作为NF-κB抑制剂的富马酸衍生物的制作方法

专利名称：作为NF-κB抑制剂的富马酸衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种或多种富马酸衍生物作为NF-кB(NF-kappaB)抑制剂的应用。同时，本发明还涉及所述富马酸衍生物在制备用于治疗受NF-кB影响的疾病的药物中的应用。
背景技术：
众所周知，诸如富马酸的药物制剂在给药后发生生物降解时进入柠檬酸循环或者其一部分得到增强的治疗显著性，特别是在以高剂量给药时，这是因为它们缓解或者治愈隐原性病因导致的疾病。另外，富马酸在小鼠中可抑制Ehrlich腹水瘤的生长，降低丝裂霉素C和黄曲霉素的毒性作用，而且具有抗牛皮癣和抗菌活性。
最重要的临床应用是用各种富马酸衍生物治疗牛皮癣，这已经在许多专利中有描述，例如EP 0 188 479、DE 25 30 372、DE 26 21 214或者EP 0 312 697。
DE 197 21 099.6和DE 198 53 487.6公开了某些富马酸衍生物如富马酸单烷基酯的其他应用。根据上述文献，这些特定的富马酸衍生物可用于治疗自身免疫疾病如多关节炎、多发性硬化以及移植物抗宿主反应。另外，DE 198 53 487.6和DE 198 39 566.3教导了富马酸单烷基酯和富马酸二烷基酯在移植药物中的应用。虽然已经对富马酸衍生物在治疗牛皮癣中的作用肌理进行了个体研究，但是在此方面仍没有具体的信息。
NF-кB(核因子кB)是真核细胞的转录因子。NF-кB属于Rel蛋白家族，是具有所谓Rel域特征的转录因子。Rel域是根据在作为癌基因的禽病毒中发现的第一个成员命名的。该同源性Rel域(RHD)是由300个氨基酸组成的，其特异性位点负责DNA连接在кB位点上，与Rel家族的其他蛋白发生二聚合以及与I-кB相互作用。
目前，在哺乳动物中已知Rel家族有5个成员，它们是c-Rel、NF-кBl(p105/p50)、NF-кB2(p100/p52)和RelB。理论上，Rel蛋白家族中的这5个成员可结合成任意形式的均二聚体和杂二聚体，尽管在体内仅观察到几种具体的结合。经典而且最具特征的NF-кB分子是p50/65亚单位NF-кB1/RelA的杂二聚体。该杂二聚体是最常见的复合物，而且实际上在所有的细胞类型中都已发现。
在细胞活化以及I-кB的离解后，NF-кB杂二聚体p50/p65迁移至细胞核中，而且在此结合共有序列5′-GGGRNNYYCC-3′。在此过程中，p50亚单位主要起到DNA结合亚单位的作用，而p65亚单位则提供反式激活功能。
这些不同结合的结果是，每一种杂二聚体都具有独特的特征，如细胞类型特异性、对于DNA结合的优先性、与I-кB同种型的差别相互作用、差别活化需要以及活化作用的动力学。
NF-кB的快速诱导性是因为该因子是以失活的形式存在于胞浆中，即、与NF-кB抑制剂I-кB结合的复合物。因此，在活化时不需要新的蛋白合成，而仅仅是该与I-кB之复合物的溶解或者该抑制剂的降解以及新的活性NF-кB二聚体随后转移至核中。
NF-кB可被多种不同的生理和非生理刺激活化。这些刺激包括细胞因子、促分裂原、病毒、病毒产物、抗原受体在T淋巴细胞和B淋巴细胞上的交联、钙离子载体、佛波醇酯、UV射线、氧化压力、磷酸酯酶抑制剂等。许多受NF-кB调节或活化的基因的范围很广泛，以至于这些基因的转录可通过该杂二聚体与上述共有序列的结合而被活化、诱导或者增强。特别地，TNF-α、IL-1、IL-2和脂多糖是重要的刺激物。
