专利名称：一种治疗血管闭塞性脉管炎的冻干粉针及其制备方法
技术领域：
本发明属于药品领域，涉及一种以植物生药金银花、玄参、牛膝和石斛为原料的脉络宁冻干粉针剂及其制备方法。
背景技术：
目前市售的脉络宁注射液是由金银花、玄参、牛膝和石斛为原料，在古方“四妙勇安汤”基础上进行有效部位提取后制备的水针剂，收载于1985年“江苏省药品标准”，虽然临床上是疗效确切、起效迅速的纯中药复方药物，主要有改善微循环、抗血栓形成、降低血压等作用，用于血管闭塞性脉管炎、脑血栓及下肢深静脉血栓。但现有的脉络宁注射液存在提取工艺不科学，有效部位提取不全，产品质量控制难度大，制剂质量标准低，使用了心血管类用药不得加入的Tween类助溶剂，并且稳定性差，运输、储存也均不方便等。例如中国专利CN 1078148A介绍了一种脉络宁静脉注射液的工艺方法，该制备方法为将金银花、玄参、牛膝和石斛四者混合后，水煎煮提取，由于金银花清热解毒的有效部位主要集中在绿原酸，有文献(王为民，不同配伍对金银花中绿原酸煎出率的影响，时珍国药研究，1996，7(3)151)报道金银花同含以有机酸、生物碱成分为主的药物配伍，有降低绿原酸煎出率的作用，而牛膝中富含齐墩果酸、阿魏酸，玄参中富含肉桂酸，石斛中富含石斛碱、盐酸小檗碱，因此，将金银花、玄参、牛膝和石斛四者混合后共同浸煮不科学；另外《中国药典》2000版在石斛项下注明“入复方宜先煎”，也说明金银花、玄参、牛膝和石斛四者共煎不合理。脉络宁注射液仅对石斛的主要成分滨嵩内酯进行定量，缺乏对金银花、玄参和牛膝主要药用部位的定量指标，显然不够全面；采用了高温灭菌法(100℃)，导致水溶性黄酮苷类成分分解生成的苷元不溶于水；采用了副作用较大的吐温-80作为增溶剂，增加了临床用药的不安全性；最后脉络宁注射液的稳定性也较差，长期储存后，颜色会变深，并产生沉淀。另一篇中国专利CN 1435250A也介绍了“注射用脉络宁及口服固体制剂的制备方法”，也是先将金银花、玄参、牛膝和石斛四者混合，粉碎后加入甲醇、氯仿，超声提取，显然提取方法不够科学合理；由于使用了甲醇等有毒溶剂，而减压回收有机溶剂无法保证有机溶剂无残留，增加了该药的毒性；在其质量标准中也仅对滨嵩内酯、生物碱和总黄酮进行了含量测定，未对牛膝、玄参的主要药用部位制定定量检查标准，制剂质量标准偏低且不完善。鉴于现有的脉络宁制剂存在上述缺点，本发明对提取工艺等也进行了更深一步的研究和改进。
发明内容
本发明的目的在于提供一种提取工艺更先进、科学，有效部位提取更完全，提取工艺质量可控，制剂质量标准更高，并且稳定性好，药物浓度高，便于运输、储存和使用的脉络宁冻干粉针剂及其制备方法。
本发明所述的脉络宁冻干粉针剂的制备方法是用植物生药金银花、玄参、牛膝和石斛的药用部位加赋形剂经冷冻干燥制成冻干粉针剂型；本发明脉络宁冻干粉针剂的制作工艺具体如下药材的前处理药材玄参、牛膝和石斛经拣选、洗净、烘干、粉碎成片状或细粒状，金银花经拣选处理。
脉络宁冻干粉针剂所用植物生药金银花、玄参、牛膝和石斛的有效部位精制液的制备方法如下1、金银花采用20～40倍的40％～70％稀乙醇回流提取2～4次，每次2～4小时，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，再取上清液滤过，即得金银花有效部位提取液A，供配液使用；2、玄参先采用20～40倍乙醇回流提取2～4次，每次2～4小时，得玄参有效部位提取液B；再将乙醇回流提取过的玄参用20～50倍的水煎煮2～4次，每次2～4小时，滤过，滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，然后取上清液滤过，滤液与上述提取液B合并，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，取上清液滤过，即得玄参药用部位提取液C，供配液使用；3、牛膝先采用20～40倍的水浸泡过夜，再煎煮2～4次，每次1～3小时，滤过，滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，取上清液滤过，即得牛膝药用部位提取液D，供配液使用；
4、石斛先采用5～15倍的水浸泡过夜，再加15～30倍的水煎煮2～4次，每次1～3小时，滤过，滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达60％，第二次使含醇量达80％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，取上清液滤过，即得石斛药用部位提取液E，供配液使用；5、将上述所得提取液A、C、D和E混匀，即得脉络宁冻干粉针剂所用植物生药的有效部位提取液，向有效部位提取液中按每毫升加入赋形剂0.05～0.5克，搅拌，溶解，滤过，并加注射用水适量，再调节PH值至4～9，即得脉络宁冻干粉针剂冻干所用植物生药的有效部位混合液；其中冻干所用植物生药的有效部位混合液的最佳PH值为6.5。
冷冻干燥将上述脉络宁冻干粉针剂冻干所用植物生药的有效部位混合液按每瓶10ml的规格分装后，未封口放入与冻干箱尺寸相应的金属盘内，对冻干箱进行灭菌处理，并将其搁板的温度降低至-25℃～-50℃，迅速将装有制剂的金属盘放入冻干箱内，维持1～6小时，然后对冻干箱进行真空处理，使箱内的真空度为0.2～0.5Pa，再将搁板升温，并严格控制在共熔点-2℃以下，保持10～24小时，最后升温至30℃～40℃，并保持一定时间，使制剂温度与搁板温度重合，放入无菌的过滤气体，控制制剂的含水量在1～5％，迅速封口即可。
冷冻干燥过程中可选择的最佳物理条件是首先将搁板降温至-30℃，维持3小时，然后使冻干箱内的真空度为0.2Pa，将搁板升温并严格控制在-2℃，保持18小时，将搁板升温至40℃放入无菌气体后，控制制剂的含水量为2％。
本发明所述的脉络宁冻干粉针剂每支10ml含相当于原生药量金银花10～100g、玄参20-200g、牛膝10-100g、石斛20-200g；每支脉络宁冻干粉针剂含主要有效成份滨嵩内酯不少于65μg，含肉桂酸不少于20mg，含绿原酸不少于2mg，含生物碱不少于20mg。
脉络宁冻干粉针剂临床用于治疗血管闭塞性脉管炎、脑血栓及下肢深静脉血栓，动脉硬化性闭塞症等疾病，疗效更显著，未引起不良反应。本发明所采用的提取工艺与现有技术相比，具有植物生药金银花、玄参、牛膝和石斛的有效部位提取更科学合理，提取工艺质量可控，制剂质量标准更高，并且冻干粉针剂的稳定性要比注射液好，脉络宁冻干粉针剂药物浓度高，便于运输、储存和使用。用本方法制备的脉络宁冻干粉针剂处于现代中药注射剂的先进水平。
