来自植物材料的全范围营养添加剂和它们的制备方法

专利名称：来自植物材料的全范围营养添加剂和它们的制备方法
技术领域：
本发明涉及获得和浓缩生物活性物质，及从不同食物中制备它们的方法。
背景技术：
很多植物衍生化合物如类胡萝卜素、花色素苷、脂肪酸、萜类和生物碱通过与细胞过程相互作用而赋予食物重要的有益的药物学或“营养药物学(nutraceutical)”特点。例如，类胡萝卜素和花色素苷通过保持低水平的活性氧中间体而在细胞中显示了抗氧化活性，通过抑制前列腺素的合成作为抗炎剂，或者作为参与细胞增殖的酶的抑制剂。这些细胞效应可以改善慢性疾病如癌症、关节炎和心血管疾病(Kinsella等，食品技术(FoodTech.)，85-89(1993))。因此，为摄食而制备这些化合物是具有商业价值的行为。生机勃勃的食品添加剂/食物和营养药物学产业已经发展为消费者提供这些具有显著健康益处的物质。
浆果如蓝莓，酸果蔓，和樱桃，以及其他植物原料如葡萄和番茄，被认为含有特别的和许多具有多种有益保健性质的生物活性化合物。连着色剂如花色素苷都被暗示在很多种植物品种中具有保健功效。例如，花色素苷如花青素-3-葡糖苷表现出很强的抗氧化活性(Tsuda，T.等，农业和食品化学杂志(J.Agric.Food Chem.)422407-2410(1994))。这种抗氧化剂可以被加入到食品中通过它们阻断脂的过氧化作用来改善保质期。天然抗氧化剂可以帮助阻止癌症发生。饭食中的抗氧化剂可以阻止一些生命系统中的过氧化损伤(Halliwell，B.和J.M.C.Gutteridge，生物和医药中的自由基(Freeradicals in biology and medicine)。牛津大学出版社，纽约416-494(1989))。类胡萝卜素也被认为基于它们的抗氧化活性可在预防或减轻病症过程中起重要作用。脂肪酸，萜类和生物碱代表了其他在维持健康中具有单独的和不同功能的类别。
提取这些生物活性化合物的方法通常对一种类型的生物活性分子比对其他的有效。很不幸，这降低了供给消费者的产品的价值或提高了供给消费者的产品的成本。文献中的很多分离生物活性分子或几类分子的源于对少量样品的基础研究的方法在商业应用中是不实用的。商业价值反映了消费者对用合理成本获取大量生物活性物质的需求。目前，药物营养品大多以粗糙的形式提供，并且从含有特别丰富的某种想要的生物活性化合物或多组化合物的植物材料粗制提取而得。因此，消费者经常购买到具有一种组成的产品，该组成由特定提取方法的简易性或具有高浓度的某种化合物的植物的可获性决定。相比之下，最理想的是，产品能全面开发自然界中可获得的生物活性范围，且其包含共有相同作用的不同种类的物质。
通过例证的方式，醉椒(Kava)包含七种主要的在不同功能中起不同作用的醉椒内酯，如抗焦虑剂，快速作用局部麻醉剂，肌肉松弛剂，和催眠剂。一种不能适应具有期望比例的主要醉椒内酯的消费品的醉椒提取或配制方法不能利用这种植物提供的所有可能。缺乏控制是一个特别的问题，其中提取方法产生粗糙、复杂的、包含不需要的有害身体健康的生物活性物质的制剂。
一个不最理想的提取方法的例子在1999年4月27号颁发给Bombardelli等的专利号为5,897,866的美国专利中提供。这份文献教导了a)芳香烃b)脂族烃和c)卤代烃，己烷和二氯甲烷对从番茄中提取番茄红素效果最好，特别是使用脂肪酸添加剂。这项专利描述了一个多步工艺，在该工艺中，在用选定的溶剂进行提取步骤之前通过均化、加热和冷却，以及离心或过滤，从番茄物质中除去番茄红素。备选地，在用己烷溶剂萃取之前，筛出番茄皮，在水中处理一个小时，干燥并研磨。在提取和蒸发后，获得5％番茄红素物质，产率大致为每10kg原料0.5gm。为从番茄红素油中获得纯度更高的物质，在逆流三步柱中应用超临界二氧化碳，500gm起始油可生产出24gm纯产物。但是，很多种番茄，每100gm重量中含有大约100mg(0.1％)(EMAN M.TAWFIK的“不同天然番茄品种和番茄产品中的番茄红素含量”(文章在2002年6月18日在美国加利福尼亚洲阿纳海姆市举办的IFT年会的技术程序会议上报告)。因此，Bombardelli专利中教导的提取方法只能回收约1％可用的番茄红素，大部分番茄红素被浪费。显然从此来源商品化生产番茄红素需要其他方法。
