用于粘膜接种疫苗的组合物和方法

专利名称：：用于粘膜接种疫苗的组合物和方法用于粘膜接种疫苗的组合物和方法
背景技术：
：传统的注射接种疫苗的途径一一例如，皮下的、肌内的和静脉内的——主要涉及诱导全身的免疫性(血清抗体和T细胞)。然而这种方法可合适于抵抗由传染剂导致的疾病(例如破伤风)，所述传染剂通过被刺穿或损伤的皮肤而全身性地进入身体，大部分病原体通过粘膜途径，例如口腔粘膜、鼻粘膜或泌尿生殖器粘膜自然感染宿主。可注射疫苗对于引发粘膜表面处的免疫性通常是无效的，这通常通过IgA和分泌性IgA(s-IgA)的产生和分泌而得，其中所述IgA和分泌性IgA经常随着各种不同的腺组织的分泌物一起被分泌入肠道、呼吸道和尿道的内腔中。在这些分泌物中，s-IgA能与病原体结合，这允许免疫细胞在所述病原体开始感染宿主细胞之前消除该病原体。因此，粘膜接种疫苗可实质上降低病原体感染宿主细胞(即细胞感染)的可能性和，在一些情况下，甚至防止病原体感染宿主细胞。相反，注射的疫苗经常应答宿主细胞被病原体感染而释放(例如，被感染细胞的溶胞)的抗原。因此粘膜接种疫苗和注射接种疫苗之间一个重要的区别是粘膜接种疫苗可刺激宿主的防御以限制或甚至防止细胞感染，而注射接种疫苗希望在感染疾病出现之前应答于细胞感染的结果。由于粘膜疫苗能诱导s-IgA应答，它们可能更有效地防止或限制粘膜感染。另外，粘膜疫苗还具有优于注射疫苗的几个其它优点。这些优点包括易于给药、降低副作用、给药是非侵入性的(例如不需要针)和不需要专业人员而可以几乎无限频次的加强免疫的效力。这些优点可降低成本和增加接种疫苗的安全性并改善依从性，这些方面在发展中世界尤其重要。另外，在新型粘膜接种疫苗系统的设计上的改进可允许对当今难于控制的疾病开发疫苗。另外，在一个粘膜位置上诱导粘膜免疫应答可导致在不同粘膜位置上的免疫应答。例如，鼻粘膜或口腔粘膜接种疫苗能导致从阴道粘膜分泌s-IgA和IgG。尽管通过粘膜途径免疫具有重要优点，但由于许多因素使用粘膜免疫的成功受到限制，所述因素包括例如，抗原的降解、受限制的吸收和与在粘膜位置上的非特异性宿主因素的相互作用、缺乏安全和有效的佐剂，以及不充分递送系统的应用。目前非常需要扩展粘膜疫苗的应用和功效。
发明内容已经发现某些小分子免疫应答改进剂(IRM)可用作适合于粘膜递送的药物组合物的组分。因此，本发明提供包含用于粘膜给药而配制的IRM化合物和用于粘膜给药而配制的抗原的药物组合物。在一些实施方案中，所述IRM化合物和所述抗原可以在单一制剂中被提供，而在另一些实施方案中，所述IRM化合物和所述抗原可以在分别的制剂中被提供。在另一个方面，本发明还提供使对象免疫的方法。通常，该方法包括与IRM化合物组合，将抗原以有效的量给药到对象的粘膜表面上，以产生针对该抗原的免疫应答；和与所述抗原组合，将IRM化合物以有效的量给药到对象的粘膜表面上，以产生针对该抗原的免疫应答。在一些实施方案中，本发明的方法可进一步包括一个或多个初始剂量的抗原，一个或多个加强剂量的抗原或IRM化合物，或者两者。本发明的其它各种特点和优点，参考如下详述的描述、实施例、权利要求和附图而变得易于明白。在整个说明书的几个地方中，通过实施例的列举提供指导。在每个例子中，所叙述的列举仅用作代表性的组并且不应被解释为排他性的列举。附图简要说明图1为流式细胞术数据，其显示在接种疫苗后，在淋巴组织(NALT，图1A;ILN，图1B;CLN，图1C;脾，图1D)中抗原-特异性T细胞的增殖。图2的数据显示了在接种疫苗后，在淋巴组织中的抗原-特异性T细胞的总数(图2A-2C)，并显示在鼻粘膜中的抗原-特异性T细胞的百分比(图2D)。图3为流式细胞术数据，其说明在接种疫苗后，抗原-特异性CD8+T细胞(图3A)和CD4+T细胞(图3B)的增殖。图4的数据显示了利用IRM和抗原的组合，对通过各种途径免疫的肺灌洗IgA(图.4A)、鼻腔灌洗IgA(图4B)和血清IgG(图4C)的抗体应答。图5的数据显示了将抗原单独或与各种IRM化合物一起通过鼻内给药，肺灌洗IgA(图5A)和血清IgG2b(图5B)的抗体应答。图6的数据显示了在用抗原和其中一种IRM化合物免疫后，在DLN(图6A)和脾(图6B)中抗原-特异性T细胞。图7的数据显示了当用抗原和IRM化合物通过不同途径5个月分两次免疫时，在DLN(图7A)和NALT(图7B)中抗原-特异性T细胞。本发明说明性实施方案的详细说明免疫应答改进剂(IRM)为可具有免疫调节活性的效力的化合物。IRM通过已知为Toll-like受体(TLR)的基础免疫体系机理而起作用以选择性调节细胞因子的生物合成。例如，某些IRM化合物诱导某些细胞因子，例如I型干扰素、TNF-a、IL-1、IL-6、IL-8、IL-IO、IL陽12、MIP-1和/或MCP-1的生成和分泌。如另一个实例，某些IRM化合物可抑制某些Th2細胞因子，例如IL-4和IL-5的生成和分泌。另外，据说一些IRM化合物抑制IL-I.和TNF(美国专利6，518，265)。某些IRM可用于治疗很多不同疾病和症状，例如某些病毒疾病(例如，人乳头状瘤病毒、肝炎，疱疹)，某些瘤形成(例如基础细胞癌、鳞状上皮细胞癌、光化性角^S病、黑素瘤)和某些TH2介导的疾病(例如哮喘、过敏性鼻炎、遗传性过敏症皮炎)。本发明涉及可有效用作粘膜疫苗的组合药物和包含将这种组合药物给药到粘膜表面的方法。通常，本发明的药物组合物包括IRM化合物和抗原，每个都以适合于粘膜递送的方式配制和每个的量为，与另一个组合时，可引起抵抗所述抗原的免疫应答。