专利名称：抗病毒复方制剂及其制备方法、质控方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明是一种抗病毒复方制剂及其制备方法、质控方法和应用，属于中药的技术领域。
背景技术：
感冒，是由多种病毒引起的上呼吸道感染，俗称“伤风”，是四季均可发生的常见呼吸道疾病。病毒性感冒即上呼吸道感染，又简称上感，是由多种病毒引起的常见呼吸道传染病。虽然市场上用于治疗感冒的药物很多，但西药普遍存在副作用大的问题，而中成药是根据不同病因，结合中医理论用以治疗疾病的药物，例如风寒感冒、风热感冒等，都是需要选择不同的药物进行治疗的。并且目前市面上西药类感冒药存在头晕、嗜睡、四肢无力等让人不快反应的弊端；而纯中药感冒药又存在起效慢等缺点。为了达到更好的防治目的，许多发明人及药品企业做了大量的研究，也提供了一些优秀的治疗产品；如专利申请号为200410048399.7、名称为“一种抗病毒口腔崩解片及其制备方法”的专利申请，它用于感冒方面的疾病有起效快的作用；但是在深入研究中发现，采用药味多的大组方，其制剂的成分复杂，并且使患者服药量大，在此基础上本申请人采用了黄芩、淫羊藿单体配伍不仅能减少患者的服用量，除去药材提取物中的一些毒副作用较强成分，提高了制剂的安全性和质量的可控性，极大地提高疗效，而且更有利于制剂的成型。
发明内容
本发明的目的在于提供一种抗病毒的中药制剂及其制备方法和应用；本发明针对现有技术，在中医药理论指导下，在实验筛选的基础上，采用黄芩苷、淫羊藿苷配伍做成制剂，优选出最佳的组方及工艺；得到的产品，特别是注射制剂和舌下含片制剂产品能起到吸收快、生物利用度高、起效快、避免肝脏的首过效应的作用。
本发明是这样构成的按照重量百分比计算，它是由黄芩苷1～99％和淫羊藿苷99～1％和适当的辅料制作而成。优选为按照重量百分比计算，它是由黄芩苷20～80％和淫羊藿苷80～20％和适当的辅料制作而成。准确的说按照重量百分比计算，它是由黄芩苷60～40％、淫羊藿苷40～60％和适当的辅料制作而成。
所述的黄芩苷可以是黄芩醇提取物、黄芩水提取物、黄芩水提醇沉提取物、黄芩半仿生提取物、黄芩超临界萃取物或者以上各提取物的精制品；淫羊藿苷可以是淫羊藿醇提取物、淫羊藿水提取物、淫羊藿水提醇沉提取物、淫羊藿半仿生提取物、淫羊藿超临界萃取物或者以上各提取物的精制品。
所述的制剂可以是药剂学上任何可以接受的剂型直接用于注射给药的注射液、直接供静脉滴注的静脉输液、需稀释后用于静脉滴注的注射用浓溶液和用冷冻干燥法或喷雾干燥法制得的注射用无菌粉末和无菌块状物以及片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂、软胶囊剂、口服液体制剂、口腔崩解片或分散片剂。准确的说所述的制剂可以是各种注射剂、滴丸、舌下含片、口崩片、分散片、软胶囊、胶囊、普通片。所述的制剂可以在将黄芩苷、淫羊藿苷中的一种或两种制备成脂质体或前体脂质体的基础上制得。
所述制剂中的黄芩苷、淫羊藿苷含量为制剂标示量的90％-110％。
所述抗病毒复方制剂中黄芩苷和淫羊藿苷可以是市售的或用以下方法制备得到的A、黄芩苷是这样制备的取黄芩药材，粉碎后加入水或乙醇溶液提取，合并提取液，过滤，浓缩得黄芩苷粗提物，在此基础上采用乙醇沉淀法、柱层析法、萃取法、絮凝沉淀法中的一种或几种联合使用进行适当精制，得黄芩苷；B、淫羊藿苷是这样制备的取淫羊藿药材，粉碎后加入水或乙醇溶液提取，合并提取液，过滤，浓缩得淫羊藿苷粗提物，在此基础上采用乙醇沉淀法、柱层析法、萃取法、絮凝沉淀法中的一种或几种联合使用进行适当精制，得淫羊藿苷。
所述制剂中的注射用无菌块状物这样制备取黄芩苷、淫羊藿苷，加1800ml注射用水，按药物与辅料用量比1∶2.5加入甘露醇，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至5.0～10.0，加注射用水至2000ml，混匀，加入0.3％的针用活性炭，煮沸30分钟，粗滤，再用0.45μm和0.22μm微孔滤膜滤过，滤液分装，每瓶2.0ml，冷冻干燥，第一阶段的平衡冻结温度为0℃时的平衡时间为2.5小时，即搁板温度与产品温度基本一致的时间；第二阶段冻结温度从0℃到最低共熔温度-15℃时，搁板温度与产品温度平衡时间为3.0小时；第三阶段继续降温至-27℃，约需3.0小时，保持此温度4小时，直至产品完全冻牢，即开始抽真空，进入干燥程序，在-25℃恒温下抽真空，缓慢升温，3～5℃/h，至最低共熔点温度，时间约为8小时，升华干燥完成后，继续在低压条件下，升温干燥以除去残余水分，时间约为3～5小时，保持25℃以上干燥4小时，压盖，即得。
所述舌下含片是这样制备取黄芩苷、淫羊藿苷的提取物混合，加入10％的甜味剂、15％的甘露醇、20％聚乙烯吡咯烷酮K30，过30目筛，加入适量滑石粉、微粉硅胶，混和均匀，压片，即得舌下含片。舌下含片的辅料可以是如下的一种或几种乳糖、甘露醇、玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮K30、柠檬酸、柠檬酸钠、硬脂酸镁、黄色色素、乙酰乙酸衍生物、甜味剂、柠檬香料。
所述制剂的辅料可以是乳糖、半乳糖、甘露醇、玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮K30、柠檬酸、柠檬酸钠、硬脂酸镁、色素、乙酰乙酸衍生物、甜味剂、香料、甘氨酸、葡萄糖、氯化钠、右旋糖酐、甘油、乙醇、丙二醇、聚乙二醇、山梨醇、吐温、羟丙基-β-环糊精、泊洛沙姆中的一种或几种。
所述制剂中的前体脂质体这样制备取黄芩苷、淫羊藿苷，加磷酸缓冲液溶解，加入十八胺混匀、豆磷脂和胆固醇的熔融液中，搅拌均匀，超声处理，低温冷冻，得到的干粉过筛，即得。
所述的质量控制方法包括如下方法中的部分或全部(1)抗病毒药物组合物的指纹图谱测试，包括以黄芩苷成分特征为主的指纹图谱和以淫羊藿苷成分特征为主的指纹图谱中的一种或几种；(2)黄芩苷、淫羊藿苷中全部或部分成分的鉴别测试方法；(3)黄芩苷、淫羊藿苷中全部或部分成分的含量测试方法。
