专利名称：用于预防或治疗心血管、心肺、肺部或肾脏疾病的特来沙坦和阿托伐他汀的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于预防或治疗心血管、心肺、肺部或肾脏疾病的方法，特别是对于已诊断有糖尿病或怀疑有前驱糖尿病的患者，用于预防糖尿病和前驱糖尿病，或治疗具有正常血压的患者的新陈代谢综合症和抗胰岛素性。该方法包括对需要治疗的患者共同施用有效量的血管紧张素II受体拮抗剂特米沙坦(Telmisartan)和HMG-CoA还原酶抑制剂阿托伐他汀(Atorvastatin)，或者是它们的多晶型物或盐。此外，本发明还涉及含有特米沙坦和阿托伐他汀或它们的多晶型物或盐的适合的药物组合物，作为在这些疾病的预防或治疗过程中同时、分开或相继的应用的复合制剂，以及还涉及特米沙坦和阿托伐他汀或它们的多晶型物或盐，在制备用于预防或治疗这些疾病的药物组合物的组合应用。
血管紧张素II(ANG II)在病理生理学上起重要作用，特别是作为对人类最有效的血压增加制剂。已知，ANG II除了其增强血压作用外还另具有促进生长的作用，该作用会造成左心室供血不足、血管增厚、动脉粥样硬化、肾机能衰竭和中风。另一方面，舒缓激肽能起到扩张血管和保护组织的作用。因此，ANG II-拮抗剂适于治疗哺乳动物的高血压和充血性心力衰竭。在EP-A-0502314、EP-A-0253310、EP-A-0323841、EP-A-0324377、US-A-4355040和US-A-4880804中记载有ANG II拮抗剂的实例。ANG II-拮抗剂的例子是坎特沙坦(Candesartan)、依普沙坦(Eprosartan)、伊贝沙坦(Irbesartan)、氯沙坦(Losartan)、奥米沙坦(Olmesanan)、特索沙坦(Tasosartan)、缬沙坦(ValSartan)或特米沙坦。ANG II-拮抗剂的抗高血压和保护肾脏的作用记载于，例如以下公开文献中·W.Wienen等人在高血压性糖尿病(D)的大鼠长期治疗之后，特米沙坦的抗高血压和肾脏保护效果，2nd.Int，Symposium On Angiotensin IIAntagonism，Febmaryl5-18，1999，The Queen Elizabeth II Conference Center，London，UK，Book Of Abstracts，Abstract No.50；·J.Wagner等人在有易于中风菌株的自发性高血压大鼠中，AT1受体阻断血压和肾素血管紧张素系统的效果，Clin.Exp.Hypertens.，Bd.20(1998)，S.205-221；和·M.Bohm等人在TGR(mREN2)27中阻断血管紧张素II受体肾素-血管紧张素-系统基因表达的影响和心血管功能，J.Hypertens.，Bd.13(8)1995，S.891-899。
在首次临床试验中已证实的ANG II-拮抗剂还有保护肾脏的作用记载在，例如，以下公开文献中·S.Andersen等人在患有糖尿病性肾病的I型糖尿病患者中，阻断血管紧张素II受体的肾脏保护效果，Kidney Int.Bd.57(2)(2000)，S.601-606；·L.M.Ruilope在糖尿病中阻断肾脏保护作用和肾素-血管紧张素系统，Am.J.Hypertens.，Bd.10(12PT2)Suppl.(1997)，S.325-331；·J.F.E.Mann缬沙坦和肾脏现在和未来，J.Cardiovasc.Pharmacol.，Bd.33，Suppl.1(1999)，S.37-40。
此外，ANG II-拮抗剂对于内皮机能紊乱的作用记载在，例如，以下公开文献中·E.L.Schiffrin等人在人类原发性高血压中，通过血管紧张素受体拮抗剂氯沙坦而矫正动脉结构和内皮的机能障碍，Circulation，Bd.101(14)(2000)，S.1653-1659；·R.M.Touyz等人血管紧张素II在得自人类动脉的血管平滑肌细胞中刺激DNA和蛋白质合成细胞外信号—调节激酶的作用，J.Hyprtens.，Bd.17(7)，S.907-916。
·E.L.Schiffrin在高血压患者中的血管重建和内皮功能抗高血压药治疗的效果，Scand.Cardiovasc.J.，Bd.32，Suppl.47(1998)S.15-21；以及·Prasad急性和慢性血管紧张素-1受体拮抗作用在动脉粥样硬化中逆转内皮的机能障碍，Circulation，Bd.101(2000)，S2349ff.。
此外还已知，ANG II-拮抗剂可选择性地阻断AT1-受体，同时不影响在抗增长作用和组织再生作用中发挥作用的AT2-受体。
EP-A-1013273还记载了AT1-受体-拮抗剂或AT2-受体-调节剂，对治疗疾病的用途，该疾病随着在皮下区域的AT1-受体或在上皮中AT2-受体的增长而出现，特别是用于治疗各种肺病。
另一方面已证实，高血压经常同时伴随着高血脂。这两种现象被认为是心血管疾病发展过程中的最主要的危险因素，其常常会导致不利的心血管事件。
高血胆固醇浓度和高血脂浓度例如参与初期的动脉硬化动脉粥样硬化，它是一种在动脉，包括冠状动脉、颈动脉和外周动脉的内膜上不规则地分散脂质沉积为特征的病征。
这种不均匀脂质分布是冠心病，心血管疾病的特点，其危害和发病也会受到糖尿病，患者的性别，抽烟和作为高血压并发症的左心室肥厚而有影响(Wilson等，Am.J.Cardiol.，Bd.59(14)(1987)，S.91G-94G)。
II型糖尿病是两种病理生理现象的体现，即胰腺β细胞的胰岛素分泌的减少和目标器官肝、骨骼肌肉和脂肪组织的抗胰岛素性。通常会出现两种要素的复杂的病变。以下疾病被诊断为空腹-高血糖症，即在经历10-12小时的禁食之后，血糖浓度高于每dl血浆125葡萄糖的临界值。通过使用噻唑烷二酮(Glitazone)类化合物可有目的地治疗明显的II型糖尿病。这些化合物能改善对循环的胰岛素的利用，并因而使得血糖值下降(胰岛素敏化剂)。同时，通过反馈机理而降低升高的胰岛素浓度并因此而减轻胰腺的负担。胰岛素敏化剂如曲格列酮(Troglitazone)、罗格列酮(Rosiglitazone)或吡格列酮(Pioglitazone)通过结合特定的核受体，即所谓的PPAR-γ(过氧化物酶体增生剂活化受体)而起到这些作用。
WO95/06410公开了血管紧张素II受体拮抗剂用于治疗慢性炎症，包括全身性自动免疫疾病的用途。糖尿病是多种全身性自动免疫疾病中的一种。1型糖尿病就属于这种自动免疫疾病，该病主要是30岁以下的成年人患有，其中，在相应的遗传因素下，在不同因素的影响下，导致随后造成B-细胞病变的胰腺炎，使胰腺只能产生少量或不产生胰岛素。II型糖尿病则不是自身免疫疾病。
