废弃白菜叶青贮饲料的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种废弃白菜叶青贮饲料的制备方法，以解决废弃白菜叶直接饲喂畜禽采食量少、吸收率低及硝酸盐中毒等问题。该方法包括如下步骤：A、废弃白菜叶预处理：挑选无腐烂变质的废弃白菜叶进行清洗，切割后干燥；B、废弃白菜叶青贮发酵：将乳酸菌发酵菌液按重量比为0.1%—1%的量，均匀喷洒至预处理后的废弃白菜叶中，密封,在15℃—30℃温度下，发酵5—30天后即得废弃白菜叶青贮饲料。本发明有效提高了原废弃白菜叶的营养价值、可消化率及适口性，延长了保存期。可有效解决废弃白菜叶被浪费和污染环境等问题，废弃白菜叶青贮饲料生产方法简便易行，经济适用，便于工业化生产。
【专利说明】
废弃白菜叶青贮饲料的制备方法
技术领域
[0001 ]本发明属于饲料领域，具体涉及一种废弃白菜叶青贮饲料的制备方法。
【背景技术】
[0002]蔬菜产业的迅速发展，对改善人民生活、增加农民收入、扩大就业、发展区域经济发挥了重要作用。但随着蔬菜产业的快速推进，净菜上市、蔬菜商品化处理的不断增加，蔬菜收获、净菜加工和商品化处理与销售环节，产生大量的蔬菜废弃物。由于蔬菜布局的集中性及蔬菜产品具有较强的季节性，收获和上市期短而集中，大部分蔬菜废弃物未被合理处理利用，而是当作垃圾随意堆放或者简单填埋，使蔬菜废弃物不仅被白白浪费，而且造成了环境污染，给蔬菜产区的农业生产、农民生活、农村生态带来了极大的负面影响。废弃白菜叶多为白菜外包叶，白菜外包叶含有丰富的粗纤维、维生素及一些微量元素等，但是因其含水量高，可消化性差等原因，直接饲喂不易被动物高效吸收利用。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是提供一种废弃白菜叶青贮饲料的制备方法，以解决废弃白菜叶直接饲喂畜禽采食量少、吸收率低及硝酸盐中毒等问题。
[0004]本发明技术方案如下:一种废弃白菜叶青贮饲料的制备方法，包括如下步骤:
A、废弃白菜叶预处理:挑选无腐烂变质的废弃白菜叶进行清洗，切割后干燥；
B、废弃白菜叶青贮发酵:将乳酸菌发酵菌液按重量比为0.1%— 1%的量，均匀喷洒至预处理后的废弃白菜叶中，密封，在15°C—30°C温度下，发酵5—30天后即得废弃白菜叶青贮饲料。
[0005]作为本发明的进一步改进，步骤A中废弃白菜叶切割成长Icm—15cm，宽Icm—3cm小段。
[0006]作为本发明的进一步改进，步骤A中废弃白菜叶干燥至水分含量在重量比55%—70%之间。
[0007 ]作为本发明的进一步改进，所述乳酸菌发酵菌液组成为发酵乳杆菌{Lactobacillus /erffiao?ω?)和植物乳杆菌(Zac1/?ajCL/a/3tar?)发酵液混合而成，发酵乳杆菌活菌数与植物乳杆菌活菌数的比例为1:1一5，乳酸菌发酵菌液总活菌数大于IX 109CFU/mL，pH 值小于 4.0。
[0008]作为本发明的进一步改进，所述发酵乳杆菌和植物乳杆菌发酵液采用下列方法分别培养:
(1)菌种活化试管培养
按体积百分比为2% — 5%的接种量接种于培养基中，试管培养，在30°C — 42°C的温度下培养20h—36h后，终止培养;连续活化得液体培养物；
(2)三角瓶一级菌种培养
取液体培养物，按体积百分比为2%—5%的接种量，接入三角瓶进行一级菌种液体培养，在30 °C —42 °C的温度下培养20h—36h后，终止培养；
(3)种子罐二级菌种培养
