专利名称：一种预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物，具体地说是银杏提取物和柿叶组成的药物组合物。
背景技术：
心脑血管疾病是一种严重危害人类健康的常见疾病。在目前我国传染病已被基本控制的情况下，该类疾病相对更为常见，且成为死亡的主要原因之一。在我国，心脑血管疾病患者人数呈逐年上升的趋势，年龄呈年轻化趋势，严重的威胁者人民的健康和生活。据统计，我国每年因心脑血管疾病造成死亡的人数约有260万，平均每小时死亡300人；我国15岁以上人群高血压患病率约为14％，比30年前增加了一倍。全国约有高血压患者1亿左右。更严重的是，30岁左右发生心肌梗塞、脑梗塞和脑溢血的患者越来越多。由于目前尚缺乏理想的治疗药物，且化学药物的滥用，不良反应发生率高，人们更青睐于由天然植物组成的中药。本发明结合中医理论和现代药理研究，将由银杏提取物和柿叶提取物组成的药物组合物应用于心脑血管疾病的治疗，不仅有良好的市场前景，而且具有重要的社会意义。
银杏(Ginkgo hiloba L.)为银杏科银杏属植物。银杏树出现于二亿年前，在冰川世纪几近灭种，仅在我国幸存，被达尔文成为“活化石”，现在许多国家也有栽培。银杏的种子、根、叶均可以作为药用。《本草纲目》记载“其性味甘苦而涩，入肺、肾二经，有定喘止咳、止带浊、缩小便”的功效。现在国内外对银杏的系统研究开发及其活跃，欧洲开发的银杏叶制剂的销售额名列所有药物的前5名。现代药理学研究表明银杏叶提取物对性血管有独特的作用，它有扩张血管和解除痉挛作用，还有扩张冠脉血管增加冠脉流量的作用。
柿叶味苦、性寒。传统中医认为其有止咳定喘、生津止渴、活血止血、疗疮等功效。现代药理学研究发现柿叶能增加动物冠脉血流量和降低冠脉阻力的作用，其醇提取物还能改善麻醉狗心脏泵功能、降低心肌耗氧量、改善全身血液循环，临床上其注射液已用于治疗高血压。
山楂叶为蔷薇科植物山里红Crataegus pinnatifida Bge.Var.major N.E.Br.或山楂Grataegus pinnatifida Bge.的干燥叶。夏、秋二季采收，晾干。气微，味涩、微苦。归肝经。传统中医认为山楂有消食健胃、行气散淤功能，能用于肉食积滞，胃脘胀满，泻痢腹痛，淤血经闭，产后淤阻，心腹刺痛，疝气疼痛，高脂血症等。近代药理学研究发现山楂还有抑制血小板聚集，抗血栓形成作用，抗心肌梗塞、心绞痛作用，强心作用和降压作用。药典记录其主要功能有活血化瘀，理气通脉。用于气滞血淤，胸闷憋气，心悸健忘，眩晕耳鸣。
苦碟子为菊科植物抱茎荬菜的当年生干燥全草。传统医学认为其有清热解毒、排脓之功效。现代医学将其用于治疗脑血栓形成及其后遗症、脑栓塞、血栓闭塞性脉管炎、血栓性静脉炎、冠心病、心绞痛、心肌梗死心率失常等心脑血管疾病。
经我们研究发现，银杏提取物和柿叶提取物的组合应用能发挥良好的协同作用，增强药物在治疗心脑血管方面的效果，是一种有效的预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物。同时，银杏提取物与山楂叶提取物或苦碟子提取物组合应用也能产生类似的协同作用，发挥相近的药效作用。
发明内容
经过我们大量的科学研究和临床试验，发现了银杏叶提取物和柿提取物的组合药物有很强的预防和治疗心脑血管疾病的作用，并对此发明做了进一步的完善，将这种组合物制成便于临床实施应用的药物制剂。
本发明的一个目的是提供一种能有效预防和治疗心脑血管疾病的银杏提取物和柿叶提取物的药物组合物，经药理和临床试验证明其作用比单独使用以上各组分更为有效。
本发明的另一个目的是提供一种制备以上药物组合物的生产工艺。