以下实验例用于进一步说明本发明实验例1脉络宁冻干粉针剂的工艺条件筛选研究1、金银花、玄参、牛膝和石斛有效部位提取工艺的筛选文献报道脉络宁注射液中金银花、玄参、牛膝和石斛有效部位的提取是先将金银花、玄参、牛膝和石斛按比例配伍混合后，水浸煮，醇沉，乙酸乙酯萃取，水转溶。这种提取工艺的不足之处是四者混合后提取，影响金银花和石斛有效部位的提取，且成分过于复杂，中间体控制难度大；仅水煎醇沉，有效部位提取不全；以有机溶剂萃取，易残留对人体有害的有机溶剂等。为此，本实验对金银花、玄参、牛膝和石斛有效部位提取最佳工艺条件进行了比较研究，现总结如下单提工艺样品的制备(1)稀乙醇回流提取金银花有效部位称取金银花2.5kg，用30倍50％乙醇回流提取3次，每次3.0小时，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，再取上清液滤过，加水至200ml，即得金银花有效部位提取液A，供配液使用。
(2)乙醇回流结合水煎醇沉法提取玄参有效部位称取玄参2.5kg，采用25倍乙醇回流提取3次，每次2.5小时，得玄参有效部位提取液B；再将乙醇回流提取过的玄参分别用40倍的水煎煮3次，每次2.0小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液与上述提取液B合并，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩至稠膏状后，加水至250ml沉淀处理，过夜，取上清液滤过，即得玄参药用部位提取液C。
(3)水煎醇沉法提取牛膝有效部位称取牛膝2.5kg，采用20倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，每次2.5小时，滤过，滤液浓缩至200ml后，进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至200ml沉淀处理，取上清液滤过，即得牛膝药用部位提取液D，供配液使用。
(4)水煎醇沉法提取石斛有效部位称取石斛2.5kg，先用15倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，时间分别为2.0小时、1.5小时和1.0小时，滤过，滤液浓缩至100ml后进行两次醇沉，第一次使含醇量达60％，第二次使含醇量达80％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至200ml沉淀处理，取上清液滤过，即得石斛药用部位提取液E，供配液使用。
(5)金银花、玄参、牛膝和石斛有效部位提取混合液的制备将上述所得的金银花、玄参、牛膝和石斛药用部位提取液A、C、D和E混合均匀，然后加水至1000ml，调节pH值至6.5，滤过，即得脉络宁冻干粉针剂所用植物生药的有效部位提取液。
混提工艺样品的制备将金银花、玄参、牛膝和石斛各2.5kg充分混合后，加30倍的水浸煮3次，每次2小时，滤过，合并煎液，浓缩至半固体状，加乙醇沉淀，使最终含醇量为75％，取上清液浓缩至原体积的三分之一，以醋酸乙酯萃取12次，减压除尽醋酸乙酯，提取物加新鲜蒸馏水，搅拌，使溶于水的物质可转溶于水，冷藏，减压滤过，加1％的吐温-80增溶，加水至1000ml，调节pH值至6.5，滤过，即得。
每处理重复3次，实验结果(见表1)表明以滨嵩内酯和绿原酸计算，单独提取工艺所得滨嵩内酯和绿原酸的量均明显高于混提工艺所得二者的量。
表1 提取工艺对滨嵩内酯和绿原酸含量的影响
实验例2脉络宁冻干粉针剂的赋形剂选择向上述单独提取工艺所得的每毫升药用部位提取液中加入不同种类的赋形剂，经冷冻干燥制成冻干粉针剂的外观结果，见表2。
表2 不同赋形剂的影响(g/ml)
每处理重复3次，表3表明选用甘露醇为最佳赋形剂。
另据文献(高嵩玲等，脉络宁与甘露醇联合应用治疗病毒性脑炎(附179例病例分析)，实用中西医结合杂志，1995，8(7)425)报道脉络宁与甘露醇两药合用.有明显的减轻脑水肿，避免产生颅内高压的作用，本发明选用甘露醇，可兼有赋形剂与配伍两方面作用。
实验例3脉络宁冻干粉针剂与注射液的质量标准比较脉络宁冻干粉针剂比脉络宁注射液的质量标准有提高，其“含量测定”项下对比如表3表3“含量测定”方法与指标的比较
实验例4脉络宁冻干粉针剂含量测定方法(1)绿原酸的含量测定方法色谱条件与系统试用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水-甲醇-冰醋酸(80∶20∶0.6)为流动相；检测波长为330nm。理论板数按绿原酸计算，应不低于5000。
对照品溶液的制备 精密称取在105℃干燥至恒重的绿原酸对照品50mg，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。精密量取1ml，置100ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得(每1ml中含绿原酸10μg)。
测定法 精密量取本品5ml，置100ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀。精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取对照品溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。
本品每1ml含金银花提取物以绿原酸(C18H18O9)计，应不少于0.2mg。
(2)肉桂酸的含量测定方法色谱条件与系统试用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.3％磷酸盐缓冲液(60∶40)为流动相；检测波长为278nm。理论板数按肉桂酸计算，应不低于5000。
对照品溶液的制备 精密称取在105℃干燥至恒重的肉桂酸对照品30mg，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。精密量取1ml，置10ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得(每1ml中含肉桂酸60μg)。
测定法 精密量取本品3ml，置100ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀。精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取对照品溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。
