一种提高唾液酸酯稳定性的方法与流程

本发明属于医药及食品，具体涉及一种提高唾液酸酯稳定性的方法。

背景技术：

1、唾液酸又称为燕窝酸，学名n-乙酰神经氨酸，是一系列含有9个碳原子的羧基化单糖酰化衍生物的统称，可见于某些动物或细菌体内，通常以低聚糖、糖脂或者糖蛋白的形式存在。唾液酸类化合物具有重要的生物学功能，在生命体内许多重要的生理、生化和病理过程中均有所参与，例如直接参与细胞与细胞、细胞与微生物、细胞与毒素、细胞与抗体之间的相互作用，在抗炎、抗肿瘤、抗病毒、抗老年痴呆、促进婴幼儿神经发育等领域均具有重要的应用价值。

2、在人体中，大脑中的唾液酸含量最高，其中脑灰质中的唾液酸含量是肝、肺等内脏器官的15倍左右。唾液酸的主要食物来源是母乳，另外也存在于牛奶、鸡蛋和奶酪中。唾液酸的种类有几十种，其中最常见的唾液酸是n-乙酰神经氨酸(neu5ac)，n-乙酰神经氨酸已被欧盟(2018年)和我国(2019年)批准为食品添加剂，主要作为婴儿食品配料和营养增补剂，2021年又被我国批准为新化妆品原料。

3、然而，n-乙酰神经氨酸的分子链中含有羧基，在人体内可以产生负电荷，是一种极性分子，不易穿过非极性的细胞膜，难以被细胞吸收，但是其水溶性强，在人体内极易被代谢排出体外，因此n-乙酰神经氨酸作为药品或营养物质时其生物利用率较低。将n-乙酰神经氨酸的羧基进行酯化修饰形成n-乙酰神经氨酸酯，可降低分子极性，作为n-乙酰神经氨酸前体，有利于细胞迅速吸收，从而解决细胞难吸收问题。

4、n-乙酰神经氨酸酯进入体内后，肝脏、肠道及其它组织细胞中的羧酸酯酶等生物水解酶就会水解n-乙酰神经氨酸酯的酯键，除去酯基，将n-乙酰神经氨酸酯回复为n-乙酰神经氨酸，被机体所利用。

5、通过将n-乙酰神经氨酸进行酯化修饰以降低分子极性、促进细胞吸收是一种高效提升n-乙酰神经氨酸生物利用率的方法。中国发明专利申请202310460510.6的发明专利提供了一种半酶法催化合成n-乙酰神经氨酸酯的方法，升级优化了生产工艺，极大缩短了合成反应时间，提高了生产率，降低了生产成本，为n-乙酰神经氨酸酯的大规模应用奠定了基础。但n-乙酰神经氨酸酯的酯键在常温普通环境下化学稳定性较差，易于水解，保质期短，不利于n-乙酰神经氨酸酯作为药品或营养补充剂所应用。因而，如何增强n-乙酰神经氨酸酯的分子稳定性、延长保质期，并确保在保质期内快速通过供应链传递到市场终端口服应用，是n-乙酰神经氨酸酯作为药品或营养补充剂应用中需要解决的重要技术问题。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供了一种提高唾液酸酯稳定性的方法，以解决上述背景技术中提到的技术问题。

2、为了实现上述目的，本发明公开了一种提高唾液酸酯稳定性的方法，以酸奶作为唾液酸酯的稳定剂，制备唾液酸酯-酸奶混合物；

3、所述唾液酸酯占唾液酸酯-酸奶混合物总质量的0.1～70％；在所述唾液酸酯-酸奶混合物中，唾液酸酯溶解或均匀悬浮分布于酸奶中；所述唾液酸酯-酸奶混合物的ph＝4.0～4.6；所述唾液酸酯-酸奶混合物的储存和运输温度为-25℃～6℃。

4、进一步的，制备唾液酸酯-酸奶混合物的方法，包括如下步骤：

5、(1)将酸奶加入唾液酸酯中；

6、(2)均质混合，得到唾液酸酯-酸奶混合物；

7、(3)对唾液酸酯-酸奶混合物进行后处理；

8、所述酸奶包括发酵乳、酸乳、风味发酵乳、风味酸乳、老酸奶、优酸乳和希腊酸奶中的一种或几种的混合物。

9、进一步的，采用一锅法制备唾液酸酯-酸奶混合物，包括如下步骤：

10、(1)向奶基中加入唾液酸酯；

11、(2)均质混合，杀菌后降温至27～45℃，向其中接入菌种发酵，发酵至酸度为68～75°t停止发酵，破乳，冷却，得到唾液酸酯-酸奶混合物；

12、(3)对唾液酸酯-酸奶混合物进行后处理。

13、进一步的，所述唾液酸酯包括n-乙酰神经氨酸甲酯、n-乙酰神经氨酸乙酯、n-乙酰神经氨酸丙酯、n-乙酰神经氨酸异丙酯、n-乙酰神经氨酸正丁酯、n-乙酰神经氨酸仲丁酯、n-乙酰神经氨酸叔丁酯、n-乙酰神经氨酸异丁酯、聚唾液酸甲酯、聚唾液酸乙酯中的一种或几种的混合物。

14、进一步的，所述奶基包括生鲜乳、脱脂乳粉和全脂乳粉中的一种或几种的混合物。

15、进一步的，所述菌种包括乳酸乳球菌乳酸亚种、乳酸乳球菌乳脂亚种、乳酸乳球菌双乙酰亚种、肠膜明串珠菌肠膜亚种、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、副干酪乳杆菌、乳酸菌中的一种或几种的混合物。

