙酸乙酯3ml(振荡60分钟)进行提取，通过无水硫酸钠使其干燥后，通过hplc进行分析。0035hplc使用lc-10as(岛津制作所(株))，uv-vis检测器使用spd-10av(岛津制作所(株))，柱使用senshupak silca-1100 4.6mm
×
长度100mm(柱温度35℃)，对于流动相使用乙酸乙酯、己烷、乙酸、水的混合液(60:40:5:0.05)，以流量1.5ml/min在波长495nm下进行检测。
[0120]
3.阳离子性物质的分析
[0121]
(1)鱼精蛋白
[0122]
称取试样约0.1～0.15g，通过氮定量法的凯氏法定量。然后，通过下式求出含量。再者，利用凯氏法的定量可以参照第8版食品添加物法典。另外，0.05mo/l硫酸1ml＝1.401mgn。
[0123]
鱼精蛋白的含量(％)＝
[0124]
[氮量(mg)
×
3.19]/[干燥物换算后的试样的采取量(g)
×
1000]
×
100
[0125]
(2)乳铁蛋白
[0126]
乳铁蛋白含量可以通过乳胶凝集法进行测定。乳胶凝集法是使用抗乳铁蛋白抗体致敏乳胶的乳胶凝集比浊法，并且是对具有抗原抗体反应活性的乳铁蛋白进行定量的方法。试样中的乳铁蛋白与和乳胶粒子结合的抗乳铁蛋白抗体显示出抗原抗体反应，产生凝集。针对该凝集，在一定波长下测定吸光度变化，将其进行换算，使用市售的试剂盒及光学分析装置测定乳铁蛋白的含量。作为市售的试剂盒，例如可以使用乳铁蛋白测定试剂(人类、牛用)(infinita co.,ltd.制造)。作为光学分析装置，可以使用自动生物化学分析仪biolis24i(tokyo boeki medisys inc.)。
[0127]
(3)hiv-tat
[0128]
试样中的hiv-tat与抗hiv-tat抗体显示出抗原抗体反应，通过elisa法，使用市售的试剂盒测定hiv-tat的含量。作为市售的试剂盒，可以使用抗tat免疫球蛋白测定elisa试剂盒(cosmo bio co.,ltd.制造)。
[0129]
(4)pvec
[0130]
试样中的pvec通过液相色谱质谱法(lc/ms/ms)，使用hplc柱及流动相进行测定。
[0131]
(5)鲸蜡基三甲基氯化铵
[0132]
关于试样中的鲸蜡基三甲基氯化铵，通过液相色谱质谱法(lc/ms/ms)，使用hplc柱及流动相进行测定。
[0133]
·
lc/ms/ms：lcms 8030(岛津制作所)
[0134]
·
hplc柱：shim pack fc ods(75mm
×
2.0mm i.d.，粒径3μm)(岛津制作所)
[0135]
·
流动相：5mm乙酸铵水溶液、5mm乙酸铵甲醇溶液
[0136]
(6)聚二烯丙基二甲基氯化铵
[0137]
关于试样中的聚二烯丙基二甲基氯化铵，通过液相色谱质谱法(lc/ms/ms)，使用hplc柱及流动相进行测定。
[0138]
4.阳离子性物质的结合常数的分析
[0139]
使用10mm磷酸缓冲液(ph值6.0)作为溶剂，在等温滴定型热量计(itc，miclocal公司制造，型号名称：vp-itc)的试样槽(体积1.4ml)中装满阳离子性物质水溶液或糊精(β-环糊精、γ-环糊精)水溶液，在25℃的条件下，自以310rpm旋转的注射器中以一定时间间隔滴
加表没食子儿茶素没食子酸酯(egcg)，反复测定所产生的热量变化。也以相同的方式测定向不包含阳离子性物质或糊精水溶液的10mm磷酸缓冲液中滴加egcg水溶液时的热量变化，将其设为稀释热的数据。自将egcg水溶液滴加于阳离子性高分子水溶液或糊精水溶液中的热滴定数据减去稀释热的数据后，使用分析软件(origin7)，以单点结合模型进行分析。
[0140]
5.ph值的测定
[0141]
将茶饮料的温度调整至20℃，使用ph计(horiba小型ph计，堀场制作所制造)进行测定。
[0142]
6.非聚合物儿茶素类的稳定性评价
[0143]
根据保存前(刚制造后)的液体组合物中的非聚合物儿茶素类的含量、及在55℃下保存7天后的液体组合物中的非聚合物儿茶素类的含量，通过下述式求出非聚合物儿茶素类的残存率。
[0144]
非聚合物儿茶素类的残存率(％)＝x/y
×
100
[0145]
(x表示保存后的液体组合物中的非聚合物儿茶素类的含量，y表示保存前的液体组合物中的非聚合物儿茶素类的含量。)
[0146]
实施例1～6及比较例1～3
[0147]
将表1所示的各成分均匀混合，制备各液体组合物。对所获得的液体组合物进行分析及非聚合物儿茶素类的稳定性评价。将其结果一并示于表1中。
[0148]
[表1]
[0149][0150]
*1：teavigo(太阳化学株式会社)：非聚合物儿茶素类94％
[0151]
*2：渡边化学株式会社
[0152]
*3：hap-100，maruha nichiro corporation，分子量(da)：4200
[0153]
*4：hiv-tat(47-57)，jena bioscience，分子量(da)：1972
[0154]
*5：pvec(人钙黏蛋白-5(cadherin-5))，anaspec,inc，分子量(da)：.2210
[0155]
*6：乳铁蛋白，sigma-aldrich co.llc.，分子量(da)：80000
[0156]
*7：quartamin 60w(花王(株))：30％，分子量(da)：320
[0157]
*8：merquat 100(花王(株))：42％，分子量(da)：491
[0158]
*9：β-环糊精，东京化成(株)，分子量(da)：1135
[0159]
*10：γ-环糊精，东京化成(株)，分子量(da)：1297
[0160]
实施例7、8及比较例4～7
[0161]
将表2所示的各成分均匀混合，制备各液体组合物。对所获得的液体组合物进行分析及非聚合物儿茶素类的稳定性评价。将其结果与实施例1及比较例1的结果一起示于表2中。
[0162]
[表2]
[0163][0164]
*1：teavigo(太阳化学株式会社)：非聚合物儿茶素类94％
[0165]
*2：渡边化学株式会社
[0166]
*3：hap-100，maruha nichiro corporation
[0167]
实施例9～12
[0168]
将表3所示的各成分均匀混合，制备各液体组合物。对所获得的液体组合物进行分析及非聚合物儿茶素类的稳定性评价。将其结果与实施例1及比较例1的结果一起示于表3中。
[0169]
[表3]
[0170]
[0171]
*1：teavigo(太阳化学株式会社)：非聚合物儿茶素类94％
[0172]
*2：渡边化学株式会社
[0173]
*3：hap-100，maruha nichiro corporation
[0174]
实施例13～15及比较例8～10
[0175]
将表4所示的各成分均匀混合，制备各液体组合物。对所获得的液体组合物进行分析及非聚合物儿茶素类的稳定性评价。将其结果与实施例1的结果一起示于表4中。
[0176]
[表4]
[0177][0178]
*1：teavigo(太阳化学株式会社)：非聚合物儿茶素类94％
[0179]
*2：渡边化学株式会社
[0180]
*3：hap-100，maruha nichiro corporation
[0181]
根据表1～4可知，通过相对于特定量的非聚合物儿茶素类，分别以特定量含有抗坏血酸或其盐及特定的阳离子性物质，能够提升非聚合物儿茶素类的稳定性。