这些受调节的基因通常包括免疫功能、炎症应答、细胞粘着、细胞生长、以及细胞死亡中涉及的基因，具体而言包括细胞粘着分子的基因、细胞因子、细胞因子受体、急性期蛋白、生长因子以及病毒基因。NF-кB诱导的基因中特别是干扰素β的基因、免疫球蛋白的轻链的基因、T细胞受体的基因、TNF-α和TNF-β的基因、以及组织因子(CD142)的基因，以前称为组织羌螨丝束蛋白(tromboplastin)或者因子III。
由于其在免疫反应和炎症应答调节中的中心作用以及参与组织因子、细胞因子等的调节作用，可假设转录因子NF-кB的选择性抑制剂具有与已知抗炎药类似的优点。甾体抗炎药、干扰素或环孢菌素可作为例子。

发明内容
令人惊奇地发现单个富马酸衍生物或者它们的混合物具有NF-кB抑制作用。该作用优选用于制备单独包含这些富马酸衍生物或者它们的混合物的药物组合物，该药物组合物可用于治疗受NF-кB介导或者影响的疾病。具体而言，受NF-кB影响的疾病是渐进性全身性硬皮病、梅毒性骨软骨病(Wegener病)、大理石色皮(livedo reticularis)、Behcet病、全身动脉炎、溃疡性结肠炎、脉管炎、骨关节炎、痛风、动脉硬化、Reiter病、肺肉芽肿、多种类型的脑炎、内毒素性休克(脓毒性休克)、脓毒症、肺炎、脑脊髓炎、神经性厌食症、肝炎(急性肝炎、慢性肝炎、中毒性肝炎、酒精诱发的肝炎、病毒性肝炎、黄胆、肝功能不足、以及巨细胞病毒性肝炎)、Rennert T淋巴瘤病、肾小球肾炎、血管成形术后再狭窄、再灌注综合症、巨细胞病毒性视网膜病、腺病毒性疾病(例如腺病毒性感冒、腺病毒性咽结膜热和腺病毒性眼炎)、AIDS、Guillain-Barre综合症、疱疹后或者带状疱疹后神经痛、炎性多神经根神经瘤、多脑神经病、胰管粘稠物阻塞症、Bechterew病、Barett食管、EBV(Epstein-Barr病毒)感染、心脏重新再造、间质性膀胱炎、II型糖尿病、人肿瘤放射致敏、恶性细胞对化学治疗剂的多重耐药性(化疗中的多药物耐药性)、环形肉芽肿以及癌症(如乳腺癌、结肠癌、黑色素瘤、原发性肝细胞癌、腺癌、卡波济肉瘤、前列腺癌、白血病如急性髓细胞白血病、多发性骨髓瘤(浆细胞瘤)、Burkitt淋巴瘤和Castleman肿瘤)。
具体实施例方式
根据本发明，选自于以下组中的一种或多种富马酸衍生物优选用于NF-кB抑制以及制备药物组合物富马酸二烷基酯和游离酸或盐形式的富马酸单烷基酯以及它们的混合物。
富马酸二烷基酯优选符合以下结构式 其中R1和R2可以相同或不相同，分别代表直链、支链、环状、饱和或不饱和的C1-24烷基或C5-20芳基，而且这些基团可以任选地被卤素(F、Cl、Br、I)、羟基、C1-4烷氧基、硝基或氰基取代。
基团R1和R2优选为甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、环戊基、2-乙基己基、己基、环己基、庚基、环庚基、辛基、乙烯基、烯丙基、2-羟基乙基、2-或3-羟基丙基、2，3-二羟基丙基、2-甲氧基乙基、甲氧基甲基或者2-或3-甲氧基丙基。
富马酸单烷基酯优选对应于以下结构式
其中R1为以上定义的基团；A为氢离子或者碱金属或碱土金属阳离子或者生理可接受的过渡金属阳离子，优选选自Li+、Na+、K+、Mg2+、Ca2+、Zn2+、Fe2+、和Mn2+，n为1或2并相应于A的价数。
优选地，本发明所采用的一种或多种富马酸衍生物选自于以下组中富马酸二甲酯、富马酸二乙酯、富马酸甲基乙基酯、富马酸甲基氢酯、富马酸乙基氢酯、富马酸甲酯镁盐、富马酸乙酯镁盐、富马酸甲酯锌盐、富马酸乙酯锌盐、富马酸甲酯铁盐、富马酸乙酯铁盐、富马酸甲酯钙盐和/或富马酸乙酯钙盐。