本品每1ml含金银花提取物以肉桂酸(C9H80O)计，应不少于2.0mg。
(3)生物碱的含量测定方法对照品溶液的制备 精密称取在105℃干燥至恒重的石斛碱对照品10mg，置100ml量瓶中，加氯仿使溶解并稀释至刻度。
标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml，分别置分液漏斗中，用氯仿准确稀释至10.0ml，加入PH4.5缓冲液5.0ml和0.04％溴甲酚绿溶液1.0ml，剧烈振摇3min，静置30min，氯仿层经氯仿浸泡处理并干燥后的药棉滤过，取续滤液6.0ml加0.01N氢氧化钠无水乙醇液1.0ml，摇匀，即得(每1ml中含石斛碱2.0μg)。以氯仿为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录V B)，在波长620nm处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
测定法 精密吸取样品试液10.0ml，自“加入PH4.5缓冲液5.0ml”起，依法立即测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中相当于石斛碱的重量，计算，即得。
本品每1ml含生物碱以石斛碱(C27H30O16)计，应不少于2.0mg。
(4)滨嵩内酯的含量测定方法对照品溶液的制备 精密称取在105℃干燥至恒重的滨嵩内酯对照品30mg，置100ml量瓶中，加氯仿振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml中含滨嵩内酯0.3mg)。
供试品溶液的制备 精密量取本品10ml，置分液漏斗中，用氯仿振摇提取4次，每次10ml，合并提取液，置水浴中浓缩至干，残渣中精密加氯仿至1ml使溶解，即得。
测定法 照薄层扫描法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取，吸取对照品溶液3μl和6μl及供试品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-氯仿-浓氨溶液(1∶1∶1)的下层溶液为展开剂，展开，展距8cm，取出，吹干，再以环己烷-氯仿-醋酸乙酯(2∶3∶3)为展开剂，展开，展距18cm，取出，晾干，在紫外光灯下定位，进行扫描，波长λ＝343±2nm，测量斑点的吸收度积分值，按二点法计算，即得。
本品每1ml含滨嵩内酯(C11H10O4)应不少于6.5μg。
实验例5脉络宁冻干粉针剂与注射液稳定性的比较将本发明所述脉络宁冻干粉针剂和相应的脉络宁注射液同置于37℃恒温恒湿箱中存放。定时抽样检查(脉络宁注射液每天检查澄明度)，共3个月，检查项目如下外观检查脉络宁注射液一般观察颜色是否变深脉络宁冻干粉针剂是否变形萎缩，颜色是否变深澄明度检查脉络宁注射液灯检是否有沉淀物析出脉络宁冻干粉针剂取一瓶加10ml注射用水，观察溶解时间，20秒内为速溶，视为合格。灯检是否有沉淀物析出。
药液pH值检查脉络宁注射液用25型pH计测定药液pH值脉络宁冻干粉针剂取一瓶加10ml蒸馏水溶解后，用25型pH计测定药液pH值。
主要成分滨嵩内酯和绿原酸的含量测定按上述方法分别测定脉络宁注射液和脉络宁冻干粉针剂中的滨嵩内酯和绿原酸的含量。
表4结果显示脉络宁注射液稳定较差，加速试验60天即发生沉淀，pH值及滨嵩内酯和绿原酸的含量均明显下降。
将脉络宁冻干粉针剂置于37℃连续考察3个月，实验结果见表5。本发明制剂的外观、色泽、水溶性、pH值及滨嵩内酯和绿原酸的含量均无明显变化，质量稳定，另外每批含水量测定，均在2％以下。结果表示本发明制剂稳定性良好，优于脉络宁注射液。
表4 脉络宁注射液37℃加速试验结果
表 5脉络宁冻干粉针剂37℃加速试验结果
实验例6对全血比粘度的影响取家免30只，随机分为5组；用乌拉坦腹腔麻醉，做股静脉插管以备取血，给药前和给药0.5小时后各取1次；在硅化的离心管内加入0.1％肝素0.1ml制成肝素抗凝管；取4ml全血以L-100型血液粘度计在25℃下分别于80s-1至20s-1等不同切变率下测定全血比粘度。结果(见表6)表明，脉络宁冻干粉针剂在高切变率及低切变率下的血粘均比相同剂量的脉络宁注射液有明显降低。
表6 家兔全血比粘度降低效应的比较
实验例7血浆比粘度和红细胞比容分别在家免给药前后各取3ml血，抗凝；1500r/min离心5min，取上层血浆。采用毛细管法用L-100型血液粘度计在25℃下测定血浆比粘度。另取1ml血于比容管内3000r/min离心30min，测得红细胞比容。结果(见表7)表明，脉络宁冻干粉针剂比相同剂量的脉络宁注射液能更显著降低血浆比粘度和红细胞比容。
表7 家兔血浆比粘度和红细胞比容降低效应的比较
实验例8对结扎大脑中动脉产生脑梗死范围的影响参照文献(Minoru Y，Akira T，Takaaki.et al.Behaviral changesafter focal cerebral ischemia by left middle cerebral artery occlusionin ratst.Brain Rcs，1988，452(2)323)方法并加以改进小鼠经水合氯醛麻醉后，取侧卧位固定；在左侧耳眼连线上作0.6cm左右的切口，分离颞肌以暴露颞骨，并作一约2.0mm×2.0mm的骨窗，可见大脑中动脉(MCA)斜行向上，用加热的细不锈钢丝烫其根部，使其凝闭。给药组在MCA阻断前30 min经尾静脉给药，动物缝合伤口后单独饲养。24小时后断头取脑，去掉小脑、嗅球和低位脑干，行冠状切片，切为5片，放入0.5％的红四氮哩(TTC)磷酸盐溶液，在37℃孵育15min。正常组织染成红色，梗死组织为白色。分别准确称重，计算梗死范围以及梗死部分重量占整个大脑重量的百分比。
结果(见表8)表明，脉络宁冻干粉针剂比相同剂量的脉络宁注射液更显著降低了梗死范围。
表8 小鼠大脑中动脉阻断24h后脑梗死范围影响的比较(n＝10)
实验例9急性不完全性脑缺血时脑含水量、脑指数及毛细血管通透性按药理实验方法学(第二版，主编，徐叔云等，1994；947～948)制备结扎大鼠双侧颈总动脉形成急性实验性不完全脑缺血模型，假手术组不结扎动脉血管。双侧颈总动脉结扎3小时后，断头，开颅取脑，计算脑指数(脑指数＝脑重×100/体重)，然后在110℃烘箱中烘干至恒重，计算脑含水量率＝[(湿重-干重)/湿重]×100％。假手术组分离颈总动脉并穿线，但不结扎并由尾静脉注射伊文思蓝50mg/kg；缺血模型组及各药物实验组在结扎双侧颈总动脉前5min，由尾静脉注射伊文思蓝50mg/kg。结扎3小时后断头取脑称重，并浸泡于甲酰胺溶液中，在45℃恒温水浴中恒温72小时，使脑组织中色素全部浸出，取色素液用分光光度计于620nm进行比色测定，根据标准曲线计算出脑内伊文恩蓝含量(μg/g脑湿重)。结果(见表9)表明，脉络宁冻干粉针剂比相同剂量的脉络宁注射液更加降低了脑含水量、脑指数及脑内伊文恩蓝含量。