粘膜接种疫苗的优点很多，本发明的组合物和方法可提供一个或多个如下优点1)本发明组合物易于给药而不需要针；2)粘膜接种疫苗可产生粘膜和全身性免疫应答两者，而注射疫苗通常只诱导全身性应答。因为大部分病原体在粘膜表面感染宿主，所以粘膜接种疫苗在病原体进入的位置诱导免疫应答；和3)粘膜接种疫苗可在不同于接种疫苗位置的粘膜位置上诱导免疫应答。这种组合药物的组分可被说成是彼此"组合"而被递送，如果该组分以允许细胞接触一种组分的生物效果保持不变至少直至另一种组分与该细胞接触的任何方式而被提供。因此，组分可与另一种组分组合而被递送，即使它们以分别的制剂形式而被提供，通过不同的给药途径而被递送，和/或在不同的时间给药。例如，IRM化合物和抗原可被考虑为组合药物，无论是否所述组分以单独制剂的形式提供，还是所述抗原在一个制剂中给药而所述IRM化合物在另一个制剂中给药。当以不同制剂给药时，所述组分可以在不同时间给药，如果需要，只是给药以使得其产生的免疫应答比如果单独给药所述抗原或者单独给药所述IRM化合物而产生的免疫应答更大。在一些实施方案中，所述组合药物可包括IRM/抗原共轭物，其中至少一个IRM部分共价结合于抗原。制备这种IRM/抗原共轭物的方法描述于，例如美国专利公开2004/0091491中。测量由粘膜疫苗诱导的免疫应答的方法是测量在应答所述抗原攻击中抗原-特异性〔08+T细胞的增殖。这示于实施例l中。抗原-特异性CD8+T细胞被荧光标记并过继性地转移到同源小鼠中。用IRM-抗原共轭物攻击所述小鼠。4天后，取出来自不同位置的淋巴组织(鼻相关淋巴组织(NALT)，子宫颈淋巴结(CL)和脾)并测量抗原-特异性CD8+T细胞的增殖。在得自每个位置的组织中，由鼻内免疫产生的008+T细胞的增殖比由用IRM-抗原共轭物的静脉内免疫，或者用抗原或IRM的鼻内免疫产生的CD8+T细胞的增殖更大(图2A-2C)。同样，在用IRM-抗原共轭物鼻内免疫7天后，在鼻粘膜中观察到的抗原-特异性CD8+T细胞的百分比，比用IRM-抗原共轭物的静脉内免疫、或者用抗原或IRM的鼻内免疫之后观察到的百分比更大(图2D)。类似的结果在使用非共轭IRM和抗原中也发现了(图3A)。另一个测量通过粘膜接种疫苗诱导的免疫应答的方法是测量在淋巴组织中，例如鼻相关淋巴组织中的抗原-特异性CD4+T细胞的增殖。活化的抗原-特异性CD4+T细胞，反过来剌激B细胞产生直接抵抗所述抗原的抗体(例如，s-IgA)。在实施例2中，抗原-特异性T细胞被过继性地移植入宿主小鼠中。用IRM化合物和免疫原性抗原肽的组合攻击所述小鼠。3天后，从所述小鼠上取出淋巴组织并分析抗原-特异性CD4+T细胞的增殖。结果示于图3B中。用IRM和抗原进行免疫的小鼠中的CD4+T细胞的增殖，比仅用抗原单独进行免疫的小鼠中的CD4+T细胞的增殖更大。因此，接种疫苗的粘膜途径(例如鼻内)可在相关的组织位置上一一鼻相关淋巴组织(NALT)和鼻粘膜上一一与非粘膜递送(静脉内的)或者9用单独抗原或单独IRM的粘膜递送相比,提供更大的抗原-特异性CD8+丁细胞和/和。04+T细胞的数量。在粘膜处抗原-特异性T细胞种群的增殖说明免疫细胞在那些位置的活化和可防止感染的免疫应答的产生。当抗原-特异性CD8+T细胞和抗原-特异性CD4+T细胞两者都被激活时，可产生抗原-特异性细胞介导的免疫应答和抗原特异性抗体的免疫应答两者。所述抗原可包括产生粘膜免疫应答的任何材料。适合的抗原材料包括但不限于蛋白质；肽；多肽；脂质；糖脂；多糖；糖类；多核苷酸；朊病毒；活性或非活性细菌、病毒或真菌；以及细菌、病毒、真菌、原生动物、肿瘤衍生的或生物衍生的免疫原、毒素或类毒素。另外，如本文中所用的，抗原可包括不必然导致粘膜免疫应答自身，但能在宿主细胞中表达以产生抗原蛋白、肽或多肽的寡核苷酸序列。这种寡核苷酸用于，例如，DNA疫苗。在一些实施方案中，所述抗原可包括两种或更多种抗原材料的组合。包含IRM和抗原的组合物，所述IRM和抗原每个均用于粘膜给药而配制，可用这种组合物的病症包括但不限于a)病毒性疾病，例如，由如下病毒感染产生的疾病腺病毒、疱疹病毒(例如HSV-I、HSV-II、CMV或VZV)、痘病毒(例如正痘病毒，如天花或牛痘，或者传染性软疣)、细小核糖核酸病毒(例如鼻病毒或肠病毒)、正粘液病毒(例如，流感病毒)、副粘液病毒(例如，副流感病毒、流行性腮腺炎病毒、麻疹病毒和呼吸道合胞病毒(RSV))、冠状病毒(例如，SARS)、乳多空病毒(例如，乳头瘤病毒，如导致尖锐湿疣、寻常疣或跖疣的那些)、肝DNA病毒(例如，乙型肝炎病毒)、黄热病病毒(例如，丙型肝炎病毒或登革热病毒)或逆转录酶病毒(例如，慢病毒，如HIV);b)细菌性疾病，例如，由如下列举的细菌感染导致的疾病埃希氏菌属、肠杆菌属、沙门氏菌属、葡萄状球菌属、志贺菌属、李斯特菌属、气杆菌属、螺旋杆菌属、克雷白杆菌属、变形菌属、假单胞菌属、链球菌属、衣原体、支原体、肺炎球菌、奈瑟球菌属、梭菌属、杆菌属、棒状杆菌、分支杆菌属、弯曲杆菌属、弧菌属、沙雷氏菌属、普罗威登斯菌属、色杆菌属、布鲁氏菌、耶尔森氏菌属、嗜血杆菌属或博代氏菌属；c)其它感染性疾病，例如衣原体，真菌疾病包括但不限于念珠菌病，曲霉病，组织胞浆菌病，隐球菌脑膜炎或寄生物病包括但不限于症疾，卡氏肺囊虫肺炎，利什曼病，隐孢子虫病，弓形体病和锥体虫感染；和d)TH2介导的遗传性过敏症疾病，例如遗传性过敏性皮炎或湿疹，嗜酸细胞增多，哮喘，过敏症，过敏性鼻炎和Ommen氏综合症。