因为从诊断角度看，例如每两个II型糖尿病患者中就会有一例冠心病，它是在复杂的代谢失调中，糖尿病增多的原因，可通过一系列的危险因素表现，如紊乱的抗葡糖性、升高的空腹血糖值、抗胰岛素性、高血压、脂质异常或躯干肥胖症。具有高甘油三酸酯血症和低HDL-胆固醇的患者中，抗胰岛素的发病率特别突出。可以提及的有前驱II型糖尿病，代谢综合症，综合症X或抗胰岛素综合症。在第一个阶段，目标器官的较低的胰岛素反应导致胰腺的胰岛素分泌量增加，从而将血糖浓度维持在正常范围内。多年后，过高或是升高的胰岛素产生使由于胰腺的β-细胞而造成胰岛素的分泌量不再提高。因此也就开始紊乱的抗葡糖性阶段。机体不再能够足够快地达到葡萄糖峰值。最后，空腹血糖值就会保持在高水平并表现为糖尿病。
心绞痛是一种因胸部产生强烈收缩性疼痛的病症，且这种疼痛常常是从心前区辐射到左肩内并向下到达左臂，通常通过β-阻断剂、硝酸酯或钙通道阻断剂与一种降血脂剂的组合治疗来治疗这种病症。一般而言，心绞痛因心脏局部缺血引起的且通常是由于冠状动脉疾病而引起的。在通过外科手术治疗心绞痛患者常常会具有并发症，如再狭窄，这种并发症非常明显地表现出来，可表现为在由于血管成形术引起的创伤上出现短时期的增生反应，或是也可表现在移植血管和血管成形术片段的动脉硬化过程的长期进行。一些用于降低血脂和胆固醇的治疗方案都是基于抑制3-羟基-3-甲基戊二酰基-辅酶A-还原酶(HMG-CoA-还原酶)的活性，该酶能催化使3-羟基-3-甲基戊二酰-辅酶A转化为甲羟戊酸酯，即生物合成胆固醇-代谢途径的早期阶段。已知的HMG-CoA-还原酶的抑制剂是，例如，那些衍生自真菌代谢物且其所采用的名称以“他汀(statin)”结尾的化合物，诸如帕伐它汀(Pravastatin)、洛伐他汀(Lovastatin)、氟伐他汀(Fluvastatin)、辛伐他汀(Simvastatin)或阿托伐他汀。
已知，阿托伐他汀是一种3-羟基-3-甲基戊二酰基-辅酶A-还原酶(HMG-CoA-还原酶)的强效抑制剂，并且能作为高度肝脏选择性的胆固醇-生物合成的抑制剂，其作用是通过较低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)的降低而消失。该作用是基于治疗复合型高血脂，一种临床上常见的导致动脉粥样硬化的病变时的这种分子吸引活性并因此也抑制动脉硬化的发展。
试验结果还表明，LDL-C-浓度的降低起到了对冠心病的保护作用(参见，例如“Scandinavian Simvastatin Survival Study”或4S-Studie，发表于TheLancet，Bd.344(1994)，S.1383-1389，或论文“Prevention of coronary heart diseasewith prevastatin in men with hypercholesterolemia”，Sheperd等发表于The NewEngland Journal of Medicine，Bd.333(1995)，S.1301-1307)。
为了确定Statin具有防止非胰岛素依赖性糖尿病患者出现心衰，中风和冠心病的防护能力，还进行了其它研究；“Collavorative Atorvastatin DiabetesStudy”或CARDS-研究“Atorvastatin Versus Revascularisation Treatment”，AVERT-研究和“Angio-Scandinavian Cardiac Outcomes trial”或ASCOT-研究。
如上所述，由于高血压常常会伴随着高血脂或II型糖尿病症状一起出现，并且也因为这些现象是出现那些常常能导致不利的心血管病变的心血管疾病发展的主要危险因素，所以对患者有益的是采取能预防或治疗这些症状的单一治疗方法。
此外，也比较有利的是，组合治疗也能改善预防或治疗那些确定ANGII-拮抗剂能对其起作用的心肺、肺部或肾脏疾病。
本发明的目的在于提供一种药剂，其适于治疗高血压也适于治疗高血脂，并同时还能用于治疗表现明显的II型糖尿病和用于治疗前驱糖尿病的复合型代谢紊乱的初期症状，并因此也能预防II型糖尿病。
已提出一些组合治疗方法和相应的含有HMG-CoA-还原酶抑制剂和ANG II-拮抗剂的组合物。
·WO95/26188记载了一种治疗动脉粥样硬化和降低胆固醇的方法，其中使用了HMG-CoA-还原酶抑制剂和ANG II-拮抗剂。可提及的作为可使用的HMG-CoA-还原酶抑制剂用的是帕伐它汀、辛伐他汀和洛伐他汀。可提及的可使用的ANG II-拮抗剂是氯沙坦。
·WO97/37688中记载了组合使用HMG-CoA-还原酶抑制剂和ANG II-拮抗剂治疗多种症状，例如心绞痛和动脉粥样硬化。可提及可用作HMG-CoA-还原酶抑制剂的是帕伐它汀、辛伐他汀、洛伐他汀和氟伐他汀(Fluvastatin)。
·WO99/11260记载了组合使用一种特定的HMG-CoA-还原酶抑制剂和ANG II-拮抗剂以降低血压和血脂浓度以及用于治疗哺乳动物的心绞痛和动脉硬化。所谓特定的HMG-CoA-还原酶抑制剂指的是阿托伐他汀。可提及的优选用作ANG II-拮抗剂的是氯沙坦，依贝沙坦和缬沙坦。其他还可提及的ANG II-拮抗剂是坎地沙坦和依普沙坦。
·WO00/45818记载了组合使用HMG-CoA-还原酶抑制剂和ANG II-拮抗剂来改善糖尿病性神经病，特别用来改善罹患糖尿病患者的神经传导速度和神经供血状况。可以提及的这些组合的实例是帕瓦它汀，辛伐他汀，斯伐他汀(Cerivastatin)，氟伐他汀，阿托伐他汀和Statin(E)与ANG II-拮抗剂的氯沙坦，依贝沙坦，缬沙坦和坎地沙坦的组合，其中优选是与坎地沙坦的结合。
·WO01/15674记载了组合使用肾素-血管紧张素-系统的抑制剂与其他的抗高血压药、降胆固醇制剂，利尿剂或阿司匹林来抑制心血管疾病事件，如中风，充血性心力衰竭，心血管病致死亡，心肌梗塞，绞痛加剧，心跳停止，血管再形成过程，糖尿病和糖尿病并发症。可提及的这些有效组合的实例是血管紧张素-转化酶(ACE)的抑制剂，即采用的名称以“-pril”结尾的化合物，如卡托普利、咪达普利(Imidapril)、雷米普利(Ramipril)和类似物，与降低胆固醇浓度的洛伐他汀，帕伐它汀，辛伐他汀或氟伐他汀的组合。
本发明惊奇地发现，血管紧张素II受体拮抗剂特米沙坦及其盐除了已知的降血压作用外，还能在细胞系统中基因表达增强，已知其转录过程是通过PPARγ受体调节。为了可比较的条件以保证这种效果，在本发明范畴内可借助稳定转化的细胞系(参见实施例2)而观察且定量化。其中所涉及一种是具有两个基因构件的转化结果的CHO-细胞。这些结构中的第一种构件，在具有酵母Gal4连结位点(参见基因库序列AF058756)五次重复的合成启动子控制的条件下，对来自Photinus Pyralis(de Wet JR，Mol Cell Biol(1987)7725)的荧光素酶基因进行编码。第二种结构对由人体PPARγ2转录因子(参见基因库序列U79012)的配位体连接区以及酵母GAL4 DNA连接区(氨基酸1-147；Sadowski I，Nucleic Acid Res(1989)177539)组成的融合蛋白质(Fusionprotein)进行编码。