其他种类的生物活性物质应用相似的预处理步骤，如在2002年7月23日颁发给Nair的专利号6,423,365的美国专利中提到的溶剂提取和色谱提纯花色素苷。在每种情形中，通常首先必须破坏植物细胞物质，加入溶剂以分离生物活性物质，然后分离的生物活性物质再进一步被提纯。如这个专利中所述，除非期望一种含有糖类和其他非所需组分的非常粗糙的材料外，需要非常昂贵的步骤来制备生物活性物质。
这个领域中没有被充分解决的另一个问题是不能从一种给定植物材料中同时提取多种所需生物活性组分。例如，很多水果含有理想数量的番茄红素和花色素苷，丹宁酸，缩合鞣酸(原花色素)和其他物质。为达到将这些组分作为药物营养品的要求，需要一个根据需要能从每种植物材料中捕获这些生物活性剂中每一种的高效系统。迄今所知的粗提和部分纯化方法，缺乏根据对特定所需效果的需要获得合适的广谱营养物和控制生物活性化合物比例的能力。为推进这个领域，广泛改善人类的营养，需要含有更加可控的生物活性组成的物质和它们的经济制备方法。
发明详述本发明的实施方案可以减轻上述问题和与现有技术相关的不足。一种实施方案提供了从植物材料中提取的可溶性组合物，包含属于选自由类胡萝卜素、花色素苷、脂肪酸、萜类和生物碱组成的组的至少3类的多种物质，其中属于每种所选类别的物质的各自重量比在植物材料中物质相同比率的100％以内，且其中组合物中游离糖的相对比例小于在植物材料中发现的游离糖的20％。另一个实施方案提供了一种从植物材料中提取的可溶性组合物，含有有机酸，氨基酸，脂肪酸，类胡萝卜素，植物甾醇，花色素苷，黄酮/异黄酮，多糖，萜类，类胡萝卜素，花色素苷和复合(complex)丹宁酸，且其相对比例在未提取的植物材料中其比例的100％以内，且其中残余的游离糖少于10％。
很惊奇地发现可以从很多种不同的食物中提取并浓缩多种类别的化学物质的全部。此外，发现的方法允许通过调节从给定植物材料中获得的生物活性物质的相对比例细调化学轮廓(profile)。这种对提取组合物的细调控制允许对目标药理作用配制提取物。例如，醉椒药草含有许多醉椒内酯，且例如七种含量最高的醉椒内酯的比率可以在预定摄入用作抗焦虑药，短期作用局部麻醉剂，肌肉松弛剂或催眠药物的制剂中可以被优化。发现的方法既允许提取更广范围的植物化学物质，又能细调给定提取物的含量。这种方法在很多情形中提供更大的目标化合物如番茄红素的回收率。该方法纯化除去了不想要的游离糖，植物水分和不溶性植物固体。此外，许多方法允许更简单和成本更低的能更少降解目标植物化合物的提取，因此，提供更有效的组合物。本领域的技术人员将在读取了说明书并将公开内容和常识结合后理解其他的优点。
省略其他人应用的初步提取步骤本领域已知的提取植物化合物和制备药物营养品的许多方法开始于一个物理破坏的步骤，如加水使植物细胞膨胀和/或冷冻以破裂细胞，研磨，浸渍，或应用已破坏的植物或水果物质作为起始原料。在破坏后，榨出液体并/或加入溶剂如己烷以溶解一种或多种植物化合物。遗憾的是，这种压榨或溶剂提取添加了一个不必要的步骤，产生了相关的费用且通常只能分离出有限或不完全范围的目标植物化合物。不完全范围的问题可以通过应用不同溶剂的多次提取来处理，但即使那样，通常获得较不完全范围的生物活性物质。该发明的实施方案通过省略许多或大部分这些步骤来缓解这些问题。