所述的制剂用于制备治疗肺炎、呼吸道感染、流感、禽流感、SARS、哮喘、免疫力低下等疾病的药物。
为证明本发明提供的药物具有有效的效果，申请人进行了一系列实验；实验例1对不同配比药效学比较研究通过肺炎双球菌感染小鼠保护作用的实验，对不同比例的处方进行了系统的筛选试验，其中取18～22gKM种小鼠随机分组，每组21只，雌雄兼用，①配方1空白对照组等量生理盐水；②配方2模型对照组，等量生理盐水；③配方3黄芩苷/淫羊藿苷＝99/1；④配方4黄芩苷/淫羊藿苷＝80/20；⑤配方5黄芩苷/淫羊藿苷＝40/60；⑥配方6黄芩苷/淫羊藿苷＝60/40；⑦配方7黄芩苷/淫羊藿苷＝20/80；⑧配方8黄芩苷/淫羊藿苷＝1/99。各组小鼠按1次/天×6天给药，第3天给药1小时后，腹腔注射肺炎双球菌菌液0.5ml/只鼠(除空白对照组外)，继续给药3天，观察各组动物7日内死亡情况。结果见表1
表1组方研究结论
由实验结果可知，黄芩苷∶淫羊藿苷的最佳配伍范围＝40～60％∶60～40％。
实验例2成型工艺研究2.1注射剂填充剂种类及用量的选择本申请人在研制中发现，适当的填充剂、填充剂用量是粉针制剂成型和稳定的重要因素，为了提高该粉针制剂的质量，首先，本申请人对填充剂的种类进行了考察。结果见下表。
2.1.1不同填充剂种类筛选表2不同填充剂冻干效果比较
可见，由于甘露醇的共熔点高，水溶性好，利于本品的冻干和成型，而其他的填充剂均不适合本品，故选择甘露醇为填充剂。
2.1.2甘露醇用量的筛选然后本申请人对甘露醇与药物有效成分的重量比进行考察，结果见下表。
表3不同填充剂配比对冻干效果的影响
可见，药物∶甘露醇＝1∶2.5时，产品成型效果好，从经济角度考虑，确定药物∶甘露醇＝1∶2.5。
2.2舌下含片填充剂种类及用量的选择2.2.1不同填充剂种类筛选舌下含片则是由舌下黏膜直接吸收而发挥全身作用的片剂药物。舌下含片可防止胃肠道破坏药物的有效成份，也可避免药物影响肝脏功能。解决了原剂型崩解性差，溶出缓慢的缺点。
考察因素与水平通过预实验，将对抗病毒组方的快速释放吸收及疗效有明确影响的因素甜味剂(A)甘露醇(B)和聚乙烯吡咯烷酮K30(C)及用量作为可变因素进行考察，各因素所取水平见下表。选用L9(43)正交表进行实验。
表4正交试验因素水平表
以对金黄色葡萄球菌感染小鼠的存活率作为指标，具体实验为取18～22g，KM种小鼠随机分组，每组21只，雌雄兼用，各组给药1次/天×6天，第3天给药1小时后，腹腔注射金黄色葡萄球菌菌液0.5ml/只鼠，继续给药3天，观察各组动物7日内死亡情况。实验分组及结果见下表表5正交试验安排和结果
可见，辅料选用10％的甜味剂、15％的甘露醇、20％聚乙烯吡咯烷酮K30，产品药效好。
实验例3制剂药效学实验3.1体内抗菌作用对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用取18～22g，KM种小鼠随机分组，每组21只，雌雄兼用，①空白对照组等量生理盐水；②模型对照组，等量生理盐水；③抗病毒颗粒3g/kg；④本发明注射剂组3g/kg；⑤本发明舌下含片组3g/kg。以上各组给药1次/天×6天，第3天给药1小时后，腹腔注射金黄色葡萄球菌菌液0.5ml/只鼠(除空白对照组外)，继续给药3天，观察各组动物7日内死亡情况，结果见表。
表6抗病毒制剂对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用
由实验结果可知，本发明药物制剂对金黄色葡萄球菌感染小鼠的存活率较抗病毒颗粒高，本发明药物制剂对金黄色葡萄球菌有抑制作用。
3.2体内抗病毒实验体内抗病毒作用病毒感染小鼠半数致死量(LD50)测定取KM种小鼠49只，体重11～13g，雌雄兼用，随机分成7组，每组7只，取增毒3次的病毒尿囊液，以10倍稀释，每组滴一个病毒浓度，各组小鼠在乙醚浅麻醉下以病毒尿囊液30ul滴鼻，观察14天内死亡数，按Reed Muench法计算，LD50为2.88。
对甲型流感病毒感染小鼠的保护作用取KM种小鼠，体重11～13g，雌雄各半，随机分成组，每组21只(1)空白对照组，等量生理盐水；(2)模型对照组，等量生理盐水；(3)利巴韦林组75mg/kg；(4)本发明注射剂组3g/kg；(5)本发明舌下含片组3g/kg。以上各组小鼠给药1次/×6天，于给药第天各组小鼠(除空白对照组外)在乙醚浅麻醉下以增毒3次的病毒尿囊液滴鼻感染小鼠，每鼠30ul(20个LD50攻击量)观察动物感染后发病症状，记录感染14天后死亡数，并计算保护率及平均存活天数，结果见表表7抗病毒制剂对甲型流感病毒感染小鼠的保护作用
由实验结果可知，本发明药物制剂对甲型流感病毒感染小鼠具有明显保护作用，本发明药物制剂对甲型流感病毒有抑制作用较好。
具体的实施方式本发明的实施例1黄芩苷50g淫羊藿苷50g取黄芩苷、淫羊藿苷，加1800ml注射用水，按药物与辅料用量比1∶2.5加入甘露醇，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至5.0～10.0，加注射用水至2000ml，混匀，加入0.3％的针用活性炭，煮沸30分钟，粗滤，再用0.45μm和0.22μm微孔滤膜滤过，滤液分装，每瓶2.0ml，冷冻干燥，第一阶段的平衡冻结温度为0℃时的平衡时间为2.5小时，即搁板温度与产品温度基本一致的时间；第二阶段冻结温度从0℃到最低共熔温度-15℃时，搁板温度与产品温度平衡时间为3.0小时；第三阶段继续降温至-27℃，约需3.0小时，保持此温度4小时，直至产品完全冻牢，即开始抽真空，进入干燥程序，在-25℃恒温下抽真空，缓慢升温，3～5℃/h，至最低共熔点温度，时间约为8小时，升华干燥完成后，继续在低压条件下，升温干燥以除去残余水分，时间约为3～5小时，保持25℃以上干燥4小时，压盖，即得注射用无菌块状物。一次2支，一日1次，用250ml0.9％生理盐水溶解后使用。