PPARγ控制的基因的转录的诱导是由已知用作抗糖尿病的噻唑烷二酮(例如罗格列酮(Rosiglitazone)进行的并且可通过其结合在PPARγ受体上及其活化而起作用的。在这里所用的测试系统可定量作为转化的细胞系的诱导的荧光素酶的活性。特米沙坦，对荧光素酶活性的这种诱导作用，不出所料同样是通过活性物质结合在受体PPARγ上而进行的。在各种测试系统中都不可能证实特米沙坦能结合到在PPARγ受体上。因此推测，当高亲和性的合成PPARγ-配位体不存在时，由血管紧张素II受体拮抗剂特米沙坦引起PPARγ的辅助因子蛋白质(Cofaktorprotein)亲和力的提高，也造成辅助因子蛋白质的补充(Rekrutierung)。于是，这引起一种通过辅助因子介导的基因转录的活化，该基因可通过PPARγ受体来调节。因为这基因的诱导承担着噻唑烷二酮的抗糖尿病作用，所以由此得出，相同基因的诱导可通过特米沙坦而发挥可相对比的抗糖尿病作用。因此，这些活性成分不仅适合于治疗高血压，而且还适于治疗和预防II型糖尿病。其中包括治疗和预防新陈代谢综合症，X综合症或抗胰岛素综合症。
特米沙坦及其盐的这种新的治疗作用意味着，它们可用于制备一种治疗人体或哺乳动物的药剂，用于预防或治疗心血管、心肺、肺部或肾脏疾病，其中当诊断为II型糖尿病或怀疑为前驱糖尿病，或者是诊断为抗胰岛素综合症的代谢紊乱时。特殊意义是，治疗其表现为预防或治疗高血压并发高血脂或动脉粥样硬化的人，或者治疗哮喘、支气管炎或间质性肺病。它们还能适用于治疗和预防II型糖尿病和前驱II型糖尿病。其中包括治疗和预防新陈代谢综合症、X综合症或抗胰岛素症。具有特别意义的是，治疗人其中预防或治疗高血压并发高血脂或动脉粥样硬化，或者治疗哮喘、支气管炎或间质性肺病。
II型糖尿病表现为空腹血糖值高于每dl血浆125mg葡萄糖，而血液中葡萄糖值的确定是医学常规分析中的标准方法。在进行葡糖耐量试验时，在空腹服用75g葡萄糖后2小时内，糖尿病患者的每dl血浆的血糖值就会超过200mg葡萄糖。在葡糖耐量测试中，受试者在经过10-12个小时的禁食期后口服75g葡萄糖，并且直接在服用前以及在服用葡萄糖后1或2小时直接测定血糖值。对于健康者，在服用前血糖值是每dl血浆60至110mg，服用后一小时为每dl低于200mg，2小时后为低于每dl140mg。如果2小时后该值在140至200mg之间，则也可认为有紊乱的葡糖耐受性。
前驱糖尿病存在的最明显标志是由抗胰岛素性得到证实。某人为了维持葡萄糖体内平衡需要相对于其他人2-3倍量的胰岛素，而不具有直接的病理学现象则该人可能是前驱糖尿病。最有说服力的、能用以确定抗胰岛素的方法是血糖正常-血胰岛素过多的(euglykmisch-hyperinsulinmische)Clamp测试。在组合的胰岛素-葡萄糖输注技术范畴内测定胰岛素对葡萄糖的比例。如葡萄糖指数低于受试背景总体25个百分点则有抗胰岛素性(WTO定义)。比Clamp试验成本更低的是所谓的极小模型，在该模型中静脉内葡糖耐量测试过程中在固定的时间间隔测定血液中的胰岛素和葡萄糖浓度，并从中计算出抗胰岛素性。另一种确定方法是数学HOMA一模型。抗胰岛素是通过空腹血浆葡萄糖和空腹胰岛素浓度计算而得的。在该方法中无法区分肝的抗胰岛素性和周边的抗胰岛素性。这些方法很少适用于日常实践中的抗胰岛素性的评价，在日常临床实践中，为了评价抗胰岛素性通常引入其它一些参数。为此优选引入患者的甘油三酸酯浓度，因为甘油三酸酯的浓度显著地与抗胰岛素性有关联。
当空腹血糖值超过了每dl血浆最大的正常值110mg葡萄糖，但是不超过与糖尿病相关的每dl血浆极限值125mg葡萄糖，则怀疑存在前驱糖尿病。前驱糖尿病的另一标志是紊乱的葡糖耐受性，即在葡糖耐量试验中，空腹摄入75g葡萄糖后2小时血糖值为每dl血浆140-200mg葡萄糖。
如果甘油三酸酯的血液值超过了150mg/dl，则也可能存在着前驱糖尿病。若HDL-胆固醇的血液值较低则更加强这种怀疑。对于妇女每dl血浆是低于40mg，对于男人则每dl血浆是低于50mg，这被认为是低的。血液中甘油三酸酯和HDL-胆固醇的测定同样也属于医学分析中的标准方法，并且记载在如Thomas L(Hrsg.)“Labor und Diagnose”，TH-Books出版公司mbH，法兰克福/Main，2000。当空腹血糖值同时超过了每dl血浆110mg葡萄糖，则可进一步加强前驱糖尿病的怀疑。如果所测得的血液值在极限值范围内，则可以引入腰围对臀围之比作为辅助的决定性参数。该比值对于妇女若超过0.8或是对于男人若超过1，则说明需要治疗。
如果也必须治疗高血压的话，则特米沙坦是特别适于治疗糖尿病或可能的前驱糖尿病的。也就是指收缩压高于140mmHg且舒张压高于90mmHg时。若是确证某患者已患有明显糖尿病，则目前推荐要将收缩压降低至低于130mmHg，且舒张压低于80mmHg。为了要达到这些目标值，就要根据情况采用血管紧张素II受体拮抗剂与利尿剂或钙血管紧张素的组合。术语“利尿剂”包括有噻嗪或噻嗪类似物如氢氯噻嗪(HCTZ)、克氯帕米(Clopamide)、利多速尿(Xipamide)或氯噻酮(Chlorthalidone)，醛甾酮-拮抗剂如螺内酯(Spironolacton)或Eperenone以及其它一些适用于治疗高血压的利尿剂，如利尿磺胺(Flurosemide)和苯吡磺苯酸(Piretanide)，和它们与氨氯吡咪(Amiloride)和氨苯喋啶(Triamteren)的组合物。
本发明表示，对于那些因高血压而需要治疗的患者来说，当需要预防前驱糖尿病的发展或是治疗明显的糖尿病时，血管紧张素II受体拮抗剂特米沙坦总是非常适用的。
可鉴别确认的病因只是占到高血压各种情况中的百分之十(继发性高血压(sekundare Hypertonie))，如肾脏疾病。通过治疗和除去该病因，通常也就能消除该继发性高血压。但是涉及到的原发性高血压所有情况中的几乎90％的，它们的确切病因还不知晓，因此也就不可能直接治愈。高血压的消极作用可以通过改变生活习惯和正确的治疗而得以减弱。不同危险因素的共同作用或是各个危险因素的共同出现似乎就导致了高血压。首先应密切观察高血压与脂肪和糖代谢紊乱的共同出现。这种紊乱首先常常是不可察觉的，但是可根据甘油三酸酯和葡萄糖血液值的升高以及HDL-胆固醇的血液值下降而辨别。在后一段可看到缓慢的肥胖现象。这种紊乱的原因在于抗胰岛素性的增强所引起。胰岛素的作用越少，脂肪和糖类代谢也就越杂乱。所有这些紊乱情况的组合最后就提高了罹患糖尿病的可能性并且可能提前患上或死于心脏病或血管疾病。