高压原料色谱层析步骤与无数现有技术在色谱步骤前应用的预处理相比，发现许多或甚至所有的开始准备步骤包括例如去核，植物细胞破碎，研磨，捣碎等等，可以通过高压“原料色谱层析”步骤来去除。术语“原料色谱层析”是指将植物物质放于密封或可密封的小室中并将植物物质作为柱树脂处理，通过一种或多种液体，气体或压力下超临界液体，以分离出更大范围的植物化合物。不希望被本发明实施方案如何操作的任何理论所束缚，相信植物原料中纤维素组分用作树脂载体，与色谱中通常用到的树脂是相似的。令人惊讶的是，植物材料的固体部分允许亚临界气体和超临界气体通过材料块，且与色谱中树脂允许渗透的方式是相似的。理想地，纤维素组分为总干物质的至少5，10，20或甚至30％。在许多情形中未干燥的原材料可以放置、流动或泵进原料色谱层析室中直接高效提取。
在理想的实施方案中，小室是圆的，高度等于至少一个直径大小，优选直径的1.5到2.5倍。更长的长度超过3，5，或甚至10倍的平均直径的柱子或小室当然可以使用。可以使用立方形的，不规则的和其他形状，但是由于结构和流动原因优选圆筒形大小的室。小室优选包含抗腐蚀的内表面，可以用不锈钢，硅酸盐，如玻璃或特氟隆制成。小室方便得被垂直放置，流体或气体或超临界流体，从上部进入，但是其他的安排如在容器中以任何朝向水平或辐射状的移动是合适的。在理想的实施方案中，提取液的体积(典型体积为原料样品体积的1到2倍)通过小室中间的一个同心筛选棒被引入，提取出的流体(经过原料的流体)经过网眼和或其他多孔表面后在外围被收集。在理想的实施方案中，植物原料作为淤浆进入小室，原料中可能还含有固体如核或种子。提取可以重复。在优选实施方案中，提取重复不超过一次或两次，总提取体积为原料体积的3，4，5，6，8或少于10倍。
在一个实施方案中，全部，部分降解的，研磨或压碎的天然源如植物和/或药草被放入，流进或者泵入可密封的小室中，任选地和共溶剂接触，然后和液相溶剂接触以将分析物溶于溶剂中。收集溶有分析物的溶剂，除去以分离分析物。在一个实施方案中，药草或植物材料在小室被密封且除去空气后和溶剂接触。得到的溶剂和天然源的混合物保持在压力下，以使天然源和溶剂密切接触在一起以将溶剂中填满分析物。这种提纯方式可以根据需要在可密封并可抽空的任何容器中进行。提取可以在任何合适的温度下进行，优选在室温或室温以下进行。
提取的流体或气体优选在植物原料柱的一侧或位置被引入，流经柱子，溶剂化并且提取当流体流过柱子时进入流体的植物化合物。提取出的流体离开柱空间并进入另一个空间，在那里流体物质被除去，留下提取的植物化合物，例如在12/07/00公开的颁发给ASHRAF-KHORASSANI MEHDI等的专利号为WO0072861中描述的那样。植物原料柱中所用的压力取决于溶剂/气体的类型及将要提纯的植物化合物的类型。优选提取物质包含二氧化碳，分子氮(氮气)，氢气，脂族烃或卤代烃如丁烷，丙烷，氟利昂，或混合物如含有醇的二氧化碳，含有乙醇的二氧化碳，含有甲醇的二氧化碳，含有15％乙醇的二氧化碳，含有乙醇和作为第二改性剂的异丙胺的二氧化碳。一个发现是超临界流体可以被用于分离更广范围的植物化合物。
但另一个发现是亚临界压力可被用于获得广谱提取物，又没有较高的超临界压力有关的高成本和高风险。这种“亚临界”压力通常是既定温度下超临界压力的0.05到0.95倍，优选超临界压力的0.25到0.8倍，更优选0.5到0.7倍。例如，来源于很多种植物材料的复合丹宁酸经常在低压下不能用单纯的水或基于水的溶剂(水加上水混溶性有机溶剂如醇，或在高或低pH下)完全洗脱。已发现，使用压力为给定温度下超临界压力0.5至0.67倍的二氧化碳的亚临界状态经常去除更多的此类植物化合物。
很多情况下，可以应用单一的超临界流体如二氧化碳，丙烷，丁烷，异丁烷等等。实验发现，加入少量的第二溶剂经常能改善提取。例如，加入醇，如甲醇或乙醇或乙基乙酸乙酯作为共溶剂，到例如浓度约为二氧化碳溶剂的0.02％到10％(摩尔比)，优选0.1％到5％的，可以改善植物化合物的回收率。