其中黄芩苷可来源于市售或由以下方法制得黄芩粉碎，加入8倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍体积水溶解，滤过，滤液过AB-8大孔树脂柱，先用6倍水和5倍20％乙醇冲洗，弃掉洗脱液；再用60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.0～1.05，用盐酸调pH值至2，搅拌均匀，放置过夜，滤过，沉淀用水洗涤，抽干，真空干燥得黄芩提取物。将提取物加入2倍乙醇溶解，滤过，加入一倍膏粉重量的硅胶混合均匀，水浴挥干溶剂，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯冲洗8倍体积，再用丙酮冲洗8倍体积，收集丙酮洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得黄芩苷。
其中淫羊藿苷可来源于市售或由以下方法制得淫羊藿切成1cm左右小段，加入10倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成50℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍量水，搅拌溶解，滤过，滤液过D-101大孔树脂柱，先用8倍体积水和5倍体积25％乙醇洗涤，弃去洗脱液，再用6倍体积50％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成50℃时测定相对密度为1.10～1.20，真空干燥得淫羊藿提取物。加入2倍乙醇溶解，拌入等量硅胶，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集6～15倍洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得淫羊藿苷。
本发明的实施例2黄芩苷50g淫羊藿苷50g取黄芩苷、淫羊藿苷混合，加入10％的甜味剂、15％的甘露醇、20％聚乙烯吡咯烷酮K30，过30目筛，加入适量滑石粉、微粉硅胶，混和均匀，压片，即得舌下含片。
其中黄芩苷可来源于市售或由以下方法制得黄芩粉碎，加入8倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍体积水溶解，滤过，滤液过AB-8大孔树脂柱，先用6倍水和5倍20％乙醇冲洗，弃掉洗脱液；再用60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.0～1.05，用盐酸调pH值至2，搅拌均匀，放置过夜，滤过，沉淀用水洗涤，抽干，真空干燥得黄芩提取物。将提取物加入2倍乙醇溶解，滤过，加入一倍膏粉重量的硅胶混合均匀，水浴挥干溶剂，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯冲洗8倍体积，再用丙酮冲洗8倍体积，收集丙酮洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得黄芩苷。
其中淫羊藿苷可来源于市售或由以下方法制得淫羊藿切成1cm左右小段，加入10倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成50℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍量水，搅拌溶解，滤过，滤液过D-101大孔树脂柱，先用8倍体积水和5倍体积25％乙醇洗涤，弃去洗脱液，再用6倍体积50％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成50℃时测定相对密度为1.10～1.20，真空干燥得淫羊藿提取物。加入2倍乙醇溶解，拌入等量硅胶，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集6～15倍洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得淫羊藿苷。
本发明的实施例3黄芩苷30g淫羊藿苷70g取市售黄芩苷、淫羊藿苷混合，加入10％的甜味剂、15％的甘露醇、20％聚乙烯吡咯烷酮K30，过30目筛，加入适量滑石粉、微粉硅胶，混和均匀，压片，即得舌下含片。
本发明的实施例4黄芩苷60g淫羊藿苷40g
取黄芩苷、淫羊藿苷混合，加入10％的甜味剂、15％的甘露醇、20％聚乙烯吡咯烷酮K30，过30目筛，加入适量滑石粉、微粉硅胶，混和均匀，压片，即得舌下含片。
其中黄芩苷可来源于市售或由以下方法制得黄芩粉碎，加入8倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍体积水溶解，滤过，滤液过AB-8大孔树脂柱，先用6倍水和5倍20％乙醇冲洗，弃掉洗脱液；再用60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.0～1.05，用盐酸调pH值至2，搅拌均匀，放置过夜，滤过，沉淀用水洗涤，抽干，真空干燥得黄芩提取物。将提取物加入2倍乙醇溶解，滤过，加入一倍膏粉重量的硅胶混合均匀，水浴挥干溶剂，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯冲洗8倍体积，再用丙酮冲洗8倍体积，收集丙酮洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得黄芩苷。
其中淫羊藿苷可来源于市售或由以下方法制得淫羊藿切成1cm左右小段，加入10倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成50℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍量水，搅拌溶解，滤过，滤液过D-101大孔树脂柱，先用8倍体积水和5倍体积25％乙醇洗涤，弃去洗脱液，再用6倍体积50％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成50℃时测定相对密度为1.10～1.20，真空干燥得淫羊藿提取物。加入2倍乙醇溶解，拌入等量硅胶，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集6～15倍洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得淫羊藿苷。