优选地，本发明富马酸衍生物在药物组合物之剂量单元中的用量为，一种或多种富马酸衍生物的量相当于或者等于1至500mg、优选10至300mg、最优选10至200mg的富马酸。
药物组合物为口服给药、非肠道给药、直肠给药、经皮给药、皮肤给药、鼻腔给药、经肺(吸入)给药或经眼给药的剂型，优选为口服给药的剂型。
就口服给药而言，本发明的药物组合物的形式为单元剂量的片剂，微片剂、微丸剂或颗粒剂，胶囊剂或供饮用的溶液，所述微片剂、微丸剂或颗粒剂可任选包胶或者填充在胶囊或袋中。在优选的实施方案中，固体制剂或其它制剂包敷有肠溶包衣。这种包衣也可以用于胶囊或内部充填的制剂中。
在通过注射(i.v.，i.m.，s.c.，i.p.)进行非胃肠道给药时，本发明的药物组合物为合适的剂型。可使用任何适用于注射的常规液体载体。
本发明药物组合物优选可单独或者以混合物的形式包含10至500mg的富马酸二烷基酯，特别是富马酸二甲酯和/或富马酸二乙酯；10至500mg的富马酸烷基酯钙盐，特别是富马酸甲酯钙盐和/或富马酸乙酯钙盐；0至250mg的富马酸烷基酯锌盐，特别是富马酸甲酯锌盐和/或富马酸乙酯锌盐；0至250mg的富马酸烷基氢酯，特别是富马酸甲基氢酯和/或富马酸乙基氢酯；以及0至250mg的富马酸烷基酯镁盐，特别是富马酸甲酯镁盐和/或富马酸乙酯镁盐；总量相当于10-500mg、优选10-300mg、最优选100mg的富马酸。
本发明的优选组合物仅包含富马酸二甲酯，其用量为10至300mg。
根据特别优选的实施方案，本发明的组合物为微片剂或微丸剂的形式。丸剂的尺寸或者平均直径优选为小于等于5000μm，更优选为300-2500μm，特别是300-1000μm；而微片剂则为1000-2500μm。通过给药本发明优选的微片剂形式的富马酸衍生物，可进一步减少在给药常规的单剂量单元的片剂时不能避免的胃肠道刺激或者副作用。这有可能是因为以下原因微片剂、优选具有肠溶包衣的微片剂已分散在胃中，并因此分批地到达肠道中，在此活性成分以局部较小剂量释放，但总的剂量仍是相同的。这也有助于避免对肠上皮细胞的刺激作用，与常规片剂相比提高了微片剂的胃肠道耐受性。
例如，富马酸衍生物可以依据EP 0 312 679中公开的方法制备。
原则上，本发明之片剂或者微片剂形式的口服药物组合物可通过典型的压片法制造。取代此等典型的压片法，也可使用其他的片剂制造方法，例如直接压片以及根据熔融法或者喷雾干燥法制备固体分散体的方法。
片剂可具有肠溶包衣。该肠溶包衣可在典型的包衣锅中包敷或者喷涂上。包衣也可用Boegel包衣设备进行包敷。另外，片剂可具有薄膜包衣。
为说明本发明的用途，以下列出了多个制备优选药物的实施例。这些实施例仅是用于说明，绝不是对本发明范围的限制。
实施例1含有肠溶包衣的薄膜衣片的制备，其中含有100.0mg的富马酸单甲酯钙盐，相当于78mg的富马酸采取必要的防护措施(口罩、手套、防护衣等)，将10kg的富马酸单甲酯钙盐粉碎，强烈混合并过800目筛混匀。然后制备以下组成的辅料混合物21kg的淀粉衍生物(STA-RX 1500)、2kg的微晶纤维素(Avicel PH 101)、0.6kg的聚乙烯吡咯烷酮(PVP，Kollidon25)、4kg的Primogel、0.3kg的胶体硅酸(Aerosil)。
将活性成份加到上述整个粉末混合物中，混合，过200目筛混合均匀，按常规方法采用2％聚乙烯吡咯烷酮(PVP，Kollidon25)水溶液制粒，然后在干燥状态下与外层相混合。后者由2kg所谓的FST复合物组成，其中含有80％的滑石粉、10％的胶体硅酸和10％的硬脂酸镁。