因为原发性或自发性高血压是一种多因素导致的疾病，所以抗胰岛素性或胰岛素过多不太可能是高血压的唯一原因。但是一系列观察表明，胰岛素代谢缺陷会导致血压升高并因此易于造成高血压。在本文中称为高血压性抗胰岛素性。在正常体重的高血压患者和正常血压的第一顺序亲属中有50％已可证实到存在有抗胰岛素性的情况。与瘦长的高血压患者相比在肥胖的患者中，不仅发现有较高的抗胰岛素性现象，而且高血压和胰岛素过多之间有着密切的相关度。
由此可以估计，世界上营养过度的约三分之一的成年人面临着高血压与脂肪和糖类代谢紊乱的共同作用，并且这个数字还在不断增加。因此需要一种药剂，其能够在尽可能早的时间段内延缓或停止所述的代谢紊乱的发展，并同时避免高血压对健康的损害作用。
本发明现公开一种药剂，其不仅能用于同时治疗高血压和高血脂，而且还能用于治疗确认的II型糖尿病或前驱糖尿病的复杂的代谢紊乱的最初症状。新型的活性成分组合物特别适于治疗和预防上述的高血压性抗胰岛素症状，所述症状是指在血液循环中循环的胰岛素没有充分利用的情况，并由此引起血压的升高。因此，本发明也包括由于在治疗高血压和高血脂的病人中预防患者的糖尿病的方法。因此，如果当出现了上述前驱糖尿病症状之一时，即刻使用特米沙坦和阿托伐他汀的组合物来控制血压、高血脂或高血压性抗胰岛素，由此延缓或避免明显的出现II型糖尿病。
特米沙坦及其合适的盐表明·不在体外结合在人体PPARγ受体的配位体结合区，·当它们被添加到稳定转化的PPARγ-受体细胞的培养基中时，会诱导荧光素酶活性，其a)表达一种由人体PPARγ转录因子的配位体结合区以及酵母GAL4DNA结合区构成的融合蛋白质，和b)含有在五次重复的酵母Gal4-结合位点控制之下的荧光素酶基因。
在实施例2中记载这种PPARγ-受体细胞系的制备。
如果在α筛选(AlphaScreen)(Ullmann EF等，Proc Natl Acad Sci USA(1994)915426-5430)中不能得到证实，则在体外不存在结合到人体PPARγ2受体的配位体结合区。除了α筛选也可进行SPA-化验(Mukherjee R等，J SteroidBiochem Mol Biol(2002)81217-225)或NMR-测试(Johnson BA等，J MolBiol(2000)298187-194)。通常这些方法中没有一个能够证实在受体的结合。
组合使用血管紧张素II受体阻断剂与一种或多种其它治疗有效的药物是有意义或必须的，特米沙坦就是一种优选的血管紧张素II受体阻断剂，因为它以单独的有效物质具有降低血压和抗糖尿病的组合作用，或者有助于预防糖尿病。出于这个理由，由特米沙坦与HMG-Co A还原酶抑制剂阿托伐他汀配制的有效物质组合物，即为一种在治疗心血管、心肺、肺部或肾脏疾病方面有重大的改进，特别是当需要同时治疗高血脂、前驱糖尿病或明显的II型糖尿病、骨质疏松或早期老年痴呆以及需要预防糖尿病时。
可以观察到，通过共同服用有效量的特米沙坦和有效量的阿托伐他汀，或是它们的多晶型物或盐，在对需要治疗的患者进行预防或治疗心血管、心肺、肺部或肾脏疾病方面可取得令人惊讶的优点。与仅服用ANG II-拮抗剂或HMG-CoA-还原酶抑制剂相比，这不依赖于活性成分特米沙坦的已知的降血压活性，也不依赖于活性成分阿托伐他汀的抗高血脂活性。这样，就可例如控制基质-金属蛋白酶MMP-9的表达，而这种表达在呼吸道的慢性发炎过程中或是在II型糖尿病上会强烈地体现。也可抵制促进炎症的细胞素CD40L的升高的血浆值。CD40L的血浆值的提高是已知的心血管疾病的危险因素。
此外还观察到，所述组合物能改善预防或治疗内皮功能，并且对于既要控制血压又要控制血脂浓度的病人可起到保护器官、组织和血管的作用。因此可改善动脉的弹性，并能在皮肤内增加产生NO，NO是内皮功能的基因标记。
另外还发现，该组合物能特别有效地预防或治疗以下症状适应症(Indikation)(A)，通过以下措施可积极影响该适应症，即抑制由AT1-受体引起的作用并维持由AT2-受体所引起的血管紧张素II(ANGII)的作用，并抑制HMG-CoA还原酶的作用，因而由此也就能强化由血管舒缓激肽所引起的作用并可以得到抗高血脂作用；或适应症(B)，且该症状还伴随出现皮下区域内AT1-受体的增加或是上皮细胞内AT2-受体的增加。
合适的适应症(A)选自如下这些适应症治疗高血压并发高血脂；减少出现中风、急性心肌梗塞或心血管疾病死亡，特别是对于那些有着较高缺陷性心血管病或中风危险的患者；发挥肾脏保护作用，例如对于肾功能不全或糖尿病性肾病；防止左心室肥大，血管增厚，例如防止血管手术后血管壁的增厚，改善心脏移植手术之后的存活可能性，防止血管成形术后出现动脉再狭窄，预防或治疗动脉硬化的病症，如动脉粥样硬化症，防止出现冠状动脉疾病，防止动脉硬化进展和预防糖尿病性血管病；降低胆固醇，降低血纤维蛋白原和血浆粘度，抑制平滑肌细胞增生，减小巨噬细胞氧化LDL的能力，保护心肌细胞不受缺氧损伤并降低血纤维蛋白溶酶原激活剂-抑制剂-1(PAI-1)；预防或治疗缺血性外周循环系统紊乱和心肌缺血(心绞痛)；和抑制心肌梗塞后心脏机能不全的发展。
合适的适应症(B)选自如下适应症阻塞性呼吸道疾病，慢性阻塞性肺部疾病，如支气管炎或慢性支气管炎，肺气肿，例如基于哮喘的，囊肿性纤维化，间质性肺病，肺癌，肺部血管疾病和提高呼吸器呼吸时的气流的阻力；成人呼吸窘迫综合征(ARDS)，减小肺癌和乳腺癌时上皮细胞的增生能力，治疗败血症，肺部损伤，如肺炎胃内物的抽吸，胸腔损伤，休克，烧伤，脂栓塞，心肺绕道术，O2-中毒，出血性胰腺炎，间质性和支气管肺泡性炎症，特别是当其伴随基质-金属蛋白酶如MMP-9升高的表达而出现时，上皮细胞和间质细胞的增生，胶原质富集和纤维化。
因此，本发明提供一种用于预防或治疗高血压和高血脂的方法，且该方法首先针对已确诊为糖尿病或存在前驱糖尿病怀疑的哺乳动物，并且该方法包括共同服用一种有效量的HMG-CoA-还原酶-抑制剂阿托伐他汀或它们的多晶型物或盐，与一种有效量的ANGII-拮抗剂特米沙坦或它们的多晶型物或盐。
另外，本发明还涉及组合使用特米沙坦和阿托伐他汀，或者组合使用这些活性成分的多晶型物或盐用于制备预防或治疗高血压结合高血脂，特别是当确诊为糖尿病或存在怀疑前驱糖尿病时用的药物组合物。
因此，本发明的有利作用主要都涉及对器官、组织和血管的组合治疗的防护作用，以及涉及糖尿病的预防作用。
前述不可预料的优点可归因于通过阿托伐他汀有效地阻断因AT1-受体所传递的ANGII的作用，由AT2-受体所传递的通过特殊的ANGII-拮抗剂而不会受到影响的ANGII的作用和由舒缓激肽所传递的作用而共同增强，类似PPARγ的转录活化作用而得到了抗高血脂的作用。
例如观察到，共同服用特定的ANGII-拮抗剂特米沙坦和特定的HMG-CoA-还原酶抑制剂阿托伐他汀，或者是共同服用这些活性成分的多晶型物或盐，与仅只是服用这些活性成分中的一种相比，前者更能起到显著的防止心血管疾病死亡和抑制总死亡率的作用，特别是有关出现中风和急性心肌梗塞的方面。