本发明的实施例5黄芩70苷g淫羊藿苷30g将以上药物混合均匀，将与主药比例是1.8∶1的硬脂酸钠置不锈钢容器内，加入提取物，混合均匀，加热至80-85℃，待全部熔融后，70-75℃保温，机械高速搅拌15min至均匀，转移至贮液瓶中，70～75℃保温，调节滴液阀门，滴入30～35℃的煤油中，滴距5～6cm，滴速40～45滴/分，将形成的滴丸沥尽并擦除煤油，包装，即得滴丸剂。
其中黄芩苷可来源于市售或由以下方法制得黄芩粉碎，加入8倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍体积水溶解，滤过，滤液过AB-8大孔树脂柱，先用6倍水和5倍20％乙醇冲洗，弃掉洗脱液；再用60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.0～1.05，用盐酸调pH值至2，搅拌均匀，放置过夜，滤过，沉淀用水洗涤，抽干，真空干燥得黄芩提取物。将提取物加入2倍乙醇溶解，滤过，加入一倍膏粉重量的硅胶混合均匀，水浴挥干溶剂，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯冲洗8倍体积，再用丙酮冲洗8倍体积，收集丙酮洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得黄芩苷。
其中淫羊藿苷可来源于市售或由以下方法制得淫羊藿切成1cm左右小段，加入10倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成50℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍量水，搅拌溶解，滤过，滤液过D-101大孔树脂柱，先用8倍体积水和5倍体积25％乙醇洗涤，弃去洗脱液，再用6倍体积50％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成50℃时测定相对密度为1.10～1.20，真空干燥得淫羊藿提取物。加入2倍乙醇溶解，拌入等量硅胶，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集6～15倍洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得淫羊藿苷。
本发明的实施例6黄芩苷20g淫羊藿苷80g取黄芩苷、淫羊藿苷混合，加入乳糖、甘露醇、玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮K30、柠檬酸、柠檬酸钠、硬脂酸镁、黄色色素、乙酰乙酸衍生物、甜味剂、柠檬香料，过30目筛，加入适量滑石粉、微粉硅胶，混和均匀，压片，即得舌下含片。
其中黄芩苷可来源于市售或由以下方法制得黄芩粉碎，加入8倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍体积水溶解，滤过，滤液过AB-8大孔树脂柱，先用6倍水和5倍20％乙醇冲洗，弃掉洗脱液；再用60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.0～1.05，用盐酸调pH值至2，搅拌均匀，放置过夜，滤过，沉淀用水洗涤，抽干，真空干燥得黄芩提取物。将提取物加入2倍乙醇溶解，滤过，加入一倍膏粉重量的硅胶混合均匀，水浴挥干溶剂，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯冲洗8倍体积，再用丙酮冲洗8倍体积，收集丙酮洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得黄芩苷。
其中淫羊藿苷可来源于市售或由以下方法制得淫羊藿切成1cm左右小段，加入10倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成50℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍量水，搅拌溶解，滤过，滤液过D-101大孔树脂柱，先用8倍体积水和5倍体积25％乙醇洗涤，弃去洗脱液，再用6倍体积50％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成50℃时测定相对密度为1.10～1.20，真空干燥得淫羊藿提取物。加入2倍乙醇溶解，拌入等量硅胶，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集6～15倍洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得淫羊藿苷。
本发明的实施例7黄芩苷25g淫羊藿苷75g
取黄芩苷、淫羊藿苷加磷酸缓冲液溶解，加入十八胺混匀、豆磷脂和胆固醇的熔融液中，搅拌均匀，超声处理，低温冷冻，得到的干粉过筛，即得前体脂质体。
其中黄芩苷可来源于市售或由以下方法制得黄芩粉碎，加入8倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍体积水溶解，滤过，滤液过AB-8大孔树脂柱，先用6倍水和5倍20％乙醇冲洗，弃掉洗脱液；再用60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.0～1.05，用盐酸调pH值至2，搅拌均匀，放置过夜，滤过，沉淀用水洗涤，抽干，真空干燥得黄芩提取物。将提取物加入2倍乙醇溶解，滤过，加入一倍膏粉重量的硅胶混合均匀，水浴挥干溶剂，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯冲洗8倍体积，再用丙酮冲洗8倍体积，收集丙酮洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得黄芩苷。