例如，粘膜给药组合物可用于预防或治疗性防止如下疾病例如BCG、霍乱、瘟疫、伤寒、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、A型流感、B型流感、副流感、脊髓灰质炎、狂犬病、麻疹、腮腺炎、风疹、黄热病、破伤风、白喉、嗜血杆菌b型流感、肺结核、脑膜炎球菌和肺炎球菌疫苗、腺病毒、HIV、水痘、巨细胞病毒、登革热、猫白血病、鸡瘟、HSV-1和HSV-2、猪瘟、乙型脑炎、呼吸道合胞病毒、轮状病毒、乳头状瘤病毒和阿兹海默症。在一些情况下，粘膜接种疫苗可用于降低穿过粘膜表面感染的可能性或者甚至防止穿过粘膜表面的感染。在另一些情况下，粘膜疫苗可用于刺激血清抗体应答。在一些情况下，粘膜疫苗可提供防止粘膜感染和血清抗体应答两者。因此，粘膜接种疫苗可用于抵抗不典型的通过粘膜表面而进行感染的病原体的接种疫苗。在一些实施方案中，所述抗原，可在给药所述抗原-IRM组合之前，给药以一个或多个分开的"引发"剂量。以此方式引发，在给药抗原-IRM组合时，可提供增强的免疫应答。在另一些实施方案中，所述抗原，可在给药所述抗原-IRM组合之后，给药以一个或多个分开的"加强"剂量。此方式加强，可通过激活CD8+记忆T细胞、CD4+记忆T细胞或两者而重新激活至少部分消退的免疫应答。在又一些实施方案中，可在给药抗原-IRM组合之后，将IRM化合物以一个或多个分开的加强剂量给药。以加强剂量提供的IRM化合物可以相同或不同于在所述抗原-IRM组合中提供的IRM化合物，并且可以相同或不同于在任何其它加强剂量中提供的IRM化合物。另外，IRM化合物的任何组合都是可用的，无论作为抗原-IRM组合的组分还是作为加强剂。许多IRM化合物是有机小分子咪唑并喹啉胺衍生物(参见，例如，美国专利4，689,338)，但很多其它类化合物也同样已知(参见，例如，美国专利5,446,153、6，194，425和6,110，929)并且更多的化合物还正在被研发。其它的IRM具有较高的分子量，例如寡核苷酸，包括CpGs(参见，例如，美国专利6,194,388)。一些IRM是有机小分子(例如，与生物大分子，例如蛋白质、肽等相反，分子量在约IOOO道尔顿以下，优选在约500道尔顿以下)，例如在如下文献中公开的那些例如美国专利4，689，338;4,929,624;5,266,5755,482,9366，451，8106，656，9386,667,3126,756，3825，268，3765，756，7476,525,0646,660,7356,670,372;5，346，卯55,352,784;;6,110，9296,194,425;;6，541，4856'545，016;;6,660,7476,664,260;;6,677,3476,677,348;5,389,640;5，446,1536,331,539;6，376，6696,545,017;6，573，2736,664,264;6,664,2656,677，349;6,683,0886，797，718和6,818,650;美国专利公开2004/00914912004/0147543和2004/0176367;和国际公开WO2005/18551、WO2005/18556和WO2005/20999。小分子IRM的另外的例子包括一些嘌呤衍生物(例如，在美国专利6,376,501和6,028,076中描述的那些)、一些咪唑并喹啉酰胺衍生物(例如描述于美国专利6，069，149中的那些)、一些咪唑并吡啶衍生物(例如，描述于美国专利6，518，265中的那些)、一些苯并咪唑衍生物(例如，描述于美国专利6,387,938中的那些)、一些稠合于五员含氮杂环的4-氨基嘧啶衍生物(例如，描述于美国专利6,376,501、6,028,076禾口6,329,381中和在WO02/0S905中的腺嘌呤衍生物)和一些3-]S-D-核糖呋喃基噻唑并[4，5-d]嘧啶衍生物(例如，描述于美国公开2003/0199461中的那些)。其它IRM包括生物大分子，例如寡核苷酸序列。一些IRM寡核苷酸序列包含胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸(CpG)并被描述于，例如，美国专利6,194,388;6,207,646;6，239，116;6,339，068禾B6,406,705中。一些含CpG的寡核苷酸可包括合成的免疫调节结构基序，例如描述于美国专利6，426，334和6,476,000中的那些。其它的IRM核苷序列没有CpG序列并被描述于例如国际专利公开WO00/75304。其它IRM包括生物分子，例如氨烷基氨基葡糖苷磷酸酯(AGP)，并被描述于美国专利6,113,918;6，303，347;6,525,028禾B6,649,172中。适合用于本发明的IRM化合物包括具有稠合于五员含氮杂环的2-氨基吡啶的化合物，这些化合物包括例如，咪唑并喹啉胺，包括但不限于取代的咪唑并喹啉胺，例如酰胺取代的咪唑并喹啉胺，磺酰胺取代的咪唑并喹啉胺，脲取代的咪唑并喹啉胺，芳基醚取代的咪唑并喹啉胺，杂环醚取代的咪唑并喹啉胺，氨基醚取代的咪唑并喹啉胺，氨磺酰基醚取代的咪唑并喹啉胺，脲取代的咪唑并喹啉醚，硫醚取代的咪唑并喹啉胺，羟胺取代的咪唑并喹啉胺，肟取代的咪唑并喹啉胺，6_、7-、8-或9-芳基、杂芳基、芳氧基或芳基烯氧取代的咪唑并喹啉胺和咪唑并喹啉二胺；四氢咪唑并喹啉胺，包括但不限于酰胺取代的四氢眯唑并喹啉胺，磺酰胺取代的四氢咪唑并喹啉胺，脲取代的四氢咪唑并喹啉胺，芳基醚取代的四氢咪唑并喹啉胺，杂环醚取代的四氢咪唑并喹啉胺，氨基醚取代的四氢咪唑并喹啉胺，氨磺酰基醚取代的四13氢咪唑并喹啉胺，脲取代的四氢咪唑并喹啉醚，硫醚取代的四氢咪唑并喹啉胺，羟胺取代的四氢咪唑并喹啉胺，肟取代的四氢咪唑并喹啉胺和四氢咪唑并喹啉二胺；咪唑并吡啶胺，包括但不限于酰胺取代的咪唑并吡啶胺，磺酰胺取代的咪唑并吡啶胺，脲取代的咪唑并吡啶胺，芳基醚取代的咪唑并吡啶胺，杂环醚取代的咪唑并吡啶胺，氨基醚取代的咪唑并吡啶胺，氨磺酰基醚取代的咪唑并吡啶胺，脲取代的咪唑并吡啶醚和硫醚取代的咪唑并吡啶胺；1,2-桥接咪唑并喹啉胺；6，7-稠合环烷基咪唑并吡啶胺；咪唑并萘啶胺；四氢咪唑并萘啶胺；噁唑并喹啉胺；噻唑并喹啉胺；噁唑并吡啶胺；噻唑并吡啶胺；噁唑并萘啶胺；噻唑并萘啶胺；吡唑并吡啶胺；吡唑并喹啉胺、四氢吡唑并喹啉胺；吡唑并萘啶胺、四氢吡唑并萘啶胺；和稠合于吡啶胺、喹啉胺、四氢喹啉胺、萘啶胺或四氢萘啶胺的1H-咪唑二聚物。