此后，用常规方法将混合物压制成圆片，片重400mg，片径10.0mm。除常规压片方法外，其它方法如直接压片或根据熔融法和喷雾干燥法进行的固体分散也可用于制片。
肠溶包衣制备含有2.250kg的羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯(HPMCP，Pharmacoat HP50)的溶液，其中溶剂为2.50L的去离子水、13L的丙酮(Ph.Helv.VII)、以及13L的乙醇(浓度为94重量％)，然后加入0.240kg的蓖麻油(Ph.Eur.II)。按常规方法在包衣锅中将溶液分份倒入或喷到素片上或采用适当结构的流化床。
干燥后进行薄膜包衣。所述包衣由一种溶液构成，其中含有4.8kg的Eudragit E 12.5％、0.34kg的滑石粉Ph.Eur.II、0.52kg的氧化钛(VI)Cronus RN 56、0.21kg的蓝颜料ZLT-2(Siegle)、以及0.12kg的聚乙二醇6000 Ph.Helv.VII，而溶剂包括8.2kg的异丙醇Ph.Helv.VII、0.06kg的甘油三乙酸酯(Triacetin)和0.2kg的去离子水。在包衣锅或流化床中均匀分布后，按常规方法对混合物进行干燥和抛光。
实施例2含有肠溶包衣的胶囊的制备，其中含有86.5mg富马酸单乙酯钙盐和110.0mg富马酸二甲酯，共相当于150mg富马酸采取必要的防护措施(口罩、手套、防护衣等)，将8.65kg的富马酸单乙酯钙盐和11kg的富马酸二甲酯粉碎，与一种混合物强烈混合，该混合物包含15kg的淀粉、6kg的乳糖(Ph.Helv.VII)、2kg的微晶纤维素(Avicel)、1kg的聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon25)和4kg的Primogel，然后过800目筛混匀。
按常规方法用2％聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon25)水溶液使上述整个化合物成粒，然后在干燥状态下与外层相混合。所述的外层相含有0.35kg的胶体硅酸(Aerosil)、0.5kg的硬脂酸镁和1.5kg的滑石粉(Ph.Helv.VII)。匀化的混合物按500.0mg的规格充填于适当的胶囊中，然后用已知方法包附肠溶包衣(耐胃酸)，其中肠溶包衣由羟丙基乙基纤维素硬脂酸酯和作为软化剂的蓖麻油组成。除硬明胶外，混合物也可以充填至适当的耐胃酸的胶囊中，该胶囊由乙酸邻苯二甲酸纤维素(CAP)和羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯(HPMCP)的混合物组成。
实施例3含有肠溶包衣的微片胶囊的制备，其中含有87.0mg的富马酸单乙酯钙盐、120mg的富马酸二甲酯、5.0mg的富马酸单乙酯镁盐和3.0mg的富马酸单乙酯锌盐，共相当于164mg富马酸(forte片)采取必要的防护措施(口罩、手套、防护衣等)，将8.7kg的富马酸单乙酯钙盐、12kg的富马酸二甲酯、0.5kg的富马酸单乙酯镁盐和0.3kg的富马酸单乙酯锌盐粉碎，强烈混合并过800目筛混匀。然后按以下组成制备辅料混合物18kg的淀粉衍生物(STA-RX 1500)、0.3kg的微晶纤维素(Avicel PH 101)、0.75kg的PVP(Kollidon 120)、4kg的Primogel、0.25kg的胶体硅酸(Aerosil)。将整个混合物加到活性成份混合物中，过200目筛混匀。按常规方法用2％的聚乙烯吡咯烷酮(KollidonK25)水溶液制粒，然后在干燥状态下与外层相混合，该外层相由0.5kg的硬脂酸镁和1.5kg的滑石粉组成。将粉末混合物用常规方法压制成圆片，片重10.0mg，片径2.0mm。除常规压片方法外，其它方法如直接压片或根据熔融法和喷雾干燥法进行的固体分散也可用于制片。