取三角瓶一级菌种液体培养物，按体积百分比为2%—5%的接种量，接入种子罐进行二级菌种液体培养，在30°C — 42°C的温度下培养20h—36h后，终止培养；
(4)发酵罐培养
将经种子罐二级菌种培养的液体培养物，按体积百分比为2%—5%的接种量，接入发酵罐，在30 °C —42 °C的温度下培养。
[0009]作为本发明的进一步改进，所述步骤(I)中培养基由下述重量份的原料组成，蛋白胨3—15份，牛肉膏I —10份，胰蛋白胨3—10份，酵母浸出粉I—10份，葡萄糖5—20份，磷酸氢二钾0.5一5份，乙酸钠0.5一5份，梓檬酸氢二钱0.5一5份，七水硫酸锌0.1一0.5份，七水硫酸镁0.1 —0.5份，吐温-801 —5份和水1000份;培养基的pH值为6.0—7.5，于0.05Mpa—0.14Mpa湿热灭菌15min—30min后备用。
[0010]作为本发明的进一步改进，所述步骤(I)菌种活化试管培养中，在菌种活化前，在无菌室将甘油法保藏的菌株在室温下放置0.5h—lh。
[0011]作为本发明的进一步改进，所述步骤(I)在活化次数为2次。
[0012]作为本发明的进一步改进，所述步骤(4)发酵罐培养中当发酵液pH低于5.5时，用NaOH溶液调节发酵液pH至6.0—6.5之间，培养20h—36h后停止培养。
[0013]作为本发明的进一步改进，最终产品含水分重量百分比为45%—65%。
[0014]乳酸菌在农业生产废弃物生物质资源的再利用上具有重要作用，由于乳酸菌的生长繁殖和多种代谢产物的生成，可使发酵饲料中大量的维生素和蛋白质保存下来，减少营养物质的损失，还可使饲料变得柔软多汁、香酸适口且易于消化，同时乳酸菌通过产生乳酸等有机酸，迅速降低环境pH，产生细菌素等抗菌活性物质有效抑制了病原菌的生长繁殖，使发酵饲料在较长时间内保持新鲜。在畜禽养殖领域，与抗生素的防病抗病相比，使用乳酸菌发酵的饲料或在常规饲料中适量添加乳酸菌及其发酵产物，在提高机体免疫力方面具有突出的优势，可有效保证畜禽健康、畜禽产品和养殖生态环境的安全。青贮饲料是青绿或半干原料，在厌氧条件下靠乳酸菌发酵，制成的能够长期保存其营养价值与饲用特性的饲料。这种饲料能有效保存青绿植物的营养成分，保证原料青绿时的鲜嫩汁液，质地柔软、适口性好、米食量大、消化利用率尚。
[0015]本发明中两种菌种分别经乳酸菌液体菌种活化培养、液体一级种子培养、液体二级种子培养、发酵罐培养后，发酵乳杆菌培养液与植物乳杆菌培养液按比例混合，喷洒接种于预处理后废弃白菜叶中，经过青贮发酵得到废弃白菜叶饲料成品。
[0016]本发明利用畜禽可食用废弃白菜叶进行青贮饲料生产，废弃白菜叶经发酵乳杆菌、植物乳杆菌乳酸菌发酵菌液青贮发酵，乳酸菌发酵菌液中含有大量乳酸菌，使废弃白菜叶快速建立乳酸菌厌氧发酵，可产生大量乳酸软化白菜叶改善适口性，发酵后的青贮饲料带有酸香味，刺激畜禽食欲，增加采食量，乳酸可以刺激消化液分泌，促进胃肠蠕动，减缓胃肠排空速度，使营养物质有更充分的消化时间，提高消化吸收率。提高了废弃白菜叶的营养价值、可消化率及适口性。同时青贮发酵产生的乳酸可降低PH值，抑制各种腐败菌生长，延长饲料的保质期。发酵后饲料中含有乳酸菌益生菌，喂养畜禽，可改善畜禽体内微生态环境，抑制畜禽体内致病菌的生长，提高畜禽的体质和抗病能力。废弃白菜叶青贮饲料经发酵乳杆菌与植物乳杆菌发酵，乳酸菌活菌含量较高，在贮存、运输和销售时可在较长时间内活性不减弱，产品保存期较长，每批产品质量稳定。废弃白菜叶青贮饲料的制备方法简便，便于工业化生产。