取银杏叶粗粉1kg，加10L50％乙醇溶液回流提取三次，每次1小时(第一次先浸泡12小时)，合并提取液，回收乙醇，浓缩至稠膏，加乙醇溶液使含醇量达90％，取上清液，回收乙醇，浓缩至稠膏，70℃减压干燥，粉碎过100目筛，加2.5L正己烷回流2小时，回收正己烷，残渣加水0.8L，用10％盐酸溶液调pH值至2，煮沸30分钟，冷藏过夜，过滤，滤液用10％氢氧化钠溶液调节pH值至3.5，上已处理好的ADS-17大孔吸附树脂柱(树脂用量与药材比为1∶8)吸附，分别用注射用水和5％乙醇溶液12L洗脱，弃去洗脱液，再用40％乙醇溶液12L洗脱，洗脱速度为134ml/min，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩至稠膏，转移到洁净环境下，70℃减压干燥，得银杏叶提取物备用。
称取柿叶粗粉1kg，加，70％乙醇10L，浸泡30分钟，回流提取1小时，过滤，药渣再加70乙醇11，回流提取1小时，过滤，重复，合并三次滤液，回收乙醇后，用NaOH调pH值至13，离心，浓缩，加乙醇含量达70％，静置过夜，滤取上清液，回收乙醇，加水溶解，滤过，滤液用醋酸乙酯提取5次，合并醋酸乙酯，回收醋酸乙酯，加水溶解，上聚酰胺柱，用蒸馏水洗至洗脱液无色，用70％乙醇洗脱，调解流速为5-10ml/min，收集洗脱液，低压低温回收酒精、浓缩、减压喷雾干燥得柿叶提取物。
山楂的提取方法取山楂果肉，以60％乙醇回流提取2次，每次1.5小时。合并提取液，回收乙醇，加入适量蒸馏水，拌匀，加入CaCl2，静置过夜。离心，分别收集上清液，用氨水调pH至7-8，分别加入大孔吸附树脂柱中，调节流速为5ml/min，用蒸馏水洗去杂质，以乙醇为流动相解吸附，回收乙醇得山楂提取物。
苦碟子的提取方法取抱茎苦碟子1000g，用水煎煮二次，第一次加10-12倍量水煎煮1小时，第二次加6-8倍量水煎煮0.5小时，合并两次煎煮液，浓缩液加CaO，调pH至10，放置，高速离心，取上清液上大孔树脂用水冲洗至流出液无色，再用80％乙醇洗脱，至流出液为淡黄色，停止洗脱，洗脱液回收乙醇至流浸膏状，加95％乙醇沉淀，滤过，减压干燥，得苦碟子提取物。
本发明的药物组合物的配方如下银杏提取物1-99重量比 柿叶提取物1-99重量比采用现有的医药工业领域的制剂技术，可以将上述配方的药物组合物制成各种适合临床使用的药物剂型。
以下内容为验证本发明药物组合物的药理学和临床研究试验结果本发明药物具有益气活血、祛瘀通络之功能，用于治疗心脑血管病，如冠心病心绞痛、心肌梗塞、脑梗塞等。以下通过药理试验对本发明的药理作用作进一步说明(1)小鼠急性脑缺氧实验昆明种小鼠50只，体重18～22g，随机分成5组，每组10只。设为空白对照组、本发明药物高中低剂量组(4.0g/kg、2.0g/kg、1.0g/kg)、舒血宁(1ml/kg)阳性对照组。腹腔给药3天后，断头，记录小鼠断头后张口次数及喘息时间。
表1药物对小鼠断头后张口喘息时间的影响(n＝10，x±s)
注与空白组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
试验结果本发明药物与舒血宁均能明显延长小鼠断头张口次数及喘息时间，高、中剂量与空白对照组比较具有极显著统计学意义(P＜0.01)，低剂量与空白组比较有显著性差异(P＜0.05)。本发明药物高剂量组效果优于舒血宁组，中剂量组与舒血宁组相当，表明本发明药物腹腔给约后能提高小鼠抗急性缺氧能力，使小鼠耗氧和耗能明显降低，具有保护脑组织缺氧和组织缺氧损伤，改善脑能量代谢。
(2)体内抗血小板聚集实验健康家兔30只，体重2.0～2.5kg，雌雄均用，随机分成5组，每组6只，即等体积空白溶液组、1.0、2.0、4.0g/kg的本发明药物组和1mg/kg的舒血宁注射液组。上述各组均以5.0ml/kg体重经耳缘静脉注射给药。给药前取血一次，给药后10、30、60、90和120min分别取血，制备PRP和PPP，观察药物静脉注射后对PAF诱导血小板聚集功能的影响。