按常规方法将耐胃酸包衣液倒入或喷入包衣锅中或采用适当结构的流化床。为获得耐胃酸的功能，制备含有2.250kg的羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯(HPMCP，Pharmacoat HP50)的溶液，其中溶剂为13L的丙酮、13.5L用2％丙酮变性的乙醇(浓度为94重量％)和2.5L的去离子水。加入0.240kg作为软化剂的蓖麻油构成最终溶液，然后按常规方法分份包敷到素片上。
薄膜包衣干燥完成后，将以下组成的悬浮液在相同包衣装置中进行薄膜包衣0.340kg的滑石粉、0.4kg的氧化钛(VI)Cronus RN56、0.324kg的红颜料86837、4.8kg的Eudragit E 12.5％、以及0.12kg的聚乙二醇6000 pH 11 XI，其中溶剂包括8.17kg的异丙醇、0.2kg的去离子水和0.6kg的甘油三乙酸酯(Triacetin)按净重500.0mg的规格将耐胃酸的微片装入硬明胶胶囊中并密封。
实施例4制备在胶囊中的肠溶包衣的微片剂，其包含120.0mg的富马酸二甲酯，相当于96mg的富马酸采取必要的防护措施(口罩、手套、防护衣等)，将12kg的富马酸二甲酯粉碎，过800目筛混匀。然后按以下组成制备辅料混合物17.5kg的淀粉衍生物(STA-RX 1500)、0.30kg的微晶纤维素(Avicel PH101)、0.75kg的PVP(Kollidon120)、4kg的Primogel、0.25kg的胶体硅酸(Aerosil)。将活性成份加到整个粉末混合物中，混合，过200目筛混匀，然后按常规方法用2％的聚乙烯吡咯烷酮(KollidonK25)水溶液制粒，接着在干燥状态下与外层相混合。该外层相含有0.5kg的硬脂酸镁和1.5kg的滑石粉。
之后，将上述粉末混合物用常规方法压制成圆片，片重10.0mg，片径2.0mm。
为获得耐胃酸的功能，制备含有2.25kg的羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯(HPMCP，Pharmacoat HP50)的溶液，其中溶剂为13L的丙酮、13.5L用2％丙酮变性的乙醇(浓度为94重量％)和1.5L的去离子水。加入0.24kg作为软化剂的蓖麻油构成最终溶液，然后按常规方法分份包敷到素片上。
干燥完成后，将以下组成的悬浮液在相同包衣装置中进行薄膜包衣0.34kg的滑石粉、0.4kg的氧化钛(VI)Cronus RN56、0.324kg的红颜料86837、4.8kg的Eudragit E 12.5％、以及0.12kg的聚乙二醇6000pH11 XI，其中溶剂包括8.17kg的异丙醇、0.2kg的去离子水和0.6kg的甘油三乙酸酯(Triacetin)按净重400mg的规格将肠溶包衣的微片装入硬明胶胶囊中并密封。
实施例5制备在胶囊中的肠溶包衣的微片剂，其包含120.0mg的富马酸二甲酯，相当于96mg的富马酸如上所述将12kg的富马酸二甲酯粉碎并混匀。然后按以下组成制备辅料混合物23.2kg的微晶纤维素(Avicel PH 200)、3kg的交联羧甲基纤维素钠(AC-Si-SOL-SD-711)、2.5kg的滑石粉、0.1kg的无水硅酸(Aerosil 200)以及1kg的硬脂酸镁。之后，将上述粉末混合物用常规方法压制成圆片，片重10.0mg，片径2.0mm。