[0017]本发明的废弃白菜叶青贮饲料，在常温下保藏180天，乳酸杆菌总活菌数大于106CFU/go
[0018]本发明有效提高了原废弃白菜叶的营养价值、可消化率及适口性，延长了保存期。解决废弃白菜叶被浪费和污染环境等问题，废弃白菜叶青贮饲料生产方法简便易行，经济适用，便于工业化生产。
【具体实施方式】
[0019]以下实施例用于说明本发明，可以使本领域专业技术人员更全面地理解本发明，不用来限值本发明的范围。
[0020]实施例中菌种购买于中国普通微生物菌种保藏管理中心，发酵乳杆菌{Lactobacillus fermen turn)，CGMCC 编号 1.1880。植物乳杆菌
plan tarum)，CGMCC编号 I.557。
[0021 ]实施例1-植物乳杆菌和发酵乳杆菌的培养。
[0022](I)乳酸菌发酵菌液制备 A、菌种活化试管培养
培养基组成为:蛋白胨15g，牛肉膏10g，胰蛋白胨3g，酵母浸出粉lg，葡萄糖20g，磷酸氢二钾5g，乙酸钠0.5g份，梓檬酸氢二钱0.5g份，七水硫酸锌0.1g份，七水硫酸镁0.1g,吐温-805g和水I OOOg。将培养基pH调至7.5,0.05Mpa湿热灭菌30min后备用。
[0023]在菌种活化前，将4°C保存的甘油法保藏的乳杆菌冻存管在室温下放置0.5h，用无菌吸管吸取0.5mL的保藏液，按体积百分比为5%的接种量接种于培养基中，试管培养，在30°C培养36h后，终止培养。以相同接种量、培养条件再连续活化2次，获得3代液体培养物。
[0024]B、三角瓶一级菌种培养
将第3代培养物按体积百分比为5%的接种量接入三角瓶进行一级菌种培养，在30°C培养36h后，终止培养。
[0025]C、种子罐二级菌种培养
取三角瓶一级菌种液体培养物，按按体积百分比为5 %的接种量，接入种子罐进行二级菌种培养，在30 °C培养36h后，终止培养。
[0026]D、发酵罐培养
发酵罐培养按体积百分比为5 %的接种量，接入种子罐二级菌种液体培养物，在30°C条件下培养，当PH低于5.5时用NaOH溶液调节发酵液pH至6.5，36h后停止培养。
[0027]实施例2-植物乳杆菌和发酵乳杆菌的培养。
[0028](I)乳酸菌发酵菌液制备 I)菌种活化试管培养
培养基组成为，蛋白胨3g，牛肉膏lg，胰蛋白胨10g，酵母浸出粉10g，葡萄糖10g，磷酸氢二钾0.5g，乙酸钠5g份，柠檬酸氢二铵5g份，七水硫酸锌0.1g份，七水硫酸镁0.5g，，吐温-801g和水100g。将培养基pH调至6.0，0.14Mpa湿热灭菌15min后备用。
[0029]在菌种活化前，将(TC保存的甘油法保藏的乳杆菌冻存管在室温下放置lh，用无菌吸管吸取0.2mL的保藏液，按体积百分比为2%的接种量接种于培养基中，试管培养，在42°C培养20h后，终止培养。以相同接种量、培养条件再连续活化2次，获得3代液体培养物。
[0030]2)三角瓶一级菌种培养
将第3代培养物按体积百分比为2%的接种量接入三角瓶进行一级菌种培养，在42°C培养20h后，终止培养。
[0031]3)种子罐二级菌种培养
取三角瓶一级菌种液体培养物，按体积百分比为2%的接种量，接入种子罐进行二级菌种培养，在42 0C培养20h后，终止培养。
[0032]4)发酵罐培养
发酵罐培养按体积百分比为2 %的接种量，接入种子罐二级菌种液体培养物，在42°C条件下培养，当PH低于5.5时用NaOH溶液调节发酵液pH至6.5，20h后停止培养。乳杆菌培养液收集备用。