其中淫羊藿苷可来源于市售或由以下方法制得淫羊藿切成1cm左右小段，加入10倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成50℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍量水，搅拌溶解，滤过，滤液过D-101大孔树脂柱，先用8倍体积水和5倍体积25％乙醇洗涤，弃去洗脱液，再用6倍体积50％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成50℃时测定相对密度为1.10～1.20，真空干燥得淫羊藿提取物。加入2倍乙醇溶解，拌入等量硅胶，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集6～15倍洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得淫羊藿苷。
本发明的实施例8黄芩苷80g淫羊藿苷20g将以上药物混合均匀，按主药∶辅料＝1.4∶1的比例加入磷酸钙，按主药∶辅料＝1.2∶1的比例加入微粉纤维素，以及按主药∶辅料＝3∶1的交联聚乙烯吡咯烷酮，混和均匀，用70％乙醇适量制软材，过20目筛制颗粒，55℃干燥，取出，过30目筛整粒，加入适量滑石粉、微粉硅胶，混和均匀，压片，即得分散片。
其中黄芩苷可来源于市售或由以下方法制得黄芩粉碎，加入8倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍体积水溶解，滤过，滤液过AB-8大孔树脂柱，先用6倍水和5倍20％乙醇冲洗，弃掉洗脱液；再用60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.0～1.05，用盐酸调pH值至2，搅拌均匀，放置过夜，滤过，沉淀用水洗涤，抽干，真空干燥得黄芩提取物。将提取物加入2倍乙醇溶解，滤过，加入一倍膏粉重量的硅胶混合均匀，水浴挥干溶剂，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯冲洗8倍体积，再用丙酮冲洗8倍体积，收集丙酮洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得黄芩苷。
其中淫羊藿苷可来源于市售或由以下方法制得淫羊藿切成1cm左右小段，加入10倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成50℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍量水，搅拌溶解，滤过，滤液过D-101大孔树脂柱，先用8倍体积水和5倍体积25％乙醇洗涤，弃去洗脱液，再用6倍体积50％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成50℃时测定相对密度为1.10～1.20，真空干燥得淫羊藿提取物。加入2倍乙醇溶解，拌入等量硅胶，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集6～15倍洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得淫羊藿苷。
本发明的实施例9黄芩苷75份淫羊藿苷25g取以上药物加入适量注射用水溶解，加入规定量的葡萄糖或氯化钠，混合溶解后按体积加入0.5％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，滤液加注射用水至规定量，再用饱和氢氧化钠溶液调pH值至6.0～6.5，煮沸，4℃冷藏过夜，粗滤、精滤，加注射用水，分装，灭菌即得葡萄糖或氯化钠静脉输液。
其中黄芩苷可来源于市售或由以下方法制得黄芩粉碎，加入8倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍体积水溶解，滤过，滤液过AB-8大孔树脂柱，先用6倍水和5倍20％乙醇冲洗，弃掉洗脱液；再用60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.0～1.05，用盐酸调pH值至2，搅拌均匀，放置过夜，滤过，沉淀用水洗涤，抽干，真空干燥得黄芩提取物。将提取物加入2倍乙醇溶解，滤过，加入一倍膏粉重量的硅胶混合均匀，水浴挥干溶剂，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯冲洗8倍体积，再用丙酮冲洗8倍体积，收集丙酮洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得黄芩苷。
其中淫羊藿苷可来源于市售或由以下方法制得淫羊藿切成1cm左右小段，加入10倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成50℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍量水，搅拌溶解，滤过，滤液过D-101大孔树脂柱，先用8倍体积水和5倍体积25％乙醇洗涤，弃去洗脱液，再用6倍体积50％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成50℃时测定相对密度为1.10～1.20，真空干燥得淫羊藿提取物。加入2倍乙醇溶解，拌入等量硅胶，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集6～15倍洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得淫羊藿苷。