之后，制备0.94kg Eudragit L在异丙醇中的溶液，该溶液还包含0.07kg的邻苯二甲酸二丁酯。将该溶液喷在素片上。制备17.32kg的EudragitL D-55以及2.8kg微滑石粉、2kg Macrogol 6000和0.07kg二甲硅油的混合物在水中的悬浮体，然后喷涂在上述芯上。
最后，按净重650mg的规格将肠溶包衣的微片装入硬明胶胶囊中并密封。
实施例6NF-кB向细胞核中的转移将NF-кB(p65)嵌于载体pEGFP-C1中，该载体包含与巨细胞病毒启动子(Clontech)连接的EGFP(绿色荧光蛋白)。这导致荧光NF-кB的表达。HUVEC细胞平板接种在涂覆明胶的培养板的第3和第5通道之间，该培养板具有12个孔(Costar)，并分别生长至80或90％融合。使用磷酸钙沉淀法对这些细胞进行转染处理。具体而言，细胞用Dulbecco改良Eagles培养基(DMEM)调节，24小时后每个孔添加包含1μg DNA的沉淀物，然后该细胞再培养4小时。用HBSS(Hanks平衡盐溶液)洗涤后，添加培养基，并在刺激前使细胞进一步生长18小时。
在试验中，用40μM/1的富马酸二甲酯调节细胞，不含有DNA的平行制剂作为对照。调节开始后2小时，用10ng/ml的TNF-α刺激所述细胞，时间如表1所示。
之后，细胞进行溶解处理，弃掉上清液，细胞核收集在含有蛋白酶抑制剂的Dounce缓冲液(10mM tris-HCl，pH7.6、0.5mM MgCl、10μg/ml亮肽素、10μg/ml抑肽酶、1mM苯基甲基磺酰基氟、1.8mg/ml碘代乙酰胺)中。在1200g、4℃下离心10分钟后，在FAC扫描流细胞计数器(Becton Dickinson)上分析细胞核。
表1NF-кB(p65)阳性核的数量(基于所有用NF-кB进行转染处理的细胞的百分数)

该表中的结果说明浓度为40μM/l的富马酸二甲酯抑制TNF诱发的NF-кB向细胞核中的转移。
实施例7对NF-кB刺激的转录的抑制作用AP-1共有位点(键合位点)的三重重复体(48bp，3×TGTGA-TGACTCAGGTT)以及NF-кB共有位点的三重重复体(60bp，3×AATCGTGGAATTTCCTCTGA)，与SpeI键合位点(未示出)相接，嵌入在pTK-UBT-luc载体(de Martin，Gene 124；137-138，1993)的SpeI位点中。由bp-1285延伸至bp+482的E-选择蛋白启动子的1.3kb构建体嵌入在pMAM Neu-luc载体(Clontech)的NdeI位点中。
HUVEC细胞用如上在实施例6中得到的构建体进行转染。在进行所述转染时，于每个孔中添加2.5μg相关的启动子构建体。为证实转染效率，在每个试样中用500ng的pSV-β半乳糖苷酶对照载体(PromegaCorp.，Madison，WI，U.S.A.)作为对照。转染后2天，用10ng/ml的TNF-α刺激细胞2小时，其中可添加或不添加6μg/ml的富马酸二甲酯(DMF)。如下收集细胞胰蛋白酶化，沉淀，洗涤，并按照制造商的建议重新悬浮在200μl的“报道基因溶解缓冲液”(Promega)15分钟。
使用虫荧光素酶测试体系(Promega)通过Berthold AutoLumatLB9507测量虫荧光素酶活性。使用Promega β-半乳糖苷酶测试体系测量β-半乳糖苷酶活性。用相关启动子构建体得到的虫荧光素酶活性相对于β-半乳糖苷酶活性进行归一化。β-半乳糖苷酶活性在每个试样中的变动宽度低于10％。表2显示了相对于基线的单个结果×倍。