在另一个发现中，发现在亚临界压力或在超临界压力下应用的溶剂，从植物原料色谱步骤中提取植物化合物。样品如整个的浆果，番茄皮，水果加工废料，简单切碎的药草物质等等，可以通过压力步骤处理，而不需要任何预处理步骤。这种优势特点大大降低了成本和将这种植物材料加工成植物化合物提取物的便利性。因此，废弃流体可以被直接用于低成本高容量提取。
另一个被发现改进规模经济的方法是在亚临界或超临界色谱前的任意时间直接将共溶剂加入到原料中。已发现，共溶剂如甲醇，乙醇或乙酸乙酯可以以典型的比例，大约样品重量的0.1％到25％，优选为样品重量的0.3％到5％，在加入高压溶剂前加入。任选地样品可以在加入共溶剂后，加入高压溶剂前用真空处理。
另一个发现是，氮气可以在亚临界条件下与共溶剂一起用于高效提取。
共溶剂可以在施加高压前加入原料。共溶剂也可以在高压氮气加入同时或在其后加入。在一种实施方案中，加入醇，如甲醇，乙醇，丙醇或丁醇，经受高压氮气，流经原料色谱空间。但是在另一种实施方案中，第二溶剂在单独位置的入口被引入，并在高压下流经原料色谱空间。在另一种实施方案中，在将原料暴露于真空之前或之后加入第二溶剂。氮气通常以100到2000psi加压，优选300到1500psi，更优选500到1200psi，还更优选700到900psi。不想被任何关于本发明实施方案如何操作的理论所束缚，相信高压氮气提高了共溶剂的活性，由此降低了所需共溶剂的量，降低了溶剂成本并改善了提取效率。
还有另一个发现是用于植物化合物二氧化碳亚临界提取的压力的微小变化允许用高压处理来控制溶剂化和提取的分子种类。例如，在使用高压二氧化碳在低于30摄氏度的恒温下从醉椒样品中提取醉椒内酯时，对压力进行少至75，50，35，25，15或甚至10psi的改变，并重复提取过程，可以选择性地分离不同组的醉椒内酯。这种定性方法与HPLC在有分离分子的能力上是相似的，且具有易放大到大规模生物量的理论优势。这个发现可以被应用到其他的化学领域，特别是分析化学中，这里，生物样品可以被放置在一个小室中，高压二氧化碳，优选使用共溶剂，在不同压力下通过小室。在不同压力下获得的洗脱的原料流体流可以例如通过吸收或荧光检测。可以进行检测信号与参照的对比，以确定样品的内含物或状态。这个技术消除了对树脂柱的需要，因为样品本身成了柱，在应用时可以用氮气或其他气体替代或补充二氧化碳。
低压水相原料色谱当然，高压提取可以与低压水相提取方法相结合。在一种实施方案中，水相，如含有高达40％乙醇或甲醇的水和任选地在高达60摄氏度的温度下通过原料色谱，以分离水溶质如类黄酮。这之后进行如上所述的高压提取。高压提取在弱溶剂化条件下(低压力和/或温度)如液体二氧化碳在亚临界条件下分离出例如极性化合物如脂肪酸和甾醇。如果大多生物活性物质是此类化合物，那么高压提取优选在没有水相提取步骤的情况下进行。优选地使用接近超临界的条件或转换到超临界条件可以去除有机的、极性较小的物质如多环化合物。因此，如果不同种类的物质需要分别被分离出来，水相提取之后，要进行不止一次而且两次高压提取。但是，为了低成本的广谱提取，期望将最初的植物材料进行简单的高压提取。
尽管高压原料色谱在去除各种各样的物质方面非常好，已发现，用低压水相进行预提取确实能改善一系列高压步骤中的回收率。例如，已发现，番茄多糖在水相类胡萝卜素提取步骤之后，更容易从番茄中被分离出来。
