一种具有治疗心绞痛和/或心律失常双向作用的中药组合物的制作方法

专利名称：一种具有治疗心绞痛和/或心律失常双向作用的中药组合物的制作方法
技术领域：
本发明属于中药领域，主要提供一种由三七、灯盏花、回心草组成的具有明显的抗心肌缺血、心律失常作用的中药组合物，以及由三七、灯盏花、回心草经提取、浓缩、精制得到各药物活性成分，即三七皂苷、黄酮类灯盏花素、回心草生物碱、氨基酸、豆甾醇等成分组成的组合物。具体涉及它们在治疗各种原因引起的心绞痛、心律失常症状的应用及其制备抗心绞痛和/或心律失常产品的应用。
背景技术：
目前国内对传统医药抗心肌缺血的研究较多集中在其抗高血脂、缓解动脉粥样硬化等方面。事实上，由于基础和临床研究的进展，近年来心脑血管疾病在发达国家中的发病率和死亡率已明显降低，死亡率由80年代前的20/106降至现在的12.2/106，但是我国的心、脑血管疾病发病率不仅未下降，反呈上升趋势，北京地区自上世纪50年代到现在，心血管疾病死亡增长了3至4倍，目前仅心血管疾病死亡数即占总死亡的50％以上，成为北京地区的第一死亡原因。
当今，高血压、高血脂、高凝状态和AS已有相应的有效防治措施，其病死率显著降低，但心肌梗塞及猝死至今尚无有效的防治方法。三七(Panax notoginseng)、灯盏花(Herbaerigeronis)和回心草(Rhodobryum roseum Limp)均为具有地方特色和丰富资源的天然药物。我们的研究表明，由三七、灯盏花、回心草组成的复合物对各种原因所致的心肌缺血、心律失常具有较好的治疗作用，而且资源丰富、价格合理、无任何毒副作用。由三七、灯盏花、回心草组成的中药组合物“七花心益康”可增强机体的耐缺氧能力，有效减少心肌缺血大鼠心电图S-T段的下移，降低血清中GOT、LDH、CK活性以及心肌组织中MDA含量，并提高SOD活性，延缓心律失常的出现时间，降低室颤发生率，具有明显的抗心肌缺血和/或心律失常的双向作用。是一种具有潜在优势的、有特色的一类心血管系统新药，具有较好的市场前景。

发明内容
本发明首次公开了三七、灯盏花、回心草的组合物及其活性成分以任何比例组合用于治疗西医范畴的以心绞痛和/或心律失常症状为主的心血管系统疾病。
可以按照常规的制剂工艺，将三七、灯盏花、回心草药材粉碎后加入常规的赋性剂、调味剂、崩解剂、防腐剂、润滑剂、湿润剂、粘合剂、溶剂、增稠剂、增溶剂等药物辅料，制成任何一种适合于临床上使用的剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液体制剂、注射剂等。
可以将三七、灯盏花、回心草经提取、浓缩、精制得到各药物活性成分，即三七皂苷、黄酮类灯盏花素、回心草氨基酸、豆甾醇、生物碱等成分按任何比例组成组合物后制成上述任一种剂型。
下面将通过具体的实例对本发明作进一步说明实施例1“七花心益康”的抗心肌缺血作用及其作用机制研究1材料和试剂1.1动物 健康SD大鼠，体重(226±28)g，雌雄兼用，由解放军总医院实验动物中心。各组大鼠均在相同条件下，自由饮水、摄食、保持自然光。
1.2药品 三七、灯盏花、回心草，均产于云南省保山地区，分别经中国科学院昆明植物研究所鉴定为Panax notoginseng、Herbaerigeronis、Rhodobryum roseum Limp。分别以水，50％乙醇，95％乙醇回流提取，经旋转蒸发制成浸膏，再用蒸馏水配制成高浓度含生药0.225g/ml，低浓度含生药0.056g/ml的溶液作为供试样品液。异丙肾上腺素(上海禾丰制药有限公司，批号030601)。10％水合氯醛由解放军总医院药材处制剂室提供。
2实验方法2.1实验分组及给药 实验前在麻醉状态下记录大鼠正常心电图一次，对心电图异常者予以剔除。用于实验的大鼠随机分为7组，每组6只，雌雄各半。各组分别为①回心草水提液高剂量组(2.25g/kg)；②回心草水提液低剂量组(0.56g/kg)；③回心草50％乙醇提液高剂量组(2.25g/kg)；④回心草50％乙醇提液低剂量组(0.56g/kg)；⑤回心草95％乙醇提液高剂量组(2.25g/kg)；⑥回心草95％乙醇提液低剂量组(0.56g/kg)；⑦蒸馏水对照组。各组大鼠均给药2ml/200g体重，每天一次，连续给药9天。
2.2造模及指标检测 各组大鼠分别于给药第7、8、9天腹腔注射异丙肾上腺素2mg/kg。末次腹腔注射异丙肾上腺素前用10％水合氯醛3ml/kg对大鼠进行麻醉，并记录肢体导联心电图一次，注射异丙肾上腺素后即刻记录30s、1m、3m、4m、5m、8m和10m的肢体导联心电图，测量心率、S-T段(J点)偏移值。末次注射异丙后1小时，取血，低温超速离心，以3000g离心5分钟制备血清，比色法测定血清GOT、LDH，CK。取血后摘取大鼠心脏，冲洗，将心肌剪成碎片，在0～4℃下将心肌组织制成10％心肌匀浆(g/ml)，以12000g离心15分钟，取上清液以TBA比色法测定心肌丙二醛(MDA)含量，黄嘌呤氧化酶法测定血浆中总SOD值。
2.3统计学处理 实验数据用均数±标准差(X±S)或百分数表示，运用Stata软件进行统计学处理，采用方差分析、x2检验及成组t检验判断统计学意义。
3结果3.1“七花心益康”对心肌缺血大鼠心电图S-T段的影响表1“七花心益康”对心肌缺血大鼠ECG中S-T段的影响(X±S)