表9 结扎双侧颈总动脉的大鼠脑含水量、脑指数及血管通透性(n＝10)
通过对软脑膜毛细血管的观察，结果(见表10)表明，脉络宁冻干粉针剂比相同剂量的脉络宁注射液更明显增加软脑膜毛细血管的开放条数。提示脉络宁冻干粉针剂能更有效改善脑部微循环，增加血氧供应。
表10 大鼠软脑膜毛细血管微循环(n＝10)
实验例10对血压的影响取杂种犬12只，随机分为三组；用戊巴比妥钠静注麻醉，经股动脉插管入腹主动脉，通过TP-200T型压力换能器接于RM-6000多导生理记录仪(Nihon Koden)。直接读取腹主动脉收缩压(SAP)、舒张压(DAP)、平均动脉压(MAP)和心率(HR)。分别从股静脉滴注给药，各参数变化情况(见表11)表明脉络宁冻干粉针剂比相同剂量的脉络宁注射液能更有效降低血压，持续时间长。
表11 麻醉犬血压影响的比较
实施例1处方组成金银花 30kg玄参 40kg牛膝 30kg石斛 40kg甘露醇 1kg注射用水适量制成 10000ml制备方法1、金银花经拣选，称取30kg，用30倍50％乙醇回流提取3次，每次3.0小时，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，再取上清液滤过，加水至2000ml，即得金银花有效部位提取液A，供配液使用；2、称取玄参40kg，采用25倍乙醇回流提取3次，每次2.5小时，得玄参有效部位提取液B；再将乙醇回流提取过的玄参分别用40倍的水煎煮3次，每次2.0小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液与上述提取液B合并，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩至稠膏状后，加水至2500ml沉淀处理，过夜，取上清液滤过，即得玄参药用部位提取液C；
3、称取牛膝30kg，采用20倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，每次2.5小时，滤过，滤液浓缩至2000ml后，进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至2000ml沉淀处理，取上清液滤过，即得牛膝药用部位提取液D，供配液使用；4、称取石斛40kg，先用15倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，时间分别为2.0小时、1.5小时和1.0小时，滤过，滤液浓缩至1000ml后进行两次醇沉，第一次使含醇量达60％，第二次使含醇量达80％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至2000ml沉淀处理，取上清液滤过，即得石斛药用部位提取液E，供配液使用；5、金银花、玄参、牛膝和石斛有效部位提取混合液的制备将上述所得的金银花、玄参、牛膝和石斛药用部位提取液A、C、D和E混合均匀，然后加入甘露醇1kg，搅拌，溶解，滤过，加水至10000ml，再调节PH值至6.5，滤过，即得脉络宁冻干粉针剂所用植物生药的有效部位混合液；将上述脉络宁冻干粉针剂冻干所用植物生药的有效部位混合液按每瓶10ml分装后，未封口放入与冻干箱尺寸相应的金属盘内，对冻干箱进行灭菌处理，并将其搁板的温度降低至-30℃，迅速将装有制剂的金属盘放入冻干箱内，维持2小时，然后对冻干箱进行真空处理，使箱内的真空度为0.2Pa，再将搁板升温，并严格控制在共熔点-2℃以下，保持12小时，最后升温至40℃，并保持一定时间，使制剂温度与搁板温度重合，放入无菌的过滤气体，控制制剂的含水量在2％，迅速封口即可。
实施例2处方组成金银花 25kg玄参 60kg牛膝 40kg石斛 20kg甘露醇 0.5kg
葡萄糖 0.5kg注射用水适量制成 10000ml制备方法1、金银花经拣选，称取25kg，用40倍60％乙醇回流提取2次，每次3.0小时，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，再取上清液滤过，加水至2000ml，即得金银花有效部位提取液A，供配液使用；2、称取玄参60kg，采用25倍乙醇回流提取2次，每次2.5小时，得玄参有效部位提取液B；再将乙醇回流提取过的玄参分别用50倍的水煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达70％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液与上述提取液B合并，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩至稠膏状后，加水至2500ml沉淀处理，过夜，取上清液滤过，即得玄参药用部位提取液C；3、称取牛膝40kg，采用40倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，每次1.5小时，滤过，滤液浓缩至2000ml后，进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至2000ml沉淀处理，取上清液滤过，即得牛膝药用部位提取液D，供配液使用；4、称取石斛20kg，先用15倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，时间分别为2.0小时、2.0小时和1.5小时，滤过，滤液浓缩至1000ml后进行两次醇沉，第一次使含醇量达60％，第二次使含醇量达80％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至2000ml沉淀处理，取上清液滤过，即得石斛药用部位提取液E，供配液使用；5、金银花、玄参、牛膝和石斛有效部位提取混合液的制备将上述所得的金银花、玄参、牛膝和石斛药用部位提取液A、C、D和E混合均匀，然后加入甘露醇和葡萄糖各0.5kg，搅拌，溶解，滤过，加水至10000ml，再调节PH值至7.0，滤过，即得脉络宁冻干粉针剂所用植物生药的有效部位混合液；将上述脉络宁冻干粉针剂冻干所用植物生药的有效部位混合液按每瓶10ml分装后，未封口放入与冻干箱尺寸相应的金属盘内，对冻干箱进行灭菌处理，并将其搁板的温度降低至-35℃，迅速将装有制剂的金属盘放入冻干箱内，维持4小时，然后对冻干箱进行真空处理，使箱内的真空度为0.2Pa，再将搁板升温，并严格控制在共熔点-2℃以下，保持14小时，最后升温至35℃，并保持一定时间，使制剂温度与搁板温度重合，放入无菌的过滤气体，控制制剂的含水量在2％，迅速封口即可。