本发明的实施例10黄芩苷99g淫羊藿苷1g
将以上药物混合均匀，加入等量的糊精，混合均匀，制粒，装胶囊，即得胶囊剂。
其中黄芩苷可来源于市售或由以下方法制得黄芩粉碎，加入5倍体积30％乙醇回流提取1次，每次0.1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩，加入1倍体积水溶解，滤过，滤液过大孔树脂柱，先用1倍水和1倍10％乙醇冲洗，弃掉洗脱液；再用10％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇，浓缩，用盐酸调pH值至1-7，搅拌均匀，放置过夜，滤过，沉淀用水洗涤，抽干，真空干燥得黄芩提取物。将提取物加入0.5倍乙醇溶解，滤过，加入一倍膏粉重量的硅胶混合均匀，水浴挥干溶剂，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯冲洗3倍体积，再用丙酮冲洗3倍体积，收集丙酮洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得黄芩苷；其中淫羊藿苷可来源于市售或由以下方法制得淫羊藿切成1cm左右小段，加入5倍体积30％乙醇回流提取1次，每次0.1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩，加入1倍量水，搅拌溶解，滤过，滤液过大孔树脂柱，先用3倍体积水和1倍体积5％乙醇洗涤，弃去洗脱液，再用3-15倍体积20％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩，真空干燥得淫羊藿提取物。加入2倍乙醇溶解，拌入等量硅胶，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集6倍洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得淫羊藿苷；本发明的实施例11黄芩苷90g淫羊藿苷10g将以上药物混合均匀，加入2倍量糊精，0.5％的甜菊甙，1.2％的微晶纤维素，用适量乙醇溶液制软材，制粒，60℃鼓风干燥，制粒，整粒，即得颗粒剂。
其中黄芩苷可来源于市售或由以下方法制得黄芩粉碎，加入8倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍体积水溶解，滤过，滤液过AB-8大孔树脂柱，先用6倍水和5倍20％乙醇冲洗，弃掉洗脱液；再用60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.0～1.05，用盐酸调pH值至2，搅拌均匀，放置过夜，滤过，沉淀用水洗涤，抽干，真空干燥得黄芩提取物。将提取物加入2倍乙醇溶解，滤过，加入一倍膏粉重量的硅胶混合均匀，水浴挥干溶剂，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯冲洗8倍体积，再用丙酮冲洗8倍体积，收集丙酮洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得黄芩苷。
其中淫羊藿苷可来源于市售或由以下方法制得淫羊藿切成1cm左右小段，加入10倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成50℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍量水，搅拌溶解，滤过，滤液过D-101大孔树脂柱，先用8倍体积水和5倍体积25％乙醇洗涤，弃去洗脱液，再用6倍体积50％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成50℃时测定相对密度为1.10～1.20，真空干燥得淫羊藿提取物。加入2倍乙醇溶解，拌入等量硅胶，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集6～15倍洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得淫羊藿苷。
本发明的实施例12黄芩苷1g淫羊藿苷99g取以上药物，混匀，加入适量注射用水溶解，按体积加入0.3％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，滤液加注射用水至规定量，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至6.0～7.0，煮沸，5℃冷藏过夜，粗滤、精滤，在进风温度为135℃，出风温度为60℃，气流速度为20m·s-1的条件下喷雾干燥得粉末，分装，即得注射用无菌粉末。
其中黄芩苷可来源于市售或由以下方法制得黄芩粉碎，加入10倍体积90％乙醇回流提取5次，每次5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩，加入5倍体积水溶解，滤过，滤液过大孔树脂柱，先用8倍水和10倍70％乙醇冲洗，弃掉洗脱液；再用90％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇，浓缩，用盐酸调pH值至1-7，搅拌均匀，放置过夜，滤过，沉淀用水洗涤，抽干，真空干燥得黄芩提取物。将提取物加入5倍乙醇溶解，滤过，加入一倍膏粉重量的硅胶混合均匀，水浴挥干溶剂，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯冲洗12倍体积，再用丙酮冲洗12倍体积，收集丙酮洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得黄芩苷；其中淫羊藿苷可来源于市售或由以下方法制得淫羊藿切成1cm左右小段，加入15倍体积90％乙醇回流提取5次，每次5小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩，加入6倍量水，搅拌溶解，滤过，滤液过大孔树脂柱，先用12倍体积水和10倍体积80％乙醇洗涤，弃去洗脱液，再用15倍体积90％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩，真空干燥得淫羊藿提取物。