16、进一步的，在唾液酸酯-酸奶混合物中，添加有复配稳定剂，所述复配稳定剂的加入量为唾液酸酯-酸奶混合物总质量的0.2～0.5％，所述复配稳定剂包括羟丙基二淀粉磷酸酯、果胶和琼脂中的一种或几种的混合物。

17、进一步的，在唾液酸酯-酸奶混合物中，添加有可食用辅料，所述可食用辅料的加入量为唾液酸酯-酸奶混合物总质量的0.1～5％，所述可食用辅料包括糖、代糖、水溶性维生素、无机微量营养元素、矿物质、电解质、谷物粒、蔬菜粒、水果粒中的一种或几种的混合物。

18、进一步的，所述后处理包括对唾液酸酯-酸奶混合物进行流质或半流质分装。

19、进一步的，所述后处理包括对唾液酸酯-酸奶混合物进行干燥，得到唾液酸酯-酸奶混合物固态粉末，然后将所述唾液酸酯-酸奶混合物固态粉末压制成片或灌装成胶囊。

20、本发明得到的唾液酸酯-酸奶混合物，可应用于药品、食品、保健品、兽药、宠物食品、饲料的制备，经口服用，快速高效补充机体所需唾液酸。

21、n-乙酰神经氨酸作为极性分子，不易透过非极性的细胞膜，不利于细胞吸收，生物利用率较低。通过将n-乙酰神经氨酸的羧基进行酯化修饰形成n-乙酰神经氨酸酯，可降低分子极性，作为n-乙酰神经氨酸前体，有利于细胞迅速吸收。但n-乙酰神经氨酸酯的酯键在常温普通环境下化学稳定性较差，例如，n-乙酰神经氨酸甲酯在ph＝7.0时不稳定，易于水解，保质期短，不利于n-乙酰神经氨酸甲酯作为药品或营养补充剂所应用。当ph降低到4.0至5.5时，n-乙酰神经氨酸甲酯稳定性提高。通过引入ph范围在4.0至5.5的稳定剂，将是提高n-乙酰神经氨酸甲酯稳定性的有效手段之一。

22、牛奶的ph＝6.3～6.6，牛奶发酵成酸奶的最佳ph范围恰好在4.0到4.6之间。牛奶在发酵过程中，乳糖会逐步转化为乳酸，ph值随之下降，当ph值下降到5.2～5.3时，酪蛋白开始凝结，直到ph值下降到4.6时，酪蛋白完全凝结，酸奶呈凝固状态，发酵完成。发酵完成后还会继续酸化，逐步把剩余的乳糖转化成乳酸。市面上的普通酸奶，糖添加量基本都在8％～12％，称为甜-酸奶饮料其实更合适些。而无糖酸奶，配料表只有生牛乳和乳酸菌，没有添加糖或代糖。市售“光明如实”无糖酸奶，每百克含4.2克蛋白质，130毫克钙，82大卡，ph值4.28。市售“和润”无糖酸奶，每百克含3.1克蛋白质，120毫克钙，62大卡，ph值4.33。市售“简爱”无糖酸奶，每百克含4克蛋白质，114毫克钙，热量78大卡，ph值4.40。当酸奶的ph值低于4.2时，口感不佳。因此，ph值4.2～4.6是酸奶ph值比较理想的范围，这个ph范围恰好有助于维持n-乙酰神经氨酸甲酯的稳定性。

23、与现有技术相比，本发明的提高唾液酸酯稳定性的方法具有以下优点：

24、(1)本发明中，创造性地使用了酸奶作为唾液酸酯的稳定剂，并使体系的ph降低到4.0～4.6，在该ph范围内，酸奶具有最佳的芳香和风味，并可保留适当的口感和质地，同时该ph范围也可有助于维持唾液酸酯的稳定性。

25、(2)唾液酸酯在水中的溶解度有限，而酸奶是流质或半流质的粘稠状态，对溶质的悬浮性能较好。以酸奶作为唾液酸酯的稳定剂，酸奶中可溶解一部分唾液酸酯，更能均匀悬浮一部分未溶解的唾液酸酯。因此，以粘稠的酸奶作为唾液酸酯的稳定剂，能够容纳且保护更多的唾液酸酯，使成品在单位体积内具有更高含量的唾液酸酯，医疗保健效果更明显。

26、(3)酸奶适宜的储藏和运输温度为2～6℃之间，唾液酸酯在该温度下也具有较好的稳定性；唾液酸酯-酸奶混合物在0～6℃(流质或半流质状态)或-25～6℃(干燥的固态粉末)的条件下储存和运输时，冷藏或冷链运输的低温环境能够同时保障唾液酸酯和酸奶的品质稳定性。

27、(4)酸奶是一种日常食品，食用安全性高，唾液酸酯水解后的主要产物是n-乙酰神经氨酸，而n-乙酰神经氨酸已被欧盟(2018年)和我国(2019年)批准为食品添加剂，可安全食用。因此，唾液酸酯-酸奶(粉)混合物口服应用安全性高。

28、(5)使用酸奶或酸奶粉作为稳定剂保护的唾液酸酯，分子极性低于唾液酸，更有利于细胞迅速吸收摄取。唾液酸酯在体内可被肝脏、肠壁及其它组织细胞中的羧酸酯酶等生物水解酶水解酯键，除去酯基，将唾液酸酯回复为唾液酸，进而被机体利用，发挥抗炎、抗肿瘤、抗病毒、抗老年痴呆、促进婴幼儿神经发育等作用。

29、(6)酸奶的生产和市场化供应体系高度成熟，城乡市场覆盖面非常广阔，借助成熟完备的酸奶供应链，有助于唾液酸酯-酸奶混合物作为药品、食品、保健品、兽药、宠物食品或饲料的市场化供应。