注与蒸馏水对照组比较，*P＜0.053.2“七花心益康”对大鼠心肌缺血后血清中GOT，LDH，CK活性的影响各组大鼠末次注射异丙肾上腺素后1小时，取血测定血清中谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性，见表2。
表2“七花心益康”对大鼠心肌缺血后血清中GOT，LDH，CK活性的影响(X±S)

注与蒸馏水对照组比较，*P＜0.053.3“七花心益康”对心肌缺血后大鼠心肌组织MDA含量和SOD活性的影响大鼠末次注射异丙肾上腺素后1小时，摘取心脏制备心肌匀浆，测定心肌组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性，见表3。
表3“七花心益康”对心肌缺血后大鼠心肌组织MDA含量和SOD活性的影响(X±S)

注与蒸馏水对照组比较，*P＜0.05实施例2“七花心益康”的抗心律失常作用研究1.1动物健康昆明种小鼠，体重34±4g，雌雄各半。由解放军总医院实验动物中心。各组大鼠均在相同条件下，自由饮水、摄食、保持自然光。
1.2药品 三七、灯盏花、回心草来源及鉴定同上。以95％乙醇、水回流提取，经旋转蒸发制成相应浸膏，分别用蒸馏水配制成溶液(3.25g生药/g小鼠体重)作为供试药液。维拉帕米注射液心得安注射液由解放军总医院1.3仪器 RM6240C型多道生理信号采集处理系统，成都仪器厂产品。
2实验方法2.1分组和给药 将小鼠(共50只)随机分为5组，每组10只，灌胃给药对照组(给予NS)，维拉帕米组(给予维拉帕米0.02mg/20g小鼠)，心得安组(给予心得安0.01mg/20g小鼠)，水提液组(给予水提液3.25g生药/g)，醇提液组(给予醇提液3.25g生药/g)。共给药3天。
2.2“七花心益康”对氯仿诱发室颤的影响 各组小鼠末次给药后0.5h，肌注速眠新(1.5ml/kg)麻醉。逐一将小鼠的头部放入含有3ml氯仿棉球(以后每换一只小鼠加入1ml氯仿)的150ml锥形瓶中，立即连接RM6240C型多道生理信号采集处理系统，记录小鼠II导联心电图；至呼吸停止立即取出剖开胸腔，肉眼观察室颤发生率。
2.3统计学处理 实验数据用百分数或均数±标准差(X±S)，运用Stata软件进行统计学处理，采用单因素方差分析、成组t检验及x2检验判断统计学意义。
3结果表5“七花心益康”对氯仿诱发小鼠室颤的影响