在一些实施方案中，所述IRM化合物可以是咪唑并萘啶胺、四氢咪唑并萘啶胺、噁唑并喹啉胺、噻唑并喹啉胺、噁唑并吡啶胺、噻唑并吡啶胺、噁唑并萘啶胺、噻唑并萘啶胺、吡唑并吡啶胺、吡唑并喹啉胺、四氢吡唑并喹啉胺、吡唑并萘啶胺或四氢吡唑并萘啶胺。在一些实施方案中，所述IRM化合物可以是取代的咪唑并喹啉胺、四氢咪唑并喹啉胺、咪唑并吡啶胺、1，2-桥接咪唑并喹啉胺、6,7-稠合环烷基咪唑并吡啶胺、咪唑并萘啶胺、四氢咪唑并萘啶胺、噁唑并喹啉胺、噻唑并喹啉胺、噁唑并吡啶胺、噻唑并吡啶胺、噁唑并萘啶胺、噻唑并萘卩定胺、吡唑并吡啶胺、吡唑并喹啉胺、四氢吡唑并喹啉胺、吡唑并萘啶胺或四氢吡唑并萘啶胺。如本文中所用的，取代的咪唑并喹啉胺指酰胺取代的咪唑并喹啉胺，磺酰胺取代的咪唑并喹啉胺，脲取代的咪唑并喹啉胺，芳基醚取代的咪唑并喹啉胺，杂环醚取代的咪唑并喹啉胺，氨基醚取代的咪唑并喹啉胺，氨磺酰基醚取代的咪唑并喹啉胺，脲取代的咪唑并喹啉醚，硫醚取代的咪唑并喹啉胺，羟基胺取代的咪唑并喹啉胺，肟取代的咪唑并喹啉胺，6-、7-、8-或9-芳基、杂芳基、芳氧基或芳烯氧基取代的咪唑并喹啉胺或咪唑并喹啉二胺。如本文中所用的，取代的咪唑并喹啉胺特别和明确排除l-(2-甲基丙基)-lH-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺和4-氨基-a，o;-二甲基-2-乙氧基甲基-m-咪唑并[4,5-c]喹啉-l-乙醇。适合的IRM化合物还可包括上述的嘌呤衍生物，咪唑并喹啉酰胺衍生物，苯并咪唑衍生物，腺嘌呤衍生物，氨烷基氨基葡糖苷磷酸酯和寡核苷酸序列。在一些实施方案中，所述的IRM化合物可以是酰胺取代的咪唑并喹啉胺，例如，l-(2-氨基-2-甲基丙基)-2-(乙氧基甲基)-lH-咪唑并[4，5-c]喹啉-4-胺或！^-[6-({2-[4-氨基-2-(乙氧基甲基>111-咪唑并[4，5-(0喹啉-1-基]-1，1-二甲基乙基}氨基)-6-氧己基]-4-叠氮基-2-羟基苯甲酰胺。在另一些实施方案中，所述IRM化合物可以是噻唑并喹啉胺，例如2-丁基噻唑并[4，5-c]喹啉-4-胺。在另一些实施方案中，所述IRM化合物可以是咪唑并喹啉胺，例如4-氨基-a，a-二甲基-2-乙氧基甲基-lH-咪唑并[4，5-c]喹啉-l-乙醇。在另一些实施方案中，所述IRM化合物可以是酰胺取代的咪唑并喹啉胺，例如N-P-[4-氨基-l-(2-甲基丙基)-lH-咪唑并[4，5-c]喹啉-7-基氧基]丙基}烟酰胺。在另一些实施方案中，所述IRM化合物可以是磺酰胺取代的咪唑并喹啉胺，例如3-[4-氨基-2-(乙氧基甲基)-111-咪唑并[4,5-(:]喹啉-1-基]-N，2，2-三甲基丙烷-l-磺酰胺。在另一些实施方案中，所述IRM化合物可以是硫醚取代的咪唑并喹啉胺，例如2-丁基-l-(2-甲基-2-[2-(甲磺酰基)乙氧基]丙基卜lH-咪唑并[4,5-c]喹啉-4-胺。在另一些实施方案中，所述IRM化合物可以是吡唑并喹啉胺，例如2-丁基-l-[2-(丙磺酰基)乙基]-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺。在另一些实施方案中，所述IRM化合物可以是芳基烯氧基取代的咪唑并喹啉胺，例如1-{4-氨基-2-乙氧基甲基-7-[3-(吡啶-3-基)丙氧基〗-lH-咪唑并[4，5-c]喹啉-l-基卜2-甲基丙-2-醇。在另一些实施方案中，所述IRM化合物可以是脲取代的咪唑并吡啶胺，例如N"2-[4-氨基-2-(乙氧基甲基)-6,7-二甲基-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶-l-基]-l,l-二甲基乙基l-N'-环己基脲。在另一些实施方案中，所述IRM化合物可以是磺酰胺取代的咪唑并喹啉胺，例如仆[2-(4-氨基-2-丁基-1^1-咪唑并[4，5-(:]喹啉-1-基)-1，1-二甲基乙基]甲垸磺酰胺。在又一些实施方案中，所述的IRM化合物可以是酰胺取代的咪唑并喹啉胺，例如，N-{2-[4-氨基-2-(乙氧基甲基)-lH-咪唑并[4，5-c]喹啉-l-基]-l，l-二甲基乙基}环己烷甲酰胺。除非另外明确说明，化合物可包括以任何药学可接受的形式的化合物，包括所有的异构体(例如，非对映异构体或对映异构体)、盐、溶剂化物、多晶型物等等。特别是，如果化合物是光学活性的，该化合物可包括每个化合物的对映异构体以及该对映异构体的外消旋混合物。在本发明的一些实施方案中，所述IRM化合物可以是至少一种TLR的激动剂，优选是TLR6、TLR7和TLR8的激动剂。在一些实施方案中，所述IRM化合物可以是TLRS选择性激动剂。在另一些实施16方案中，所述IRM化合物可以是TLR7选择性激动剂。如本文中所用的，术语"TLR8选择性激动剂"指充当TLR8激动剂，但不充当TLR7激动剂的所有化合物。"TLR7选择性激动剂"指充当TLR7激动剂，但不充当TLR8激动剂的化合物。"