专利名称：治疗乙肝的注射液及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗乙肝的注射液及其制备工艺。
背景技术：
现在用于治疗乙肝的同类品种只有苦参碱注射液和苦参素(氧化苦参碱)注射液两种，这两个品种均是由苦参或苦豆子药材中提取分离出的单一有效成分组成的，它们存在成本高(3000元/kg，)和资源利用不合理的缺点。
发明内容
本发明为了解决同类产品成本高和资源利用不合理的缺点，提供一种治疗乙肝的注射液及其制备方法。本发明的治疗乙肝的注射液为1～5％的苦参总碱水溶液。它按照下述步骤进行制备a、将去除泥土、砂石及其它杂质的苦参粉碎成粗粉；b、用浓度为0.1～0.3％的盐酸对苦参粗粉进行渗漉，收集渗漉液；c、用碱调节渗漉液的pH值为6～8，过滤；d、将滤液通过H+型阳离子交换树脂，用浓度为3～10％的氨水洗脱阳树脂，收集洗脱液；e、用酸调节洗脱液的pH值为酸性，过滤；f、滤液通过OH-型阴离子交换树脂，收集流出液；g、将流出液通过H+型阳离子交换树脂，用浓度为3～10％的氨水洗脱阳离子交换树脂，收集洗脱液浓缩至干，得到黄色或黄棕色固态苦参总碱；h、按照苦参总碱1～5g、注射水100ml的比例配成苦参总碱水溶液，用盐酸调节苦参总碱水溶液的pH值为4.0～4.2；i、加入浓度为0.1～0.5％的活性炭，在80～100℃的条件下加热30～60分钟，过滤至澄明；j、灌封，以100℃流通蒸汽加热30～60分钟，得到无色注射液。本发明的苦参总碱是经过特殊工艺提取出来的，它具有如下优点(1)含量高两次pH梯度沉淀和阴树脂的进一步除杂质使苦参总碱的含量提高，经过上述除去杂质的苦参总碱水溶液，再通过阳离子交换树脂对苦参总碱进一步富集，使苦参总碱的含量进一步提高，在收率不变的情况下比已有提取方法的含量(70％)提高10％以上；(2)颜色浅性状由现有工艺的棕褐色膏状物改变为黄色或黄棕色固体；(3)低能耗以往树脂法需要将吸附生物碱的阳离子交换树脂出柱干燥，干燥周期长、能耗高，本发明的工艺流程中仅最后一步需要加热浓缩，大大降低了能源消耗；(4)无污染、成本低本发明首次研究清楚苦参总碱与共存杂质理化性质的区别，利用pH梯度沉淀法和阴离子树脂去除杂质而不是应用有机溶媒提纯，采用水作为溶剂，成本降低、不污染环境，而且所得产物中没有有机溶媒残留；(5)毒性低小鼠LD50为893.3mg·kg-1，而现有工艺小鼠LD50为298.5mg·kg-1，毒性降低了3倍。苦参具有解毒、清热、利湿、祛风燥湿、杀虫等作用，氧化苦参碱具有抗HBV及HCV、改善肝细胞功能、抗肝纤维化、调节免疫功能及抗细胞凋亡的作用。本发明将氧化苦参碱和苦参碱作为治疗乙肝的主要有效成分，集两者疗效于一体，使两者相辅相成，达到治疗乙肝的最佳效果。本发明具有如下优点(1)资源利用合理以苦参总碱为主要有效成分治疗乙肝，其中苦参总碱含氧化苦参碱约60％、苦参碱5％，资源利用比单一应用有效成分更合理；(2)成本低苦参碱3000元/kg，氧化苦参碱3000元/kg，而苦参总碱800元/kg，成本降低了73％；(3)颜色浅所得注射液为无色水针；(4)疗效好注射液对HepG22.2.15细胞分泌的HbsAg和HbeAg均有抑制作用；对鸭乙型肝炎病毒感染亦有治疗作用；对小鼠CCl4急性肝损伤具有明显保护作用。
