专利名称：苯并(1,2,5)噻二唑als crf－拮抗剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的苯并噻二唑类化合物、它们的制备方法、它们作为药物的用途和含有它们的药物组合物。
更具体而言，本发明提供了游离碱或酸加成盐形式的式A的化合物 式A的化合物概括性地包含在EP 1049 694和相应的专利或专利申请的式I中。该专利族还公开了制备式I化合物和其酸加成盐的方法以及游离碱或可药用的酸加成盐形式的式I化合物作为药物的用途，所述药物用于治疗伴有内源性促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)水平升高或其中下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴失调的任何状态或由CRF诱导或促进的疾病。
式A的化合物和其酸加成盐从未被具体报道过。
式A的化合物和其酸加成盐可以通过包括以下步骤的方法制备使式II的化合物
其中Hal是卤素，与式III的化合物反应 并回收所得的游离碱形式或酸加成盐形式的化合物。
反应可以用已知方法进行，例如如实施例1所述。Hal优选是氯、溴或碘，特别是氯。
可以按照已知方法对根据以上方法获得的反应混合物进行后处理并将由此获得的化合物进行纯化。
酸加成盐可以用已知方法由游离碱形式制备，反之亦然。用于本发明的合适的可药用的酸加成盐包括例如盐酸盐、马来酸氢盐、富马酸氢盐和丙二酸氢盐。
式II的起始原料可以如实施例1中所述获得。
现已令人惊奇地发现游离碱或可药用的酸加成盐形式的式A的化合物(下文中称为本发明的化合物)可用作非竞争性CRF1受体拮抗剂。
已经在以下分析中体外测定了本发明的化合物的非竞争性CRF1受体拮抗剂活性。
在补充了10％胎牛血清、非必需氨基酸、100U/ml青霉素、100mg/l链霉素和1g/l遗传霉素(geneticin)(G418)的Dulbecco’s改良Eagle培养基中增殖表达人重组CRF1的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞(Chen等，Proc NatlAcad Sci USA 90，8967-8971，1993)。对于环腺苷酸的测定，使细胞在24-孔板中生长至融合。如前所述(Schoeffer等，Neuropharmacology 36，429-437，1997)，用[3H]腺嘌呤标记技术在完整细胞中测量CRF(人或鼠型)对环腺苷酸蓄积的刺激作用。
在假定的拮抗剂(1nM-1μM)或载体(二甲亚砜1％体积)存在下构建CRF的浓度-反应曲线。通过拟合增加拮抗剂浓度而产生的CRF(10nM)作用的抑制百分比来计算拮抗剂的IC50值。用Origin软件包(OriginLabCorporation，Northampton，MA，USA)的非线性对数功能进行拟合。
在该试验中，本发明的化合物显示出非竞争性CRF1拮抗活性，对CRF1的IC50值为约1-500nM。
因此，本发明的化合物可用于治疗伴有内源性CRF水平升高或其中HPA(下丘脑-垂体轴)失调的任何状态或由CRF诱导或促进的疾病，包括炎性病症如关节炎、哮喘和变态反应；焦虑，包括广泛性焦虑症；恐怖和惊恐发作；抑郁症；疲劳综合征(fatigue syndrome)；头痛；疼痛，例如炎性疼痛或神经性疼痛；癌；肠易激惹综合征，包括局限性回肠炎、痉挛性结肠和激惹性结肠；免疫功能障碍；人类免疫缺陷病毒(HIV)感染；神经变性疾病如老年性痴呆、阿尔茨海默病和帕金森病；中风和头部创伤；癫痫；胃肠疾病；进食和体重障碍如肥胖症和神经性厌食症；出血性应激(hemorrhagic stress)；药物和酒精戒断症状；药物成瘾；睡眠障碍；激素失调；皮肤病症；应激引起的精神病发作；生育力问题；性功能障碍和早产(pre-term birth)。
本发明的化合物对上述疾病中的效用可以在多种标准试验中证明例如，本发明的化合物的抗焦虑活性可以在小鼠高架十字迷宫中得到证明[参见例如Rodgers R.J.，Behavioural Pharmacology 8477-496(1997)，其中与高架十字迷宫相关的内容在486页进行了讨论；关于方法，参见Rodgers R.J.等，Ethology and Psychopharmacology(编辑SJ Cooper和CAHendrie)，9-44页，J.Wiley，Chichester]。在该试验中，当口服施用0.1至30mg/kg后，本发明的化合物表现出抗焦虑样作用。