TLR7/8激动剂"指充当TLR7和TLR8两者的激动剂的化合物。TLR8选择性激动剂或TLR7选择性激动剂可以充当用于所指TLR和一种或多种TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR9或TLR10的激动剂。因此，尽管"TLR8选择性激动剂"可以指充当TLR8而不是其它的TLR的激动剂，但它可以另外指充当TLR8和，例如，TLR6的激动剂的化合物。类似的，"TLR7选择性激动剂"可以指充当TLR7，而不是其它TLR的激动剂，但它可以另外指充当TLR7和，例如，TLR6的激动剂的化合物。具体化合物的TLR激动作用可以以任何适合的方式评估。例如，用于检测测试化合物的TLR激动作用的试验被描述于，例如美国专利公开US2004/0132079，并且在例如国际专利公开WO04/053057中描述了适合用于这个试验的重组细胞系。不考虑所用的具体试验，如果用化合物进行的试验至少导致由特定TLR介导的一些生物活性的阈值增加，那么化合物可以被认为是特定TLR的激动剂。相反，如果当被用于进行设计用来检测由特定TLR介导的生物活性试验时，该化合物没有引出所述生物活性的阈值增加，则化合物被认为不作为特定TLR的激动剂。除非另外明确说明，生物活性增加指同样的生物活性，超过在合适对照中观察到的活性的增加。可以与适合的对照结合或不结合而进行试验。利用经验，本领域技术人员可以具有对特定试验足够的熟悉程度(例如在特定的试验条件下在合适的对照中观察到的数值范围)，以使得不必总是进行对照试验以确定在特定试验中化合物的TLR激动作用。TLR介导的生物活性的精确的阈值增加，在给定的试验中用于确定是否特定的化合物是或不是特定TLR的激动剂，可以根据本领域中已知的因素变化，所述因素包括但不限于作为试验终点而观察到的生物活性，用于测量和确定试验终点的方法，试验的信噪比、试验的精度和同样的试验是否被同时用于确定化合物对于两种TLR的激动作用。因此，对于所有可能的试验，通常提出TLR介导的生物活性的阈值增加是不实际的，所述增加对确定化合物作为特定TLR的激动剂或非激动剂是必需的。然而，那些本领域中普通技术人员利用应当考虑的所述因素可容易地确定合适的阈值。用可表达的TLR结构基因转染HEK293细胞，采用该细胞的试验可用一个阈值用于确定化合物是转染入细胞中的TLR的激动剂，所述阈值例如，当在一定浓度，例如约lpM至约10pM，提供所述化合物时，至少三倍增加TLR介导的生物活性(例如，NFkB活化)。然而，不同的阈值和/或不同的浓度范围也许只在某些情况适合。同样，不同的阈值可能只适合于不同的试验。以引发剂量或加强剂量提供的抗原-IRM组合物的组分，以及抗原或IRM，可以在适合于对对象粘膜给药的任何制剂中被提供。合适类型的制剂描述于，例如，美国专利5，939，090、美国专利6，365，166、美国专利6，245，776和美国专利6,486,168中。所述化合物——无论抗原或IRM化合物一一可以以任何适合的形式而被提供，所述形式包括但不限于溶液、悬浮液、乳液或任何混合形式。所述化合物可与所有药学可接受的赋形剂、载体或媒介物一起以制剂递送。另外，抗原-IRM组合中的IRM组分和抗原组分可以在单一制剂中一起被提供，或者在分开的制剂中被提供。制剂可以以任何合适的剂型被递送，所述剂型例如，乳膏、软膏、气溶胶制剂、非气溶胶喷剂、凝胶剂、洗剂等等。所述制剂可进一步包括一种和多种添加剂，包括但不限于佐剂、促渗剂、着色剂、香味剂、调味剂、润湿剂、增稠剂等等。制剂可被给药到对象的任何适合的粘膜表面，例如，口腔粘膜、鼻粘膜或泌尿生殖器粘膜。适合于粘膜接种疫苗的制剂的组合物将根据本领域已知的因素而改变，所述因素包括但不限于所述一种或多种组分(即，IRM化合物禾口/或抗原)的物理和化学性质，载体的性质、计划的服药方案，对象免疫系统的状态(例如，抑制、折衷、刺激)，一种或多种组分的给药方法，以及将所述制剂给药的物种。因此，对于所用可能应用，通常提出有效用于粘膜接种疫苗制剂的组合物是不实际的。然而，那些本领域普通技术人员利用应当考虑的所述因素可容易地确定合适的制剂。在一些实施方案中，本发明的方法包括向对象以制剂形式给药IRM，所述制剂含例如约0.0001%至约10%(除非另外明确说明，本文中提供的所有百分比均为总制剂的重量/重量)的IRM，尽管在一些实施方案中，所述IRM化合物可以采用提供超过这个范围外的浓度的TRM化合物的制剂给药。在一些实施方案中，所述方法包括向对象给药制剂，所述制剂包括至少约0.01%IRM化合物、至少约0.03%IRM化合物或至少约0.1XIRM化合物。在另一些实施方案中，所述方法包括向对象给药制剂，所述制剂包括最大至约5XIRM化合物、最大至约1。％IRM化合物或最大至约0.5XIRM化合物。在一个具体的实施方案中，所述方法包括以一种制剂给药IRM化合物，所述制剂包括至少约0.1XIRM化合物，最大至约5%IRM的化合物。在一些实施方案中，制剂可以被给药到粘膜表面上，所述粘膜表面为典型的感染位置或特定病原体感染的预计的位置。例如，粘膜疫苗或粘膜疫苗的组分可以被给药到鼻粘膜上以接种抵抗呼吸病原体(例如，流感病毒)。或者，制剂可以被给药到一个粘膜表面以诱导在远离粘膜位置上的免疫应答。例如，制剂可以给药到鼻粘膜或口腔粘膜上，以接种抵抗通过例如阴道粘膜感染的病原体(例如，疱疹病毒)。对于粘膜接种疫苗，IRM化合物的有效量为与由给药不含IRM化合物的抗原而引起的免疫应答相比，对组合中的抗原足以增加免疫应答的量。