[0033]实施例3-植物乳杆菌和发酵乳杆菌的培养。
[0034](I)乳酸菌发酵菌液制备 I)菌种活化试管培养
培养基组成为，蛋白胨5g，牛肉膏5g，胰蛋白胨5g，酵母浸出粉5g，葡萄糖5g，磷酸氢二钾5g，乙酸钠3g份，柠檬酸氢二铵3g份，七水硫酸锌0.5g份，七水硫酸镁0.3g，，吐温-803g和水I OOOg。将培养基pH调至7.0,0.10]\^?湿热灭菌20111；[11后备用。
[0035]在菌种活化前，将4°C保存的甘油法保藏的乳杆菌冻存管在室温下放置0.5h，用无菌吸管吸取0.3mL的保藏液，按体积百分比为3%的接种量接种于培养基中，试管培养，在37°C培养24h后，终止培养。以相同接种量、培养条件再连续活化2次，获得3代液体培养物。
[0036]2)三角瓶一级菌种培养
将第3代培养物按体积百分比为3%的接种量接入三角瓶进行一级菌种培养，在37°C培养24h后，终止培养。
[0037]3)种子罐二级菌种培养
取三角瓶一级菌种液体培养物，按体积百分比为3%的接种量，接入种子罐进行二级菌种培养，在37 °C培养24h后，终止培养。
[0038]4)发酵罐培养
发酵罐培养按体积百分比为3%的接种量，接入种子罐二级菌种液体培养物，在37 V条件下培养，当PH低于5.5时用NaOH溶液调节发酵液pH至6.0，24h后停止培养。乳杆菌培养液收集备用。
[0039]实施例4-饲料制备
废弃白菜叶预处理:挑选无腐烂变质适合畜禽食用的白菜叶。进行清洗，冲洗去多余的泥土及杂质。将清洗后的的废弃白菜叶，切割成长15cm，宽3cm的小段。通过自然干燥使废弃白菜叶水分含量控制在重量比70%。
[0040]废弃白菜叶青贮发酵:将实施例1分别发酵好的植物乳杆菌、发酵乳杆菌，按植物乳杆菌发酵液活菌数:发酵乳杆菌发酵液活菌数=5:1比列混合，乳酸菌发酵菌液总活菌数为1.2X109CFU/mL，乳酸菌发酵菌液按重量比为0.1%的量，均匀喷洒至预处理后的废弃白菜叶中，装入青贮池，压实、密封，在15°C温度下发酵30天后即得废弃白菜叶青贮饲料。
[0041 ] 实施例5-饲料制备废弃白菜叶预处理:
挑选无腐烂变质适合畜禽食用的白菜叶。进行清洗，洗去多余的泥土及杂质。将清洗后的的废弃白菜叶，切割成长Icm，宽Icm的大段。通过加热干燥使废弃白菜叶水分含量控制在重量比55%。
[0042]废弃白菜叶青贮发酵:将将实施例2分别发酵好的植物乳杆菌、发酵乳杆菌，按发酵乳杆菌发酵液活菌数:植物乳杆菌发酵液按活菌数=1: I比列混合，乳酸菌发酵菌液总活菌数为1.1 X 109CFU/mL，乳酸菌发酵菌液按重量比为1%的量，均匀喷洒至预处理后的废弃白菜叶中，装入单向排气阀青贮袋装袋后压实、密封，在30°C温度下发酵5天后即得废弃白菜叶青贮饲料。本实施例效果最佳。
[0043]实施例6-饲料制备
废弃白菜叶预处理:挑选无腐烂变质适合畜禽食用的白菜叶。进行清洗，洗去多余的泥土及杂质。将清洗后的的废弃白菜叶，切割成长5cm，宽2cm的小段。通过自然干燥使废弃白菜叶水分含量控制在重量比65%。
[0044]废弃白菜叶青贮发酵:将将实施例3分别发酵好的植物乳杆菌、发酵乳杆菌，按发酵乳杆菌发酵液活菌数:植物乳杆菌发酵液按活菌数=1:3比列混合，乳酸菌发酵菌液总活菌数为1.0 X 109CFU/mL，乳酸菌发酵菌液按重量比为0.5%的量均匀喷洒至预处理后的废弃白菜叶中，装入单向排气阀青贮袋，装袋后压实、密封，，在25°C温度下发酵7天后即得废弃白菜叶青IC饲料。