表2药物对PAF诱导血小板聚集的影响(n＝10，x±s)
注(1)与给药前比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。(2)括号内为抑制率。
实验结果表明，本发明药物静脉注射后，对PAF诱导的血小板聚集功能物明显抑制作用，注射后30和60分钟抑制PAF引起的血小板聚集作用非常明显。高剂量(4.0mg/kg)，注射后10min起效，于60min达最大抑制作用，抗PAF作用持续至120min；舒血宁注射液的作用特点与本发明药物高剂量相似，注射后30min、60min、90min，本发明药物的抗PAF作用强度明显高于1ml/kg舒血宁注射液组。
(3)电刺激大鼠颈动脉血栓形成试验雄性SD大鼠50只，体重190～230g，随机分成5组，每组10只，即空白溶液组(等体积)、1.0、2.0、4.0g/kg的本发明药物组和1ml/kg的舒血宁注射液组。上述各组腹腔注射1次/d，共2次，于末次给药30min后，腹腔注射30mg/kg戊巴比妥钠麻醉大鼠，分离左颈总动脉，以不锈钢电极置于颈总动脉下，以1.5mA直流电刺激动脉，远心端放置温度传感器。打开仪器开关，随动脉内血栓形成，血流阻断，温度下降，仪器自动报警，显示血栓形成时间。实验数据用Studentt-检验行统计学处理。
表3药物对电刺激大鼠颈动脉血栓形成时间的影响(n＝10，x±s)
注与空白组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
试验结果显示本发明药物静脉注射后，呈剂量相关性明显延长电刺激大鼠颈动脉的血栓形成时间；1mg/kg舒血宁注射液组的血栓形成时间与2.0mg/kg本发明药物相当。
(4)对胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓形成的影响取健康小鼠，18～20g，50只，雌雄各半，随机分为5个组，每组10只，即生理盐水组(等体积)，1ml/kg的舒血宁注射液组，1.0、2.0、4.0g/kg的本发明药物组。各组每日给药一次，连续7大，末次给药后30分钟，尾静脉注射胶原蛋白(225μg/只)与肾上腺素(9μg/只)的混合诱导剂，注射后即观察5分钟之内小鼠死亡数和15分钟内小鼠偏瘫的恢复数，计算小鼠脑血栓的保护率。
表4药物对胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓形成的影响(n＝10，x±s)
注与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
实验结果本发明药对胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓有明显的保护作用(P＜0.01)。本发明药高剂量作用效果与舒血宁注射液效果相当。
(5)抗心肌缺血试验取大鼠50只，随机分为5组，即生理盐水对照组(等容积)，1mg/kg的舒血宁注射液组，1.0、2.0、4.0g/kg的本发明药物组。各组动物腹腔注射戊巴比妥钠30mg/kg麻醉后，尾静脉注射垂体后叶素(Pit)，于15s、30s、1min、2min、5min记录心电图。待心电图回复正常后，腹腔注射给药，30min后，尾静脉注射Pit，同上记录心电图，观察给药前后T波及S-T段的变化。实验数据用Studentt-检验行统计学处理。
表5药物对垂体后叶素引起的T波增高的影响(n＝10，x±s)(T波升高最大值)
注与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
表6药物对垂体后叶素引起的S-T段上移的影响(n＝10，x±s)(S-T段上移最大值)
注与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