在粘膜疫苗中给药的IRM化合物的准确的量将根据本领域已知的因素改变，所述因素包括但不限于所述IRM化合物的物理和化学性质、载体的性质、计划的服药方案，对象免疫系统的状态(例如，抑制、折衷、刺激)、所述IRM化合物的给药方法，和将所述粘膜疫苗给药的物种。因此，对于所用可能应用，通常提出构成有效用于粘膜接种疫苗的IRM化合物的量的量是不实际的。那些本领域普通技术人员利用应当考虑的所述因素可容易地确定合适的量。在一些实施方案中，本发明的方法包括给药足够的IRM化合物以向对象提供剂量，例如约100ng/kg至约50mg/kg，尽管在一些实施方案中，可以通过以超出该范围的剂量给药IRM化合物而进行所述方法。在一些这样的实施方案中，所述方法包括给药足够的IRM化合物以向对象提供剂量，约10pg/kg至约5mg/kg，例如，约3.75mg/kg的剂量。所述的服药方案可至少部分依赖于本领域已知的许多因素，包括但不限于，所述IRM化合物的物理和化学性质、载体的性质、被给药的IRM的量、对象免疫系统的状态(例如，抑制、折衷、刺激)、所述IRM化合物的给药方法，和将所述粘膜疫苗给药的物种。因此，对于所有可能应用，通常设定有效用于粘膜接种疫苗的服药方案是不实际的。那些本领域普通技术人员利用应当考虑的所述因素可容易地确定合适的服药方案。在一些实施方案中，所述IRM化合物可以，例如，在设定的时间期限内(例如，每天，每星期等)一次或多次剂量给药。在一些实施方案中，可以将所述IRM化合物只给药一次。在另一些实施方案中，所述IRM可以约每10年1次到每天多次给药。例如，可以将所述的IRM化合物给药至少每10年1次，至少每5年一次，或者至少每2年1次。在另一些实施方案中，可以将所述IRM化合物给药至少每年1次，至20少每6个月l次，至少每个月l次，至少每星期一次或至少每天一次。在一个具体的实施方案中，将所述的IRM化合物给药约每星期1次至约每年一次。本发明的方法可在任何合适的对象身上进行。合适的对象包括但不限于动物，例如但不限于人、非人的灵长类动物、啮齿动物、犬、猫、马、猪、绵羊、山羊或牛。实施例选择下述的实施例仅仅为了进一步阐述本发明的特征、优点和其它细节。然而，应当清楚理解的是尽管这些实施例用于这个目的，但所用的具体的材料和量以及其它条件和细节不必解释成过度的限制本发明的范围。用于所述实施例中的IRM化合物示于表1中。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>弁该化合物不是特定的实施例，但利用公开于引用文献的合成方法可容易地合成。实施例1如下制备卵白蛋白-IRMl共轭物。将IRM1悬浮于二甲基亚砜(DMSO)中形成10mg/ml。将卵白蛋白悬浮于磷酸盐缓冲液(PBS)中形成10mg/ml，并通过加入NaOH将pH调整至〉10.0。将500^1的该卵白蛋白溶液(5mg卵白蛋白)与100pl的IRM1溶液(lmgIRM1)混合于12-孔组织培养板的一个孔中。将该板放置于冰上，并将长波长紫外光源放置在该板的正上方，与含有所述IRMl/卵白蛋白混合物的孔尽可能近。照射所述混合物15分钟。形成的共轭物从孔中移出并悬浮于PBS中以形成卵白蛋白为5mg/mL、IRM1为0.5mg/mL的最终浓度，并对PBS中透析以除去所有未共轭的IRM。将鸡卵白蛋白-特异性CD8+T细胞(OT-I，TheJacksonLaboratories,BarHarbor，ME)用以固定方式染色细胞的荧光染料，羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE,MolecularProbes,Inc.,Eugene,OR)标记，然后过继性地转移到同源C57BL/6小鼠中(CharlesRiverLaboratories,Wilmington,MA)。然后将受体小鼠在第O天用100微克(pg)的卵白蛋白-IRMl共轭物通过鼻内(IN)或者通过静脉内(IV)免疫。在第4天，将该小鼠处死并取出鼻相关淋巴组织(NALT)、腹股沟淋巴结(ILN)、子宫颈淋巴结(CLN)和脾(Spl)。将从小鼠上采集的每个组织穿过100/mi尼龙筛(BDBiosciences,Bedford,MA)，离心并再次悬浮于流式细胞术染色缓冲液(BiosourceInternational,Inc.，Rockville，Md)中。然后将细胞用CD8國cych腿e(BDPharmigen，SanDiego，CA)和SIINFEKL/Kb四聚体-phycoerytherine(BeckmanCoulter,Inc.,Fullerton，CA)抗体标记。然后将细胞在FACSCaliber(Becton，Dickinson,andCo.，SanJose，CA)上运行，并且分析CD8+SIINFEKL/Kb四聚体+T细胞的CFSE表达。结果示于图1中，如下NALT在图1A中，ILN在图IB中，CLN在图1C中和脾在图1D中。抗原与IRM—起鼻内递送导致在所有的位置上有效地激活细胞毒素T淋巴细胞，如通过CFSE的累进损失而表明的那样。另外，在第7天计数在鼻相关淋巴组织(NALT)中、子宫颈淋巴结(CLN)中和脾中的总OT-I细胞数。OT-I细胞数量通过计数总淋巴细胞(台盼蓝排阻)和与0T-I+CD8+的百分比(流式细胞术分析滩乘而确定。另外，在鼻粘膜中的OT-I细胞的百分比在第7天确定。结果示于图2中，如下NALT在图2A中；CLN在图2B中；脾在图2C中和鼻粘膜在图2D中。抗原加上IRM1的鼻内递送在第7天，在所有被检验的淋巴组织中，比静脉递送产生更多的总OT-I细胞数量。