图1为苦参药材的指纹图，图2为本发明提取的苦参总碱的指纹图，图3为本发明注射液的指纹图。
具体实施例方式具体实施方式
一本实施方式的治疗乙肝的注射液为1～5％的苦参总碱水溶液，即苦参总碱1～5g、注射用水100ml制成的水溶液。
具体实施方式
二本实施方式的注射液为1％的苦参总碱水溶液，即苦参总碱1g、注射用水100ml制成的水溶液。
具体实施方式
三本实施方式按照下述步骤制备注射液a、将去除泥土、砂石及其它杂质的苦参粉碎成粗粉；b、用浓度为0.1～0.3％的盐酸对苦参粗粉进行渗漉，收集渗漉液；c、用碱调节渗漉液的pH值为6～8，过滤；d、将滤液通过H+型阳离子交换树脂，用浓度为3～10％的氨水洗脱阳树脂，收集洗脱液；e、用酸调节洗脱液的pH值为酸性，过滤；f、滤液通过OH-型阴离子交换树脂，收集流出液；g、将流出液通过H+型阳离子交换树脂，用浓度为3～10％的氨水洗脱阳离子交换树脂，收集洗脱液浓缩至干，得到黄色或黄棕色固态苦参总碱；h、按照苦参总碱1～5g、注射水100ml的比例配成苦参总碱水溶液，用盐酸调节苦参总碱水溶液的pH值为4.0～4.2；i、加入浓度为0.1～0.5％的活性炭，在80～100℃的条件下加热30～60分钟，过滤至澄明；j、灌封，以100℃流通蒸汽加热30～60分钟，得到无色注射液，即乙肝康注射液。所述H+型阳离子交换树脂为H+型732树脂或H+型110树脂；OH-型阴离子交换树脂为OH-型717树脂或OH-型330树脂。用高效液相法测试所得的苦参总碱和注射液，从谱图可以看出本发明所得苦参总碱指纹图(图2)、注射液指纹图(图3)与苦参药材指纹图(图1)相似度符合要求。
具体实施方式
四本实施方式按照下述步骤进行a、将去除泥土、砂石及其它杂质的苦参粉碎成粗粉；b、用浓度为0.2％的盐酸对苦参粗粉在常温常压下进行渗漉，收集渗漉液；c、用氨水调节渗漉液的pH值为7，过滤；d、将滤液通过H+型110树脂，用浓度为8％的氨水洗脱110树脂，收集洗脱液；e、用盐酸调节洗脱液的pH值为2，过滤；f、滤液通过OH-型330树脂，收集流出液；g、将流出液通过H+型110树脂，用浓度为8％的氨水洗脱110树脂，收集洗脱液浓缩至干，得到黄色或黄棕色固态苦参总碱；h、按照苦参总碱1g、注射水100ml的比例配成苦参总碱水溶液，用盐酸调节苦参总碱水溶液的pH值为4.1；i、加入浓度为0.8％的活性炭，在100℃的条件下加热30分钟，过滤至澄明；j、灌封，以100℃流通蒸汽加热30分钟，得到无色水针，即乙肝康注射液。该注射液每支5ml，含苦参总碱50mg，应为标示量的90.0～110.0。
该注射液经中国药品生物制品检定所药理室进行药效学毒理研究结论如下乙肝康注射液在0.25～1mg·ml-1的剂量范围内，给药3、6、9天对HepG22.2.15细胞分泌的HbsAg和HbeAg均有一定的抑制作用，随着剂量的增加抑制作用也加强，苦参碱在0.025±0.5mg·ml-1的剂量范围内也有抑制作用。接触细胞9天内，乙肝康注射对HbsAg的IC50和SI的平均值分别为0.527mg·ml-1和3.35；而苦参碱为0.222mg·ml-1和3.83。接触细胞9天后，乙肝康注射对HbeAg的IC50和SI分别为0.704mg·ml-1和2.5；而苦参碱为0.286mg·ml-1和2.69。乙肝康注射液和苦参碱注射液对培养的HepG22.2.15细胞的TC50分别为1.76±0.50和0.77±0.19mg·ml-1。