试验结果表明本发明药物高、中、低剂量均能明显对抗垂体后叶素引起的T波及S-T段升高(P＜0.05)，表明本发明药物具有较明显的抗心肌缺血作用，高剂量其效果优于阳性药舒血宁注射液。
具体实施例以下为结合具体实施方式
对本发明所作的进一步的详细描述，并不对本发明作任何限制实施例1胶囊处方及工艺处方 (按1000粒计)银杏提取物 20g柿叶提取物 20g淀粉 150ml微粉硅胶 10g制成 1000粒取银杏叶粗粉1kg，加10L50％乙醇溶液回流提取三次，每次1小时(第一次先浸泡12小时)，合并提取液，回收乙醇，浓缩至稠膏，加乙醇溶液使含醇量达90％，取上清液，回收乙醇，浓缩至稠膏，70℃减压干燥，粉碎过100目筛，加2.5L正己烷回流2小时，回收正己烷，残渣加水0.8L，用10％盐酸溶液调pH值至2，煮沸30分钟，冷藏过夜，过滤，滤液用10％氢氧化钠溶液调节pH值至3.5，上已处理好的ADS-17大孔吸附树脂柱(树脂用量与药材比为1∶8)吸附，分别用注射用水和5％乙醇溶液12L洗脱，弃去洗脱液，再用40％乙醇溶液12L洗脱，洗脱速度为134ml/min，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩至稠膏，转移到洁净环境下，70℃减压干燥，得银杏叶提取物备用。
称取柿叶粗粉1kg，加，70％乙醇10L，浸泡30分钟，回流提取1小时，过滤，药渣再加70乙醇1L，回流提取1小时，过滤，重复，合并三次滤液，回收乙醇后，用NaOH调pH值至13，离心，浓缩，加乙醇含量达70％，静置过夜，滤取上清液，回收乙醇，加水溶解，滤过，滤液用醋酸乙酯提取5次，合并醋酸乙酯，回收醋酸乙酯，加水溶解，上聚酰胺柱，用蒸馏水洗至洗脱液无色，用70％乙醇洗脱，调解流速为5-10ml/min，收集洗脱液，低压低温回收酒精、浓缩、减压喷雾干燥得柿叶提取物。
山楂的提取方法取山楂果肉，以60％乙醇回流提取2次，每次1.5小时。合并提取液，回收乙醇，加入适量蒸馏水，拌匀，加入CaCl2，静置过夜。离心，分别收集上清液，用氨水调pH至7-8，分别加入大孔吸附树脂柱中，调节流速为5ml/min，用蒸馏水洗去杂质，以乙醇为流动相解吸附，回收乙醇得山楂提取物。
苦碟子的提取方法取抱茎苦碟子1000g，用水煎煮二次，第一次加10-12倍量水煎煮1小时，第二次加6-8倍量水煎煮0.5小时，合并两次煎煮液，浓缩液加CaO，调pH至10，放置，高速离心，取上清液上大孔树脂用水冲洗至流出液无色，再用80％乙醇洗脱，至流出液为淡黄色，停止洗脱，洗脱液回收乙醇至流浸膏状，加95％乙醇沉淀，滤过，减压干燥，得苦碟子提取物。
取处方量银杏提取物、柿叶提取物、淀粉，微粉硅胶混均，装胶囊。
实施例2粉针处方及工艺处方(按1000瓶计)银杏提取物 10g柿叶提取物 10g甘露醇 250g注射用水10g制成1000瓶提取方法同上。成型工艺为取处方量银杏提取物、柿叶提取物、甘露醇、聚乙二醇400、80％处方量注射用水溶解；初滤后再用0.2um微孔滤膜精滤；补足注射用水至全量；分装；冻干；包装。
实例3注射液处方及工艺处方 (按1000瓶计)银杏提取物10g柿叶提取物10g注射用水 加至2000ml制成 1000瓶提取方法同上。成型工艺为取处方量银杏提取物、柿叶提取物、50％处方量注射用水溶解；活性炭初滤后再用0.2um微孔滤膜精滤；补足注射用水至全量；测定含量；分装；灭菌；灯检；包装。
实例4片剂处方及工艺处方 (按1000片计)银杏提取物 20g柿叶提取物 20g淀粉 150g羟丙基纤维素 7g羟甲基淀粉钠 7g微粉硅胶 10g制成 1000片提取方法同上。成型工艺为取处方量银杏提取物、柿叶提取物、淀粉，羧甲基淀粉钠，用5％羟丙基纤维素作黏合剂，制软材，20目筛制粒，60℃干燥，加入微粉硅胶整粒，压片。