表2转录的增加在有或没有40μM/l的富马酸二甲酯(DMF)时用TNF刺激(10ng/ml)后虫荧光素酶活性的相对增加(相对于基线的×倍增加)，n＝6

表2中的结果说明富马酸二甲酯抑制TNF诱导的NF-кB依赖性基因的转录，但不抑制AP-1依赖性基因的转录。因此，富马酸二甲酯的抑制作用是NF-кB特异性的。
权利要求
1.一种或多种富马酸衍生物在制备用于治疗受NF-κB影响之疾病的药物组合物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述富马酸衍生物选自于富马酸二烷基酯、游离酸或盐形式的并任选取代的富马酸单烷基酯以及它们的混合物。
3.如权利要求2所述的应用，其中所述富马酸二烷基酯相应于以下结构式 其中R1和R2可以相同或不相同，分别代表直链、支链、环状、饱和或不饱和的C1-24烷基或C5-20芳基，而且这些基团可以任选被卤素(F、Cl、Br、I)、羟基、C1-4烷氧基、硝基或氰基取代。
4.如权利要求2或3所述的应用，其特征在于基团R1和R2为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、环戊基、2-乙基己基、己基、环己基、庚基、环庚基、辛基、乙烯基、烯丙基、2-羟基乙基、2-或3-羟基丙基、2-甲氧基乙基、2，3-二羟基丙基、甲氧基甲基或者2-或3-甲氧基丙基。
5.如权利要求2所述的应用，其中所述富马酸单烷基酯相应于以下结构式 其中-R1为权利要求3或4定义的基团；-A为氢离子或者碱金属或碱土金属阳离子或者生理可接受的过渡金属阳离子，优选选自Li+、Na+、K+、Mg2+、Ca2+、Zn2+、Fe2+、和Mn2+；-n为1或2并相应于A的价数。
6.如权利要求1至5之一所述的应用，其特征在于所述富马酸衍生物为一种或多种选自于以下组中的衍生物富马酸二甲酯、富马酸二乙酯、富马酸甲基乙基酯、富马酸甲基氢酯、富马酸乙基氢酯、富马酸甲酯钙盐、富马酸乙酯钙盐、富马酸甲酯镁盐、富马酸乙酯镁盐、富马酸甲酯锌盐、富马酸乙酯锌盐、富马酸甲酯铁盐和富马酸乙酯铁盐以及它们的混合物。
7.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述富马酸衍生物是富马酸二甲酯。
8.一种或多种富马酸衍生物在制备用于治疗受NF-κB影响之疾病的药物组合物中的应用，所述疾病选自于以下组中渐进性全身性硬皮病、梅毒性骨软骨病(Wegener病)、大理石色皮(livedo reticularis)、Behcet病、全身动脉炎、溃疡性结肠炎、脉管炎、骨关节炎、痛风、动脉硬化、Reiter病、肺肉芽肿、多种类型的脑炎、内毒素性休克(脓毒性休克)、脓毒症、肺炎、脑脊髓炎、神经性厌食症、肝炎(急性肝炎、慢性肝炎、中毒性肝炎、酒精诱发的肝炎、病毒性肝炎、黄胆、肝功能不足、以及巨细胞病毒性肝炎)、Rennert T淋巴瘤病、肾小球肾炎、血管成形术后再狭窄、再灌注综合症、巨细胞病毒性视网膜病、腺病毒性疾病(例如腺病毒性感冒、腺病毒性咽结膜热和腺病毒性眼炎)、AIDS、Guillain-Barre综合症、疱疹后或者带状疱疹后神经痛、炎性多神经根神经瘤、多脑神经病、胰管粘稠物阻塞症、Bechterew病、Barett食管、EBV(Epstein-Barr病毒)感染、心脏重新再造、间质性膀胱炎、II型糖尿病、人肿瘤放射致敏、恶性细胞对化学治疗剂的多重耐药性(化疗中的多药物耐药性)、环形肉芽肿以及癌症(如乳腺癌、结肠癌、黑色素瘤、原发性肝细胞癌、腺癌、卡波济肉瘤、前列腺癌、白血病如急性髓细胞白血病、多发性骨髓瘤(浆细胞瘤)、Burkitt淋巴瘤和Castleman肿瘤)。