实施例3处方组成金银花 30kg玄参 50kg牛膝 35kg石斛 40kg水解明胶 0.5kg葡萄糖 0.5kg注射用水适量制成 10000ml制备方法1、金银花经拣选，称取30kg，用40倍70％乙醇回流提取2次，每次2.0小时，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，再取上清液滤过，加水至2000ml，即得金银花有效部位提取液A，供配液使用；2、称取玄参50kg，采用35倍乙醇回流提取3次，每次3小时，得玄参有效部位提取液B；再将乙醇回流提取过的玄参分别用40倍的水煎煮3次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液与上述提取液B合并，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩至稠膏状后，加水至2500ml沉淀处理，过夜，取上清液滤过，即得玄参药用部位提取液C；3、称取牛膝35kg，采用30倍的水浸泡过夜，再煎煮2次，每次3小时，滤过，滤液浓缩至2000ml后，进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至2000ml沉淀处理，取上清液滤过，即得牛膝药用部位提取液D，供配液使用；4、称取石斛40kg，先用10倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，时间分别为3.0小时、2.0小时和1.5小时，滤过，滤液浓缩至1000ml后进行两次醇沉，第一次使含醇量达60％，第二次使含醇量达75％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至2000ml沉淀处理，取上清液滤过，即得石斛药用部位提取液E，供配液使用；5、金银花、玄参、牛膝和石斛有效部位提取混合液的制备将上述所得的金银花、玄参、牛膝和石斛药用部位提取液A、C、D和E混合均匀，然后加入水解明胶和葡萄糖各0.5kg，搅拌，溶解，滤过，加水至10000ml，再调节PH值至7.0，滤过，即得脉络宁冻干粉针剂所用植物生药的有效部位混合液；将上述脉络宁冻干粉针剂冻干所用植物生药的有效部位混合液按每瓶10ml分装后，未封口放入与冻干箱尺寸相应的金属盘内，对冻干箱进行灭菌处理，并将其搁板的温度降低至-30℃，迅速将装有制剂的金属盘放入冻干箱内，维持3小时，然后对冻干箱进行真空处理，使箱内的真空度为0.2Pa，再将搁板升温，并严格控制在共熔点-2℃以下，保持11小时，最后升温至40℃，并保持一定时间，使制剂温度与搁板温度重合，放入无菌的过滤气体，控制制剂的含水量在2％，迅速封口即可。
实施例4处方组成金银花 40kg玄参30kg牛膝20kg石斛50kg右旋糖苷0.8kg蔗糖0.5kg
注射用水适量制成 10000ml制备方法1、金银花经拣选，称取40kg，用30倍60％乙醇回流提取2次，每次4.0小时，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，再取上清液滤过，加水至2000ml，即得金银花有效部位提取液A，供配液使用；2、称取玄参30kg，采用25倍乙醇回流提取3次，每次2.5小时，得玄参有效部位提取液B；再将乙醇回流提取过的玄参分别用50倍的水煎煮3次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达70％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液与上述提取液B合并，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩至稠膏状后，加水至2500ml沉淀处理，过夜，取上清液滤过，即得玄参药用部位提取液C；3、称取牛膝20kg，采用40倍的水浸泡过夜，再煎煮2次，每次3小时，滤过，滤液浓缩至2000ml后，进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至2000ml沉淀处理，取上清液滤过，即得牛膝药用部位提取液D，供配液使用；4、称取石斛50kg，先用15倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，时间分别为2.0小时、2.0小时和1.5小时，滤过，滤液浓缩至1000ml后进行两次醇沉，第一次使含醇量达60％，第二次使含醇量达80％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至2000ml沉淀处理，取上清液滤过，即得石斛药用部位提取液E，供配液使用；5、金银花、玄参、牛膝和石斛有效部位提取混合液的制备将上述所得的金银花、玄参、牛膝和石斛药用部位提取液A、C、D和E混合均匀，然后加入右旋糖苷0.8kg，蔗糖0.5kg，搅拌，溶解，滤过，加水至10000ml，再调节PH值至7.5，滤过，即得脉络宁冻干粉针剂所用植物生药的有效部位混合液；将上述脉络宁冻干粉针剂冻干所用植物生药的有效部位混合液按每瓶10ml分装后，未封口放入与冻干箱尺寸相应的金属盘内，对冻干箱进行灭菌处理，并将其搁板的温度降低至-30℃，迅速将装有制剂的金属盘放入冻干箱内，维持3小时，然后对冻干箱进行真空处理，使箱内的真空度为0.2Pa，再将搁板升温，并严格控制在共熔点-2℃以下，保持15小时，最后升温至40℃，并保持一定时间，使制剂温度与搁板温度重合，放入无菌的过滤气体，控制制剂的含水量在2％，迅速封口即可。