【主权项】
1.一种废弃白菜叶青IC饲料的制备方法，其特征在于它包括如下步骤: A、废弃白菜叶预处理:挑选无腐烂变质的废弃白菜叶进行清洗，切割后干燥； B、废弃白菜叶青贮发酵:将乳酸菌发酵菌液按重量比为0.1%— 1%的量，均匀喷洒至预处理后的废弃白菜叶中，密封，在15°C—30°C温度下，发酵5—30天后即得废弃白菜叶青贮饲料。2.根据权利要求1所述的废弃白菜叶青IC饲料的制备方法，其特征在于:步骤A中废弃白菜叶切割成长Icm—15cm，宽Icm—3cm小段。3.根据权利要求1或2所述的废弃白菜叶青IC饲料的制备方法，其特征在于:步骤A中废弃白菜叶干燥至水分含量在重量比55%—70%之间。4.根据权利要求3所述的废弃白菜叶青贮饲料的制备方法，其特征在于:所述乳酸菌发酵菌液组成为发酵乳杆菌fermen 和植物乳杆菌(Zac1/?a 发酵液混合而成，发酵乳杆菌活菌数与植物乳杆菌活菌数的比例为1:1一5，乳酸菌发酵菌液总活菌数大于I X 109CFU/mL，pH值小于4.0。5.发酵乳杆菌和植物乳杆菌发酵液米用下列方法分别培养: (1)菌种活化试管培养 按体积百分比为2% — 5%的接种量接种于培养基中，试管培养，在30°C — 42°C的温度下培养20h—36h后，终止培养;连续活化得液体培养物； (2)三角瓶一级菌种培养 取液体培养物，按体积百分比为2%—5%的接种量，接入三角瓶进行一级菌种液体培养，在30 °C —42 °C的温度下培养20h—36h后，终止培养； (3)种子罐二级菌种培养 取三角瓶一级菌种液体培养物，按体积百分比为2 % —5 %的接种量，接入种子罐进行二级菌种液体培养，在30°C — 42°C的温度下培养20h—36h后，终止培养； (4)发酵罐培养 将经种子罐二级菌种培养的液体培养物，按体积百分比为2% —5%的接种量，接入发酵罐，在30 °C —42 °C的温度下培养。6.根据权利要求5所述的废弃白菜叶青贮饲料的制备方法，其特征在于:所述步骤(I)中培养基由下述重量份的原料组成，蛋白胨3—15份，牛肉膏I—10份，胰蛋白胨3—10份，酵母浸出粉I一10份，葡萄糖5—20份，磷酸氢二钾0.5—5份，乙酸钠0.5—5份，柠檬酸氢二铵0.5—5份，七水硫酸锌0.1—0.5份，七水硫酸镁0.1—0.5份，吐温-801—5份和水1000份;培养基的pH值为6.0一7.5，于0.05Mpa一0.14Mpa湿热灭菌15min—30min后备用。7.根据权利要求6所述的废弃白菜叶青贮饲料的制备方法，其特征在于:所述步骤(I)菌种活化试管培养中，在菌种活化前，在无菌室将甘油法保藏的菌株在室温下放置0.5h—Ih08.根据权利要求7所述废弃白菜叶青贮饲料的制备方法，其特征在于:所述步骤(I)在活化次数为2次。9.根据权利要求8所述废弃白菜叶青贮饲料的制备方法，其特征在于:所述步骤(4)发酵罐培养中当发酵液pH低于5.5时，用NaOH溶液调节发酵液pH至6.0—6.5之间，培养20h—36h后停止培养。10.根据权利要求1所述废弃白菜叶青IC饲料的制备方法，其特征在于:生产的饲料最终产品含水分重量百分比为45%—65%。
【文档编号】A23K10/12GK106036033SQ201610476507
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年6月27日
【发明人】邵建宁, 彭章普, 刘彩云, 麻和平, 张文齐, 赵昊星
【申请人】甘肃省科学院生物研究所