IRM1加上抗原的鼻内递送在第7天也产生了比单独抗原更大的总OT-I细胞数量，这说明了通过这个途径IRM在增强抗原特异性T细胞活化上引人注目的效果。另外，接种疫苗的鼻内途径在相关的组织位置上一一鼻相关淋巴组织(NALT)和鼻粘膜上——产生较大量的OT-I细胞。实施例2将得自OT-I小鼠(TheJacksonLaboratories,BarHarbor,ME)的CD8+T细胞过继地转移到C57BL/6小鼠(CharlesRiverLaboratories,Wilmington,MA)中。将得自DO.l1TCR小鼠(TheJacksonLaboratories,BarHarbor,ME)的CD4+T细胞过继性地转移到Balb/c小鼠(CharlesRiverLaboratories,Wilmington,MA)中。然后将这些小鼠在第O天鼻内免疫，如下将OT-I转移的C57BL/6小鼠用每只小鼠100pg全鸡卵白蛋白免疫，或者与(IRMS+Ag，75/xgIRMW鼠)或不与(单独的Ag)IRM2一起免疫；将DO.ll转移的Balb/c小鼠用每只鼠100/ig的OVA肽(ISQAVHAAHAEINEAGR)免疫，或者与(IRM2+Ag，75pgIRM2/鼠)或不与(单独的Ag)IRM2—起免疫。在第3天，取出鼻相关淋巴组织，并且确定每个细胞种群相对单独的PBS的增殖倍数。CD8+OT-I细胞用SIINFEKL/Kb四聚体检测，并且CD4+D0.11用克隆型抗体(CaltagLaboratories,Burlingame，CA)检测，并采用FACSCaliber(Becton，Dickinson,SanJose,CA)进行分析。结果示于图3中，如下CD8+OT-I的增殖示于图3A中；CD4+DO.11的增殖示于图3B中。IRM/抗原组合的鼻内免疫诱导了CD8+T细胞和CD4+T细胞两者的增殖，其达到比用单独的抗原在鼻内免疫更大的程度。实施例3将Balb/c小鼠(CharlesRiverLaboratories,Wilmington,MA)用50/xg的全鸡卵白蛋白(OVA)蛋白质(Sigma-Aldrich，St丄ouis，MO)与50/xg的IRM4的磷酸盐缓冲液(PBS)—起通过不同途径处理。通过用生物珠(Bio-RadLaboratories,Inc.,Hercules,CA，Cat弁152-3920)洗涤OVA以清除内毒素而制备干净的卵白蛋白蛋白质，然后将干净的卵白蛋白蛋白质重新悬浮于磷酸缓冲盐(PBS)中。用OVA和IRM4通过如下方式处理小鼠皮下(SC)注射、静脉内(IV)注射、肌内(IM)注射、皮内(ID)注射、鼻内滴注(IN)、皮内OVA注射，其中直接在OVA注射位置上典型地给药10/xlIRM4膏剂(ID+Top.)，或者不处理(什么都没有)。在第21天处死小鼠，通过气管施用lmL的PBS进行肺和鼻的灌洗，并且通过心脏穿刺和离心以除去细胞而获得血清。收集血清用来分析。通过ELISA测量灌洗样本的OVA特异性IgA。通过ELISA测量血清样本的OVA特异性IgG2a。通过用100/xI/孔20/xg/ml卵白蛋白的PBS溶液涂覆CostarEIR/RIA96孔板(Cat弁3590，Corning,Inc.,Corning,NY)并在37。C下培养一到两小时或在4"C下培养过夜而进行所述OVA特异性抗体ELISA。然后将板用0.5%的吐温-20的PBS溶液(洗涤缓冲液)洗涤一次。将200/^1/孔的1XBSA的PBS溶液放置于孔中，然后在37匸下培养一到两小时或在4匸下培养过夜。接着用洗涤缓冲液洗涤两次。在垂直于板方向(acrosstheplate)以未稀释的灌洗样本开始三倍系列稀释，或者以血清样本的1:10稀释液开始20倍系列稀释在0.2XBSA、0.05%吐温-20的PBS(稀释缓冲液)中，并且在4'C下培养过夜。然后用洗涤缓冲液洗涤该板4次。将100/d/孔以稀释缓冲液1:2000稀释的羊抗鼠IgG2a(SouthernBiotechnologyAssociates,Inc.,Birmingham,AL)或羊抗鼠IgA(SouthernBiotechnologyAssociates,Inc.)放置于孔中并在室温下培养1小时。然后将板用洗涤缓冲液洗涤4次，用100/d/孔的稳定化的chromagen(Cat弁SB02，BiosourceInternational,Camarillo，CA)填充，培养少于5分钟，然后加入50/!l/孔的终止溶液(Cat弁SS02,BiosourceInternational)。在分光光度计上在OD490处读板。结果示于图4中。在肺(图4A)和鼻(图4B)粘膜中只有IRM/抗原组合的鼻内给药产生强烈的IgA应答。所有的给药途径，包括鼻内给药，在血中产生强烈的IgG2a应答。实施例4在第0天和第7天将Balb/c小鼠(charlesRiversLabcratorics)用35pg的OVA单独或与14pg的IRM3，IRM4，IRM5，IRM6，IRM7，IRM8，IRM9，IRM10，IRM11或IRM12的PBS组合进行鼻内免疫。在第14天，处死小鼠，如实施例3中所述的那样进行肺灌洗和血清收集。如实施例3中所述的那样分别分析肺灌洗和血清样本的OVA特异性IgA禾口IgG2b(SouthernBiotechnologyAssociates,Inc.)结果示于图5中。所有测试的IRM化合物的IRM/抗原的组合提供比单独抗原更大的IgA(图5A)和IgG2b(图5B)应答。实施例5得自GFP+/OT-I+C57BL6小鼠的淋巴结的淋巴细胞被过继性地转移到C57BL6小鼠中。