因此，优选的本发明方法在于，要减少在需要治疗的人群或非人哺乳动物中出现中风和急性心肌梗塞，特别是对那些确证患II型糖尿病或怀疑有前驱糖尿病或具有高危险缺陷性的心血管病或中风的人群，对其共同给药特米沙坦和阿托伐他汀或是将这些活性成分的多晶型物或盐一起服用。
此外还观察到，组合治疗和相应的特别含有一定量HGM-CoA-还原酶抑制剂阿托伐他汀和一定量ANGII-拮抗剂特米沙坦或这些活性成分的多晶型物或盐的组合物，在调节哺乳动物的血压和调节血脂方面起到较高的活性。可以预料，通过这些特定组合而达到的协同作用是令人惊讶地超过相应的传统组合方法所起的作用。
所谓用于调节血压和血脂的协同组合物应理解为，该组合物中含有一定量的阿托伐他汀和一定量的特米沙坦或是这些活性成分的多晶型物或盐，其中单个活性成分的量是不足以达到治疗效果，并且一定量的治疗药剂的组合效用大于以该量的单个药剂所能达到的治疗效果的总和。
本发明的再一项内容在于含有特米沙坦或其盐中的一种以及阿托伐他汀的药物组合物，以及这种药物组合物的制备方法。该组合物施用于人体或非人哺乳动物体而预防或治疗前述的疾病或适应症，其中的组合物含有特米沙坦和阿托伐他汀且适当时还含有药物学相容的稀释剂和/或载体物质，更确切地说是在预防或治疗疾病或适应症的过程中能同时、分开或相继施用的组合剂型进行给药。
通常，这些活性成分组合物中可混入一种或多种配方助剂，如甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、碳酸钙、磷酸钙、乳糖、交联羧甲基纤维素钠盐(纤维素羧甲基醚钠盐，交联的)、交联的聚乙烯吡咯烷酮、淀粉羟乙酸钠、羟丙基纤维素(低取代的)、玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、乙烯吡咯烷酮和其它乙烯衍生物的共聚物(共聚乙烯吡咯烷酮)、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、微晶纤维素或淀粉、硬脂酸镁、硬脂基富马酸钠、滑石、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素、醋酸纤维素邻苯二甲酸酯、聚乙酸乙烯酯、水、水/乙醇、水/甘油、水/山梨醇、水/聚乙二醇、丙二醇、十六烷基硬脂醇、羧甲基纤维素或含脂肪的物质如硬脂或其合适的混合物，并且可加工成盖伦式制剂如片剂、糖衣丸剂、胶囊、粉剂、悬浮液或栓剂。
也可以，例如，通过混合活性成分与一种或多种助剂并接着压制成型而制得片剂。片剂也可以由多层构成。助剂的例子是·惰性稀释剂如甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、碳酸钙、磷酸钙和乳糖；·崩解剂如交联羧甲基纤维素钠盐(纤维素羧甲基醚钠盐，交联的)，交联的聚乙烯吡咯烷酮，淀粉羟乙酸钠，羟丙基纤维素(低取代的)和玉米淀粉；·粘结剂如聚乙烯吡咯烷酮，乙烯吡咯烷酮和其它乙烯衍生物的共聚物(共聚乙烯吡咯烷酮)，羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，微晶纤维素或淀粉；·润滑剂如硬脂酸镁，硬脂基富马酸钠和滑石；·用于储存效果的试剂如羟丙基甲基纤维素，羧甲基纤维素，乙酸邻苯二甲酸纤维素和聚乙酸乙烯酯；和·药物学相容的颜料如有色的氧化铁。
在本发明的各个方面，涉及的特定的ANG II-拮抗剂特米沙坦，是{4’-[2-正丙基-4-甲基-6-(1-甲基苯并咪唑-2-基)-苯并咪唑-1-基甲基]-联苯基-2-羧酸}，或其多晶型物或盐，优选是钠盐。特米沙坦已有市售，例如商品名Micardis。
特米沙坦记载在，例如，EP-0502314和US-5591762中。特米沙坦的多晶型物记载在，例如，WO-00/43370，US-6358986和US-6410742中。特米沙坦的钠盐记载在，例如，WO03/037876中。
例如，在WO03/037876中记载有，可通过合适地选择制备条件而选择性地制得晶体多晶型形式的且具有如下化学式的特米沙坦的钠盐。
特米沙坦钠盐的这种晶体形式的特征在于熔点T＝245±5℃(通过差示扫描量热法并使用Mettler-Toledo DSC82-装置测得；加热速率为10°K/min)。
为了制备特米沙坦的钠盐，可以采取如下所述的两种制备方法之一。
在本发明的各个方面，涉及HMG-CoA-还原酶抑制剂的阿托伐他汀或其多晶型物或盐，优选涉及的是半钙盐(Hemicalciumsalz){[R-(R*，R*)]-2-(4-氟苯基)-β，δ-二羟基-5-(1-甲基乙基)-3-苯基-4-[(苯氨基)-羰基]-1H-吡咯-1-庚酸-半钙盐}，例如可以商品名Lipitor，Zarator和Sortis购得。
阿托伐他汀记载在，例如，EP0247633和US-4681893中。阿托伐他汀的多晶型物记载在例如，WO-97/03958，WO-97/03959，EP-0848704和EP-1148049中。阿托伐他汀的盐(单钾盐，单钠盐，钙盐，镁盐，锌盐和葡甲胺)则记载在，例如，EP-0409281和US-5273995中。
所谓共同服用两种活性成分应理解为是按时间相继服用或同时服用，并且优选同时服用。如果是相继服用，则可以在服用了阿托伐他汀之前或之后服用特米沙坦。
活性成分可以经口服、口腔、肠胃外、通过吸入、直肠或局部给药，其中优选口服给药。肠胃外给药可以是包括皮下、静脉内、肌肉内和胸骨内的注射以及输注技术。
可以以多种不同的制剂形式以口服给药，即有效物质可以和各种药物学相容的惰性载体加工成片剂、胶囊、丸剂、糖、粉剂、喷雾剂、水性悬浮液、酏剂、糖浆等等。属于这种载体物质的有固体稀释剂或填料，消毒的水性介质和各种无毒的有机溶剂。此外，这种口服的药物制剂可以以合适的方式混有甜味剂和/或增味剂，其中可使用那些符合此目的而常用的各种制剂。通常，本发明的化合物在这种口服制剂中的浓度范围以组合物总重计为约0.5至约90重量％，且其用量应以形成理想的剂量单位为准。另一些合适的本发明化合物的制剂包括技术人员所熟悉的具有控制释放能力的制剂和药具。对于口服给药，可以使用片剂，其含有一定量不同载体，如柠檬酸钠、碳酸钙和磷酸钙，并结合各种崩解剂，如淀粉，优选的土豆或木薯淀粉、藻酸和某些复合的硅酸盐，以及粘合剂如聚乙烯吡咯烷酮，蔗糖，明胶和阿拉伯胶。此外，还可以使用润滑剂，如硬脂酸镁、月桂基硫酸钠和滑石或相似类型的组合物，同样作为填装在软胶囊和硬胶囊中的填料。属于此类的也有乳糖或奶糖以及高分子量的聚乙二醇。如果希望是用于口服的水性悬浮液和/或酏剂，则可以使活性成分与各种甜味剂或增味剂，着色剂或颜料和任选的乳化剂和/或水、乙醇、丙二醇、甘油和它们的各种组合物相结合。