对于上述适应症，适宜的剂量当然将根据例如所使用的化合物、受施主体、施用方式和所治疗疾病的性质和严重程度而变化。但是，一般而言，在动物中可获得令人满意的结果的日剂量是约0.1至约100mg/kg动物体重，优选约0.5至约100mg/kg动物体重。在较大的哺乳动物例如人中，适用的日剂量是约1至约500mg、优选约1至约300mg本发明的化合物，该日剂量可以方便地例如以每天不超过4次的分剂量或以缓释形式被施用。
本发明的化合物可以以任何常规途径施用，特别是经肠、优选口服施用，例如以片剂或胶囊剂形式经肠施用，或者经胃肠外施用，例如以注射用溶液或混悬液形式经胃肠外施用。
如上所述，本发明还提供了用作药物的本发明的化合物，例如所述药物用于治疗由CRF诱导或促进的疾病。
本发明还提供了包含本发明的化合物和至少一种药用载体或稀释剂的药物组合物。这种组合物可以用常规方法制备。单位剂量形式含有例如约0.25至约150mg、优选0.25至约25mg本发明的化合物。
此外，本发明还提供了本发明的化合物在制备治疗本文中所述的任何病症的药物中的用途。
另一方面，本发明还提供了在需要所述治疗的个体中治疗任何上述病症的方法，该方法包括对所述的个体施用治疗有效量的本发明的化合物。
以下实施例用于举例说明本发明。温度均以摄氏度给出且未经校正。
实施例1环丙基甲基-[7-(5，7-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑-4-基)-2，5，6-三甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-丙基-胺在氩气下，将4-(4-氯-2，5，6-三甲基-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基)-5，7-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑(1g)和环丙基甲基-丙基-胺(1.5ml)在无水二甲亚砜(10ml)中的溶液在130℃下搅拌10小时。用薄层色谱监测该反应。将反应混合物冷却，加入水(100ml)，用甲基叔丁基醚(2×100ml)萃取水相。将有机相干燥、蒸发，残余物用甲醇重结晶，得到标题化合物。熔点＝136.0-136.5℃。起始原料4-(4-氯-2，5，6-三甲基-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基)-5，7-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑分8步如下制备将3，5-二甲基-苯-1，2-二胺(87.5g)和N-亚硫酰基苯胺(365g)在无水甲苯(90ml)中的溶液回流20小时。将反应混合物冷却，然后与6N盐酸(900ml)一起搅拌10分钟。分离各层并蒸发有机层。在高真空下蒸馏剩余的油状物，得到4，6-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑。沸点＝80℃，0.1Torr。
将4，6-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑(76.8g)溶解在浓硫酸(200ml)中并冷却至0-5℃。在1小时期间，于5-10℃下，滴加浓硝酸(25ml，d＝1.52)。将该澄清的溶液倾在冰上，滤出所得沉淀，用水洗涤，干燥并用环己烷重结晶，得到5，7-二甲基-4-硝基-苯并[1，2，5]噻二唑纯品。熔点＝105-106℃。
将5，7-二甲基-4-硝基-苯并[1，2，5]噻二唑(20g)在水(2.2L)和乙醇(2.2L)中的溶液加热至回流。逐份加入连二亚硫酸钠(180g)(剧烈放热反应)。加入完毕后，将混合物在冰浴中冷却并用乙酸乙酯萃取。分离出有机层，干燥并蒸发，得到5，7-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑-4-基-胺粗品，将其通过用水重结晶进行纯化。熔点＝113-114℃。
将5，7-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑-4-基-胺(18g)、3-羟基-丁烷-2-酮(18g)和浓盐酸(0.1ml)溶解在环己烷(225ml)中。将反应混合物使用Dean-Stark分水器加热4小时。将混合物冷却数小时，沉淀出少量的副产物并将其滤出。蒸发滤液，得到3-(5，7-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑-4-基-氨基)-丁烷-2-酮粗品，为红色油状物，将其不经进一步纯化直接用于下一步。