实例5滴丸处方及工艺处方(按1000粒计)银杏提取物 20g柿叶提取物 20g聚乙二醇6000 200g制成 1000粒提取方法同上。成型工艺为取聚乙二醇6000于油浴上加热至90-100℃，待全部溶解后，加入银杏提取物、柿叶提取物、搅拌至溶解，转移至贮液瓶中，密闭并保温再80-90℃，调节滴液定量阀门，滴入10-15℃的液体石蜡中，将形成的滴丸沥干并擦除液体石蜡，干燥。
权利要求
1.一种预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于该药物组合物的配方为银杏提取物1-99重量比，柿叶提取物1-99重量比。
2.一种预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于该药物组合物的配方为银杏提取物45-55重量比，柿叶提取物45-55重量比。
3.按照权利要求1所述的预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物，其中的柿叶提取物可以用山楂叶提取物代替。
4.按照权利要求1所述的预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物，其中的柿叶提取物可以用苦碟子提取物代替。
5.按照权利要求1所述的预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物，其中的银杏提取物可以用银杏原药材代替，柿叶提取物可用柿叶原药材代替。
6.按照权利要求2所述的预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物，其中的山楂叶提取物可以用山楂叶原药材代替。
7.按照权利要求3所述的预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物，其中的苦碟子提取物可以用苦碟子原药材代替。
8.按照权利要求1所述的预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于银杏提取物中银杏黄酮重量比为10-100，柿叶提取物中柿叶黄酮的重量比为10-100。
9.按照权利要求2所述的预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于山楂叶提取物中山楂黄酮重量比为10-100，苦碟子提取物中苦碟子黄酮的重量比为10-100。
10.按照权利要求1所述的预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于其临床上适用于治疗高血压、冠心病、心绞痛、心肌梗塞、淤血型肺心病、缺血性脑病、脑血栓等心脑血管疾病。
11.按照权利要求1所述预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于它的剂型是适合临床应用的注射液(包括输液、冻干粉针)、丸剂、滴丸、片剂(包括分散片、口崩片等)、缓释片、胶囊、软胶囊、颗粒剂、散剂、锭剂、煎膏剂、口服液(合剂)、糖浆剂、软膏剂、搽剂、涂膜剂等药剂学上可以接受的剂型中的任何一种药物剂型。
全文摘要
本发明提供了一种能有效的预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物，即银杏和柿叶提取物组成的药物组合物。它们的组合应用有良好的协同作用提高了药效，药理试验表明这种药物组合物具有益气活血、祛淤通络之功效，对心脑血管疾病具有独特的疗效。
文档编号A61P9/10GK1907319SQ20051008883
公开日2007年2月7日 申请日期2005年8月2日 优先权日2005年8月2日
发明者孙毅 申请人:孙毅