与对照组比较，*P＜0.05。
实施例3“七花心益康”耐缺氧作用研究1材料和试剂1.1动物健康昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄各半。由解放军总医院实验动物中心。各组大鼠均在相同条件下，自由饮水、摄食、保持自然光。
1.2药品 三七、灯盏花、回心草来源及鉴定同上。以95％、50％乙醇和水回流提取，经旋转蒸发制成浸膏，各部分分别用蒸馏水配制成高浓度(13g生药/g小鼠体重)、低浓度(3.25g生药/g小鼠体重)溶液作为供试药液。
2实验方法2.1分组和给药 将小鼠(共70只)随机分为7组，每组10只对照组，水相低剂量组，水相高剂量组，95％低剂量组，95％高剂量组，50％低剂量组，50％高剂量组。灌胃给药，每日1次，共3天。对照组给予NS 0.2ml/只，其他各组分别给予相应各萃取相。
2.2断头小鼠张口动作持续时间测定 于末次给药后1h，用大剪刀在耳下部将小鼠逐只快速断头，立即用秒表记录小鼠断头后至张口喘气停止时间。
2.3统计学处理 实验数据用均数±标准差(X±S)，运用Stata软件进行统计学处理，采用单因素方差分析及成组t检验判断统计学意义。
3结果表4“七花心益康”对断头小鼠张口动作持续时间的影响

与对照组比较，*P＜0.014结论本研究利用给大鼠腹腔快速注射大剂量异丙肾上腺素的方法，造成大鼠急性心肌缺血，主要表现为ECG中S-T段明显下移，血清中GOT、LDH、CK活性升高，心肌组织中MDA含量明显升高，而SOD活性下降；而给予“七花心益康”各组均能减少异丙肾上腺素造成的大鼠心电图S-T段的下移，以50％乙醇提液高剂量组为显著。同时“七花心益康”各组也均能降低大鼠注射异丙肾上腺素后血清GOT、LDH、CK的活性水平，以50％乙醇提液高剂量组对LDH，CK的影响为显著。这些结果提示“七花心益康”对实验性心肌缺血有明显的保护作用。
已知氧自由基在心肌缺血的病理过程中起重要的作用。自由基是心肌细胞发生脂质过氧化，使心肌损伤加剧的重要因素。MDA是自由基损伤作用的产物，SOD是机体防御新陈代谢及其他生命活动中氧自由基损伤和破坏的抗氧化酶。当心肌损伤时，心肌组织中MDA含量增高，SOD活性下降。本实验中，“七花心益康”各组均能降低心肌缺血大鼠血浆中MDA含量，并使SOD活性增强。其中，50％乙醇提液高剂量组对减少MDA生成有显著性，而95％乙醇提液高剂量组对提高SOD活性有显著性。
氯仿的致室颤机制可能与植物神经及其释放递质或肾上腺髓质释放去甲肾上腺素和肾上腺素增加有关，而氯仿本身对心肌的直接作用则是不规则地延长心室不应期，导致复极不均一性增加，上述两者的相互作用导致室颤发生。本实验同时采用Ca2+拮抗剂——维拉帕米、β-受体阻滞剂——心得安为阳性对照，观察了“七花心益康”对氯仿诱发小鼠室颤的影响，结果表明，维拉帕米组、心得安组、“七花心益康”水提液组、“七花心益康”醇提液组均可显著延长小鼠心律失常出现时间、降低室颤发生率，其中，“七花心益康”水提液作用优于其他各组。
脑对缺氧最敏感，心脏次之。因小鼠断头实验操作简单、快捷，目前常把它作为抗心肌缺血药的一种初筛方法。本研究表明，“七花心益康”95％乙醇总提物和50％乙醇总提物部分可显著延长断头小鼠张口动作持续时间，提示“七花心益康”可降低组织耗氧，提高物质代谢和能量代谢，增强机体的耐缺氧能力。
综上所述，由三七、灯盏花、回心草组成的中药组合物“七花心益康”可增强机体的耐缺氧能力，有效减少心肌缺血大鼠心电图S-T段的下移，降低血清中GOT、LDH、CK活性以及心肌组织中MDA含量，并提高SOD活性，延缓心律失常的出现时间，降低室颤发生率，具有明显的抗心肌缺血、心律失常的作用。
实施例2“七花心益康”治疗冠心病心绞痛、心律失常的临床印象观察1、诊断标准与病例选择西医诊断标准依据国际心脏病学会和协会及WHO临床命名标准化联合专题组制定的“缺血性心脏病的命名及诊断标准”。
中医辨证及心绞痛分度标准依据国家中医药管理医政司协作组制定的“胸痹心痛急症治疗规范”。
病例选择病例除按以上标准进行诊断、分型外，而且要求心绞痛发作时间5分钟以上。除外合并有严重心律失常、心肺功能不全及其他心脏病疾患者。
2、一般资料全部病例58例均为门诊病人，其中男性36例，女性22例，年龄21～68岁。心律失常32例(频发房早18例，房颤7例，室上速7例)；心绞痛26例。按中医辨证分型论治(气滞血淤型20例，痰浊淤阻型17例，肝肾阴虚型10例，气血两虚型7例，心气虚型4例)。治疗前均检查心电图、血脂、肝肾功能协助诊断。
2、方法病人服用“七花心益康”水煎剂(三七、灯盏花、回心草，1∶1∶1)，汤药日1剂服用2次，服药4周后进行心电图检查。
3、治疗结果58例患者中，“七花心益康”对于冠心病引起的房早、房颤效果较好；胸闷、胸痛等症状明显改善，服药3剂即有明显好转。
表6“七花心益康”对不同证型的疗效观察