实施例5处方组成金银花 25kg玄参 25kg牛膝 25kg石斛 25kg右旋糖苷 0.5kg甘露醇 0.5kg注射用水适量制成 10000ml制备方法1、金银花经拣选，称取25kg，用40倍60％乙醇回流提取3次，每次4.0小时，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，再取上清液滤过，加水至2000ml，即得金银花有效部位提取液A，供配液使用；2、称取玄参25kg，采用30倍乙醇回流提取3次，每次2.5小时，得玄参有效部位提取液B；再将乙醇回流提取过的玄参分别用50倍的水煎煮3次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达70％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液与上述提取液B合并，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩至稠膏状后，加水至2500ml沉淀处理，过夜，取上清液滤过，即得玄参药用部位提取液C；3、称取牛膝25kg，采用40倍的水浸泡过夜，再煎煮2次，每次3小时，滤过，滤液浓缩至2000ml后，进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至2000ml沉淀处理，取上清液滤过，即得牛膝药用部位提取液D，供配液使用；4、称取石斛25kg，先用15倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，时间分别为2.0小时、2.0小时和1.5小时，滤过，滤液浓缩至1000ml后进行两次醇沉，第一次使含醇量达60％，第二次使含醇量达80％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至2000ml沉淀处理，取上清液滤过，即得石斛药用部位提取液E，供配液使用；5、金银花、玄参、牛膝和石斛有效部位提取混合液的制备将上述所得的金银花、玄参、牛膝和石斛药用部位提取液A、C、D和E混合均匀，然后加入右旋糖苷0.5kg，甘露醇0.5kg，搅拌，溶解，滤过，加水至10000ml，再调节PH值至7.5，滤过，即得脉络宁冻干粉针剂所用植物生药的有效部位混合液；将上述脉络宁冻干粉针剂冻干所用植物生药的有效部位混合液按每瓶10ml分装后，未封口放入与冻干箱尺寸相应的金属盘内，对冻干箱进行灭菌处理，并将其搁板的温度降低至-30℃，迅速将装有制剂的金属盘放入冻干箱内，维持3小时，然后对冻干箱进行真空处理，使箱内的真空度为0.2Pa，再将搁板升温，并严格控制在共熔点-2℃以下，保持13小时，最后升温至35℃，并保持一定时间，使制剂温度与搁板温度重合，放入无菌的过滤气体，控制制剂的含水量在2％，迅速封口即可。
实施例6处方组成金银花 25kg玄参25kg牛膝25kg石斛25kg甘露醇 1.0kg注射用水适量制成10000ml
制备方法1、金银花经拣选，称取25kg，用40倍60％乙醇回流提取3次，每次4.0小时，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，再取上清液滤过，加水至2000ml，即得金银花有效部位提取液A，供配液使用；2、称取玄参25kg，采用30倍乙醇回流提取3次，每次2.5小时，得玄参有效部位提取液B；再将乙醇回流提取过的玄参分别用50倍的水煎煮3次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达70％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液与上述提取液B合并，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩至稠膏状后，加水至2500ml沉淀处理，过夜，取上清液滤过，即得玄参药用部位提取液C；3、称取牛膝25kg，采用40倍的水浸泡过夜，再煎煮2次，每次3小时，滤过，滤液浓缩至2000ml后，进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至2000ml沉淀处理，取上清液滤过，即得牛膝药用部位提取液D，供配液使用；4、称取石斛25kg，先用15倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，时间分别为2.0小时、2.0小时和1.5小时，滤过，滤液浓缩至1000ml后进行两次醇沉，第一次使含醇量达60％，第二次使含醇量达80％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至2000ml沉淀处理，取上清液滤过，即得石斛药用部位提取液E，供配液使用；5、金银花、玄参、牛膝和石斛有效部位提取混合液的制备将上述所得的金银花、玄参、牛膝和石斛药用部位提取液A、C、D和E混合均匀，然后加入甘露醇1.0kg，搅拌，溶解，滤过，加水至10000ml，再调节PH值至7.5，滤过，即得脉络宁冻干粉针剂所用植物生药的有效部位混合液；将上述脉络宁冻干粉针剂冻干所用植物生药的有效部位混合液按每瓶10ml分装后，未封口放入与冻干箱尺寸相应的金属盘内，对冻干箱进行灭菌处理，并将其搁板的温度降低至-30℃，迅速将装有制剂的金属盘放入冻干箱内，维持3小时，然后对冻干箱进行真空处理，使箱内的真空度为0.2Pa，再将搁板升温，并严格控制在共熔点-2℃以下，保持13小时，最后升温至35℃，并保持一定时间，使制剂温度与搁板温度重合，放入无菌的过滤气体，控制制剂的含水量在2％，迅速封口即可。
实施例7处方组成金银花 30kg玄参 30kg牛膝 30kg石斛 30kg甘露醇 1.0kg注射用水适量制成 10000ml制备方法1、金银花经拣选，称取30kg，用35倍60％乙醇回流提取2次，每次4.0小时，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，再取上清液滤过，加水至2000ml，即得金银花有效部位提取液A，供配液使用；2、称取玄参30kg，采用25倍乙醇回流提取2次，每次2.5小时，得玄参有效部位提取液B；再将乙醇回流提取过的玄参分别用50倍的水煎煮3次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达70％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液与上述提取液B合并，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩至稠膏状后，加水至2500ml沉淀处理，过夜，取上清液滤过，即得玄参药用部位提取液C；3、称取牛膝30kg，采用30倍的水浸泡过夜，再煎煮2次，每次3小时，滤过，滤液浓缩至2000ml后，进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至2000ml沉淀处理，取上清液滤过，即得牛膝药用部位提取液D，供配液使用；4、称取石斛30kg，先用15倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，时间分别为2.