加入2倍乙醇溶解，拌入等量硅胶，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集15倍洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得淫羊藿苷；本发明的实施例13黄芩苷10g淫羊藿苷90g取以上药物加入5％的低取代羟丙基纤维素和1.5％山梨醇，压制成片，即得口崩片。
其中黄芩苷可来源于市售或由以下方法制得黄芩粉碎，加入8倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍体积水溶解，滤过，滤液过AB-8大孔树脂柱，先用6倍水和5倍20％乙醇冲洗，弃掉洗脱液；再用60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.0～1.05，用盐酸调pH值至2，搅拌均匀，放置过夜，滤过，沉淀用水洗涤，抽干，真空干燥得黄芩提取物。将提取物加入2倍乙醇溶解，滤过，加入一倍膏粉重量的硅胶混合均匀，水浴挥干溶剂，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯冲洗8倍体积，再用丙酮冲洗8倍体积，收集丙酮洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得黄芩苷。
其中黄芩苷可来源于市售或由以下方法制得淫羊藿切成1cm左右小段，加入10倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成50℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍量水，搅拌溶解，滤过，滤液过D-101大孔树脂柱，先用8倍体积水和5倍体积25％乙醇洗涤，弃去洗脱液，再用6倍体积50％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成50℃时测定相对密度为1.10～1.20，真空干燥得淫羊藿提取物。加入2倍乙醇溶解，拌入等量硅胶，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集6～15倍洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得淫羊藿苷。
本发明的实施例15黄芩苷40g淫羊藿苷60g取黄芩苷、淫羊藿苷，加1800ml注射用水，按药物与辅料用量比1∶2.5加入甘露醇，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至5.0～10.0，加注射用水至2000ml，混匀，加入0.3％的针用活性炭，煮沸30分钟，粗滤，再用0.45μm和0.22μm微孔滤膜滤过，滤液分装，每瓶2.0ml，冷冻干燥，第一阶段的平衡冻结温度为0℃时的平衡时间为2.5小时，即搁板温度与产品温度基本一致的时间；第二阶段冻结温度从0℃到最低共熔温度-15℃时，搁板温度与产品温度平衡时间为3.0小时；第三阶段继续降温至-27℃，约需3.0小时，保持此温度4小时，直至产品完全冻牢，即开始抽真空，进入干燥程序，在-25℃恒温下抽真空，缓慢升温，3～5℃/h，至最低共熔点温度，时间约为8小时，升华干燥完成后，继续在低压条件下，升温干燥以除去残余水分，时间约为3～5小时，保持25℃以上干燥4小时，压盖，即得注射用无菌块状物。
其中黄芩苷可来源于市售或由以下方法制得黄芩粉碎，加入8倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍体积水溶解，滤过，滤液过AB-8大孔树脂柱，先用6倍水和5倍20％乙醇冲洗，弃掉洗脱液；再用60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇，浓缩至60℃时测定相对密度为1.0～1.05，用盐酸调pH值至2，搅拌均匀，放置过夜，滤过，沉淀用水洗涤，抽干，真空干燥得黄芩提取物。将提取物加入2倍乙醇溶解，滤过，加入一倍膏粉重量的硅胶混合均匀，水浴挥干溶剂，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯冲洗8倍体积，再用丙酮冲洗8倍体积，收集丙酮洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得黄芩苷。
其中淫羊藿苷可来源于市售或由以下方法制得淫羊藿切成1cm左右小段，加入10倍体积70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成50℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍量水，搅拌溶解，滤过，滤液过D-101大孔树脂柱，先用8倍体积水和5倍体积25％乙醇洗涤，弃去洗脱液，再用6倍体积50％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成50℃时测定相对密度为1.10～1.20，真空干燥得淫羊藿提取物。加入2倍乙醇溶解，拌入等量硅胶，干法上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，收集6～15倍洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥得淫羊藿苷。