在过继性转移后l天，小鼠用35/xg的卵白蛋白单独或与14pig的IRM3，IRM4,IRM5，IRM6，IRM7，IRM8，IRM9，IRMIO，IRM11或IRM12的柠檬酸盐缓冲液(CBS)组合进行鼻内免疫。4天后，处死小鼠并取出沥干的淋巴结(DLN)和脾。DLN淋巴细胞和脾细胞的总数通过使用GuavaPCA96(GuavaTechnologies,Inc.，Hayward,CA)确定。DLN淋巴细胞和脾细胞用碘化丙啶染色，并且小鼠的抗CD8抗体(BDPharmingen，SanDiego，CA)和OT-I"GFP+淋巴细胞的百分比通过对P^CD8+/GFP+淋巴细胞门控的流式细胞术而测定。0丁-1+^^+淋巴细胞的总量通过将脾细胞的总数与PrOT-I+/GFP+淋巴细胞的百分比相乘而确定。结果示于图6中。采用许多不同的IRM化合物的IRM/抗原组合的鼻内给药，在DLN中(图6A)和脾中(图6B)中提供了比单独抗原给药更大数量的抗原特异性T细胞。实施例6得自OT-I小鼠的淋巴细胞(TheJacksonLaboratories，BarHarbor,ME)净皮过继性转移到C57BL/6(CharlesRiverLaboratories,Wilmington,MA)小鼠中。如实施例3中所述的那样洗涤卵白蛋白。在过继性转移1天后，用PBS单独鼻内免疫小鼠，或用50pg的卵白蛋白和的IRM4的PBS，通过鼻内(IN)、静脉内(IV)或皮下(SC)使小鼠免疫。5个月后，小鼠以它们先前被免疫的同样方式再次免疫，或者不再免疫。在5个月免疫后4天，处死小鼠，并收集沥干的淋巴结(DLN)和鼻相关淋巴组织(NALT)。DLN淋巴细胞和NALT淋巴细胞的总数通过使用GuavaPCA96(GuavaTechnologies,Inc.,Hayward，CA)确定。DLN淋巴细胞和NALT淋巴细胞用碘化丙啶(PI)和小鼠的抗CD8抗体(BDPharmingen,SanDiego，CA)染色，并且通过对？1-008+/0+淋巴细胞门控的流式细胞术测定OT-I+ZGFP+淋巴细胞的百分比。OT-I"VGFP+淋巴细胞的总量通27过将dln淋巴细胞或nalt淋巴细胞的总量与dln或naltpi-ot-iVgfp+淋巴细胞的百分比相乘而确定。结果示于图7中，如下dln在图7a中；nalt在图7b中。所有的免疫途径，包括鼻内免疫，导致在再次免疫时，在dln中的ot-i细胞数量的增加。另外，鼻内免疫导致在再次免疫时在nalt中的ot-i细胞数量的增加。本文中引用的专利、专利文献和公开文本的全部内容通过引用全文而并入本文中，如每个被单独并入那样。在出现矛盾的情况下，应该以包括定义的本说明书为准。对本领域技术人员而言，不背离本发明的范围和主旨，本发明的各种修改和变化将是明显的。所列举的实施方案和实施例仅作为例子而被提供并且不意于用来限制本发明的范围。本发明的范围仅由如下提出的权利要求限定。权利要求1.一种组合药物，其包含用于粘膜给药而配制的IRM化合物；和用于粘膜给药而配制的抗原。2.权利要求1的组合药物，其包含含有所述IRM化合物和所述抗原的单一制剂。3.权利要求l的组合药物，其包含包含所述IRM化合物的第一制剂；和包含所述抗原的第二制剂。4.使对象免疫的方法，其包括与IRM化合物组合，将抗原以有效的量给药到对象的粘膜表面，以产生针对该抗原的免疫应答；和与所述抗原组合，将IRM化合物以有效的量给药到对象的粘膜表面，以产生针对该抗原的免疫应答。5.权利要求4的方法，其中所述的抗原和IRM以单一制剂给药。6.权利要求4的方法，其中所述的抗原以第一制剂给药，而所述IRM化合物以第二制剂给药。7.权利要求6的方法，其中所述的抗原和所述的IRM化合物在不同的位置给药。8.权利要求7的方法，其中至少一个位置包含鼻粘膜。9.权利要求7的方法，其中至少一个位置包含口腔粘膜。10.权利要求7的方法，其中至少一个位置包含胃-肠粘膜。11.权利要求7的方法，其中至少一个位置包含泌尿生殖器粘膜。12.权利要求7的方法，其中所述的不同位置为不同的粘膜表面。13.权利要求6的方法，其中所述的IRM化合物在给药抗原之前给药。14.权利要求6的方法，其中所述的IRM化合物在给药抗原之后给药。15.权利要求4的方法，其中所述的抗原包含蛋白质、肽、活的或灭活的细菌、活的或灭活的病毒或者它们的任意组合。16.权利要求4的方法，其中所述的IRM化合物包含稠合于五员含氮杂环的2-氨基吡啶。17.权利要求4的方法，其进一步包含至少一次另外给药所述抗原。18.权利要求4的方法，其进一步包含至少一次另外给药IRM化合物。19.权利要求18的方法，其中第一次给药IRM化合物中的IRM化合物不同于第二次给药IRM化合物中的IRM化合物。20.权利要求4的方法，其中针对所述抗原的免疫应答包含分泌IgA。21.权利要求4的方法，其中针对所述抗原的免疫应答包含增加抗原特异的T细胞在粘膜组织中的数量或百分比。全文摘要本发明提供包含用于粘膜给药而配制的IRM化合物和用于粘膜给药而配制的抗原的组合药物。另外，本发明还提供用于使对象免疫的方法。通常，该方法包括与IRM化合物组合，将抗原以有效的量给药到对象的粘膜表面上，以产生针对所述抗原的免疫应答；和与抗原组合，将IRM化合物以有效的量给药到对象的粘膜表面上，以产生针对所述抗原的免疫应答。文档编号A61K39/02GK101426524SQ200580013768公开日2009年5月6日申请日期2005年4月28日优先权日2004年4月28日发明者威廉·C·基佩尔,理查德·L·米勒申请人:3M创新有限公司