0小时、2.0小时和1.5小时，滤过，滤液浓缩至1000ml后进行两次醇沉，第一次使含醇量达60％，第二次使含醇量达80％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后，加水至2000ml沉淀处理，取上清液滤过，即得石斛药用部位提取液E，供配液使用；5、金银花、玄参、牛膝和石斛有效部位提取混合液的制备将上述所得的金银花、玄参、牛膝和石斛药用部位提取液A、C、D和E混合均匀，然后加入甘露醇1.0kg，搅拌，溶解，滤过，加水至10000ml，再调节PH值至7.5，滤过，即得脉络宁冻干粉针剂所用植物生药的有效部位混合液；将上述脉络宁冻干粉针剂冻干所用植物生药的有效部位混合液按每瓶10ml分装后，未封口放入与冻干箱尺寸相应的金属盘内，对冻干箱进行灭菌处理，并将其搁板的温度降低至-30℃，迅速将装有制剂的金属盘放入冻干箱内，维持3小时，然后对冻干箱进行真空处理，使箱内的真空度为0.2Pa，再将搁板升温，并严格控制在共熔点-2℃以下，保持15小时，最后升温至30℃，并保持一定时间，使制剂温度与搁板温度重合，放入无菌的过滤气体，控制制剂的含水量在2％，迅速封口即可。
权利要求
1.一种治疗血管闭塞性脉管炎的冻干粉针剂，其特征在于每支10毫升装的冻干粉针剂含相当于原生药量金银花10-100g、玄参20-200g、牛膝10-100g、石斛20-200g。
2.一种治疗血管闭塞性脉管炎的冻干粉针剂的制备方法，其特征在于该冻干粉针是由药用组分为植物生药金银花、玄参、牛膝和石斛的药用部位加赋形剂经冷冻干燥获得。
3.根据权利要求2所述的一种治疗血管闭塞性脉管炎的冻干粉针的制备方法，其特征在于该方法中赋形剂采用甘露醇、乳糖、右旋糖酐、水解明胶、葡萄糖、蔗糖或它们的混合物。
4.根据权利要求2所述的一种治疗血管闭塞性脉管炎的冻干粉针的制备方法，其特征在于该方法为金银花采用20～40倍的40％～70％稀乙醇回流提取2～4次，每次2～4小时，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，再取上清液滤过，即得金银花有效部位提取液A，供配液使用；玄参先采用20～40倍乙醇回流提取2～4次，每次2～4小时，得玄参有效部位提取液B；再将乙醇回流提取过的玄参用20～50倍的水煎煮2～4次，每次2～4小时，滤过，滤液浓缩后进行2～3次醇沉，每次使含醇量达50％～75％，然后取上清液滤过，滤液与上述提取液B合并，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，取上清液滤过，即得玄参药用部位提取液C，供配液使用；牛膝先采用20～40倍的水浸泡过夜，再煎煮2～4次，每次1～3小时，滤过，滤液浓缩后进行2～3次醇沉，每次使含醇量达50％～75％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，取上清液滤过，即得牛膝药用部位提取液D，供配液使用；石斛先采用5～15倍的水浸泡过夜，再加15～30倍的水煎煮2～4次，每次1～3小时，滤过，滤液浓缩后进行2～3次醇沉，每次使含醇量达60％～80％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，取上清液滤过，即得石斛药用部位提取液E，供配液使用；将上述所得提取液A、C、D和E混匀，即得冻干粉针剂所用植物生药的有效部位提取液，向有效部位提取液中按每毫升加入赋形剂0.05～0.5克，搅拌，溶解，滤过，并加注射用水适量，再调节PH值至4～9，即得该冻干粉针剂冻干所用植物生药的有效部位混合液，冷冻干燥制成冻干粉针。
5.根据权利要求4所述的一种治疗血管闭塞性脉管炎的冻干粉针的制备方法，其特征在于该方法为金银花采用30倍的50％稀乙醇回流提取3次，每次3.0小时，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，再取上清液滤过，即得金银花有效部位提取液A，供配液使用；玄参先采用25倍乙醇回流提取3次，每次2.5小时，得玄参有效部位提取液B；再将乙醇回流提取过的玄参用40倍的水煎煮3次，每次2小时，滤过，滤液浓缩后进行2次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，然后取上清液滤过，滤液与上述提取液B合并，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，取上清液滤过，即得玄参药用部位提取液C，供配液使用；牛膝先采用20倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，每次2.5小时，滤过，滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，取上清液滤过，即得牛膝药用部位提取液D，供配液使用；石斛先采用15倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，时间分别为2.0小时、1.5小时和1.0小时，滤过，滤液浓缩后进行2次醇沉，第一次使含醇量达60％，第二次使含醇量达80％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，取上清液滤过，即得石斛药用部位提取液E，供配液使用；将上述所得提取液A、C、D和E混匀，即得冻干粉针剂所用植物生药的有效部位提取液，向有效部位提取液中按每毫升加入赋形剂甘露醇0.1克，搅拌，溶解，滤过，并加注射用水适量，再调节PH值至6.5，即得该冻干粉针剂冻干所用植物生药的有效部位混合液，冷冻干燥制成冻干粉针。