对于肠胃外给药，可以使用化合物于芝麻油或花生油中的溶液，或者是水性丙二醇中的溶液，以及消过毒的相应药物学相容的盐的水溶液。适当时也可以合适的方法对这种水溶液进行缓冲，并且适当时可以用足量的食盐或葡萄糖使液体稀释剂成为等渗压的。这种特定的水性溶液特别适于静脉内，肌肉内和皮下注射。其中，经消毒的水性介质可简便地根据技术人员所公知的常用技术而得到。例如，使用通常的蒸馏水作为液体稀释剂。制成的制剂通过合适的滤菌器，如由烧结玻璃、硅藻土或未玻璃化的陶瓷制成的过滤器而得到。属于这种类型的优选的过滤器是Berkefeld-，Chamberland-和石棉盘-金属-Seitz-过滤器，其中借助于真空泵而将液体吸入经消毒的容器中。在可注射溶液的整个制备过程中，所需步骤的实施要使得终产物以消毒状态存在。
对于透皮给药的特定化合物或组合物的制剂，例如，溶液、洗剂、膏剂、乳剂、凝胶、栓剂、具有缓释的制剂以及适用于此的药具。这些制剂形式包括特殊的化合物并且还可以含有乙醇、水、渗透增强剂和惰性载体，例如成胶材料、矿物油、乳化剂、苯甲醇等类似物。
所制得的给药制剂含有，例如，2.5-40mg，优选5，10，15，20，25，30，35或40mg阿托伐他汀的当量物。阿托伐他汀或其多晶型物或盐的日剂量为，口服剂量为约1.25mg(或0.018mg/kg体重，以体重为70kg的人计)至约450mg(6.43mg/kg体重，以体重为70kg的人计)，肠胃外给药量为约20mg(0.286mg/kg体重，以体重为70kg的人计)，且优选以口服给药，给药量为约2.5mg(0.036mg/kg体重，以体重为70kg的人计)至约80mg(1.428mg/kg体重，以体重为70kg的人计)。特别优选口服日剂量为约5mg(0.071mg/kg体重，以体重为70kg的人计)，约10mg(0.143mg/kg体重，以体重为70kg的人计)，约20mg(0.286mg/kg体重，以体重为70kg的人计)或约40mg(0.571mg/kg体重，以体重为70kg的人计)或特别在开始时口服日剂量即为约10mg。
所制得的给药制剂含有，例如，20-200mg，优选20，40，80，120，160或200mg特米沙坦游离酸的当量物。如果活性成分与HCTZ或氯噻酮相组合，则给药制剂含有10-50mg，优选50，25或12.5mg的利尿剂。特米沙坦或其多晶型物或盐的给药量按照日剂量计算，口服剂量为约10mg(或0.143mg/kg体重，以体重为70kg的人计)至约500mg(7.143mg/kg体重，以体重为70kg的人计)，肠胃外给药量为约20mg(0.286mg/kg体重，以体重为70kg的人计)，且优选以口服给药，给药量为约20mg(0.286mg/kg体重，以体重为70kg的人计)至约100mg(1.429mg/kg体重，以体重为70kg的人计)。特别优选口服日剂量为约40mg(0.571mg/kg体重，以体重为70kg的人计)至约80mg(1.143mg/kg体重，以体重为70kg的人计)，或特别优选剂量为约80mg(1.143mg/kg体重，以体重为70kg的人计)。
在药物组合物中，优选阿托伐他汀对特米沙坦或其多晶型物或盐之比为1∶100至100∶1(以重量计)。
在特别优选的实施方式中，以口服形式共同服用阿托伐他汀或其多晶型物或盐与特米沙坦或其多晶型物或盐时，按照以下日剂量进行给药10mg阿托伐他汀和40mg特米沙坦(或它们的多晶型物或盐)；10mg阿托伐他汀和80mg特米沙坦(或它们的多晶型物或盐)；20mg阿托伐他汀和40mg特米沙坦(或它们的多晶型物或盐)；20mg阿托伐他汀和80mg特米沙坦(或它们的多晶型物或盐)；根据一优选实施方式，本发明的药物组合物中，单个剂量单位中含有HMG-CoA-还原酶-抑制剂，其量为1.25mg至450mg，和ANG II-拮抗剂，其量为10mg至500mg，并且适当时还可含有一种或多种药物学相容的稀释剂和/或载体物质。
根据另一优选的实施方式，本发明的药物组合物中，单个剂量单位中含有其量为2.5mg至80mg的阿托伐他汀，和其量为20至100mg的特米沙坦，且适当时还可含有一种或多种药物学相容的稀释剂和/或载体。
在本发明的药物组合物的另一优选小组中，单个剂量单位中含有其量为5mg至20mg的阿托伐他汀和其量为40mg至80mg的特米沙坦，且适当时还可含有一种或多种药物学相容的稀释剂和/或载体。
在本发明的药物组合物的再一优选小组中，单个剂量单位中含有其量为10或20mg的阿托伐他汀，和其量为40或80mg的特米沙坦，且适当时还可含有一种或多种药物学相容的稀释剂和/或载体。
如上所述的，本发明也涉及到特米沙坦用于制备药物组合物的用途，所述该药物组合物在与阿托伐他汀相组合使用时能对人体或非人哺乳动物体预防或治疗上述那些适应症。对于这种应用，应理解为是制备所有上文提及的符合本发明的药物组合物。
实施例实施例1特米沙坦，氯沙坦和依贝沙坦不在体外结合在PPARγ配位体结合区在大肠杆菌(E.coli.)中制备含有人体PPARγ-配位体结合区(LBD)的蛋白质作为GST-融合蛋白质并用亲合色谱法进行提纯。
为此，通过在表达载体pGEX-4T-1(Amersham)中另外嵌入限制性片段位点BamH I和Xho I而亚克隆DNA片段，其编码人体PPARγ2-转录因子的氨基酸205-505(参见基因库登记号U79012)，并且控制该片段的序列。在25℃下用0.2mM的IPTG诱导4小时之后，在推荐的大肠杆菌-菌株BL21(DE3)的pGEX载体中进行融合蛋白质的表达。表达后接着使细菌沉淀并逐份在PBS，pH7.4中冷冻(wegfrieren)。根据法国Press说明，借助于GSTrap-柱(Parmacia)提纯溶解的GST-PPARγ-LBD-融合蛋白质。通过添加20mM还原的谷胱甘肽进行洗提。
利用HiTrap脱盐柱(Parmacia)对GST-PPARγ-LBD-蛋白质馏分脱盐，并利用标准化验法确定蛋白质浓度。
在E.coli.中制备含有人体RXRα-配位体结合区(LBD)的蛋白质作为Histag-融合蛋白质并用亲合色谱法进行提纯。
为此，通过在表达载体pET28c(Novagen)中另外嵌入限制性片段位点BamH I和Not I而对对人体RXRα-转录因子的氨基酸220-461编码的DNA片段(参见基因库登记号NM 002957)进行亚克隆，并且控制该片段的序列。在25℃下用0.2mM的IPTG诱导4小时后，在推荐的大肠杆菌-菌株BL21(DE3)的pET载体中进行融合蛋白质的表达。紧接着表达后将细菌沉淀并逐份在PBS，pH7.4中冷冻去(wegfrieren)。根据法国Press说明，借助于HiTrap螯合-柱(Parmacia)提纯溶解的His-RXRalpha-LBD-融合蛋白质。通过添加500mM的咪唑梯度(stufe)进行洗提。利用HiTrap脱盐柱(Parmacia)对His-RXRalpha-LBD-蛋白质馏分脱盐，并利用标准化验法确定蛋白质浓度。
