一种从乌鸡中提取活性肽的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物工程领域，具体是一种从乌鸡中提取活性肽的方法。
【背景技术】
[0002]乌鸡内含丰富的黑色素、蛋白质、B族维生素等18种氨基酸和18种微量元素，其中烟酸、维生素E、磷、铁、钾、钠的含量均高于普通鸡肉，胆固醇和脂肪含量却很低。乌鸡的血清总蛋白和球蛋白质含量均明显高于普通鸡。乌鸡肉中含氨基酸高于普通鸡，而且含铁元素也比普通鸡高很多，是营养价值极高的滋补品。食用乌鸡可以提高生理机能、延缓衰老、强筋健骨。对防治骨质疏松、佝偻病、妇女缺铁性贫血症等有明显功效。
[0003]多肽是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质。科学发现，几乎所有细胞都受多肽调节，如:细胞分化、神经激素递质调节、免疫调节等均与活性多肽密切相关，它具有调节机体生理功能和为机体提供营养的双重功效。乌鸡多肽具有补肝、益气血、养阴清热、调经健脾补血、补贤固精、抗衰老、抗疲劳、抗糖基化促骨细胞增殖等功效，并且乌鸡多肽具有水溶性好、营养价值高、服用方便、口感好、高效吸收等特点，是生产可降解小肽片的理想原料。
[0004]目前市面上乌鸡的用途多为直接加热食用或入药制备乌鸡口服液、乌鸡精等制品，由于其中大分子的蛋白质需消化后才能吸收，因而其中的有效成分并不能完全发挥和利用。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种从乌鸡中提取活性肽的方法，提取率为20%以上，且小分子肽比例在95%以上。
[0006]为实现上述目的，本发明提供如下技术方案:
一种从乌鸡中提取活性肽的方法，包括以下步骤:
(O原材料的处理:把乌鸡宰杀后去毛，去内脏，去鸡头鸡爪，洗净，然后用绞肉机打成肉浆；
(2)水解:将上述肉浆放入高压锅内，向高压锅内加入肉浆质量的2.5倍的水，利用高压锅将其加压至0.2-0.3MPa并维持30_60min，得到水解后的溶液；
(3)粉碎:将水解后得到的溶液，用超微粉碎设备于25°C进行处理，处理压力为5-20MPa，处理时间为5-15min，得到膏状浆液；
(4)发酵:将步骤(3)得到的膏状浆液经过超高温瞬时灭菌，然后调整pH值为6.5-7.0，按体积百分比为0.3-0.5%接入乳酸菌液体菌种，放入发酵罐中发酵，发酵温度在42°C，发酵时间3-4h ；
(5)酶解:将步骤(4)得到的发酵液经过超高温瞬时灭菌，过滤，收集滤液，往滤液中加入0.2-0.3%重量份的蛋白酶，55-58°C酶解反应30_60min ；
(6)灭酶:将酶解后的溶液加热至75-80°C，保温5-20min，得到灭酶后的溶液； (7)浓缩:将步骤(6)得到的灭酶后的溶液投入硅藻土和/或活性炭中静置，过滤，收集滤液，将滤液减压浓缩成相对密度为1.18-1.20的浸膏；
(8)干燥、包装:将浸膏进行喷雾干燥，包装后即得成品。
[0007]作为本发明进一步的方案:所述步骤(5)中，蛋白酶采用的是等质量比的复合蛋白酶和胰蛋白酶。
[0008]作为本发明进一步的方案:所述步骤(7)中，浸膏中活性肽的质量百分含量为20-25%。
[0009]作为本发明进一步的方案:所述步骤(8)中，喷雾干燥的设定进风温度范围为150-155°C，设定出风温度范围为85-90°C。
[0010]与现有技术相比，本发明的有益效果是:
1、本发明利用超微粉碎技术处理乌鸡的水解液，改变了物料的分子结构，使其分散、细化，得到的溶液颗粒粒径分布均匀，具有操作简单、无污染、可在线清洁消毒、可高效率进行细胞破壁等诸多优点。
[0011]2、本发明通过少量乳酸菌来处理水解液，可以促进蛋白质、单糖的分解以及促进钙、镁等营养物质的吸收，产生维生素B族等大量有益物质，还可以增加肠道有益菌群，改善人体胃肠道功能，恢复人体肠道内菌群平衡，形成抗菌生物屏障，抑制胆固醇吸收，降血月旨、降血压作用，免疫调节作用，增强人体免疫力和抵抗力等作用。
[0012]3、本发明对乌鸡进行酶解提取而成分子量在1000道尔顿以下的小分子肽类物质，具有极高的消化吸收性和利用率。它可以不经胃肠消化而直接被人体吸收，有效解决了大分子蛋白如何被人体有效吸收和利用的问题。
[0013]本发明的提纯率和分离度更高，现有技术采用酸性蛋白酶酶解，活性肽的提取率为9-14%，而本发明的提取率为20%以上，且小分子肽比例在95%以上。本发明制备出的活性肽无需搅拌即可迅速溶于水，服用该活性肽可以提高生理机能、延缓衰老、强筋健骨。对防治骨质疏松、佝偻病、妇女缺铁性贫血症等有明显功效。合理补充乌鸡活性肽，能使人体内保持营养的充足，供给身体各组织器官正常运转，维持形态，使机体保持健康和活力。
【具体实施方式】
[0014]下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0015]实施例1
本发明实施例中，一种从乌鸡中提取活性肽的方法，包括以下步骤:
(O原材料的处理:把乌鸡宰杀后去毛，去内脏，去鸡头鸡爪，洗净，然后用绞肉机打成肉浆；
(2)水解:将上述肉浆放入高压锅内，向高压锅内加入肉浆质量的2.5倍的水，利用高压锅将其加压至0.25MPa并维持50min，得到水解后的溶液；
(3)粉碎:将水解后得到的溶液，用超微粉碎设备于25°C进行处理，处理压力为lOMPa，处理时间为lOmin，得到膏状浆液； (4)发酵:将步骤(3)得到的膏状浆液经过超高温瞬时灭菌，然后调整pH值为6.5-7.0，按体积百分比为0.4%接入乳酸菌液体菌种，放入发酵罐中发酵，发酵温度在42°C，发酵时间 3.5h ；
(5)酶解:将步骤(4)得到的发酵液经过超高温瞬时灭菌，过滤，收集滤液，往滤液中加入0.25%重量份的等质量比的复合蛋白酶和胰蛋白酶，56°C酶解反应40min ;
(6)灭酶:将酶解后的溶液加热至78°C，保温lOmin，得到灭酶后的溶液；
(7)浓缩:将步骤(6)得到的灭酶后的溶液投入硅藻土和/或活性炭中静置，过滤，收集滤液，将滤液减压浓缩成相对密度为1.20的浸膏；
(8)干燥、包装:将浸膏进行喷雾干燥，喷雾干燥的设定进风温度范围为150°C，设定出风温度范围为85°C，包装后即得成品。
[0016]取步骤(7)中过滤所得滤液样品，采用甲醛测定法测定样品的水解度，结果为25.0%。
[0017]实施例2
本发明实施例中，一种从乌鸡中提取活性肽的方法，包括以下步骤:
(O原材料的处理:把乌鸡宰杀后去毛，去内脏，去鸡头鸡爪，洗净，然后用绞肉机打成肉浆；
(2)水解:将上述肉浆放入高压锅内，向高压锅内加入肉浆质量的2.5倍的水，利用高压锅将其加压至0.2MPa并维持60min，得到水解后的溶液；
(3)粉碎:将水解后得到的溶液，用超微粉碎设备于25°C进行处理，处理压力为20MPa，处理时间为5min，得到膏状浆液；
(4)发酵:将步骤(3)得到的膏状浆液经过超高温瞬时灭菌，然后调整pH值为6.5-7.0，按体积百分比为0.5%接入乳酸菌液体菌种，放入发酵罐中发酵，发酵温度在