6.根据权利要求4所述的一种治疗血管闭塞性脉管炎的冻干粉针的制备方法，其特征在于该方法为金银花采用40倍的60％稀乙醇回流提取2次，每次3.0小时，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，再取上清液滤过，即得金银花有效部位提取液A，供配液使用；玄参先采用25倍乙醇回流提取2次，每次2.5小时，得玄参有效部位提取液B；再将乙醇回流提取过的玄参用50倍的水煎煮3次，每次2小时，滤过，滤液浓缩后进行2次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，然后取上清液滤过，滤液与上述提取液B合并，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，取上清液滤过，即得玄参药用部位提取液C，供配液使用；牛膝先采用40倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，每次1.5小时，滤过，滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，取上清液滤过，即得牛膝药用部位提取液D，供配液使用；石斛先采用15倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，时间分别为2.0小时、2.0小时和1.5小时，滤过，滤液浓缩后进行2次醇沉，第一次使含醇量达60％，第二次使含醇量达80％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，取上清液滤过，即得石斛药用部位提取液E，供配液使用；将上述所得提取液A、C、D和E混匀，即得冻干粉针剂所用植物生药的有效部位提取液，向有效部位提取液中按每毫升加入赋形剂甘露醇和葡萄糖共0.1克，搅拌，溶解，滤过，并加注射用水适量，再调节PH值至7.0，即得该冻干粉针剂冻干所用植物生药的有效部位混合液，冷冻干燥制成冻干粉针。
7.根据权利要求4所述的一种治疗血管闭塞性脉管炎的冻干粉针的制备方法，其特征在于该方法为金银花采用40倍的60％稀乙醇回流提取3次，每次4.0小时，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，再取上清液滤过，即得金银花有效部位提取液A，供配液使用；玄参先采用30倍乙醇回流提取3次，每次2.5小时，得玄参有效部位提取液B；再将乙醇回流提取过的玄参用50倍的水煎煮3次，每次2.0小时，滤过，滤液浓缩后进行2次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达70％，然后取上清液滤过，滤液与上述提取液B合并，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，取上清液滤过，即得玄参药用部位提取液C，供配液使用；牛膝先采用40倍的水浸泡过夜，再煎煮2次，每次3.0小时，滤过，滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，取上清液滤过，即得牛膝药用部位提取液D，供配液使用；石斛先采用15倍的水浸泡过夜，再煎煮3次，时间分别为2.0小时、2.0小时和1.5小时，滤过，滤液浓缩后进行2次醇沉，第一次使含醇量达60％，第二次使含醇量达80％，冷藏，然后取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，取上清液滤过，即得石斛药用部位提取液E，供配液使用；将上述所得提取液A、C、D和E混匀，即得冻干粉针剂所用植物生药的有效部位提取液，向有效部位提取液中按每毫升加入赋形剂甘露醇和右旋糖苷各0.1克，搅拌，溶解，滤过，并加注射用水适量，再调节PH值至7.5，即得该冻干粉针剂冻干所用植物生药的有效部位混合液，冷冻干燥制成冻干粉针。
8.根据权利要求4、5、6或7所述的一种治疗血管闭塞性脉管炎的冻干粉针的制备方法，其特征在于该方法中所述的冷冻干燥方法为将冻干所用植物生药的有效成分混合液按每瓶定量分装后，未封口放入冻干箱的金属盘内，并将其搁板的温度降低至-25℃-50℃，迅速将装有制剂的金属盘放入冻干箱内，维持1-6小时，然后对冻干箱进行真空处理，使箱内的真空度为0.2-0.5Pa，再将搁板升温，并严格控制在共熔点-2℃以下，保持10-24小时，最后升温至30℃～40℃，并保持一定时间，使制剂温度与搁板温度重合，放入无菌的过滤气体，控制制剂的含水量在1-5％，迅速封口即可。
9.根据权利要求8所述的一种治疗血管闭塞性脉管炎的冻干粉针的制备方法，其特征在于该方法中所述的冷冻干燥方法为将冻干所用植物生药的有效成分混合液按每瓶定量分装后，未封口放入冻干箱的金属盘内，并将其搁板的温度降低至-30℃，迅速将装有制剂的金属盘放入冻干箱内，维持2小时，然后对冻干箱进行真空处理，使箱内的真空度为0.3Pa，再将搁板升温，并严格控制在共熔点-2℃以下，保持12小时，最后升温至40℃，并保持一定时间，使制剂温度与搁板温度重合，放入无菌的过滤气体，控制制剂的含水量在2％，迅速封口即可。
10.根据权利要求8所述的一种治疗血管闭塞性脉管炎的冻干粉针的制备方法，其特征在于该方法中所述的冷冻干燥方法为将冻干所用植物生药的有效成分混合液按每瓶定量分装后，未封口放入冻干箱的金属盘内，并将其搁板的温度降低至-35℃，迅速将装有制剂的金属盘放入冻干箱内，维持4小时，然后对冻干箱进行真空处理，使箱内的真空度为0.2Pa，再将搁板升温，并严格控制在共熔点-2℃以下，保持14小时，最后升温至35℃，并保持一定时间，使制剂温度与搁板温度重合，放入无菌的过滤气体，控制制剂的含水量在2％，迅速封口即可。
11.根据权利要求8所述的一种治疗血管闭塞性脉管炎的冻干粉针的制备方法，其特征在于该方法中所述的冷冻干燥方法为将冻干所用植物生药的有效成分混合液按每瓶定量分装后，未封口放入冻干箱的金属盘内，并将其搁板的温度降低至-30℃，迅速将装有制剂的金属盘放入冻干箱内，维持3小时，然后对冻干箱进行真空处理，使箱内的真空度为0.2Pa，再将搁板升温，并严格控制在共熔点-2℃以下，保持13小时，最后升温至35℃，并保持一定时间，使制剂温度与搁板温度重合，放入无菌的过滤气体，控制制剂的含水量在2％，迅速封口即可。
12.根据权利要求8所述的一种治疗血管闭塞性脉管炎的冻干粉针的制备方法，其特征在于该方法中所述的冷冻干燥过程可选择的最佳物理条件是首先将搁板降温至-30℃，维持3小时，然后使冻干箱内的真空度0.2Pa，将搁板升温并严格控制在-2℃，保持18小时，将搁板升温至40℃放入无菌气体后，控制制剂的含水量为2％。
全文摘要
本发明公开了一种脉络宁冻干粉针剂型及其制备方法，脉络宁冻干粉针是用植物生药金银花、玄参、牛膝和石斛的药用部位加赋形剂制备成冻干粉针剂，其中金锒花的药用部位采用稀乙醇回流提取；玄参的药用部位采用乙醇回流结合水煎醇沉法提取；牛膝的药用部位采用水煎醇沉法提取；石斛的药用部位采用水煎醇沉法提取。与现有的同类脉络宁制剂相比，脉络宁冻干粉针剂具有药用部位提取更科学合理，稳定性好，质量标准更高，药效更好，毒性更低，并且运输、存放和使用更方便的优点。
文档编号A61P9/14GK1654062SQ20041003943
公开日2005年8月17日 申请日期2004年2月12日 优先权日2004年2月12日
发明者李亚平, 任武贤, 李亚政, 冯伟, 隋红, 卫银波 申请人:山西亚宝药业集团股份有限公司, 中国科学院上海药物研究所