表7“七花心益康”对心律失常及ST段改变的疗效观察

4、讨论冠心病是指由于冠状动脉所供应的血液和氧不能满足心肌需要所引起的一组临床症候群，祖国医学把本病归属于“胸痹”范畴，“心主身之血脉”、“心痹者、脉不通”，认为本病的病机主要责之于寒凝、痰浊、气滞血淤、心脉淤阻、心失所养。三七、灯盏花、回心草均为云南省多民族共用的传统草药，其中三七具有活血化淤、抗心律失常的作用，灯盏花也具有扩张血管、降低外周血管阻力、减慢心率等作用，回心草则可扩冠、增加心肌血流量、改善心肌供血状况。
本临床实验观察了由三七、灯盏花、回心草组成的“七花心益康”对冠心病心绞痛、心律失常的治疗作用，结果表明，“七花心益康”可明显改善患者的胸闷、胸痛症状，对于冠心病引起的房早、房颤疗效确切。在服药过程中对患者进行血常规、尿常规、肝肾功能等检查发现“七花心益康”对肝肾功能及末梢循环无毒副作用。
权利要求
1.一种对心绞痛和/或心律失常症状有显著治疗作用的中药组合物“七花心益康”，其特征是由下列重量份数的原料制成三七、灯盏花、回心草(比例为任意组合)。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，包括三七总皂苷(包括各单体皂苷)、灯盏花素、回心草中生物碱、氨基酸、豆甾醇等化学成分以任何比例组成的组合物“七花心益康”。
3.根据权利要求1和权利要求2所述的中药组合物，是指加入常规的赋性剂、调味剂、崩解剂、防腐剂、润滑剂、湿润剂、粘合剂、溶剂、增稠剂、增溶剂等药物辅料，制成任何一种适合于临床上使用的剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液体制剂、注射剂等。
4.根据权利要求1所述的应用，其中所指的心绞痛和/或心律失常症状是指由于各种原因引起的心绞痛、心律失常症状。
全文摘要
本发明涉及一种对心绞痛和/或心律失常症状有显著治疗作用的中药组合物“七花心益康”。该药物制剂是由三七、灯盏花、回心草按一定比例混合，或经提取活性部位(三七皂苷、灯盏花素、回心草中氨基酸、豆甾醇、生物碱等脂溶性和/或水溶性成分等)后的组合物，可制备成各种剂型(如片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂、冻干粉针剂等)。本品适用于各种原因导致的心绞痛和/或心律失常症状，其机理在于本品能使机体MDA含量降低，SOD活性增强，延缓心律失常出现时间，提高机体的耐缺氧能力。
文档编号A61K9/48GK1733029SQ20041007054
公开日2006年2月15日 申请日期2004年8月9日 优先权日2004年8月9日
发明者刘屏, 王东晓, 汪进良, 王波, 戴畅, 王忠孝, 陈宜鸿, 周筱青 申请人:中国人民解放军总医院