本发明的实施例15本发明注射制剂的质控方法采用如下方法(1)抗病毒药物组合物的指纹图谱测试，包括以黄芩苷和淫羊藿苷成分特征为主的指纹图谱；(2)黄芩苷、淫羊藿苷的鉴别测试方法；(3)黄芩苷、淫羊藿苷的含量测试方法。
权利要求
1.一种抗病毒复方制剂，其特征在于按照重量百分比计算，它是由黄芩苷1～99％和淫羊藿苷99～1％和适当的辅料制作而成。
2.按照权利要求1所述的一种抗病毒复方制剂，其特征在于按照重量百分比计算，它是由黄芩苷20～80％和淫羊藿苷80～20％和适当的辅料制作而成。
3.按照权利要求1或2所述一种抗病毒复方制剂，其特征在于按照重量百分比计算，它是由黄芩苷60～40％、淫羊藿苷40～60％和适当的辅料制作而成。
4.按照权利要求1～3任意一项所述的一种抗病毒复方制剂，其特征在于所述组方中的黄芩苷可以是黄芩醇提取物、黄芩水提取物、黄芩水提醇沉提取物、黄芩半仿生提取物、黄芩超临界萃取物或者以上各提取物的精制品；淫羊藿苷可以是淫羊藿醇提取物、淫羊藿水提取物、淫羊藿水提醇沉提取物、淫羊藿半仿生提取物、淫羊藿超临界萃取物或者以上各提取物的精制品。
5.按照权利要求1～3任意一项所述的抗病毒复方制剂，其特征在于所述的制剂可以是药剂学上任何可以接受的剂型，包括直接用于注射给药的注射液、直接供静脉滴注的静脉输液、需稀释后用于静脉滴注的注射用浓溶液和用冷冻干燥法或喷雾干燥法制得的注射用无菌粉末和无菌块状物以及片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂、软胶囊剂、口服液体制剂、口腔崩解片和分散片剂。
6.按照权利要求5所述的一种抗病毒复方制剂，其特征在于所述的制剂可以是各种注射剂、滴丸、舌下含片、口崩片、分散片、软胶囊、胶囊、普通片。
7.按照权利要求5、6所述的一种抗病毒复方制剂，其特征在于所述的制剂可以在将黄芩苷、淫羊藿苷中的一种或两种制备成脂质体或前体脂质体的基础上制得。
8.按照权利要求1～7中任意一项所述的一种抗病毒复方制剂，其特征在于制剂中的黄芩苷、淫羊藿苷含量为制剂标示量的90％-110％。
9.如权利要求1～8中任意一项所述的一种抗病毒复方制剂，其特征在于黄芩苷和淫羊藿苷可以是市售的或用以下方法制备得到的A、黄芩苷是这样制备的取黄芩药材，粉碎后加入水或乙醇溶液提取，合并提取液，过滤，浓缩得黄芩苷粗提物，在此基础上采用乙醇沉淀法、柱层析法、萃取法、絮凝沉淀法中的一种或几种联合使用进行适当精制，得黄芩苷；B、淫羊藿苷是这样制备的取淫羊藿药材，粉碎后加入水或乙醇溶液提取，合并提取液，过滤，浓缩得淫羊藿苷粗提物，在此基础上采用乙醇沉淀法、柱层析法、萃取法、絮凝沉淀法中的一种或几种联合使用进行适当精制，得淫羊藿苷。
10.按照权利要求1～7中任意一项所述的一种抗病毒复方制剂的制备方法，其特征在于所述制剂中的注射用无菌块状物这样制备取黄芩苷、淫羊藿苷，加1800ml注射用水，按药物与辅料用量比1∶2.5加入甘露醇，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至5.0～10.0，加注射用水至2000ml，混匀，加入0.3％的针用活性炭，煮沸30分钟，粗滤，再用0.45μm和0.22μm微孔滤膜滤过，滤液分装，每瓶2.0ml，冷冻干燥，第一阶段的平衡冻结温度为0℃时的平衡时间为2.5小时，即搁板温度与产品温度基本一致的时间；第二阶段冻结温度从0℃到最低共熔温度-15℃时，搁板温度与产品温度平衡时间为3.0小时；第三阶段继续降温至-27℃，约需3.0小时，保持此温度4小时，直至产品完全冻牢，即开始抽真空，进入干燥程序，在-25℃恒温下抽真空，缓慢升温，3～5℃/h，至最低共熔点温度，时间约为8小时，升华干燥完成后，继续在低压条件下，升温干燥以除去残余水分，时间约为3～5小时，保持25℃以上干燥4小时，压盖，即得。
11.按照权利要求1～7中任意一项所述的抗病毒复方制剂的制备方法，其特征在于所述舌下含片是这样制备取黄芩苷、淫羊藿苷的提取物混合，加入10％的甜味剂、15％的甘露醇、20％聚乙烯吡咯烷酮K30，过30目筛，加入适量滑石粉、微粉硅胶，混和均匀，压片，即得舌下含片。
12.按照权利要求1～7、9中任意一项所述的抗病毒复方制剂，其特征在于辅料可以是乳糖、半乳糖、甘露醇、玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮K30、柠檬酸、柠檬酸钠、硬脂酸镁、色素、乙酰乙酸衍生物、甜味剂、香料、甘氨酸、葡萄糖、氯化钠、右旋糖酐、甘油、乙醇、丙二醇、聚乙二醇、山梨醇、吐温、羟丙基-β-环糊精、泊洛沙姆中的一种或几种。
13.按照权利要求7所述的治疗心脑血管疾病的中药制剂的制备方法，其特征在于所述制剂中的前体脂质体这样制备取黄芩苷、淫羊藿苷，加磷酸缓冲液溶解，加入十八胺混匀、豆磷脂和胆固醇的熔融液中，搅拌均匀，超声处理，低温冷冻，得到的干粉过筛，即得。
14.如权利要求1～11中任意一项所述的抗病毒复方制剂的应用，其特征在于所述的质量控制方法包括如下方法中的部分或全部(1)抗病毒药物组合物的指纹图谱测试，包括以黄芩苷成分特征为主的指纹图谱和以淫羊藿苷成分特征为主的指纹图谱中的一种或几种；(2)黄芩苷、淫羊藿苷中全部或部分成分的鉴别测试方法；(3)黄芩苷、淫羊藿苷中全部或部分成分的含量测试方法。
15.如权利要求1～12中任意一项所述的抗病毒复方制剂的应用，其特征在于所述的制剂用于制备治疗肺炎、呼吸道感染、流感、禽流感、SARS、哮喘、免疫力低下等疾病的药物。
全文摘要
本发明公开了一种复方制剂，它由黄芩苷和淫羊藿苷组方，制成注射剂、胶囊、片剂、分散片、舌下含片、颗粒剂、口服液体制剂、滴丸剂等药剂学上允许的剂型，本发明制剂疗效确切、稳定性好，毒副作用低，用于治疗肺炎、呼吸道感染、流感、禽流感、SARS、哮喘等疾病，并能提高机体免疫力。
文档编号A61K9/14GK1969870SQ20051012399
公开日2007年5月30日 申请日期2005年11月24日 优先权日2005年11月24日
发明者于文风 申请人:北京奇源益德药物研究所