代表性的提取试剂可以使用各种各样天然来源的适合溶剂化各种生物活性物质的溶剂，其中包括但不限于醇，弱酸，酮，氯衍生物，烃，氟化烃，醋酸盐，醚，或其组合。与丙烷和丁烷相比，由于其不易燃的性质和对于广泛范围的目标分析物的极好溶剂化性能，CO2已经成为用于超临界流体萃取领域的最普通的挥发性物质，对于许多实施方案是理想的。但是，CO2在水的存在下可以形成碳酸，碳酸可以降解生物分子和一些用于反应器的金属表面。此外，超临界CO2提取系统经常在超过39℃的温度下操作。在处理过程中使不稳定的天然物质在这个温度下保持很长时间可导致热或酶诱导的损坏。另一方面，应用这里描述的亚临界二氧化碳条件，发现了显著的分解。未氯化的碳氟溶剂也可以被应用在亚临界浓度和超临界条件下。这种如美国专利号5,512,285中披露的溶剂可以被用于实施方案中。
在一个实施方案中，可以使用的未氯化的碳氟溶剂包括但不限于，三氟甲烷，二氟甲烷，氟代甲烷，五氟乙烷，1，1，1-三氟乙烷，1，1-二氟乙烷，1，1，1，2，2，3，3-七氟丙烷，1，1，1，3，3，3-六氟丙烷，1，1，1，2，2-五氟丙烷，2，2，3-六氟丙烷，1，1，2，2，3，3-六氟丙烷，1，1，1，2，3，3-六氟丙烷，和1，1，1，2-四氟乙烷。这些溶剂的混合物，可以被用于在特定过程中适应混合物的沸点，并促进特定生物活性物质的选择性洗脱。这些溶剂可以通过与另一种挥发性物质如丁烷，己烷，乙醇或任何其他适宜的物质混和而进一步改性(modified)。在优选实施方案中，用于提取的非碳氟溶剂是四氟乙烷，优选1，1，1，2-四氟乙烷。在更优选的实施方案中，四氟乙烷未被改性。
代表性的提取番茄薄片和樱桃被用作代表性的原料，在高压下被不同溶剂和气体提取。在一次樱桃的提取中，全部类胡萝卜素(主要为番茄红素)中的83％被分离出来，同时去除了大于90％的游离糖。进行二氧化碳超临界提取，但是非常慢而且产出非常少的番茄红素。在方法中加入共溶剂来改善产率也只取得了很小成功，直至奇怪的是，没有共溶剂的高压丙烷提取高于80％的番茄红素。
在其它研究中，将蓝莓放置到一个色谱室中，先用水和醇(水中10％-40％甲醇)在100psi下进行提取。将水溶剂处理的材料暴露于真空。然后应用接近超临界态的烃(丙烷)，将2到3倍体积通过柱子。各种各样的植物活性物质被分离出来。提取物中物质的相对比例与其在蓝莓植物材料中的比例是类似的。
在另一项研究中，甲醇被注入到色谱室内的樱桃材料中，重量为总重(原料加甲醇)的3％。然后，在25摄氏度下，将高压丙烷在75％超临界压力下加入。通入3倍体积的接近超临界态的丙烷，分离出的物质通过降低压力来干燥。提取出的物质中包含类胡萝卜素，花色素苷，脂肪酸，萜类和生物碱，相对比例与在原材料中发现的相同。
在另一项研究中，在色谱室中应用二氧化碳和甲醇共溶剂直接提取醉椒叶。应用的压力大约是超临界压力的一半。在通过两倍体积后，压力提高75psi，再通过两倍体积。压力再提高75psi，再通过两倍体积。再重复这个过程4次，收集洗脱液。已发现，不同的醉椒内酯偏向于被提取到不同的洗脱液中。
获得的代表性的提取物在用接近超临界或超临界气体条件下进行的每个研究中，提取出的物质是可溶的。本文所用术语“可溶”是指组合物不含有植物颗粒物质(含有少于1％重量，优选少于0.5％，0.2％，甚至少于0.1％重量的植物微粒)但含有溶解在至少一种接近中性ph(5到9)的溶剂，包括用于制备提取物的超临界溶剂或接近超临界的溶剂中的植物化合物和其他分子。当然，如果两种提取都进行，且结合起来，那么不是所有的溶质都必须溶解在同一溶剂中。提取物可以是粉末，液体，或淤浆等形式，也可以是易应用于其他食品或粘合剂(binder)的形式。术语“从植物材料中提取”是指植物中的游离水(未和可溶物结合的水)被除去。