9.如权利要求8所述的应用，其特征在于所述富马酸衍生物选自于富马酸二烷基酯以及游离酸或盐形式的富马酸单烷基酯或者它们的混合物。
10.如权利要求9所述的应用，其中所述富马酸二烷基酯相应于以下结构式 其中R1和R2可以相同或不相同，分别代表直链、支链、环状、饱和或不饱和的C1-24烷基或C5-20芳基，而且这些基团可以任选被卤素(F、Cl、Br、I)、羟基、C1-4烷氧基、硝基或氰基取代。
11.如权利要求9或10所述的应用，其特征在于基团R1和R2为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、环戊基、2-乙基己基、己基、环己基、庚基、环庚基、辛基、乙烯基、烯丙基、2-羟基乙基、2-或3-羟基丙基、2-甲氧基乙基、2，3-二羟基丙基、甲氧基甲基或者2-或3-甲氧基丙基。
12.如权利要求9所述的应用，其中所述富马酸单烷基酯相应于以下结构式 其中-R1为权利要求3或4定义的基团；-A为氢离子或者碱金属或碱土金属阳离子或者生理可接受的过渡金属阳离子，优选选自Li+、Na+、K+、Mg2+、Ca2+、Zn2+、Fe2+、和Mn2+；-n为1或2并相应于A的价数。
13.如权利要求1至5之一所述的应用，其特征在于所述富马酸衍生物在药物组合物之单元剂量中的含量相当于1至500mg、优选10至300mg、最优选10至200mg的富马酸。
14.如权利要求8-13之一所述的应用，其中所述药物组合物为口服给药、非肠道给药、直肠给药、经皮给药、皮肤给药、鼻腔给药、经肺(吸入)给药或经眼给药的剂型，优选为口服给药的剂型。
15.如权利要求14所述的应用，其中口服给药的药物组合物的剂型为单元剂量的片剂，微片剂、微丸剂或颗粒剂，胶囊或供饮用的溶液，所述微片剂、微丸剂或颗粒剂可任选包胶或者填充在胶囊或袋中。
16.如权利要求15所述的应用，其特征在于固体制剂包有肠溶包衣。
17.如权利要求8所述的应用，其特征在药物组合物的单元剂量中单独或者组合含有一种或多种以下物质10至500mg的富马酸二烷基酯，特别是富马酸二甲酯和/或富马酸二乙酯；10至500mg的富马酸烷基酯钙盐，特别是富马酸甲酯钙盐和/或富马酸乙酯钙盐；0至250mg的富马酸烷基酯锌盐，特别是富马酸甲酯锌盐和/或富马酸乙酯锌盐；0至250mg的富马酸烷基氢酯，特别是富马酸甲基氢酯和/或富马酸乙基氢酯；0至250mg的富马酸烷基酯镁盐，特别是富马酸甲酯镁盐和/或富马酸乙酯镁盐；总量相当于10-500mg、优选10-300mg、最优选100mg的富马酸。
18.如权利要求15或16所述的应用，其特征在于所述组合物为尺寸小于等于5000μm的微片剂或微丸剂，对于丸剂优选为300-1000μm；而微片剂则为1000-2500μm。
全文摘要
本发明涉及一种或多种富马酸衍生物作为NF－κB抑制剂的应用。同时，本发明还涉及所述富马酸衍生物在制备用于治疗受NF－κB影响的疾病的药物中的应用。
文档编号A61K47/04GK1520291SQ02803628
公开日2004年8月11日 申请日期2002年1月8日 优先权日2001年1月12日
发明者拉金德拉·库马尔·乔希, 汉斯－彼得·斯特雷贝里, 彼得·佩策尔鲍尔, 佩策尔鲍尔, 拉金德拉 库马尔 乔希, 说谩に固乩妆蠢 申请人:富玛法姆股份公司