a)α筛选在Ullmann EF等，Proc Natl Acad Sci USA(1994)915426-5430中首次记载了α筛选试验。本实施例中所施行的测量过程是按Glickman JF等，J BiomolScreen(2002)73-10中所记载的进行。试验缓冲液是由25mM的Hepes pH7.4，100mM的NaCl，1mM的DTT，0.1％的Tween-20，0.1％的BSA组成的。在有各种浓度的试样(DMSO中)存在条件下，在室温下培养3nM的GST-PPARγ-LBD-融合蛋白质，15nM的辅因子CBP的生物素化LXXLL-肽(相当于Mukherjee R等的J Steroid Biochem Mol Biol(2002)81217-225中的第218页上公开的，具有另一N封端的半胱氨酸的肽)和每次10μg/ml的抗GST-受体珠或链霉抗生蛋白素-供体珠(实用的生物系统)4个小时，其总体积为12.5μl。在试验的最后DMSO浓度为1％(v/v)。将1％的DMSO溶液用作对照参比物(NSB)。测量是在Packard Fusion-测量仪上进行。
与罗格列酮相反，一种文献中已知的在LBD结合的PPARγ-激动剂，发现随着特米沙坦，氯沙坦和依贝沙坦的浓度增加(浓度直至50μM)，没有发生PPARγ-LBD的直接活化并因此也没有发生显著的LXXLL-肽的补充。
b)SPA-试验在Mukherjee R等，J Steroid Biochem Mol Biol(2002)81217-225中记载了SPA-试验方式。试验缓冲液是由25mM的Tris pH7.5，25mM的KCl，10mM的DTT，0.2％的Triton X-100组成的。将30nM的GST-PPARγ-LBD-融合蛋白质，30nM的His-RXRα-LBD，抗GST-抗体(1∶600，Amersham Pharmacia)，0.25mg蛋白质A SPA PVT抗体结合珠(Amersham Pharmacia)，30nM的3H-标记的罗格列酮在用试验物质稀释的100μl总体积中在室温培养5小时。
添加10μM的未标记的罗格列酮取代放射性的罗格列酮作为对照参比(NSB)，添加所用的溶剂如DMSO取代试样作为最大值(Bmax)。
培养后紧接着将测试物在Hettich Universal 30Rf-离心器中于2000Upm的条件下离心分离5分钟并在Packard TopCount NXT上进行测量。
与结合在PPARγ-LBD上的直接的PPARγ-激动剂相反，在特米沙坦、洛沙坦或依贝沙坦过量很多的情况下也没有浓度依赖性地抑制来自结合位点的放射性罗格列酮。
c)NMR-检测与直接的PPARγ-配位体，例如罗格列酮不同，当在有试样特米沙坦存在的条件下对PPARγ-LBD进行15N TROSY谱的测量时，没有出现试样与结合位点的氨基酸发生相互作用。在有试样的条件下结合位点的氨基酸的定位与没有配位体存在时一样。
实施例2制备一种稳定转化的PPARγ-受体细胞系对人体PPARγ2-转录因子的205-505(对应于基因库-序列号U79012的核苷酸703-1605)进行编码的DNA片段是通过另外在载体pFA-CMV(stratagene)的多克隆位点嵌入限制性片段位点BamH I和Hind III而进行，并验证其序列。所得的质粒pFA-CMV/hPPARγ2-LBD，在对于Gal4 DNA-结合区的相同的读框中对PPARγ-LBD的N端基进行编码。另外，质粒还对新霉素抗体进行了编码。
细胞系CHO-K1(ATCC CCL-61)和质粒pFA-CMV/hPPARγ2-LBD和pFR-Luc(stratagene)共转染。pFR-Luc在五重复的酵母Gal4-结合位置的控制下对荧光素酶进行编码。根据制造者的说明用Lipofectamin2000进行转染。
转染之后，在有0.5mg/ml G-418存在的条件下在介质(含有10％小牛血清的Ham’s F12)中培养细胞。培养六天后细胞传代并在培养基中再保持10天。在显微镜下检出所得的抗新霉素的菌落并在96-孔-盘内进行分隔和培养。得到含有质粒(例如克隆号10，11，13等)的各种不同转化的细胞系，并将其继续保留在培养基中。
关于荧光素酶的基因的可诱导性，通过PPARγ-激动剂，例如罗格列酮，研究细胞系，并与通过PPARγ-激动剂刺激使其增加的荧光素信号反应。
实施例3特米沙坦，氯沙坦和伊贝沙坦活化的PPARγ细胞在96-well-平底盘中播撒来自实施例2的转化克隆体11衍生的CHO-K1细胞系，其密度为3×104细胞/200μl/孔的密度，然后在含有10％小牛血清和0.5mg/ml G-418的Ham’s F-12-培养基中培养过夜。24小时后将其改换到不添加G-148的培养基中。
用合适的溶剂，例如DMSO使试样浓度达到100倍的理想浓度，并通过料添加50μl的洗涤缓冲液和150μl的荧光素酶-试验缓冲液(25mM Tricine，0.5mM EDTA，0.54mM NaTPP，16.3mM MgSO4，1.2mM ATP，0.05mM荧光素，56.8mM 2-巯基乙醇，0.1％的Trition X-100，pH7.8)。在Packard TopCountNXT上等待五分钟的时间后进行荧光的测量。对开始测量后最初十秒内的相对荧光素酶单位(RLU)进行积分而得到荧光紊酶活性。
通过血管紧张素II受体拮抗剂特米沙坦能特别强烈地活化在PPARγ-受体细胞系中的PPARγ-通道。通过其他血管紧张素II受体拮抗剂如氯沙坦和伊贝沙坦首先在较高测试浓度并以较小程度进行活化作用。
实施例4配方实施例片剂1通过直接压制特米沙坦的钠盐和助剂以及硬脂酸镁，能得到具有如下组成的片剂组分 mg特米沙坦的钠盐 41.708甘露醇 149.542
微晶纤维素50.000交联羧甲基纤维素钠盐 5.000酸硬脂酸镁3.750总计 250.000片剂2通过直接压制特米沙坦的钠盐和助剂以及硬脂酸镁，得到具有如下组成的片剂组分 mg特米沙坦的钠盐 83.417山梨醇 384.083聚乙烯吡咯烷酮K2525.000硬脂酸镁 7.500总计 500.000片剂3将氢氯噻嗪、特米沙坦的钠盐、山梨醇和氧化铁红在自由落体混合器(“Free Fall Blender”)中混合，通过0.8mm的筛网进行筛分，并在添加硬脂酸镁后于自由落体混合器中加工成粉末状混合物。
然后，用合适的压片机(例如Korsch EK0或Fette P1200)将活性成分和助剂的组合物压制成片剂。制得的片剂具有如下组成，其中每片所含有的特米沙坦的钠盐的量相当于特米沙坦的游离酸80mg。