许多根据本发明实施方案制备的提取物包含“全范围(full spectrum)”的植物化合物，这些化合物与得到它们的植物材料中的植物化合物的范围相似。本文中“模拟(mimic)”一词的意思是，每一组中植物化合物的比率(方便地以干燥形式基于重量基础测量)在彼此300％，200％，100％，50％以内，更优选在25％以内。植物化合物组可以是类胡萝卜素，花色素苷，脂肪酸，萜类，和生物碱。备选地，各组也可以是有机酸，氨基酸，脂肪酸，类胡萝卜素，植物甾醇类，花色素苷，黄酮/异黄酮，糖类，萜类，类胡萝卜素，花色素苷和复合丹宁酸。在很多情况下，可能只有每组中的两个，三个，四个或者五个成员能理想地以这种方式被比较，因为很多植物原料往往只含有在一组或几组中占优势的植物化合物。通常，因而，最好通过只比较合在一起含有植物材料中总的植物化合物的至少80％的组来进行比较。例如，如果番茄植物化合物补充剂中大部分(大于80％)是番茄红素，花色素苷和萜类，只有类胡萝卜素，花色素苷和萜类需要用来比较以确定给定的提取物是否模拟来源植物材料中的植物化合物的补充物(complement)。
一些提取物，如依上述的那些由不同的二氧化碳压力处理制备的，将包含不同比例的期望植物化合物。这将为技术人员提供混合和匹配不同比率的期望植物化合物的自由，以获得具有创新性和有效组的药理学作用的复合产品，如以上关于醉椒内酯所例举的。这个特性使得在单剂量大小内允许多组分配方。通过在提取过程中去除植物材料中的纤维质和游离糖组分，使其更为可行。对于给定的生物需求，通过从特定制剂中进一步去除不需要的植物化合物，可以减小剂量大小。
考虑说明书和此处公开的本发明的实践，本发明的其他实施方案和应用对于那些本领域的技术人员来说是显而易见的。此处引用的所有参考文献，包括所有美国和外国专利和专利申请，在此明确和完整得并入作为参考。说明书和实施例应当认为仅是例举性的，本发明的真正范围和精神体现在后附权利要求中。
权利要求
1.从植物材料中提取的可溶性组合物，包含属于选自由类胡萝卜素、花色素苷、脂肪酸、萜类和生物碱组成的组的至少3类的多种物质，其中属于每种所选类别的物质的各自重量比在植物材料中物质相同比率的100％以内，且其中组合物中游离糖的相对比例小于在植物材料中发现的游离糖的20％。
2.权利要求1所述的组合物，其中选择至少4类。
3.权利要求1所述的组合物，其中选择至少5类。
4.权利要求1所述的组合物，其中保持了植物材料少于1％的初始含水量。
5.权利要求1所述的组合物，其中组合物中游离糖的相对比例小于在植物材料中发现的游离糖的10％。
6.权利要求1所述的组合物，其中组合物中游离糖的相对比例小于在植物材料中发现的游离糖的5％。
7.从植物材料中提取的可溶性组合物，含有类胡萝卜素、花色素苷、脂肪酸、萜类和生物碱，且其相对比率模拟它们在未提取的植物材料中的比率，其中游离糖的相对比例小于未提取植物材料中游离糖的20％。
8.权利要求7所述的组合物，其中保持了植物材料少于1％的初始含水量。
9.权利要求7所述的组合物，其中组合物中游离糖的相对比例小于在植物材料中发现的游离糖的10％。
10.权利要求7所述的组合物，其中组合物中游离糖的相对比例小于在植物材料中发现的游离糖的5％。
11.从植物材料中提取的可溶性组合物，含有类胡萝卜素、花色素苷、和复合丹宁酸，且其相对比例模拟它们在未提取的植物材料中的比率，其中游离糖剩余少于10％。
12.从植物材料中提取的可溶性组合物，包含有机酸，氨基酸，脂肪酸，类胡萝卜素，植物甾醇，花青素苷，黄酮/异黄酮，多糖，萜类，类胡萝卜素，花青素苷和复合丹宁酸，且其相对比例在未提取的植物材料中它们的比例的100％以内，且其中残余的游离糖少于10％。
13.权利要求12所述的组合物，其中游离糖的相对比例小于在植物材料中发现的游离糖的10％。
14.权利要求12所述的组合物，其中游离糖的相对比例小于在植物材料中发现的游离糖的5％。
全文摘要
本发明涉及获得和浓缩生物活性物质，及从不同食物制备它们的方法。
文档编号A61K36/81GK1703147SQ03825039
公开日2005年11月30日 申请日期2003年9月12日 优先权日2002年9月12日
发明者M·Z·马丁 申请人:M·Z·马丁