将3-(5，7-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑-4-基-氨基)-丁烷-2-酮(24.5g)、丙二腈(7.7g)和催化量的β-丙氨酸(75mg)在无水乙醇(150ml)中的溶液在80℃下加热4小时。将反应混合物冷却，将得到的结晶性2-氨基-1-(5，7-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑-4-基)-4，5-二甲基-1H-吡咯-3-腈滤出，用甲基叔丁基醚洗涤并用乙酸乙酯重结晶。熔点＝209-211℃(粗产物)。
将2-氨基-1-(5，7-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑-4-基)-4，5-二甲基-1H-吡咯-3-腈(10g)在乙酸酐(5ml)和冰醋酸(10ml)中于50℃下加热2小时。冷却后，加入甲基叔丁基醚(30ml)。沉淀出N-[3-氰基-1-(5，7-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑-4-基)-4，5-二甲基-1H-吡咯-2-基]-乙酰胺，为无色晶体，将其滤出，用甲基叔丁基醚洗涤并干燥。熔点＝209-211℃。
在剧烈搅拌下，将N-[3-氰基-1-(5，7-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑-4-基)-4，5-二甲基-1H-吡咯-2-基]-乙酰胺(10g)在85％磷酸(10ml)中于130℃下加热30分钟。加入冰水(100ml)，将所得的7-(5，7-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑-4-基)-2，5，6-三甲基-3，7-二氢-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-酮滤出，用水、甲醇和甲基叔丁基醚洗涤并干燥。熔点＝357-359℃(分解)。
将7-(5，7-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑-4-基)-2，5，6-三甲基-3，7-二氢-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-酮(1g)和磷酰氯(3ml)加热至125℃达2.5小时。在高真空下蒸除过量的磷酰氯，将残余物溶解在乙酸乙酯(20ml)中，加入相同体积的冰水，将混合物搅拌1小时，分离各层。用甲基叔丁基醚(2×20ml)萃取水层。将合并的有机层干燥，用炭处理，过滤并蒸发，得到4-(4-氯-2，5，6-三甲基-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基)-5，7-二甲基-苯并[1，2，5]噻二唑。熔点＝169-171℃。
权利要求
1.游离碱或酸加成盐形式的式A的化合物
2.制备式A化合物和其酸加成盐的方法，该方法包括以下步骤使式II的化合物 其中Hal是卤素，与式III的化合物反应 并回收所得的游离碱形式或酸加成盐形式的化合物。
3.用作药物的游离碱或可药用的酸加成盐形式的权利要求1的化合物。
4.用于治疗伴有内源性CRF水平升高或其中HPA失调的任何状态或由CRF诱导的或促进的疾病的游离碱或可药用的酸加成盐形式的权利要求1的化合物。
5.包含游离碱或可药用的酸加成盐形式的权利要求1的化合物和药用载体或稀释剂的药物组合物。
6.游离碱或可药用的酸加成盐形式的权利要求1的化合物作为药物的用途，所述药物用于治疗伴有内源性CRF水平升高或其中HPA失调的任何状态或由CRF诱导的或促进的疾病。
7.游离碱或可药用的酸加成盐形式的权利要求1的化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗伴有内源性CRF水平升高或其中HPA失调的任何状态或由CRF诱导的或促进的疾病。
8.在需要所述治疗的个体中治疗伴有内源性CRF水平升高或其中HPA失调的任何状态或由CRF诱导的或促进的疾病的方法，该方法包括对所述个体施用治疗有效量的游离碱或可药用的酸加成盐形式的权利要求1的化合物。
全文摘要
本发明涉及游离碱或酸加成盐形式的式(A)的新的苯并噻二唑、其制备方法、其作为药物的用途和含有该化合物的药物组合物。
文档编号A61P25/22GK1738625SQ200480002343
公开日2006年2月22日 申请日期2004年2月6日 优先权日2003年2月7日
发明者P·舍伏特 申请人:诺瓦提斯公司