三批料的片剂中的特米沙坦的钠盐经过30分钟的搅拌(75rpm)后溶于900ml的0.1M磷酸盐缓冲液pH7.5至92±1.5％，96±1.8％或100±1.0％中。30分钟后，氢氯噻嗪30分钟后溶解在900ml的0.1M HCl(100rpm)达69±6.3％，72±2.1％或78±1.8％中。
实施例5从特米沙坦制备晶状特米沙坦钠盐制备结晶的特米沙坦钠盐的原料是按传统方法(例如，根据EP-0502314)得到的特米沙坦的游离酸。
将154.4g特米沙坦置于合适的反应容器中的308.8ml甲苯中，向悬浮液中混入27.8g的44.68％的氢氧化钠溶液和84.9ml的乙醇，在78℃下加热约30分钟。然后过滤混合物。接着，任选地，当大量固体残留在过滤器中时，用61.8ml的甲苯和15.3ml的乙醇混合物洗涤过滤器。
将463.2ml的甲苯置于另一反应容器中，并在回流条件下加热。然后在沸腾温度下缓慢地添加根据上述方法所得的滤液，同时进行共沸蒸馏。在完全添加后，同样添加任选地通过洗涤过滤器而得到的溶液并重新进行共沸蒸馏。蒸馏混合物直至温度为103℃。然后将悬浮液冷却到环境温度。抽滤晶体，用154.4ml的甲苯洗涤并在60℃下于循环空气干燥箱中进行干燥。
得率154.6g(96％)无色晶体C33H29N4O2Na×0.5H2O 计算值.C72.51H5.72N10.25测得值.C72.57H5.69N10.21实施例6从特米沙坦-氢氯化物制备晶状特米沙坦的钠盐特米沙坦-氢氯化物的制备将411g的叔丁基-4’-[[2-正丙基-4-甲基-6-(1-甲基苯并咪唑-2-基)-苯并咪唑-1-基]-甲基]-联苯基-2-羧酸酯悬浮在822ml的冰醋酸中，并加入213g的浓盐酸水溶液(37％)。在回流条件下加热混合物。蒸去约640ml的溶剂。缓慢地向残留物中加入50-60℃的约620ml的水。向该混合物中加入20g活性炭(例如Norit SX2 Ultra)。在恒温下搅拌所得的混合物约10分钟。过滤后用25ml的冰醋酸和约620ml的水洗涤残留物3次。将所得滤液重新加热到约50-60℃并加入约2升的水。在经过23℃下约12小时的搅拌后，抽滤所形成的晶体并用约500ml的水洗涤2次，用约900ml的丙酮洗涤1次，然后在约60℃下干燥。
得率367g(92.5％)无色晶体熔点278℃由特米沙坦氢氯化物制备晶状特米沙坦钠盐将55.1g的特米沙坦氢氯化物溶于110.2ml甲苯，5.5ml水和55.1ml异丙醇中。向混合物中加入36.9g甲醇钠(30％甲醇溶液)和2.75g活性炭(例如Norit SX2Ultra)。接着将混合物加热到约75℃。在恒温下于约30分钟内蒸去约50ml的溶剂混合物。过滤所得悬浮液。用约20ml甲苯洗涤残留物。向滤液中加入约5ml水和约150ml的甲苯。在回流条件下加热所得混合物。其中共沸蒸馏掉约150ml的溶剂混合物(直至102℃)。在100℃下结晶混合物1小时。抽滤晶体，用约50ml甲苯洗涤并在约60℃下干燥。
得率53.6g(99％)无色晶体C33H29N4O2Na×0.5H2O 计算值.C72.51H5.72N10.25测得值.C72.44H5.68N10.20
权利要求
1.血管紧张素II受体拮抗剂特米沙坦或其一种盐和HMG-CoA-还原酶抑制剂阿托伐他汀的用途，其用于制备一种治疗那些需要预防或治疗心血管、心肺或肾脏疾病的人或哺乳动物的药剂。
2.如权利要求1所述的用于医治人类的用途，其中所述医治是预防或治疗高血压组合高血脂或动脉粥样硬化的患者。
3.如权利要求1所述的用于医治人类的用途，其中所述医治是治疗哮喘，支气管炎或间质性肺病的患者。
4.如权利要求1所述的用于医治人类的用途，其中所述医治是对诊断II型糖尿病或者是怀疑存在前驱糖尿病的人以预防糖尿病和前驱糖尿病，或者治疗代谢综合症和具有正常血压的患者的抗胰岛素症状。
5.如权利要求1所述的用途，它用于治疗或预防高血压性抗胰岛素性。
6.如权利要求1所述的用途，其特征在于，在待治疗的人群中空腹血糖值每dl血浆高于110mg葡萄糖。
7.如权利要求1所述的用途，其特征在于，在待治疗的人群中甘油三酸酯的血液值高于150mg/dl。
8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，在待治疗的人群中HDL的血液值，妇女是每dl血浆低于40mg，男子是每dl血浆低于50mg。
9.如权利要求4所述的用途，其特征在于，在待治疗的人群中，收缩压超过130mmHg且舒张压超过80mmHg。
10.如权利要求8所述的用途，其特征在于，口服时，阿托伐他汀或其多晶型物或盐的日用剂量为约0.018mg/kg体重至6.43mg/kg体重，而特米沙坦或其多晶型物或盐的日用剂量为约0.143mg/kg至7.143mg/kg体重。
11.如权利要求8所述的用途，其特征在于，肠胃外给药时，阿托伐他汀或其多晶型物或盐的日用剂量为约0.286mg/kg体重，而特米沙坦或其多晶型物或盐的日用剂量为约0.286mg/kg体重。
12.用于医治那些需要预防或治疗心血管、心肺或肾脏疾病的人群的方法，其特征在于给药一种含有血管紧张素II受体拮抗剂特米沙坦或一种其盐和HMG-CoA-还原酶抑制剂阿托伐他汀的药剂。
13.用于医治那些需要预防或治疗心血管、心肺或肾脏疾病的人类或哺乳动物的药物组合物，其含有特米沙坦并组合阿托伐他汀，且适当时还含有一种或多种助剂。
14.如权利要求13所述的药物组合物，其特征在于，药物的给药制剂中含有20-300mg的特米沙坦和2.5-40mg的阿托伐他汀。
15.如权利要求14所述的药物组合物，其特征在于，阿托伐他汀对特米沙坦或它们的多晶型物或盐之比为1∶2至1∶8(以重量计)。
16.如权利要求13所述的药物组合物，其特征在于，两种活性成分还另组合有利尿剂。
17.如权利要求16所述的药物组合物，其特征在于，药物的给药制剂中含有10-50mg的HCTZ或氯噻酮。
18.如权利要求13所述的药物组合物，以同时、分开或相继施用活性成分进行治疗。
全文摘要
本发明涉及一种通过改善内皮功能和在需要对血压血脂进行控制的适应症中对器官、组织和脉管的保护作用，而预防或治疗心血管、心肺、肺部或肾脏疾病的方法，特别是针对那些确诊有II型糖尿病或怀疑存在有前驱糖尿病的人群，所述方法也用于预防糖尿病和前驱糖尿病并用于治疗新陈代谢综合症和血压正常的患者的抗胰岛素性。所述方法包括共同施用有效量的特米沙坦或其多晶型物或盐和阿托伐他汀。本发明也涉及含有特米沙坦或其多晶型物或盐和阿托伐他汀的适宜的药物组合物，作为一种以同时、分开或相继使用于预防或治疗所述疾病的组合制备。
文档编号A61K31/401GK1738617SQ200480002407
公开日2006年2月22日 申请日期2004年1月14日 优先权日2003年1月16日
发明者阿克塞尔·里德尔, 约瑟普－玛丽亚·森德拉, 约瑟夫·M·E·莱特, 斯蒂芬·考希克, 迈克尔·马克 申请人:贝林格尔·英格海姆国际有限公司