乙肝康注射液100mg/kg腹腔注射，对鸭血清DHBV-DNA有非常显著的抑制作用。(P＜0.05)苦参碱注射液50mg/kg抑制作用不明显，100mg/kg有显著抑制作用，拉米夫啶50mg·ml-1，有显著抑制作用。
乙肝康注射液高剂量组(100mg/kg/d)连续给药7天，具有明显的抑制CCl4致急性肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶(P＜0.05)和谷草转氨酶(P＜0.01)升高的作用。中、低剂量(50，25mg/kg/d)抑制谷丙转氨酶不明显(P＞0.05)，但具有明显的抑制谷草转氨酶作用(P＜0.01)；50mg/kg/d的苦参碱降酶作用不及乙肝康注射液中剂量组(50mg/kg/d)。100mg/kg/d的乙肝康注射液连续给药7天对小鼠CCl4急性肝损伤具有明显的保护作用，相同临床用量倍数的乙肝康注射液的降酶作用强于苦参碱。
本发明的注射液经药效学毒理研究表明乙肝康注射液对HepG22.2.15细胞分泌的HbsAg和HbeAg均有一定的抑制作用；乙肝康注射液对鸭乙型肝炎病毒感染有治疗作用；乙肝康注射液对小鼠CCl4急性肝损伤有明显保护作用。乙肝康注射液对小鼠静脉注射的LD50为114.49mg/kg，95％可信限为105.46～124.36mg/kg。
权利要求
1.治疗乙肝的注射液，其特征在于它为1～5％的苦参总碱水溶液。
2.根据权利要求1所述的治疗乙肝的注射液，其特征在于它为1％的苦参总碱水溶液。
3.治疗乙肝的注射液的制备方法，其特征在于它按照下述步骤进行制备a、将去除泥土、砂石及其它杂质的苦参粉碎成粗粉；b、用浓度为0.1～0.3％的盐酸对苦参粗粉进行渗漉，收集渗漉液；c、用碱调节渗漉液的pH值为6～8，过滤；d、将滤液通过H+型阳离子交换树脂，用浓度为3～10％的氨水洗脱阳树脂，收集洗脱液；e、用酸调节洗脱液的pH值为酸性，过滤；f、滤液通过OH-型阴离子交换树脂，收集流出液；g、将流出液通过H+型阳离子交换树脂，用浓度为3～10％的氨水洗脱阳离子交换树脂，收集洗脱液浓缩至干，得到黄色或黄棕色固态苦参总碱；h、按照苦参总碱1～5g、注射水100ml的比例配成苦参总碱水溶液，用盐酸调节苦参总碱水溶液的pH值为4.0～4.2；i、加入浓度为0.1～0.5％的活性炭，在80～100℃的条件下加热30～60分钟，过滤至澄明；j、灌封，以100℃流通蒸汽加热30～60分钟，得到无色注射液。
4.根据权利要求3所述的治疗乙肝的注射液的制备方法，其特征在于所述H+型阳离子交换树脂为H+型732树脂或H+型110树脂。
5.根据权利要求3所述的治疗乙肝的注射液的制备方法，其特征在于所述OH-型阴离子交换树脂为OH-型717树脂或OH-型330树脂。
全文摘要
治疗乙肝的注射液及其制备方法，它涉及一种注射液及其制备工艺。本发明的注射液为1～5％的苦参总碱水溶液，其制备步骤为a.将苦参粉碎成粗粉；b.用盐酸对苦参粗粉进行渗漉；c.用碱调节渗漉液的pH值，过滤；d.将滤液通过H
文档编号A61P31/00GK1593602SQ200410043718
公开日2005年3月16日 申请日期2004年7月16日 优先权日2004年7月16日
发明者于喜水, 王有志 申请人:黑龙江省医药工业研究所, 于喜水, 王有志